G6PD ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಲ್ಲಿ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ: ವರ್ಣಕವು ನಿಜವಾಗಿ ಏನು ಮಾಡುತ್ತದೆ

ಇನ್‌ಕ್ಯುಬೇಶನ್ ಬಳಿಕ ಒಬ್ಬ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿ ಎರಡು ಪರೀಕ್ಷಾ ನಳಿಕೆಗಳನ್ನು ಗಮನಿಸುತ್ತಾನೆ. ಒಂದರಲ್ಲಿ ನಿರೀಕ್ಷಿತ ಬಣ್ಣ ಬಂದಿದೆ. ಇನ್ನೊಂದರಲ್ಲಿ ಬಂದಿಲ್ಲ. ಎರಡನೇ ರೋಗಿಯಲ್ಲಿ ಗ್ಲೂಕೋಸ್-6-ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಡಿಹೈಡ್ರೋಜನೇಸ್ ಕೊರತೆಯಿದೆ ಎಂದು ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿ ತೀರ್ಮಾನಿಸುತ್ತಾನೆ. ಆ ತೀರ್ಮಾನ ಸರಿಯಾಗಿರಬಹುದು, ಆದರೆ ಅದರ ಹಿಂದಿನ ತರ್ಕವು ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಸಾಧ್ಯವಾಗಿಸುವ ಮೂಲ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಯನ್ನು ಕಡೆಗಣಿಸುತ್ತದೆ. ನಳಿಕೆಯಲ್ಲಿರುವ ಯಾವುದೂ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಅಳೆಯುವುದಿಲ್ಲ. ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಅನ್ನು ಮಧ್ಯವರ್ತಿಯಾಗಿ ಬಳಸಿ, ಕಿಣ್ವವು ಉತ್ಪಾದಿಸುವುದನ್ನು ನಳಿಕೆಯ ಪರೀಕ್ಷೆ ಅಳೆಯುತ್ತದೆ.

ಈ ಪರೋಕ್ಷ ವಿಧಾನ ಸ್ಪಷ್ಟವಾದಾಗ, ಪರೀಕ್ಷಾ ವಿಧಾನ, ನಿಯಂತ್ರಣ ಮಾದರಿಗಳು ಮತ್ತು ತಪ್ಪು ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಅಂಶಗಳ ದೀರ್ಘ ಪಟ್ಟಿ ಇನ್ನು ಮನಬಂದಂತೆ ನಿಗದಿಪಡಿಸಿದವುಗಳಂತೆ ಕಾಣುವುದಿಲ್ಲ.

ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತ ಉತ್ತರ

G6PD ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಒಂದು ಉತ್ಕರ್ಷಣ-ಅಪಚಯ ಸೂಚಕವಾಗಿದೆ. G6PD ಕಿಣ್ವವು NADPH ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ. NADPH-ಅವಲಂಬಿತ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳು ನೀಲಿ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಅನ್ನು ಅದರ ಬಣ್ಣರಹಿತ ಲ್ಯೂಕೋ ರೂಪಕ್ಕೆ ಅಪಚಯಗೊಳಿಸುತ್ತವೆ, ಅಥವಾ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್‌ಗಳನ್ನು ವರ್ಗಾಯಿಸಲು ಅದನ್ನು ಬಳಸುತ್ತವೆ. ಸಾಮಾನ್ಯ ಕಿಣ್ವ ಚಟುವಟಿಕೆಯಿಂದ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಅಪಚಯ ನಡೆಯುತ್ತದೆ. ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಕೊರತೆಯಿಂದ ಅಪಚಯ ನಿಧಾನವಾಗಿ ಅಥವಾ ಅಪೂರ್ಣವಾಗಿ ನಡೆಯುತ್ತದೆ. ಪರೀಕ್ಷೆಯ ಸಂಪೂರ್ಣ ಸಂಕೇತ ಇದೇ.

ಎರಡು ಐತಿಹಾಸಿಕ ವಿಧಾನಗಳು ಇದೇ ವರ್ಣಕವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಅವುಗಳ ಅಂತಿಮ ಸೂಚಕಗಳು ಭಿನ್ನವಾಗಿವೆ. ಅವುಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಂಡರೆ ಬಹುತೇಕ ಗೊಂದಲ ದೂರವಾಗುತ್ತದೆ.

ಎರಡು ಪರೀಕ್ಷೆಗಳು, ಒಂದೇ ವರ್ಣಕ, ವಿಭಿನ್ನ ಅಂತಿಮ ಸೂಚಕಗಳು

ಮೊದಲನೆಯದು ನೇರ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಅಪಚಯ ಪರೀಕ್ಷೆ. ಇದನ್ನು ಸಾಸ್ ಮತ್ತು ಸಹೋದ್ಯೋಗಿಗಳು ವಿವರಿಸಿದರು; ನಂತರ ಗಿಬ್ಸ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಿದರು. ಇಲ್ಲಿ ಅಂತಿಮ ಸೂಚಕವು ವರ್ಣಕವೇ ಆಗಿದೆ: ಉತ್ಕರ್ಷಿತ ನೀಲಿ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಣ್ಣರಹಿತ ಲ್ಯೂಕೋಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಆಗುವತ್ತ ಅಪಚಯಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಈ ಬದಲಾವಣೆಯ ವೇಗವು NADPH ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸುತ್ತದೆ. ಮೂಲ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ತಪಾಸಣಾ ಸಂಶೋಧನಾ ಲೇಖನವು PubMedನಲ್ಲಿ ಸಾಸ್ ಮತ್ತು ಸಹೋದ್ಯೋಗಿಗಳ (1966) ಹೆಸರಿನಡಿ ಸೂಚ್ಯಂಕಗೊಂಡಿದೆ.

ಎರಡನೆಯದು ಬ್ರೂವರ್ ಮೆತ್‌ಹೀಮೋಗ್ಲೋಬಿನ್ ಅಪಚಯ ಪರೀಕ್ಷೆ. ಸೋಡಿಯಂ ನೈಟ್ರೈಟ್ ಮೊದಲು ಹೀಮೋಗ್ಲೋಬಿನ್ ಅನ್ನು ಕಂದು ಬಣ್ಣದ ಮೆತ್‌ಹೀಮೋಗ್ಲೋಬಿನ್ ಆಗಿ ಉತ್ಕರ್ಷಿಸುತ್ತದೆ. ನಂತರ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ವರ್ಗಾವಣೆಯ ಮಧ್ಯವರ್ತಿಯಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ: ಅಪಚಯಗೊಂಡ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮೆತ್‌ಹೀಮೋಗ್ಲೋಬಿನ್‌ಗೆ ಅಪಚಯಕಾರಿ ಸಮತೂಲ್ಯಗಳನ್ನು ವರ್ಗಾಯಿಸಿ, ಅದನ್ನು ಮತ್ತೆ ಕೆಂಪು ಹೀಮೋಗ್ಲೋಬಿನ್ ಆಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಕಣ್ಣಿಗೆ ಕಾಣುವ ಅಂತಿಮ ಸೂಚಕವು ಕಂದು ಮತ್ತು ಕೆಂಪಿನ ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸವೇ ಹೊರತು ನೀಲಿ ಮತ್ತು ಬಣ್ಣರಹಿತದ ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸವಲ್ಲ. ಮೂಲ ವಿಧಾನವು ವಿಶ್ವ ಆರೋಗ್ಯ ಸಂಸ್ಥೆಯ ಬುಲೆಟಿನ್‌ನಲ್ಲಿ (ಬ್ರೂವರ್ ಮತ್ತು ಸಹೋದ್ಯೋಗಿಗಳು, 1960) ಪ್ರಕಟವಾಯಿತು.

ಬ್ರೂವರ್ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ವರ್ಣಕದ ಬಣ್ಣ ನಿವಾರಣೆಯ ಪರೀಕ್ಷೆ ಎಂದು ಕರೆಯುವುದು ರಾಸಾಯನಿಕವಾಗಿ ನಿಖರವಲ್ಲ. ವರ್ಣಕವು ಚಕ್ರಾಕಾರವಾಗಿ ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ; ಬಣ್ಣ ಬದಲಿಸುವುದು ಹೀಮೋಗ್ಲೋಬಿನ್. ಕೆಳಗಿನ ಚಿತ್ರವು ಎರಡೂ ಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ.

ಮೂಲ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ

G6PD ಪೆಂಟೋಸ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಮಾರ್ಗದ ಮೊದಲ ಉತ್ಕರ್ಷಣ ಹಂತವನ್ನು ವೇಗಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ:

Glucose-6-phosphate + NADP+ becomes 6-phosphogluconolactone + NADPH + H+

ಲುಝಾಟ್ಟೊ ಮತ್ತು ಸಹೋದ್ಯೋಗಿಗಳು Bloodನಲ್ಲಿ ಪ್ರಕಟಿಸಿದ ವಿಮರ್ಶೆಯಲ್ಲಿ (2020) ವಿವರಿಸಿರುವಂತೆ, ಪ್ರೌಢ ಕೆಂಪು ರಕ್ತಕಣಗಳು NADPHಗಾಗಿ ಈ ಮಾರ್ಗವನ್ನು ಬಹಳವಾಗಿ ಅವಲಂಬಿಸಿವೆ. NADPH ಗ್ಲುಟಾಥಯೋನ್ ಅನ್ನು ಅಪಚಯಗೊಂಡ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಇರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕೋಶವನ್ನು ಉತ್ಕರ್ಷಣದಿಂದಾಗುವ ಹಾನಿಯಿಂದ ರಕ್ಷಿಸುತ್ತದೆ. ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಈ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ಸ್ವೀಕಾರಕವಾಗಿ ಭಾಗವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಸಾಕಷ್ಟು G6PD ಇದ್ದರೆ ಸಾಕಷ್ಟು NADPH ದೊರೆಯುತ್ತದೆ; ಇದರಿಂದ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಅಪಚಯ ನಡೆಯುತ್ತದೆ. G6PD ಕಡಿಮೆಯಾದರೆ ಈ ಸರಪಳಿ ಮೊದಲ ಕೊಂಡಿಯಲ್ಲೇ ಮುರಿಯುತ್ತದೆ.

ವರ್ಣಕವನ್ನು ಎಂಜಿನ್ ಎಂದು ಅಲ್ಲ, ಇಂಧನ ಮಾಪಕ ಎಂದು ಭಾವಿಸಿ. ಅದು NADPH ಪೂರೈಕೆಯ ಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಆ ಪೂರೈಕೆಯನ್ನು ಅಥವಾ ಫಲಿತಾಂಶದ ಓದನ್ನು ಬದಲಿಸುವ ಬೇರೆ ಯಾವುದೇ ಅಂಶವು ಜೀನ್‌ನಲ್ಲಿ ಬದಲಾವಣೆ ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೂ ಮಾಪಕದ ಸೂಚನೆಯನ್ನು ಬದಲಿಸಬಹುದು.

ಬ್ರೂವರ್ ಮಾದರಿಯ ಪರೀಕ್ಷೆ ಹೇಗೆ ನಡೆಯುತ್ತದೆ

ದಶಕಗಳಿಂದ ಕಾರಕಗಳ ತಯಾರಿಕಾ ಸೂತ್ರಗಳು ಬದಲಾಗುತ್ತಾ ಬಂದಿವೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಬೋಧನೆಗಾಗಿ ನೀಡುವ ವಿವರಣೆಯನ್ನು ವೈದ್ಯಕೀಯ ಪರೀಕ್ಷೆಯ ನಿಯಮಾವಳಿ ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಬಾರದು. ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಪ್ರಯೋಗಾಲಯವೂ ತನ್ನದೇ ಆದ ಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಪ್ರಮಾಣಿತ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಅನುಸರಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಎಚ್ಚರಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ, ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ನಳಿಕಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಮೂರು ನಳಿಕೆಗಳು ಮತ್ತು 3 ಗಂಟೆಗಳ ಇನ್‌ಕ್ಯುಬೇಶನ್ ಬಳಸುವ ರೂಪವನ್ನು ಈ ಪ್ರಕಟಿತ ಅನುಷ್ಠಾನದಲ್ಲಿ ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ:

1. ರೋಗಿಯ ನಳಿಕೆ: ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತಕ್ಕೆ ಗ್ಲೂಕೋಸ್, ಸೋಡಿಯಂ ನೈಟ್ರೈಟ್ ಮತ್ತು ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ನೈಟ್ರೈಟ್ ಮೆತ್‌ಹೀಮೋಗ್ಲೋಬಿನ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ, ಗ್ಲೂಕೋಸ್ ಕೆಂಪು ರಕ್ತಕಣಗಳ ಚಯಾಪಚಯಕ್ಕೆ ಆಧಾರ ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವರ್ಣಕವು NADPH-ಅವಲಂಬಿತ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ವರ್ಗಾವಣೆಗೆ ನೆರವಾಗುತ್ತದೆ.
2. ಉತ್ಕರ್ಷಿತ ನಿಯಂತ್ರಣ ಮಾದರಿ: ರಕ್ತಕ್ಕೆ ನೈಟ್ರೈಟ್ ಮತ್ತು ಗ್ಲೂಕೋಸ್ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಸೇರಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಇದು ಕೊರತೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುವ ಕಂದು ಮೆತ್‌ಹೀಮೋಗ್ಲೋಬಿನ್‌ನ ಅಂತಿಮ ಬಣ್ಣವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ.
3. ಹೀಮೋಗ್ಲೋಬಿನ್ ನಿಯಂತ್ರಣ ಮಾದರಿ: ರಕ್ತಕ್ಕೆ ನೀರು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಸಾಮಾನ್ಯ ಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುವ ಕೆಂಪು ಹೀಮೋಗ್ಲೋಬಿನ್‌ನ ಅಂತಿಮ ಬಣ್ಣವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ.
4. ಇನ್‌ಕ್ಯುಬೇಟ್ ಮಾಡಿ: ಎಲ್ಲ ನಳಿಕೆಗಳನ್ನು ಸುಮಾರು 37 Cನಲ್ಲಿ, ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 3 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ, ನಿಧಾನವಾಗಿ ಬೆರೆಸುತ್ತಾ ಇರಿಸಿ.
5. ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ: ಪ್ರತಿ ನಳಿಕೆಯಿಂದ ಸ್ವಲ್ಪ ಅಳತೆಯ ಭಾಗವನ್ನು ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ನೀರಿಗೆ ಸೇರಿಸಿ. ಇದರಿಂದ ಕೋಶಗಳು ಒಡೆದು, ಬಣ್ಣವನ್ನು ಸುಲಭವಾಗಿ ಹೋಲಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ.
6. ಹೋಲಿಸಿ: ರೋಗಿಯ ನಳಿಕೆಯನ್ನು ಎರಡೂ ನಿಯಂತ್ರಣ ಮಾದರಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿ. ಬಣ್ಣವು ಮತ್ತೆ ಕೆಂಪಿನತ್ತ ಸಾಗುವುದು ಗಣನೀಯ ಅಪಚಯಕಾರಿ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಕಂದು ಬಣ್ಣವೇ ಉಳಿಯುವುದು ತೀವ್ರ ಕೊರತೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.

ಒಂದು ಐತಿಹಾಸಿಕ ತಯಾರಿಕಾ ಸೂತ್ರದಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 1 mL ರಕ್ತದೊಂದಿಗೆ, ಸುಮಾರು 180 mM ಸೋಡಿಯಂ ನೈಟ್ರೈಟ್, 280 mM ಡೆಕ್ಸ್‌ಟ್ರೋಸ್ ಮತ್ತು 0.4 mM ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಇರುವ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗಿತ್ತು. ಈ ಅಂಕಿಗಳನ್ನು ಸಾಹಿತ್ಯದಲ್ಲಿನ ಉದಾಹರಣೆಯಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸಿ, ಎಲ್ಲೆಡೆ ಅನ್ವಯಿಸುವ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮಾನದಂಡವಾಗಿ ಅಲ್ಲ.

ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳುವುದು

G6PD ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವಿಕೆಯಲ್ಲಿನ ಅಂತರಗಳ ಕುರಿತು Malaria Journalನ ಈ ವಿಮರ್ಶೆಯಲ್ಲಿ ಚರ್ಚಿಸಿರುವಂತೆ, ಗುಣಾತ್ಮಕ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ತಪಾಸಣೆಯು ಸಾಮಾನ್ಯ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಸುಮಾರು 30 ರಿಂದ 40 ಪ್ರತಿಶತದ ಮಟ್ಟದಲ್ಲಿ ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿ ವ್ಯತ್ಯಾಸ ಗುರುತಿಸುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಸಾಮಾನ್ಯ ತಪಾಸಣಾ ಫಲಿತಾಂಶ ಎಂದರೆ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ತೀವ್ರ ಕೊರತೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಿಲ್ಲ ಎಂದರ್ಥ. ಅದು ಚಟುವಟಿಕೆ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸುವುದಿಲ್ಲ.

ಪ್ರಾಥಮಿಕ ತಪಾಸಣೆ ಏಕೆ ದಾರಿತಪ್ಪಿಸಬಹುದು

ಹೀಮೋಲೈಸಿಸ್ ಬಳಿಕ ರೆಟಿಕ್ಯುಲೋಸೈಟ್‌ಗಳ ಹೆಚ್ಚಳ ತಪ್ಪಾಗಿ ಸಾಮಾನ್ಯ ಫಲಿತಾಂಶ ಬರುವ ಪ್ರಸಿದ್ಧ ಕಾರಣವಾಗಿದೆ. ಹೊಸ ಕೆಂಪು ರಕ್ತಕಣಗಳು ಮತ್ತು ರೆಟಿಕ್ಯುಲೋಸೈಟ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಹಳೆಯ ಕಣಗಳಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು G6PD ಇರುತ್ತದೆ. ತೀವ್ರ ಹೀಮೋಲೈಸಿಸ್ ಘಟನೆಯ ವೇಳೆ ಅತ್ಯಂತ ಹಳೆಯ, ಹೆಚ್ಚು ಕೊರತೆಯಿರುವ ಕಣಗಳು ಈಗಾಗಲೇ ನಾಶವಾಗಿರಬಹುದು. ಉಳಿದ ಹೊಸ ಕಣಗಳ ಸಮೂಹದ ಚಟುವಟಿಕೆ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಕಾಣಬಹುದು. ಇದೇ ಜೈವಿಕ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ ವರ್ಣಕಾಧಾರಿತ ತಪಾಸಣೆಗಳನ್ನು ಮಾತ್ರವಲ್ಲ, ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳನ್ನೂ ದಾರಿತಪ್ಪಿಸುತ್ತದೆ.

ಇತ್ತೀಚಿನ ರಕ್ತ ವರ್ಗಾವಣೆ ಕೊರತೆಯನ್ನು ಮರೆಮಾಚುತ್ತದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ದಾನಿಯ ಕೆಂಪು ರಕ್ತಕಣಗಳು ತಮ್ಮದೇ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಮಾದರಿಗೆ ಸೇರಿಸುತ್ತವೆ. ರೆಟಿಕ್ಯುಲೋಸೈಟ್‌ಗಳ ಹೆಚ್ಚಳ ಮತ್ತು ಶ್ವೇತ ರಕ್ತಕಣಗಳ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪದ ಜೊತೆಗೆ, ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹವಲ್ಲದ ಕಿಣ್ವ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಅಂಶಗಳಲ್ಲಿ Mayo Clinic Laboratories ರಕ್ತ ವರ್ಗಾವಣೆಯನ್ನೂ ಪಟ್ಟಿಮಾಡಿದೆ.

ಹೆಟೆರೋಜೈಗಸ್ ಮಹಿಳೆಯರಲ್ಲಿ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಅತ್ಯಂತ ಕಷ್ಟಕರವಾಗಿದೆ. ಯಾದೃಚ್ಛಿಕ X-ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳ್ಳುವಿಕೆಯಿಂದ ಸಾಮಾನ್ಯ ಮತ್ತು ಕೊರತೆಯಿರುವ ಕೆಂಪು ರಕ್ತಕಣಗಳ ಮಿಶ್ರಣ ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ. ಒಟ್ಟಾರೆ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ತೀವ್ರ ಕೊರತೆಯಿಂದ ಹಿಡಿದು ಮೇಲ್ನೋಟಕ್ಕೆ ಸಾಮಾನ್ಯವೆಂದು ಕಾಣುವ ಮಟ್ಟದವರೆಗೆ ಎಲ್ಲಿಯಾದರೂ ಇರಬಹುದು. ಗುಣಾತ್ಮಕ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ತಪಾಸಣೆಗಳು ಮಧ್ಯಂತರ ಫೀನೋಟೈಪ್‌ಗಳನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವುದಿಲ್ಲ. G6PD ಪರೀಕ್ಷೆಯ ಕುರಿತು WHO ದಾಖಲೆ ಈ ಮಿತಿಯನ್ನು ವಿವರವಾಗಿ ಚರ್ಚಿಸುತ್ತದೆ.

ಮಾದರಿಯ ವಯಸ್ಸು, ಸಂಗ್ರಹಣೆಯ ತಾಪಮಾನ, ಅಂತಿಮ ಬಣ್ಣವನ್ನು ಕಣ್ಣಿನಿಂದ ನಿರ್ಣಯಿಸುವಲ್ಲಿನ ವ್ಯಕ್ತಿನಿಷ್ಠತೆ, ಹೀಮಟೋಕ್ರಿಟ್ ಮತ್ತು ಕಾರಕಗಳ ಗುಣಮಟ್ಟ ಈ ಜೈವಿಕ ಪರಿಣಾಮಗಳ ಜೊತೆಗೆ ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಅನಿಶ್ಚಿತತೆಯನ್ನೂ ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತವೆ.

ಪ್ರಾಥಮಿಕ ತಪಾಸಣೆ ರೋಗನಿರ್ಣಯವಲ್ಲ

ಕೊರತೆ, ಮಧ್ಯಂತರ ಚಟುವಟಿಕೆ ಅಥವಾ ವೈದ್ಯಕೀಯ ಸ್ಥಿತಿಗೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗದ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಪ್ರಾಥಮಿಕ ತಪಾಸಣೆ ತೋರಿಸಿದರೆ, ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ G6PD ಕಿಣ್ವ ಪರೀಕ್ಷೆ ಅಗತ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. WHO ತಾಪಮಾನ-ನಿಯಂತ್ರಿತ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೊಮೆಟ್ರಿಯನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖ ವಿಧಾನವಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸುತ್ತದೆ. ಆ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತಕಣಗಳನ್ನು ಒಡೆದು ಪಡೆದ ದ್ರವಕ್ಕೆ ಗ್ಲೂಕೋಸ್-6-ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಮತ್ತು NADP+ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುವ NADPH ಅನ್ನು 340 nmನಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚುತ್ತಿರುವ ಬೆಳಕಿನ ಹೀರಿಕೆಯ ಮೂಲಕ ಗಮನಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಬದಲಾವಣೆಯ ದರವು ಕಿಣ್ವದ ಚಟುವಟಿಕೆಗೆ ಅನುಪಾತದಲ್ಲಿರುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಅದನ್ನು ಪ್ರತಿ ಗ್ರಾಂ ಹೀಮೋಗ್ಲೋಬಿನ್‌ಗೆ ಘಟಕಗಳ ರೂಪದಲ್ಲಿ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರಸ್ತುತ ವೈದ್ಯಕೀಯ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳ ಪದ್ಧತಿಯನ್ನು G6PD ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಕುರಿತ Mayo ಪರೀಕ್ಷಾ ಪಟ್ಟಿಯ ದಾಖಲೆಯಲ್ಲಿ ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ ನೀಡಲಾಗಿದೆ.

ಫಲಿತಾಂಶದ ಅರ್ಥವಿವರಣೆಗೆ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯವು ಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಉಲ್ಲೇಖ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಜನಸಂಖ್ಯೆಯ ಸಾಮಾನ್ಯ ಚಟುವಟಿಕೆಗೆ ಹೋಲಿಸಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ; ಕೊರತೆಯನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 30 ಪ್ರತಿಶತದ ಮಿತಿಯ ಸಮೀಪದಲ್ಲೂ, ಮಧ್ಯಂತರ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಅದಕ್ಕಿಂತ ಮೇಲಿನ ಮಟ್ಟದಲ್ಲೂ ಚರ್ಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. G6PD ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಿಗಾಗಿ WHOನ ಗುರಿ ಉತ್ಪನ್ನ ವಿವರಗಳು (2022) ಈ ರೋಗನಿರ್ಣಯ ಚೌಕಟ್ಟನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತವೆ. ಇತ್ತೀಚಿನ ಹೀಮೋಲೈಸಿಸ್ ಅಥವಾ ರಕ್ತ ವರ್ಗಾವಣೆಯಿಂದ ಫೀನೋಟೈಪ್ ನಿರ್ಧಾರ ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹವಾಗದಿದ್ದರೆ, ಕೆಂಪು ರಕ್ತಕಣಗಳ ಸಮೂಹ ಮತ್ತೆ ಸಮತೋಲನಕ್ಕೆ ಬಂದ ಬಳಿಕ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸಿ. ಕಿಣ್ವದ ಮಾಪನಕ್ಕೆ ಬದಲಿಯಾಗದೆ, ಆಣ್ವಿಕ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಮಾಹಿತಿ ನೀಡಬಹುದು.

ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳಬೇಕಾದ ಒಂದು ಗಡಿ

ಈ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಲ್ಲಿ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಒಂದು ದೇಹದ ಹೊರಗೆ ಬಳಸುವ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ಕಾರಕವಾಗಿದೆ. ರೋಗಿಗೆ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ನೀಡುವ ಸುರಕ್ಷತೆಯ ಚರ್ಚೆಯಿಂದ ಈ ವಿಷಯ ಭಿನ್ನವಾಗಿದೆ. ಆ ಸುರಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಳಸಬಾರದ ಸಂದರ್ಭಗಳ ಮಾರ್ಗದರ್ಶನದಲ್ಲಿ ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಔಷಧವೂ NADPH-ಅವಲಂಬಿತ ಅಪಚಯವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸುವುದರಿಂದ ಇವೆರಡರ ನಡುವೆ ಜೀವರಾಸಾಯನಿಕ ಸಂಬಂಧವಿದೆ. ಆದರೆ ಪರೀಕ್ಷಾ ನಳಿಕೆಯಲ್ಲಿರುವ ವರ್ಣಕವು ರಕ್ತಪ್ರವಾಹದಲ್ಲಿರುವ ಔಷಧದ ಪ್ರಮಾಣವಲ್ಲ. ಬೇರೆ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚುವ ವರ್ಣಕವಾಗಿ ಅದು ಹೇಗೆ ವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬ ಹಿನ್ನೆಲೆಗಾಗಿ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚುವಿಕೆಯ ತತ್ವಗಳನ್ನು ನೋಡಿ. ಅದು ಸೇರಿರುವ ರಾಸಾಯನಿಕ ಕುಟುಂಬವನ್ನು ತಿಳಿಯಲು ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದಲ್ಲಿನ ಉತ್ಕರ್ಷಣ-ಅಪಚಯ ವರ್ಣಕಗಳನ್ನು ನೋಡಿ.

ಪ್ರಾಥಮಿಕ ತಪಾಸಣೆಯು ಅಪಚಯಕಾರಿ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ ಅಬಾಧಿತವಾಗಿ ಕಾಣುತ್ತಿದೆಯೇ ಎಂದು ಕೇಳುತ್ತದೆ. ದೃಢೀಕರಣವು ನಿಜವಾಗಿ ಎಷ್ಟು ಕಿಣ್ವವಿದೆ ಎಂದು ಕೇಳುತ್ತದೆ. ಎರಡನೆಯ ಪ್ರಶ್ನೆಗೆ ಉತ್ತರಿಸಲು ವರ್ಣಕವನ್ನು ಬಳಸದೆ ಇರುವವರೆಗೆ, ಅದು ಮೊದಲನೆಯ ಪ್ರಶ್ನೆಗೆ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ನೆರವಾಗುತ್ತದೆ.