Famakiana ny endriky ny kolonia E. coli sy ny kolonia hafa amin'ny agara EMB

Mpianatra iray no mamafy santionany tsy fantatra amin'ny alalan'ny tsipika eo amin'ny agara eozina sy manga metilena, mampitombo azy mandritra ny alina, ary miverina mahita lovia misy kolonia maizina mamirapiratra maitso. Izao no voasoratra ao amin'ny kahie: "E. coli, voamarina." Mihoatra noho izay azon'ilay lovia porofoina izany fanambarana izany. Ny lovia dia mampiseho ny toetra hita maso amin'ny fitomboana sy ny fermentasiona ao anatin'ny fepetra voafaritra. Fanambarana hafa ny famantarana ny karazana, ary mila porofo hafa izany.

Ity torolalana ity dia mandray ny valin'ny agara EMB ho zavatra mila fandikana. Manazava ny foto-kevitra iorenany izy, mitarika amin'ny atlasy misy sary fanoharana momba ny lovia sy santionany fanaraha-maso, ary manondro ireo toe-javatra izay mety hamitahan'ny sary mahazatra ao amin'ny boky fianarana.

Ny foto-kevitra iorenan'ny lovia

Ny agara EMB dia sady mifantina no manavaka. Ny fandoko eozina Y sy manga metilena dia manakana zavamiaina Gram miabo maro, ka manome tombony ny fitomboan'ny Gram miiba ilay fitaovana fampitomboana. Ireo fandoko ireo ihany koa dia miasa ho famantarana: rehefa manao fermentasiona amin'ny siramamy misy eo ny zavamiaina iray ka mamokatra asidra ampy manodidina azy, dia mandray fandoko betsaka ny kolonia ary lasa volomparasy maizina ka hatramin'ny manga mainty. Rehefa betsaka ny famokarana asidra, dia mety hiseho eo amin'ny tampon'ny kolonia ny famirapiratana maitso toy ny metaly, izay miova arakaraka ny zoro ijerena azy. Ny protokolan'ny ASM momba ny lovia agara eozina sy manga metilena dia mamaritra io fitambaran'ny fifantenana sy fanavahana io ary manome sary tena nalaina ho fanovozan-kevitra amin'ny fampianarana.

Misy antsipiriany iray lehibe tokony hojerena alohan'ny hamakiana valiny: fantaro izay raikipohy ampiasaina. Ny raikipohy Holt Harris Teague taloha dia misy laktôzy sy sakarôzy, fa ny Levine EMB kosa dia misy laktôzy ihany. Ny zavamiaina manao fermentasiona amin'ny sakarôzy fa tsy amin'ny laktôzy, toy ny santionany Serratia marcescens maro nosarahina, dia mety hanana endrika samy hafa amin'ireo kinova roa ireo. Ny antontan-taratasin'ny mpanamboatra momba ny fitaovana fampitomboana EMB dia milaza mazava io fahasamihafan'ny raikipohy io. Soraty ao amin'ny kahie miaraka amin'ny valiny ny mpanamboatra sy ny raikipohy.

Ny agara EMB efa voaomana nefa mbola tsy nasiana santionany dia mazàna mena volontany ka hatramin'ny volomparasy somary mena, indraindray misy taratra maitso na antsanga madinika. Tsy fitomboana io lokon'ny fototra io. Ampitahao amin'ny lovia tsy nasiana santionany na amin'ny endrika fototra voarakitra an-tsoratra ny famakiana rehetra, ary vakio ny lovia voalohany rehefa avy nampitomboina nandritra ny 18 ka hatramin'ny 24 ora teo ho eo, amin'ny fisian'ny oksizena sy amin'ny 35 ka hatramin'ny 37 C, raha tsy misy toromarika hafa ao amin'ny protokola fampianarana. Mety hanova ny endriky ny fermentasiona ny fampitomboana maharitra kokoa.

Fomba fijerena ny lovia

Mampiasà karazana hazavana roa. Diniho aloha ny lovia amin'ny hazavana taratra na hazavana mitongilana, ary atongilano izy: miova arakaraka ny zoro ijerena azy ny famirapiratana metaly, ka mety hiseho na hanjavona. Avy eo diniho amin'ny hazavana mamakivaky azy mba hitsarana ny lokon'ny kolonia sy ny faritra maizina eo afovoany. Kolonia misaraka tsara no diniho, satria ny fifanizahana sy ny kolonia manodidina dia manova ny fiangonan'ny asidra eo an-toerana ary mety hampihena na hampitombo tafahoatra ny loko. Mampiseho izany mivantana ny andian-tsarin'ny ASM: mety tsy hiseho amin'ny E. coli ao anaty kolontsaina mifangaro ny famirapiratana antenaina, satria manova ny tontolo misy asidra ny zavamiaina manodidina.

Ampidiro ny santionany fanaraha-maso isaky ny mamela izany ny fanazaran-tena. Andiana santionany fampiasa amin'ny fampianarana ny E. coli ATCC 25922 ho an'ny toetra manga mainty sy mamirapiratra toy ny metaly, ny zavamiaina tsy manao fermentasiona toy ny Salmonella Typhimurium ATCC 14028 na Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 ho an'ny toetra tsy misy loko, ary ny Gram miabo toy ny Enterococcus faecalis na Staphylococcus aureus ho santionany fanaraha-maso ny fanakanana, araka ny voatanisa ao amin'ny tabilao mahazatra momba ny fanaraha-maso ny kalitaon'ny fitaovana fampitomboana EMB. Raha tsy mamirapiratra ilay santionany fanaraha-maso miabo, dia ahiahio aloha ny toe-javatra nampitomboana, ny fifanizahana, na ny raikipohy, vao ahiahiana ilay santionany tsy fantatra.

Atlasy misy sary fanoharana momba ny lovia

Sary fanoharana novokarina ireo lovia eto ambany, fa tsy sary tena nalaina tamin'ny kolontsaina. Ny endrika tokony hotadiavina no asehony, fa tsy ny lokon'ny taranaka iray manokana. Ampitahao amin'ny sary fanovozan-kevitry ny ASM sy amin'ny lovia tena misy ao amin'ny laboratoara fampianarana izy ireo.

Lovia 1: Escherichia coli amin'ny agara EMB, manao fermentasiona mahery amin'ny laktôzy

Ny E. coli amin'ny agara EMB dia mazàna volomparasy maizina ka hatramin'ny manga mainty, matetika misy faritra maizina eo afovoany sy famirapiratana maitso toy ny metaly vokatry ny famokarana asidra betsaka. Io famirapiratana io no famantarana malaza tadiavin'ny mpianatra, nefa raiso ho porofo manohana izy fa tsy ho famaritana. Miovaova arakaraka ny taranaka, ny fotoana nampitomboana, ny hakitroky ny kolonia, ary ny zoro ijerena ny hamafin'ny famirapiratana. Tsy manilika ny E. coli ny tsy fisian'ny famirapiratana, ary mety manondro zavamiaina hafa maromaro manao fermentasiona ny kolonia maizina tsy mamirapiratra. Mifidiana kolonia misaraka tsara ho an'ny asa fanampiny rehetra, fa aza miantehitra amin'ny famakiana faritra feno kolonia mifanizina.

Lovia 2: Klebsiella pneumoniae amin'ny agara EMB, manao fermentasiona ary misy tsiranoka madity

Ny Klebsiella pneumoniae amin'ny agara EMB dia mazàna mamorona kolonia lehibe, mangirana ary misy tsiranoka madity, miloko mavokely volomparasy ka hatramin'ny volontany volomparasy, matetika misy faritra maizina eo afovoany nefa tsy dia misy famirapiratana metaly mafy. Miseho amin'ny zavamiaina akaiky azy manao fermentasiona, toy ny Enterobacter, koa ny endrika mitovy amin'izany. Anisan'ny famakiana ny fisian'ny tsiranoka madity sy ny haben'ny kolonia: tsy mitovy ny lanjan'ny kolonia mavokely kely sy fisaka sy ny an'ny kolonia lehibe mibontsina misy tsiranoka madity. Toy ny amin'ny E. coli, ny lovia dia manondro toetra amin'ny fermentasiona, ary mila fanamafisana biôsimika, izay hazavaina etsy ambany, ny fanomezana anarana amin'ny ambaratongan'ny karazana.

Lovia 3: Salmonella amin'ny agara EMB sy ireo zavamiaina hafa tsy manao fermentasiona, kolonia tsy misy loko

Ny Salmonella amin'ny agara EMB sy ireo zavamiaina mifandraika aminy tsy manao fermentasiona amin'ny laktôzy, anisan'izany ny Shigella sy ny santionany Pseudomonas maro nosarahina, dia mazàna mitombo ho kolonia tsy misy loko, mamela hazavana handalo, na miloko amber malefaka. Misy raikipohy sy toe-javatra sasany manome taratra mavokely malefaka, ka tsy voatery ho zavamiaina manao fermentasiona ny kolonia mavokely hatsatra. Tsy manavaka ny Salmonella amin'ny Shigella na amin'ny zavamiaina hafa tsy manao fermentasiona ny EMB; ny fitsapana manaraka no manao izany fanavahana izany. Mariho koa fa efa voarakitra ny taranaka Salmonella manao fermentasiona amin'ny laktôzy manana kolonia mamirapiratra toy ny metaly, mitovy amin'ny E. coli, ka antony iray fanampiny tsy ahafahan'ny lovia tokana mamarana ny fanadihadiana izany.

Lovia 4: Serratia marcescens sy ny fandriky ny raikipohy

Mendrika fizarana manokana ny Serratia marcescens satria matetika ny mpianatra no manantena kolonia mena ka diso mamaky ny lovia. Tsy manao fermentasiona amin'ny laktôzy ny ankamaroan'ny santionany nosarahina avy amin'ny santionany klinika, ka mazàna hatsatra na tsy dia miloko izy ireo amin'ny Levine EMB. Satria manao fermentasiona amin'ny sakarôzy ny santionany maro nosarahina, dia mety hanome fihetsika maizina kokoa na mifandray kokoa amin'ny asidra ny raikipohy misy sakarôzy. Aza manantena koa ny loko mena prodigiosin mahazatra amin'ny 35 ka hatramin'ny 37 C; tsy azo ianteherana ny famokarana io loko io amin'ny maripanan'ny fitaovana fampitomboana. Rehefa miresaka momba ny Serratia marcescens amin'ny agara EMB ny protokola, dia jereo izay raikipohy iorenan'ilay fanambarana. Ny famintinana fikarohana momba ny metabolisman'ny Serratia dia mamintina ny tsy fanaovany fermentasiona amin'ny laktôzy sy ny fiovaovan'ny fanaovany fermentasiona amin'ny sakarôzy, izay fototr'io fandrika io.

Lovia 5: santionany fanaraha-maso sy zavamiaina voasakana

Ny zavamiaina Gram miabo toy ny Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus, ary Bacillus dia amin'ny ankapobeny voasakana na mihena be ny fitomboany amin'ny agara EMB, na dia tsy tanteraka amin'ny taranaka rehetra aza izany fanakanana izany. Ny andiana santionany fanaraha-maso dia mampiorina ny fahamarinan'ny famakiana: tokony hampiseho fitomboana tsara miaraka amin'ny loko manga mainty sy famirapiratana ny santionany fanaraha-maso E. coli, tokony hampiseho fitomboana tsy misy loko ilay tsy manao fermentasiona, ary tokony hampiseho fitomboana kely na tsy misy mihitsy ilay santionany fanaraha-maso ny fanakanana. Raha mitombo tsara ilay santionany fanaraha-maso ny fanakanana, dia tsy nahomby ny dingana fifantenana, ka mampiahiahy ny famakiana hafa rehetra amin'io andiany io. Fanontaniana hafa noho ny valian'ny fitaovana fampitomboana no valian'ny fomba fandokoana; ho an'ny lafiny fandokoana amin'ny lamina fitaratra ao amin'ny laboratoara, jereo ny atlasy momba ny fandokoana amin'ny manga metilena.

Fampitahana voafetra

Fehezanteny telo no mamintina ireo endrika mety hamitaka. Tsy midika hoe E. coli ny loko maizina, satria ny Klebsiella, Enterobacter, ary ny zavamiaina hafa manao fermentasiona dia manana faritra maizina eo afovoany nefa tsy mamirapiratra. Tsy midika hoe Klebsiella ny loko mavokely, satria mety hiseho ho mavokely na volomparasy malefaka ny zavamiaina manao fermentasiona antonony na miadana sy ny sasany sokajiana ho tsy manao fermentasiona. Tsy manamarina tanteraka ny E. coli ny famirapiratana, satria afaka mamokatra azy koa ny zavamiaina hafa manao fermentasiona mahery. Ny protokola fampianarana sy ny sariny momba ny kolontsaina mifangaro dia mampiseho ireo tsy fahamarinan'ny famantarana ireo tsirairay.

Ny fetran'ny fanamafisana

Toetra hita maso no asehon'ny agara EMB, fa tsy karazana. Mety hanana endrika kolonia iray ihany ny zavamiaina samy hafa, ary mety hiova amin'ny endrika mahazatra ao amin'ny boky fianarana ny zavamiaina iray, arakaraka ny taranaka, ny taona, ny fifanizahana, ny raikipohy, ary ny toe-javatra fampitomboana. Izany no antony handraisan'ny fomba fiasa amin'ny fampianarana sy amin'ny sehatra klinika ny endriky ny kolonia amin'ny EMB ho famantarana mialoha ihany.

Izao no fomba fiasa azon'ny mpianatra tohanan'ny porofo: farito ny kolonia misaraka (habe, loko, faritra afovoany, famirapiratana amin'ny hazavana mitongilana, fisian'ny tsiranoka madity), raketo ny raikipohy, ny fotoana sy ny maripana nampitomboana, ary ny santionany fanaraha-maso; avy eo afindrao sy ampitomboy ny kolonia misaraka tsara mba hahazoana kolontsaina madio alohan'ny fitsapana fanamafisana rehetra. Anisan'ny dingana fanampiny mahazatra ny fandokoana Gram miaraka amin'ny fihetsika IMViC ho an'ny famantarana mialoha ny E. coli sy ny coliformes, ny TSI na KIA sy ny andiam-pitsapana biôsimika manokana ho an'ny zavamiaina avy amin'ny tsinay, miaraka amin'ny famantarana amin'ny fomba serôlôjika, MALDI TOF, na fomba hafa voamarina rehefa takin'ny asa izany. Raha mila fanazavana momba ny toeran'ny EMB eo anivon'ireo fitaovana fampitomboana mifantina sy manavaka ho an'ny zavamiaina avy amin'ny tsinay, dia jereo ireo fampidirana momba ny fitaovana fampitomboana ireo zavamiaina ireo sy ny dingana manaraka aorian'ny fandokoana Gram. Momba ilay fanontaniana mifandraika amin'izany, dia ny hoe inona no azon'ny fandokoana manga amin'ny lamina fitaratra porofoina sy tsy porofoina, ny atlasy momba ny fandokoana amin'ny manga metilena dia manasaraka ny zavatra hita sy ny fehin-kevitra, amin'io fomba fisainana io ihany.

Soraty aloha ny zavatra hita, vao ny fehin-kevitra. Azo tohanan'ny porofo ny hoe: "Kolonia manga mainty maizina misy famirapiratana maitso miankina amin'ny zoro ijerena, amin'ny Levine EMB rehefa afaka 24 ora, mifanaraka amin'ny fermentasiona mahery amin'ny laktôzy." Ny hoe "E. coli, voamarina" kosa dia mitaky ilay dingana fanamafisana izay tsy azon'ny lovia irery omena.