Метиленско сино и замастен црн дроб: што открија експерименталните студии

Замастен црн дроб е една ознака за неколку различни проблеми. Кај едно лице, причината е долготрајна прекумерна употреба на алкохол. Кај друго, тоа е прекумерен внес на хранливи материи со инсулинска резистенција и зголемен прилив на масти во црниот дроб. Под микроскоп може да се види едноставно складирање масти во двата случаи, но почетните причини се разликуваат. Таа разлика одредува што може да докаже секој експеримент.

Литературата за метиленско сино и замастен црн дроб е ограничена и, во однос на ова прашање, целосно претклиничка. Најчесто се цитираат три студии кај стаорци и глувци, а нивните наоди не упатуваат во иста насока. Една студија со исхрана што содржи етанол коригирала редокс-промена, но не ја променила количината на масти во црниот дроб. Една студија со исхрана богата со масти ги намалила мастите во црниот дроб, придружено со промена во сигнализацијата. Една студија кај здрави животни открила спротивни резултати за липидната пероксидација во црниот дроб и бубрегот. Разгледани заедно, тие покажуваат зошто три крајни показатели мора да останат одвоени: редокс-промената, активирањето на сигнализацијата и натрупувањето масти во ткивото.

Три крајни показатели што лесно се мешаат

Редокс-показателот опишува како се пренесуваат електроните. Соодносот NAD+ кон NADH во црниот дроб покажува дали клеточната средина е релативно оксидирана или редуцирана. Оксидацијата на етанолот го претвора NAD+ во NADH, па хроничното пиење го намалува соодносот. Боја што прифаќа електрони може повторно да го зголеми. Тоа е хемија, а не доказ за помалку складирани масти.

Показателот за сигнализација ја опишува регулацијата. SIRT1 е регулаторен ензим зависен од NAD+ што ги модифицира протеините вклучени во митохондријалната функција и метаболизмот на липидите. AMPK дејствува како сензор за ниска енергија кој, кога е активиран, ја поттикнува оксидацијата на енергетските супстрати и ја ограничува синтезата на липиди. Кога еден труд известува за активирање на SIRT1 во црниот дроб со метиленско сино, тој известува за регулаторна промена. Со тоа сè уште не е прикажан исход кај пациент.

Хистолошкиот или биохемискиот показател го опишува самиот црн дроб. Чести примери се содржината на триглицериди по грам ткиво, боењето на неутралните масти со Oil Red O, процената на балонската дегенерација и оштетувањето со хематоксилин и еозин и активноста на ALT во плазмата. Само оваа трета класа одговара дали стеатозата на црниот дроб се подобрила со метиленско сино во тој експеримент.

Одделувањето на овие класи го спречува најчестото погрешно толкување: поволен редокс-резултат или резултат за сигнализацијата не значи помала замастеност на црниот дроб.

Етанолски модел: коригиран редокс, непроменети масти

Најјасниот негативен наод потекнува од студија со хронично хранење со етанол кај машки стаорци Wistar. Животните добивале етанол како дел од течна исхрана, со зголемување до 36 проценти од вкупната енергија, додека контролните животни со усогласен внес на храна добивале гликоза наместо енергијата од етанолот. Една етанолска група и една контролна група добивале и метиленско сино во количина од 130 mg на литар исхрана, околу 42 mg на kg дневно, од ден 5 до ден 30.

Редокс-состојбата била проценета со стандардни парови метаболити: лактат кон пируват за цитозолот и 3-хидроксибутират кон ацетоацетат за митохондриите. На почетокот на хранењето со високи дози етанол, етанолските групи покажале големи промени, со намалување на соодносот NAD+ кон NADH во цитозолот за околу 62 проценти и во митохондриите за околу 71 процент, како и повисок глицерол 3-фосфат. Метиленското сино во голема мера ги поништило тие промени и го вратило глицерол 3-фосфатот блиску до контролните вредности, без да го промени внесот на етанол, зголемувањето на телесната тежина или етанолот во серумот.

Мастите во црниот дроб покажале поинаква слика. На ден 12, пред значително натрупување масти, триглицеридите не се разликувале меѓу групите. На ден 27, етанолските групи имале големи зголемувања на триглицеридите, независно од метиленското сино. На ден 30, вкупните липиди се зголемиле за околу 89 проценти, а триглицеридите за околу 196 проценти кај животните хранети со етанол, повторно без влијание од бојата. Центрилобуларната масна инфилтрација изгледала исто со или без третман. Авторите заклучиле дека редокс-промената предизвикана од етанол не е главната причина за замастен црн дроб по долготрајно хранење во овој модел. Тука помага разбирањето како наодите кај животни и клетки се поврзуваат со ризикот кај луѓето: еден механизам може да биде реален, а сепак да не го одредува исходот.

Ова е студијата што треба да се цитира кога некој тврди дека секоја редокс-корекција мора да ги отстрани мастите од црниот дроб. Во овој експериментален дизајн тоа не се случило.

Метаболички модел: сигнализација и помалку масти, кај глувци

Поинаква слика дава студија со хепатоцити и глувци на исхрана богата со масти, насочена кон SIRT1 и AMPK. Во клетките HepG2, клетките AML-12 и примарните хепатоцити од стаорци, метиленското сино го зголемило соодносот NAD+ кон NADH, ја зголемило количината на протеинот SIRT1, ја намалило ацетилацијата на регулаторот PGC-1alpha, ги зголемило содржината на митохондријална ДНК и потрошувачката на кислород и го активирало AMPK, со последователни зголемувања на CPT-1 и PPARalpha. Кога експресијата на SIRT1 била намалена, активирањето на AMPK се изгубило, што ја поврзува оваа низа со SIRT1 во тој клеточен систем. Бојата, исто така, се спротивставила на липогените сигнали од агонистот на LXR, T0901317, и од изложувањето на палмитат, вклучувајќи ја индукцијата на SREBP-1c, FAS и ACC.

Животинскиот дел користел машки глувци C57BL/6 хранети со исхрана со 60 проценти масти во текот на 8 недели, со орално давање метиленско сино четири пати неделно во последните 4 недели, во количина од 3 или 10 mg на kg дневно. Третираните глувци покажале помало боење со Oil Red O, пониски триглицериди во црниот дроб, помала балонска и масна дегенерација на хистолошки преглед и понизок ALT во плазмата од нетретираните глувци на исхрана богата со масти. Фармакокинетичкото испитување во истиот труд открило орална биорасположливост од околу 31 до 35 проценти, со речиси целосна цревна апсорпција, но значителен метаболизам, и највисок сооднос меѓу ткивото и плазмата во црниот дроб. Тоа го прави ефектот врз црниот дроб барем веродостоен од аспект на распределбата.

Тоа е вистински сигнал за намалување на стеатозата, но со тесни граници. Станува збор за краток експеримент кај глувци со 9 до 10 животни по група, една исхрана, две дози и четири недели третман. Тој испитува метаболичка стеатоза и карактеристики на стеатохепатитис, а не болест поврзана со алкохол, и не испитува цироза, повлекување на фиброзата или каков било исход кај луѓе. Улогата на митохондријалните и редокс-показателите во толкувањето на таквите резултати е да ги означат како поткрепа за хипотеза, а не како доза или протокол.

Пресек на здраво ткиво: иста доза, спротивни ефекти во различни органи

Трета студија често се вклучува во тврдења за црниот дроб каде што не ѝ е местото. Во 30-дневен експеримент кај здрави женски стаорци Wistar, пет животни добивале 1 mM метиленско сино во водата за пиење, а пет служеле како контроли. Супероксид дисмутазата, каталазата и редуцираниот глутатион не се промениле во црниот дроб или бубрегот. Липидната пероксидација благо се зголемила во црниот дроб и се намалила во бубрегот. ALT и креатининот во серумот се намалиле, без промена на уреа-азотот во крвта.

Коректното толкување е ткивна специфичност кај здрави животни, а не лекување болест. Истото изложување изгледало благо прооксидативно според еден маркер во црниот дроб и благо заштитно според истиот маркер во бубрегот, додека стандардните антиоксидативни одбранбени механизми останале непроменети. Со пет животни по група и без модел на болест, овој труд предупредува да не се нарекува метиленското сино општ антиоксиданс за црниот дроб. Тој покажува и зошто промените на ензимите на црниот дроб бараат јасно дефиниран контекст на болест пред да се толкуваат како подобрување.

Споредба на трите експерименти за црниот дроб

Табелата јасно ја покажува главната поента. Слична сина боја, различна биологија. Етанолската студија го одделува успехот во редокс-корекцијата од неуспехот во намалувањето на мастите. Студијата со исхрана ги поврзува сигнализацијата и намалувањето на мастите во еден модел. Студијата кај здрави животни покажува дека редокс-маркерите можат да се движат во спротивни насоки зависно од органот.

Зошто од ова не произлегува тврдење за лекување

Ниту една од овие студии не вклучила луѓе со замастен црн дроб. Дозите, начините на примена и времетраењето се разликуваат меѓу трудовите и не можат да се претворат во режим за луѓе со едноставно пропорционално пресметување. Малите групи, особено трите животни за секоја временска точка на редокс-мерење во етанолското истражување и петте по група во истражувањето кај здрави животни, оставаат значителна неизвесност. Полот, сојот, составот на исхраната и времето на третманот во однос на оштетувањето се разликуваат. А двата модела на болест претставуваат различни почетни причини, па позитивниот резултат од исхраната не може да го надомести негативниот резултат од етанолот, ниту обратно.

За секој со дијагностицирана болест на црниот дроб, поважно е овие наоди да се читаат од аспект на претпазливост, а не на терапија. Прегледот на мерките на претпазливост за бубрезите и црниот дроб при употреба на метиленско сино објаснува зошто нарушената функција на органите ги менува прашањата за безбедноста, дури и кога еден труд со животни изгледа поволно. Однесете ги дијагнозата, неодамнешните лабораториски резултати, точниот производ и начинот на примена и целосниот список на лекови кај лекар и прашајте кои докази ја поддржуваат употребата на тој производ за таа цел кај лице со таков степен на нарушена функција.

Заклучок: метиленското сино ја променило редокс-состојбата на црниот дроб во еден етанолски модел без да ги намали складираните масти, ги активирало SIRT1 и AMPK додека ги намалувало мастите во еден метаболички модел кај глувци и покажало редокс-ефекти специфични за органот кај здрави стаорци. Тоа е збир на насоки за истражување, а не утврден третман за замастен црн дроб.