ലേഖനം
മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ സൂക്ഷ്മജീവിവിരുദ്ധ ഗവേഷണം: ബാക്ടീരിയ, ഫംഗസുകൾ, പ്രകാശ സജീവീകരണം
മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ സൂക്ഷ്മജീവിവിരുദ്ധ പ്രവർത്തനം എന്ന പ്രയോഗം കാണുന്ന രണ്ട് വായനക്കാർ വ്യത്യസ്ത കാര്യങ്ങൾ സങ്കൽപ്പിക്കുന്നു. ഒരാൾ സമ്പർക്കത്തിലൂടെ സൂക്ഷ്മജീവികളെ വിഷബാധയേൽപ്പിക്കുന്ന നീല ദ്രാവകമാണ് സങ്കൽപ്പിക്കുന്നത്. മറ്റൊരാൾ ചായവും ചുവന്ന പ്രകാശവും ചേർന്ന് അവയെ നശിപ്പിക്കുന്ന ഒരു നടപടിക്രമമാണ് സങ്കൽപ്പിക്കുന്നത്. രണ്ടിലും കുറച്ച് സത്യമുണ്ട്. എന്നാൽ രണ്ടും പൂർണ്ണമായ ആശയങ്ങളല്ല; ഇവയെ കൂട്ടിക്കുഴയ്ക്കുന്നതാണ് മിക്ക ഓൺലൈൻ അവകാശവാദങ്ങളും തെറ്റിപ്പോകാൻ കാരണം.
ഈ വ്യത്യാസമാണ് ഈ അവലോകനത്തിന്റെ വിഷയം. മതിയായ സാന്ദ്രതയിൽ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന് പ്രകാശമില്ലാത്ത സാഹചര്യത്തിൽ മിതമായ വിഷപ്രഭാവമുണ്ട്. ചുവന്ന പ്രകാശത്തിൽ അത് ഒരു ഫോട്ടോസെൻസിറ്റൈസറായി മാറുന്നു: ഒരു ഫോട്ടോൺ ആഗിരണം ചെയ്ത്, പ്രതിപ്രവർത്തനക്ഷമമായ ട്രിപ്ലെറ്റ് അവസ്ഥയിലെത്തി, ഒരേസമയം പല ലക്ഷ്യങ്ങളെയും കേടുവരുത്തുന്ന ഓക്സീകരണ രാസപ്രവർത്തനങ്ങൾ നയിക്കുന്നു. പ്രകാശത്താൽ സജീവമാകുന്ന ഈ പ്രവർത്തനരീതിക്ക് സൂക്ഷ്മജീവിവിരുദ്ധ ഫോട്ടോഡൈനാമിക് തെറാപ്പി എന്ന പ്രത്യേക പേരും അതിന്റേതായ വ്യവസ്ഥകളുമുണ്ട്. സാന്ദ്രത മാത്രം അതിനെ നിർവചിക്കുന്നില്ല. തരംഗദൈർഘ്യം, പ്രകാശ ഡോസ്, ഇൻക്യുബേഷൻ, ഓക്സിജൻ, ജീവി എന്നിവയാണ് ഫലം നിർണ്ണയിക്കുന്നത്.
നശീകരണത്തിന്റെ രണ്ട് ആശയങ്ങൾ
ആദ്യം പ്രകാശമില്ലാത്ത സാഹചര്യത്തിലെ ആശയം പരിഗണിക്കാം. മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ പോസിറ്റീവ് ചാർജുള്ള ഒരു ഫീനോതയാസിനിയം ചായമാണ്. അത് സൂക്ഷ്മജീവികളുടെ ആവരണങ്ങളുമായി ചേർന്ന്, വ്യത്യസ്ത അളവുകളിൽ കോശങ്ങളിലേക്ക് പ്രവേശിച്ച്, റെഡോക്സ്, ബന്ധന രാസപ്രവർത്തനങ്ങളിൽ ഏർപ്പെടുന്നു. ഇതിൽ ഫോട്ടോണുകൾക്ക് പങ്കില്ല. നശീകരണം നടക്കുന്നു, എന്നാൽ ജീവിക്കനുസരിച്ച് വളരെ വ്യത്യാസപ്പെടുന്ന സാന്ദ്രതകളിൽ മാത്രമാണ്; പ്രവർത്തനരീതിക്ക് ഒരൊറ്റ വ്യക്തമായ ലക്ഷ്യവുമില്ല.
ഫോട്ടോഡൈനാമിക് ആശയം ഇതിലേക്ക് പ്രകാശം ചേർക്കുന്നു. ഏകദേശം 630 മുതൽ 680 nm വരെയുള്ള ചുവന്ന ഫോട്ടോണുകൾ ചായത്തിന്റെ ആഗിരണ ബാൻഡുമായി ഒത്തുചേരുന്നു; മോണോമറിന്റെ പരമാവധി ആഗിരണം ഏകദേശം 664 nm-ലാണ്. ആഗിരണം ചായത്തെ ഹ്രസ്വായുസ്സുള്ള സിംഗ്ലെറ്റ് അവസ്ഥയിലേക്കും തുടർന്ന് കൂടുതൽ ദീർഘായുസ്സുള്ള ട്രിപ്ലെറ്റ് അവസ്ഥയിലേക്കും എത്തിക്കുന്നു. അവിടെനിന്ന് രണ്ട് വിഭാഗത്തിലുള്ള പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങൾ നടക്കുന്നു. Type I രാസപ്രവർത്തനത്തിൽ ട്രിപ്ലെറ്റ് ഒരു ഇലക്ട്രോൺ സബ്‌സ്ട്രേറ്റിലേക്ക് കൈമാറുകയും സൂപ്പർഓക്സൈഡ്, ഹൈഡ്രോക്സിൽ സ്പീഷീസുകൾ ഉൾപ്പെടുന്ന റാഡിക്കൽ പാതകൾ ആരംഭിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. Type II രാസപ്രവർത്തനത്തിൽ അത് അടിസ്ഥാനാവസ്ഥയിലുള്ള ഓക്സിജനിലേക്ക് നേരിട്ട് ഊർജം കൈമാറി സിംഗ്ലെറ്റ് ഓക്സിജൻ സൃഷ്ടിക്കുന്നു. രണ്ടും ഒരേസമയം നടക്കാം; ചായത്തെ ശുദ്ധമായ സിംഗ്ലെറ്റ് ഓക്സിജൻ ഏജന്റ് എന്നു വിശേഷിപ്പിക്കുന്നത് അമിതമായ ലളിതീകരണമാണ്. ഫീനോതയാസിനിയം ഫോട്ടോസെൻസിറ്റൈസറുകളുടെ ഘടനയും പ്രവർത്തനവും തമ്മിലുള്ള ബന്ധത്തിന്റെ അവലോകനം ഇത് നേരിട്ട് കാണിക്കുന്നു: ബന്ധപ്പെട്ട ചായങ്ങളിൽ, ബാക്ടീരിയയിലെ പ്രകാശവിഷപ്രഭാവം സിംഗ്ലെറ്റ് ഓക്സിജൻ ഉൽപാദനത്തെ മാത്രം പിന്തുടർന്നില്ല. കാരണം ആഗിരണം, കോശത്തിനുള്ളിലെ സ്ഥാനം, പ്രവർത്തനരഹിതമായ ല്യൂക്കോ രൂപത്തിലേക്കുള്ള നിരോക്സീകരണം എന്നിവയ്ക്കും പ്രകാശഭൗതികത്തിനോളം പ്രാധാന്യമുണ്ടായിരുന്നു. തരംഗദൈർഘ്യനിയമത്തിനു പിന്നിലെ പ്രകാശരസതന്ത്രം ചായവും ചുവന്ന പ്രകാശവും സംബന്ധിച്ച അനുബന്ധ അവലോകനത്തിൽ വിശദീകരിച്ചിരിക്കുന്നു.
ഉപയോഗപ്രദമായ ഒരു സവിശേഷതയിൽ സിംഗ്ലെറ്റ് ഓക്സിജന് കേന്ദ്രപങ്കുണ്ട്. അത് ഒരേസമയം പല ജൈവതന്മാത്രകളുമായും പ്രതിപ്രവർത്തിക്കുന്നതിനാൽ, ആക്രമണം ഒരൊറ്റ എൻസൈമിനെയോ ബന്ധന പ്രോട്ടീനിനെയോ ലക്ഷ്യമിടുന്നതിനു പകരം പല ഘടകങ്ങളിലൂടെയാണ് നടക്കുന്നത്. ഫോട്ടോഡൈനാമിക് സൂക്ഷ്മജീവിവിരുദ്ധ കീമോതെറാപ്പിയുടെ അടിസ്ഥാന വിവരണം പരമ്പരാഗത പ്രതിരോധരൂപങ്ങൾക്ക് കുറഞ്ഞ പ്രസക്തിയുള്ളതിന്റെ കാരണമായി ഇതിനെ അവതരിപ്പിച്ചു: അധിക പെനിസിലിൻ-ബന്ധന പ്രോട്ടീനോ മ്യൂട്ടേഷൻ സംഭവിച്ച ടോപോഐസോമറേസോ പ്രതിപ്രവർത്തനക്ഷമമായ ഓക്സിജന്റെ പെട്ടെന്നുള്ള ഉൽപാദനത്തെ തടയുന്നില്ല. മെത്തിസിലിൻ പ്രതിരോധമുള്ള Staphylococcus aureus-നും വാൻകോമൈസിൻ പ്രതിരോധമുള്ള എന്ററോകോക്കികൾക്കും എതിരായ പരിശോധനകളിൽ ഈ യുക്തി നിലനിന്നു; താഴെയുള്ള പട്ടിക അത് കാണിക്കുന്നു. ഇതിനർത്ഥം പ്രതിരോധം അസാധ്യമാണെന്നല്ല, അത് വ്യത്യസ്തമായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു എന്നുമാത്രമാണ്. എഫ്ലക്സ് പമ്പുകൾക്കും ആന്റിഓക്സിഡന്റ് പ്രതിരോധങ്ങൾക്കും ആവശ്യമായ ഡോസിൽ ഇപ്പോഴും മാറ്റം വരുത്താനാകും, പ്രത്യേകിച്ച് ഫംഗസുകളിൽ.
ജീവികളും പഠന മാതൃകകളും അടങ്ങിയ പട്ടിക
ഈ പട്ടികയാണ് ലേഖനത്തിന്റെ മുഖ്യ ഉള്ളടക്കം. ഓരോ മൂല്യവും പ്രോട്ടോക്കോളിനെ ആശ്രയിച്ചുള്ളതാണ്: ഒരേ ചായമായാലും പ്രകാശ ഡോസോ ഇൻക്യുബേഷനോ മാറിയാൽ സംഖ്യയും മാറും. MBC, MLC, MIC എന്നിവ പരസ്പരം മാറ്റിവയ്ക്കാവുന്നവയായി വായിക്കരുത്. ഇവിടെ MBC, MLC എന്നിവ സബ്‌കൾച്ചറിൽ ജീവിച്ചിരിക്കുന്ന സൂക്ഷ്മജീവികളൊന്നും കണ്ടെത്താത്തതിനെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു; MIC വളർച്ച തടയുന്നതിനെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. ഓരോ എൻട്രിയുടെയും പ്രകാശ വ്യവസ്ഥകൾ ഒപ്പം നൽകിയിരിക്കുന്നു.
| ജീവിയും മാതൃകയും | പ്രകാശമില്ലാത്തപ്പോഴുള്ള ഫലം | പ്രകാശമുള്ളപ്പോഴുള്ള ഫലം | വ്യവസ്ഥകൾ |
|---|---|---|---|
| S. aureus NCTC 6571, പ്ലാങ്ക്ടോണിക് സസ്പെൻഷൻ | MBC 5 uM | MBC 5 uM | അവലോകന പട്ടിക, വെളുത്ത പ്രകാശം 12 J per cm2 |
| S. aureus NCTC 6571, പ്ലാങ്ക്ടോണിക് സസ്പെൻഷൻ | MLC 2.5 uM | MLC 1 uM | പ്രാഥമിക 1997 പ്രോട്ടോക്കോൾ, 1 മണിക്കൂർ 1.7 mW per cm2, ഏകദേശം 6.3 J per cm2, ഇൻഒകുലം ഏകദേശം 10^6 CFU per mL, മൂല ഫീനോതയാസിനിയം പ്രകാശ-ബാക്ടീരിയനാശക പഠനത്തിൽ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തത് |
| MRSA EMRSA-15, പ്ലാങ്ക്ടോണിക് | MBC 80 uM | MBC 20 uM | അവലോകന പട്ടിക, ഏകദേശം 12 J per cm2, സംവേദനക്ഷമത നാലിരട്ടിയായി |
| MRSA EMRSA-16, പ്ലാങ്ക്ടോണിക് | MBC 40 uM | MBC 10 uM | മുകളിലുള്ള അതേ പ്രോട്ടോക്കോൾ |
| E. coli NCTC 9001, പ്ലാങ്ക്ടോണിക് | MBC 500 uM | MBC 100 uM | അതേ പ്രോട്ടോക്കോൾ, സംവേദനക്ഷമത അഞ്ചിരട്ടിയായി |
| P. aeruginosa NCTC 10622, പ്ലാങ്ക്ടോണിക് | MBC 500 uM | MBC 25 uM | അതേ പ്രോട്ടോക്കോൾ, സംവേദനക്ഷമത ഇരുപതിരട്ടിയായി |
| E. faecalis NCTC 775, പ്ലാങ്ക്ടോണിക് | MLC 100 uM | MLC 100 uM | 6.3 J per cm2-ലുള്ള 1997 പ്രോട്ടോക്കോൾ, ഈ സ്ട്രെയിനിലും ഡോസിലും മെച്ചമുണ്ടായില്ല |
| വാൻകോമൈസിൻ പ്രതിരോധമുള്ള E. faecium, പ്ലാങ്ക്ടോണിക് | MBC 400 uM | MBC 400 uM | അവലോകന പട്ടിക, അടിസ്ഥാന ചായം ഉപയോഗിച്ചപ്പോൾ മെച്ചമുണ്ടായില്ല; എന്നാൽ കൂടുതൽ ഹൈഡ്രോഫോബിക് ആയ മെത്തിലേറ്റഡ് ഡെറിവേറ്റീവുകൾ മെച്ചം കാണിച്ചു, വാൻകോമൈസിൻ പ്രതിരോധമുള്ള എന്ററോകോക്കസ് പഠനം പ്രകാരം |
| Candida albicans, പ്ലാങ്ക്ടോണിക് | MIC 12.79 ug per mL-നു മുകളിൽ | 5, 10, 15 J per cm2-ൽ യഥാക്രമം MIC 12.79, 6.39, 1.59 ug per mL | പ്രകാശമില്ലാതെ 30 മിനിറ്റ് പ്രീഇൻക്യുബേഷൻ, 635 nm-ൽ പരമാവധി തീവ്രതയുള്ള 600 മുതൽ 650 nm വരെയുള്ള ചുവന്ന LED, മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ ഫംഗസ് വിരുദ്ധ ഫോട്ടോഡൈനാമിക് പ്രവർത്തനത്തിന്റെ ഡോസ്-പ്രതികരണ പഠനം പ്രകാരം |
| C. albicans YEM14-ഉം എഫ്ലക്സ് അമിതമായി പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന വകഭേദവും, CFU നശീകരണം | ബാധകമല്ല | മൂല സ്ട്രെയിനിൽ ഏകദേശം 5 log നശീകരണം, CDR1/CDR2 അമിതമായി പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന വകഭേദത്തിൽ ഏതാണ്ട് ശൂന്യമായ നശീകരണം | 100 uM ചായം, 30 മിനിറ്റ് ഇൻക്യുബേഷൻ, 60 J per cm2-ൽ 660 nm, മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ പ്രകാശനശീകരണത്തിൽ എഫ്ലക്സ് പമ്പുകളുടെ സ്വാധീനത്തെക്കുറിച്ചുള്ള പഠനം പ്രകാരം |
| Trichophyton rubrum ഹൈഫകളും സ്പോറുകളും | ബാധകമല്ല | ഹൈഫകളുടെ MIC ഏകദേശം 6.3 ug per mL, സ്പോറുകളുടേത് ഏകദേശം 2.0 ug per mL; CFU പൂർണ്ണമായി തടയാൻ ഹൈഫകൾക്ക് 5 ug per mL-ഉം 100 J per cm2-ഉം ആവശ്യമായി, സ്പോറുകൾക്ക് 1.25 ug per mL-ഉം 40 J per cm2-ഉം | 635 nm ഫോട്ടോഡൈനാമിക് പ്രോട്ടോക്കോൾ, ഡെർമറ്റോഫൈറ്റുകളുടെ വളർച്ചാഘട്ടങ്ങളിലെ സംവേദനക്ഷമതയെക്കുറിച്ചുള്ള പഠനം പ്രകാരം |
| 33 സ്പീഷീസുകൾ അടങ്ങിയ പക്വമായ മോണയ്ക്കടിയിലെ ബയോഫിലിം, കാൽഗറി ഉപകരണം, ദിവസം 6 | MB മാത്രം ഉപയോഗിച്ചപ്പോൾ ആകെ എണ്ണത്തിൽ 80 ശതമാനത്തിലധികം കുറവ് | MB-യും 660 nm LED-യും ചേർന്നപ്പോൾ ഉപാപചയ പ്രവർത്തനത്തിൽ ഏകദേശം 55 ശതമാനം കുറവ്, സമൂഹഘടനയിൽ വ്യാപകമായ പുനഃക്രമീകരണമില്ല | 0.01 ശതമാനം ചായം (100 ug per mL), ഏകദേശം 330 mW per cm2-ൽ 5 മിനിറ്റ് 660 nm, ഓക്സിജനില്ലാത്ത വളർച്ച, വിവിധ സ്പീഷീസുകൾ അടങ്ങിയ വായിലെ ബയോഫിലിമിന്റെ ഇൻ വിട്രോ പഠനം പ്രകാരം |
മൂന്ന് പ്രവണതകൾ വ്യക്തമാണ്. ഒന്നാമതായി, ഗ്രാം-പോസിറ്റീവ് സ്റ്റാഫിലോകോക്കികൾ കുറഞ്ഞ മൈക്രോമോളാർ അളവുകളിൽ നശിക്കുന്നു; എന്നാൽ ഗ്രാം-നെഗറ്റീവ് ദണ്ഡാകാര ബാക്ടീരിയകൾക്ക് പ്രകാശമില്ലാത്തപ്പോൾ ഏകദേശം നൂറിരട്ടി ചായം ആവശ്യമാണ്. കാരണം ഗ്രാം-നെഗറ്റീവുകളുടെ പുറംപടലം പ്രവേശനം നിയന്ത്രിക്കുന്നു. പ്രകാശം ഈ വ്യത്യാസം കുറയ്ക്കുന്നു, പക്ഷേ ഇല്ലാതാക്കുന്നില്ല. രണ്ടാമതായി, മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ ഫംഗസ് വിരുദ്ധ പ്രവർത്തനം യാഥാർഥ്യമാണെങ്കിലും വ്യവസ്ഥകളെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു: Candida-യുടെ നശീകരണം പ്രകാശ ഡോസ് കൂടുമ്പോൾ കുത്തനെ മെച്ചപ്പെടുന്നു; എഫ്ലക്സ് പമ്പുകളുടെ അമിതപ്രകടനം പോലുള്ള ഒരൊറ്റ ഫീനോടൈപ്പ് മാറ്റത്തിന് അതേ ഡോസിലുള്ള 5 log നശീകരണം ഇല്ലാതാക്കാനാകും. മൂന്നാമതായി, പക്വമായ ബയോഫിലിം സസ്പെൻഷനുകളിൽനിന്ന് വ്യത്യസ്തമായി പെരുമാറുന്നു; വായിലെ ബയോഫിലിമിന്റെ വരി ഈ വിഭാഗത്തിലാണ് വരുന്നത്.
ബാക്ടീരിയ: പ്രകാശം ഏറ്റവും സഹായിക്കുന്നതും സഹായിക്കാത്തതുമായ സാഹചര്യങ്ങൾ
സ്റ്റാഫിലോകോക്കികളാണ് സംവേദനക്ഷമത കൂടുതലുള്ള ഉദാഹരണം. പ്രകാശം പ്രയോഗിക്കുമ്പോൾ പകർച്ചവ്യാപനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട MRSA-യുടെ അവലോകന പട്ടികയിലെ മൂല്യങ്ങൾ പോലും താരതമ്യത്തിനെടുത്ത വാൻകോമൈസിൻ മൂല്യത്തിന് തുല്യമോ അതിലും താഴെയോ ആണ്. ഡൈമെത്തിലേറ്റഡ് ഡെറിവേറ്റീവുകൾ ഇതിലും മെച്ചപ്പെട്ടു; കാരണം മെത്തിലേഷൻ കൊഴുപ്പിനോടുള്ള ആകർഷണവും സിംഗ്ലെറ്റ് ഓക്സിജൻ ഉൽപാദനവും വർധിപ്പിക്കുകയും ല്യൂക്കോ രൂപത്തിലേക്കുള്ള നിരോക്സീകരണത്തെ ചെറുക്കുകയും ചെയ്തു. ഈ രാസവിശദാംശം പ്രധാനമാണ്: നശീകരണം ചായം ലക്ഷ്യത്തിലെത്തുന്നതും പ്രകാശഭൗതികവും ചേർന്നുണ്ടാകുന്നതാണെന്നും പ്രകാശഭൗതികം മാത്രം കാരണമല്ലെന്നും ഇത് കാണിക്കുന്നു.
ഗ്രാം-നെഗറ്റീവ് ജീവികൾ ചായം ലക്ഷ്യത്തിലെത്തുന്നതിന്റെ പങ്ക് വ്യക്തമാക്കുന്നു. Pseudomonas-ന് പ്രകാശമില്ലാത്തപ്പോൾ 500 uM-ഉം പ്രകാശമുള്ളപ്പോൾ 25 uM-ഉം ആവശ്യമായി; ഇരുപതിരട്ടി മെച്ചം. എങ്കിലും പ്രകാശമുള്ളപ്പോഴുള്ള മൂല്യം സ്റ്റാഫിലോകോക്കികളുടെ പരിധിയെക്കാൾ വളരെ കൂടുതലാണ്. പോസിറ്റീവ് ചാർജ് ചായത്തെ പുറംപടലത്തിന് സമീപമെത്താൻ സഹായിക്കുന്നു, പക്ഷേ അകത്തേക്കുള്ള പ്രവേശനം പരിമിതിയായി തുടരുന്നു. ഒരേ ചായം കൂടുതൽ ഡോസിൽ ആവർത്തിച്ച് ഉപയോഗിക്കുന്നതിനേക്കാൾ ഫോർമുലേഷനുകൾ, ഇൻക്യുബേഷൻ സമയം, ഡെറിവേറ്റീവിന്റെ തിരഞ്ഞെടുപ്പ് എന്നിവ ഈ സംഖ്യകളെ കൂടുതൽ മാറ്റുന്നു.
എന്ററോകോക്കികൾ ജാഗ്രതയുടെ ആവശ്യകത കാണിക്കുന്നു. പഴയ പ്രോട്ടോക്കോളുകളിൽ E. faecalis-ന് പ്രകാശത്തിന്റെ യാതൊരു നേട്ടവും ഉണ്ടായില്ല; വാൻകോമൈസിൻ പ്രതിരോധമുള്ള E. faecium-ന് കൂടുതൽ പ്രകാശത്തിനു പകരം മറ്റൊരു തന്മാത്ര ആവശ്യമായി. മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ ഒരൊറ്റ MBC-യെ പൊതുവായ ബാക്ടീരിയവിരുദ്ധ സ്ഥിരാങ്കമായി ഉദ്ധരിക്കുന്നവർ പഠനസാഹിത്യം തെറ്റായി വായിക്കുകയാണ്. അത്തരമൊരു സ്ഥിരാങ്കമില്ല. സ്ട്രെയിൻ, മാധ്യമം, ഇൻഒകുലം, ഇൻക്യുബേഷൻ, തരംഗദൈർഘ്യം, ഫ്ലുവൻസ് എന്നിവയ്ക്കു നിർദ്ദിഷ്ടമായ മൂല്യങ്ങൾ മാത്രമാണുള്ളത്. സ്വയം തെറ്റിദ്ധരിക്കാതെ ഈ മൂല്യങ്ങൾ എങ്ങനെ വായിക്കാമെന്ന് നശീകരണ വക്രങ്ങൾ വ്യാഖ്യാനിക്കുന്നതിനുള്ള മാർഗ്ഗദർശികയിൽ വിശദീകരിച്ചിരിക്കുന്നു.
ഫംഗസുകൾ: സംവേദനക്ഷമമാണെങ്കിലും ഘട്ടവും പമ്പുകളും ഫലം നിർണ്ണയിക്കുന്നു
ഗ്ലൂക്കാനുകൾ, മാന്നാനുകൾ, കൈറ്റിൻ എന്നിവ അടങ്ങിയ ഫംഗസുകളുടെ കോശഭിത്തികൾ ബാക്ടീരിയകളിൽനിന്ന് വ്യത്യസ്തമായ ഒരു ആഗിരണപ്രശ്നം സൃഷ്ടിക്കുന്നു; കൂടാതെ ഫംഗസുകൾക്ക് സജീവമായ പ്രതിരോധ സംവിധാനങ്ങളുമുണ്ട്. മുകളിലുള്ള Candida എഫ്ലക്സ് ഫലമാണ് ഏറ്റവും വ്യക്തമായ ഉദാഹരണം: ഒരേ ചായം, ഒരേ പ്രകാശം, ഒരേ മാധ്യമം; എന്നിട്ടും അമിതപ്രകടനമുള്ള വകഭേദം അതിജീവിച്ചു, മൂല സ്ട്രെയിന് കോളനി രൂപീകരണ യൂണിറ്റുകളുടെ ഏകദേശം 99.999 ശതമാനം നഷ്ടപ്പെട്ടു. ഡെർമറ്റോഫൈറ്റുകളിൽ വളർച്ചാഘട്ടവും മറ്റൊരു ഘടകമാകുന്നു. ഹൈഫകളെക്കാൾ സ്പോറുകൾ വളരെ എളുപ്പത്തിൽ നശിക്കുന്നു; അതിനാൽ സ്പോറുകളെ ഇല്ലാതാക്കുന്ന ഒരു പ്രോട്ടോക്കോൾ അതേ ഡോസിൽ ഹൈഫകളുടെ ശകലങ്ങളെ ജീവനോടെ അവശേഷിപ്പിച്ചേക്കാം.
അതുകൊണ്ടാണ് മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ ഫംഗസ് വിരുദ്ധ റിപ്പോർട്ടുകളിലും ബാക്ടീരിയ സംബന്ധിച്ച റിപ്പോർട്ടുകളിലേതുപോലെ പ്രകാശ വ്യവസ്ഥകൾ കൃത്യമായി പാലിക്കേണ്ടത്. നഖത്തിലും ചർമ്മത്തിലുമുള്ള ക്ലിനിക്കൽ ഫോട്ടോഡൈനാമിക് പഠനങ്ങൾ 1 മുതൽ 2 ശതമാനം വരെയുള്ള ചായത്തെ, നിർവചിച്ച ഫ്ലുവൻസുകളിലും തുടർപരിശോധനയോടെയും അളന്ന ചുവന്ന പ്രകാശവുമായി ചേർത്തു; അവ ക്ലിനിക്കൽ കാഴ്ചയിലെ മാറ്റത്തെയും ഫംഗസ് പരിശോധനയിൽ ഇല്ലാതായതായി കണ്ടെത്തുന്നതിനെയും വേർതിരിച്ചു. ഈ പരീക്ഷണങ്ങൾ നഖത്തിലെയും ചർമ്മത്തിലെയും ഫംഗസുകൾക്കെതിരായ ഫോട്ടോഡൈനാമിക് തെളിവുകളുടെ സംഗ്രഹത്തിൽ അവലോകനം ചെയ്തിരിക്കുന്നു. മുറിയിലെ വെളിച്ചത്തിൽ ഒരു ക്ഷതത്തിൽ നേർപ്പിച്ച ചായം പുരട്ടുന്നത് നിറം മാത്രം പുനഃസൃഷ്ടിക്കുന്നു; നടപടിക്രമം അതിൽ ഉൾപ്പെടുന്നില്ല.
ബയോഫിലിം പരിശോധന: 33 സ്പീഷീസുകൾ അടങ്ങിയ വായിലെ മാതൃക
2024-ലെ വിവിധ സ്പീഷീസുകൾ അടങ്ങിയ വായിലെ ബയോഫിലിം പഠനം ശ്രദ്ധ അർഹിക്കുന്നു; കാരണം അത് എളുപ്പമുള്ളതിനുപകരം പ്രയാസമുള്ള സാഹചര്യം പരിശോധിക്കുന്നു. Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia, Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Fusobacterium, വായിലെ സ്ട്രെപ്റ്റോകോക്കികൾ എന്നിവ ഉൾപ്പെടെയുള്ള മുപ്പത്തിമൂന്ന് വായിലെ സ്പീഷീസുകൾ ഓക്സിജനില്ലാതെ വളർന്ന് ദിവസം 6-ൽ പക്വമായ ബയോഫിലിമായി. ഉയർന്ന വികിരണ തീവ്രതയിൽ 5 മിനിറ്റ് 660 nm LED-യോടൊപ്പം 0.01 ശതമാനം ചായമാണ് ചികിത്സയിൽ ഉപയോഗിച്ചത്. ചായം മാത്രവും പ്രകാശം മാത്രവും ആകെ എണ്ണം ഗണ്യമായി കുറച്ചു; ഇവയുടെ സംയോജനം ഉപാപചയ പ്രവർത്തനം ഏകദേശം പകുതിയായി കുറച്ചു. എന്നിട്ടും സമൂഹഘടന പുനഃക്രമീകരിക്കപ്പെട്ടില്ല, ബയോഫിലിം പൂർണ്ണമായി സൂക്ഷ്മജീവിമുക്തമായതുമില്ല.
വ്യക്തമായ പരിമിതിയുള്ള യഥാർഥ ഫലമാണിത്. വൃത്തിയാക്കിയ മോണപ്പൊക്കറ്റിൽ പ്രാദേശിക അനുബന്ധമായി ഫോട്ടോഡൈനാമിക് ചികിത്സയെ ഇത് പിന്തുണയ്ക്കുന്നു; രോഗനിർണ്ണയം നടത്തിയ പെരിയോഡോണ്ടൈറ്റിസിനെ സ്വയം ചികിത്സിക്കുന്ന വായ്കഴുകൽ ദ്രാവകമായി അല്ല. ഇതാണ് പൊതുവായ വിടവിലേക്ക് നമ്മെ എത്തിക്കുന്നത്.
ലബോറട്ടറിയിലെ നശീകരണം ചികിത്സയ്ക്ക് തുല്യമല്ലാത്തത് എന്തുകൊണ്ട്
പ്ലാങ്ക്ടോണിക് MBC പരിശോധനയിൽ ഓക്സിജനുള്ള മാധ്യമത്തിൽ ഒരേവിധത്തിലുള്ള കോശങ്ങളെ ഒരേവിധത്തിലുള്ള ചായത്തിനും പ്രകാശത്തിനും വിധേയമാക്കുന്നു. ഒരു ക്ഷതത്തിൽ ഇവയൊന്നും ലഭ്യമല്ല. മാട്രിക്സ് പ്രവേശനം മന്ദഗതിയിലാക്കുന്നു, പെർസിസ്റ്റർ പോലുള്ള അവസ്ഥകൾ ഓക്സീകരണത്തെ സഹിക്കുന്നു, രക്തവും സ്രവങ്ങളും പ്രകാശം ആഗിരണം ചെയ്യുന്നു, കലകളുടെ ആകൃതി നിഴലുകൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നു, ഓക്സിജൻ കുറവുള്ള പൊക്കറ്റുകൾ Type II രാസപ്രവർത്തനത്തെ ദുർബലപ്പെടുത്തുന്നു. കാരണം സിംഗ്ലെറ്റ് ഓക്സിജന് നിർവചനപ്രകാരം തന്നെ തന്മാത്രാ ഓക്സിജൻ ആവശ്യമാണ്. മിശ്ര അണുബാധകളിൽ ആഗിരണത്തിലും സംവേദനക്ഷമതയിലും വ്യത്യാസമുള്ള സ്പീഷീസുകൾ കൂടി ഉണ്ടാകുന്നു; അതിനാൽ ഒരൊറ്റ റഫറൻസ് സ്ട്രെയിനിന്റെ മൂല്യത്തിന് ആ സ്ഥലം മുഴുവനെയും പ്രതിനിധീകരിക്കാനാവില്ല.
വായിലെ ഉദാഹരണം ഈ വിടവ് വ്യക്തമായി കാണിക്കുന്നു. ഒരു പരീക്ഷണപാത്രത്തിൽ Porphyromonas-നെയോ സ്ട്രെപ്റ്റോകോക്കികളെയോ കുറയ്ക്കുന്നതോ, കൾച്ചർ ചെയ്ത ബയോഫിലിമിനെ പകുതിയായി അടിച്ചമർത്തുന്നതോ, നീല വായ്കഴുകൽ ദ്രാവകം പെരിയോഡോണ്ടൈറ്റിസ് ചികിത്സിക്കുന്നു, എൻഡോഡോണ്ടിക് അണുബാധ സുഖപ്പെടുത്തുന്നു, അല്ലെങ്കിൽ ബാക്ടീരീമിയ ഇല്ലാതാക്കുന്നു എന്ന് സ്ഥാപിക്കുന്നില്ല. ക്ലിനിക്കൽ പെരിയോഡോണ്ടൽ പരിചരണം ബയോഫിലിമിനെ യാന്ത്രികമായി തകർക്കുകയും നീക്കം ചെയ്യുകയും ചെയ്യുന്നതിനൊപ്പം മോണപ്പൊക്കറ്റിന്റെ ശരീരഘടന കൈകാര്യം ചെയ്യുന്നതിനെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു; പ്രകാശാധിഷ്ഠിത ചികിത്സ പ്രാദേശിക അനുബന്ധമായാണ് പഠിക്കപ്പെടുന്നത്. പരീക്ഷണ വെല്ലിൽ നശീകരണം നടത്തുന്ന ചായത്തിന്റെ സാന്ദ്രതയ്ക്കും മോണയുടെ അരികിനടിയിലെ ബാക്ടീരിയകളിലെത്തുന്ന സാന്ദ്രതയ്ക്കും തമ്മിൽ സ്ഥിരമായ ബന്ധമില്ല; മുറിയിലെ വെളിച്ചം 660 nm ഡോസുമല്ല. വായിലെ ഏതൊരു ഉപയോഗത്തിന്റെയും ഡോസ്, സുരക്ഷ, പരസ്പരപ്രവർത്തന പരിധികൾ എന്നിവ ഒരു ക്ലിനീഷ്യന്റെ പരിധിയിലാണ് വരുന്നത്; സുരക്ഷയും പരസ്പരപ്രവർത്തനങ്ങളും സംബന്ധിച്ച റഫറൻസിൽ ഇത് വിശദീകരിച്ചിരിക്കുന്നു.
ഈ തെളിവ് എന്തല്ല
ഇത് ഗാർഹിക അണുനാശകത്തെക്കുറിച്ചുള്ള അവകാശവാദമല്ല. ബാക്ടീരിയനാശക പട്ടികകൾ നിർവചിച്ച സ്ട്രെയിനുകൾ, മാധ്യമങ്ങൾ, സമ്പർക്ക സമയങ്ങൾ, സ്പെക്ട്രങ്ങൾ, ഫ്ലുവൻസുകൾ എന്നിവ ഉപയോഗിക്കുന്നു. അടുക്കളയിലെ പ്രതലങ്ങൾ, ജൈവമാലിന്യമുള്ള സാഹചര്യങ്ങളിൽ ആവശ്യമായ സമ്പർക്ക സമയം, അല്ലെങ്കിൽ നിയന്ത്രണാധിഷ്ഠിത അണുനശീകരണ മാനദണ്ഡങ്ങൾ എന്നിവയെക്കുറിച്ച് അവ ഒന്നും പറയുന്നില്ല.
ഇത് ശരീരമാകെ പ്രവർത്തിക്കുന്ന ആന്റിബയോട്ടിക്കിന്റെ പകരവുമല്ല. പരമ്പരാഗത ഫോട്ടോഡൈനാമിക് പ്രവർത്തനത്തിന് ഒരേ സ്ഥലത്ത് ഒരേ സമയം ചായവും ആഗിരണം ചെയ്ത പ്രകാശവും ഓക്സിജനും ആവശ്യമാണ്. വിഴുങ്ങിയ മരുന്ന് രക്തത്തിലെത്തുന്നതുപോലെ പ്രകാശം ആഴത്തിലുള്ളതോ വ്യാപിച്ചുകിടക്കുന്നതോ ആയ സ്ഥലങ്ങളിൽ എത്തുന്നില്ല. തുടക്കംമുതൽ പ്രാദേശിക അണുനശീകരണത്തെ Wainwright അവതരിപ്പിച്ചതുപോലെതന്നെ, എത്തിച്ചേരാവുന്ന പ്രാദേശിക അണുബാധകൾക്കോ അനുബന്ധമായോ ആണ് പഠനസാഹിത്യം ഈ സമീപനത്തെ അവതരിപ്പിക്കുന്നത്.
ന്യായമായ സംഗ്രഹം കൂടുതൽ പരിമിതമാണെങ്കിലും ശ്രദ്ധേയമാണ്. മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന് പ്രകാശമില്ലാത്തപ്പോൾ മിതമായ സൂക്ഷ്മജീവിവിരുദ്ധ പ്രവർത്തനമുണ്ട്; ചുവന്ന പ്രകാശം പല ബാക്ടീരിയകളിലും ഫംഗസുകളിലും വളരെ വലിയ ഫോട്ടോഡൈനാമിക് പ്രഭാവം സാധ്യമാക്കുന്നു. Pseudomonas-ന് 500 മുതൽ 25 uM വരെയും പകർച്ചവ്യാപനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട MRSA-യ്ക്ക് 80 മുതൽ 20 uM വരെയും പോലുള്ള, പ്രകാശമില്ലാത്തതും ഉള്ളതുമായ സാഹചര്യങ്ങൾക്കിടയിലെ വലിയ അനുപാതങ്ങൾ ഇതിനുദാഹരണങ്ങളാണ്; അതോടൊപ്പം എന്ററോകോക്കികളിലെയും കാര്യക്ഷമമായ എഫ്ലക്സ് സംവിധാനമുള്ള Candida-യിലെയും പരാജയങ്ങൾ പഠനപാഠങ്ങളും നൽകുന്നു. ഈ കണ്ടെത്തലുകളെ പ്രായോഗികമായി പ്രയോഗിക്കുന്നതിനെ നാമമാത്രമായ ചായസാന്ദ്രതയ്ക്കോളം തന്നെ ചായം ലക്ഷ്യത്തിലെത്തുന്നതും ബയോഫിലിമിന്റെ ശരീരക്രിയകളും ഓക്സിജനും നിയന്ത്രിക്കുന്നു. ഈ വ്യവസ്ഥകൾ വ്യക്തമായി നിലനിർത്തിയാൽ സംഖ്യകൾക്ക് അർത്ഥമുണ്ട്. അവയെ നീക്കിയാൽ സംഖ്യകൾക്ക് അർത്ഥമില്ല.