ಜೀಬ್ರಾಫಿಶ್ ಸಂಶೋಧನೆಯಲ್ಲಿ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ: ಸಾಕಣೆಯ ಸಂಯೋಜಕ ಮತ್ತು ಪ್ರಯೋಗದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಗೊಂದಲಗೊಳಿಸುವ ಅಂಶ

ಜೀಬ್ರಾಫಿಶ್ ಮೊಟ್ಟೆಗಳ ನೀರು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಮಸುಕಾದ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣದಲ್ಲಿರುತ್ತದೆ; ಅದು ಏಕೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಬಹುತೇಕ ಯಾರೂ ದಾಖಲಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಆ ವರ್ಣಕ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ. ಶಿಲೀಂಧ್ರವನ್ನು ತಡೆಯಲು ಅದನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಅದನ್ನು ಹಿನ್ನೆಲೆಯ ಭಾಗವೆಂದು ಪರಿಗಣಿಸುತ್ತವೆ. ಇಲ್ಲಿ ಹಿನ್ನೆಲೆ ಎಂಬ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಯೇ ತಪ್ಪು. ಅದಕ್ಕಿಂತ ಸೂಕ್ತವಾದುದು ದಾಖಲಿಸದ ಪ್ರಯೋಗಾತ್ಮಕ ಅಂಶ: ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಗುಂಪಿನ ಪಾತ್ರೆಗಳಲ್ಲಿ ಇದ್ದು ನಿಯಂತ್ರಣ ಗುಂಪಿನ ಪಾತ್ರೆಗಳಲ್ಲಿ ಇಲ್ಲದ, ಬಳಸುವ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಲ್ಲಿ ಔಷಧಶಾಸ್ತ್ರೀಯವಾಗಿ ಸಕ್ರಿಯವಾಗಿರುವ, ಮತ್ತು ಪ್ರಯೋಗ ಅಳೆಯುವ ಫಲಿತಾಂಶ ಸೂಚಕಗಳನ್ನೇ ಬದಲಾಯಿಸಬಲ್ಲ ಅಂಶ.

ಮುಂದಿನ ಎಲ್ಲ ಚರ್ಚೆಗೆ ಈ ವ್ಯತ್ಯಾಸವೇ ಆಧಾರ. ಸಾಮಾನ್ಯ ಶಿಲೀಂಧ್ರನಿರೋಧಕ ಸಾಕಣೆ ಒಂದು ಪ್ರಶ್ನೆ. ಆ ಸಂಯೋಜಕವು ನಿಮ್ಮ ಪರೀಕ್ಷೆಯ ದೃಷ್ಟಿಯಿಂದ ತಟಸ್ಥವೇ ಎಂಬುದು ಬೇರೊಂದು ಪ್ರಶ್ನೆ. ಇತ್ತೀಚಿನ ಜೀಬ್ರಾಫಿಶ್ ಸಂಶೋಧನಾ ಸಾಹಿತ್ಯವು ಮೊದಲನೆಯದಕ್ಕೆ ಸಮಾಧಾನಕರವಾಗಿಯೂ ಎರಡನೆಯದಕ್ಕೆ ಅಸಮಾಧಾನಕರವಾಗಿಯೂ ಉತ್ತರಿಸುತ್ತದೆ.

ಮಾರ್ಗಸೂಚಿಗಳು ನಿಜವಾಗಿ ಏನನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ

ಇದಕ್ಕೆ ಒಂದೇ ಮಾನದಂಡವಿಲ್ಲ; ಸಮಸ್ಯೆಯ ಒಂದು ಭಾಗವೇ ಅದು. ಶಿಲೀಂಧ್ರದ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಮೊಟ್ಟೆ ಮತ್ತು ಲಾರ್ವಾಗಳ ಸಾಗಣೆಯ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ 0.5 mg/L, ಅಥವಾ 0.00005%, ಬಳಸುವುದನ್ನು ಕೆನಡಿಯನ್ ಕೌನ್ಸಿಲ್ ಆನ್ ಅನಿಮಲ್ ಕೇರ್ ಮಾರ್ಗದರ್ಶನ ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ. ಯುರೋಪಿನ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಮಾರ್ಗದರ್ಶನವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಇದೇ 0.00005% ಹೊಂದಿರುವ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಭ್ರೂಣಗಳನ್ನು ಇರಿಸುವುದನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ಕೋಲ್ಡ್ ಸ್ಪ್ರಿಂಗ್ ಹಾರ್ಬರ್ E3 ತಯಾರಿಕಾ ಸೂತ್ರವು ಇದರ ಎರಡು ಪಟ್ಟು, 1 mg/L ಅಥವಾ 0.0001%, ಅನ್ನು ಒಂದು ಘಟಕವಾಗಿ ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಇದಕ್ಕೆ ವಿರುದ್ಧವಾಗಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾದ ಒಂದು ಗೈರುಹಾಜರಿ ಇದೆ: OECD ಮೀನಿನ ಭ್ರೂಣದ ವಿಷತ್ವ ಪರೀಕ್ಷೆಯ ಮಾರ್ಗಸೂಚಿಯು ಮರುಸಂಯೋಜಿತ ದುರ್ಬಲೀಕರಣ ನೀರು ಮತ್ತು ಪರೀಕ್ಷಾ ರಾಸಾಯನಿಕವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ; ಅದರ 2013 ಆವೃತ್ತಿಯಲ್ಲಾಗಲಿ ನಂತರದ ಪರಿಷ್ಕರಣೆಯಲ್ಲಾಗಲಿ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಳಕೆಯ ಶಿಫಾರಸು ಇಲ್ಲ. ಹೀಗಾಗಿ ಒಂದು ಪ್ರಯೋಗಾಲಯವು ಜೀವನದ ಮೊದಲ ಗಂಟೆಗಳಿಂದಲೇ ಜೀಬ್ರಾಫಿಶ್ ಭ್ರೂಣಗಳನ್ನು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬೆರೆಸಿದ ನೀಲಿ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಬೆಳೆಸುತ್ತದೆ; ಮತ್ತೊಂದು ನಿಯಂತ್ರಣಾತ್ಮಕ ಭ್ರೂಣ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಬಣ್ಣರಹಿತ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ನಡೆಸುತ್ತದೆ. ಎರಡೂ ತಮ್ಮ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವೆಂದು ಕರೆಯುತ್ತವೆ. ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳ ನಡುವಿನ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಹೋಲಿಸುವ ಅಥವಾ ಹಿಂದಿನ ನಿಯಂತ್ರಣ ದತ್ತಾಂಶವನ್ನು ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸುವ ಯಾರಿಗಾದರೂ ಈ ಅಸಂಗತತೆ ಎದುರಾಗುತ್ತದೆ.

ಸಾಂದ್ರತೆಗಳ ಹಿನ್ನೆಲೆ ತಿಳಿಯಲು, 0.00005% ಸುಮಾರು 1.56 micromolar ಮತ್ತು 0.0001% ಸುಮಾರು 3.13 micromolar ಆಗಿದೆ. ಇವು ಕಡಿಮೆ ಸಂಖ್ಯೆಗಳು; ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವಷ್ಟು ದೊಡ್ಡದಲ್ಲವೆಂದು ಭಾವಿಸುವ ಪ್ರಲೋಭನೆ ಉಂಟಾಗಬಹುದು. ಕೆಳಗಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಸರಿಯಾಗಿ ಇದೇ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಲ್ಲಿ ಇದೇ ಊಹೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸುತ್ತವೆ.

ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ಬದಲು ಮೀನು ಸಾಕಣೆಯ ಹಿನ್ನೆಲೆಯಿಂದ ಬರುವ ಓದುಗರು ಇದೇ ಅಣುವನ್ನು ಬೇರೆ ಸನ್ನಿವೇಶದಲ್ಲಿ ಕಾಣುತ್ತಾರೆ; ಅದನ್ನು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಕುರಿತ ಅಕ್ವೇರಿಯಂ ಮಾರ್ಗದರ್ಶಿ ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರ ಒಂದೇ; ವರ್ಣಕವು ಕೋಶಗಳ ಮೂಲಕ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್‌ಗಳನ್ನು ಹೇಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬ ಚರ್ಚೆ, ರೆಡಾಕ್ಸ್-ಸಕ್ರಿಯ ಸಂಯುಕ್ತವು ಚಯಾಪಚಯದ ಸಂಶೋಧನಾ ಲೇಖನಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತೆ ಮತ್ತೆ ಏಕೆ ಕಾಣಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ಮುಂದಿನ ಚರ್ಚೆ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಹೊಂದಿರುವ ಜೀಬ್ರಾಫಿಶ್ ಮೊಟ್ಟೆಗಳ ನೀರಿಗೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿದೆ.

ಚಯಾಪಚಯ: ಹಂತಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಪರಿಣಾಮದ ದಿಕ್ಕು ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ

ಅತ್ಯಂತ ಮಾಹಿತಿಪೂರ್ಣ ಅಧ್ಯಯನವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬೆಳೆಯುತ್ತಿರುವ ಜೀಬ್ರಾಫಿಶ್‌ಗಳನ್ನು ಜೀವನದ ಮೊದಲ ದಿನದಿಂದ ನಿಷೇಚನದ ನಂತರದ 5 ದಿನಗಳವರೆಗೆ ವರ್ಣಕಕ್ಕೆ ಒಡ್ಡಿ, ಪ್ರತಿ ಹಂತದಲ್ಲೂ ಆಕ್ಸಿಡೇಟಿವ್ ಚಯಾಪಚಯವನ್ನು ಅಳೆಯಿತು. ಇದನ್ನು ಭ್ರೂಣ ಚಯಾಪಚಯ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಪ್ರಕಟಿತ ವರದಿ ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಎಚ್ಚರಿಕೆಯಿಂದ ವಿವರಿಸಬೇಕು, ಏಕೆಂದರೆ ಅದರ ದಿಕ್ಕು ತಿರುಗುತ್ತದೆ.

ನಿಷೇಚನದ ನಂತರದ 1 ದಿನದಲ್ಲಿ, ಸಾಕಣೆಗೆ ಬಳಸುವ ಎರಡೂ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಿಗೆ ಒಡ್ಡಿದ ಭ್ರೂಣಗಳಲ್ಲಿ ಮೂಲಮಟ್ಟದ ಆಮ್ಲಜನಕ ಬಳಕೆ ಹೆಚ್ಚಾಯಿತು. 2 ದಿನಗಳಲ್ಲಿ, 0.00005%, 0.0001%, ಮತ್ತು 0.0003% ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಿಗೆ ಒಡ್ಡಿದ ಲಾರ್ವಾಗಳ ಮೇಲ್ಮೈ ಪದರದಲ್ಲಿ ಮೈಟೋಕಾಂಡ್ರಿಯ ಪೊರೆಯ ವಿದ್ಯುತ್ ವಿಭವ ಹೆಚ್ಚಿತ್ತು. 4 ರಿಂದ 5 ದಿನಗಳ ವೇಳೆಗೆ, ಮೊಟ್ಟೆಯಿಂದ ಹೊರಬಂದ ನಂತರ, ಪರಿಣಾಮದ ದಿಕ್ಕು ತಿರುಗಿತ್ತು: ನಿಷೇಚನದಿಂದ ನಿರಂತರವಾಗಿ ಒಡ್ಡಿದ್ದರೂ ಅಥವಾ ಕೇವಲ 3ನೇ ದಿನದಿಂದ 4ನೇ ದಿನದವರೆಗೆ ಅಲ್ಪಾವಧಿಗೆ ಒಡ್ಡಿದ್ದರೂ, ಆಕ್ಸಿಡೇಟಿವ್ ಶಕ್ತಿವ್ಯಯ ಕಡಿಮೆಯಾಯಿತು. ಅದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಮೈಟೋಕಾಂಡ್ರಿಯ ಉಸಿರಾಟ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳ ಉಪಘಟಕಗಳ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟ್‌ಗಳು 1 ಮತ್ತು 4 ದಿನಗಳೆರಡರಲ್ಲೂ ಕಡಿಮೆಯಾದವು; ಸ್ಟೆರಾಯ್ಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆ ಮತ್ತು ಗ್ಲೂಕೋನಿಯೋಜೆನೆಸಿಸ್‌ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟ್‌ಗಳೂ ಕಡಿಮೆಯಾದವು.

ಇನ್ನೂ ಎರಡು ಅವಲೋಕನಗಳು ಈ ಚಿತ್ರಣವನ್ನು ಸ್ಪಷ್ಟಗೊಳಿಸುತ್ತವೆ. ಸಾಕಣೆಯ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಯಲ್ಲಿ ಮೊಟ್ಟೆಯಿಂದ ಹೊರಬರುವಿಕೆ ಸ್ವಲ್ಪ ಬೇಗ ನಡೆಯಿತು: ವರ್ಣಕಕ್ಕೆ ಒಡ್ಡಿದ ಭ್ರೂಣಗಳು 2 ದಿನಗಳಲ್ಲಿ ಮುಂದಿದ್ದವು, ಮತ್ತು ನಿಯಂತ್ರಣ ಗುಂಪು 3ನೇ ದಿನಕ್ಕೆ ಅದೇ ಹಂತ ತಲುಪಿತು. ಒತ್ತಡ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಅಕ್ಷವೂ ಅಬಾಧಿತವಾಗಿರುವಂತೆ ಕಂಡಿತು: 5 ದಿನಗಳ ಲಾರ್ವಾಗಳನ್ನು ಸುಳಿಯುವ ಚಲನೆಯ ಒತ್ತಡಕಾರಕಕ್ಕೆ ಒಳಪಡಿಸಿದಾಗ, ಎರಡೂ ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ ಇಡೀ ದೇಹದ ಕಾರ್ಟಿಸೋಲ್ ಮಟ್ಟ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾಯಿತು. ಆದ್ದರಿಂದ ಈ ಪ್ರಮಾಣಗಳಲ್ಲಿ ವರ್ಣಕವು ಸಾಮಾನ್ಯ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ವಿಷವಲ್ಲ, ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಶಾರೀರಿಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನೂ ಕುಂಠಿತಗೊಳಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಅದು ಹಂತಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಶಕ್ತಿಯ ಚಯಾಪಚಯವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ: ಮೊಟ್ಟೆಯಿಂದ ಹೊರಬರುವ ಮೊದಲು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ, ನಂತರ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.

ವರ್ತನೆ: ಎರಡು ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಏಕೆ ಭಿನ್ನವಾಗಿವೆ, ಮತ್ತು ಎರಡೂ ಏಕೆ ಸರಿಯಾಗಿರಬಹುದು

ವರ್ಣಕಕ್ಕೆ ಒಡ್ಡುವ ವಿನ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಪಕ್ಕಪಕ್ಕದಲ್ಲಿ ನೋಡದಿದ್ದರೆ ವರ್ತನೆಯ ಕುರಿತ ಸಂಶೋಧನಾ ಸಾಹಿತ್ಯ ವಿರೋಧಾಭಾಸದಂತೆ ಕಾಣುತ್ತದೆ. ಒಂದು ಬೆಳವಣಿಗೆ ಮತ್ತು ವರ್ತನೆಯ ಸುರಕ್ಷತಾ ಅಧ್ಯಯನ ನಿಷೇಚನದ ನಂತರ ಸುಮಾರು 6 ಗಂಟೆಗಳಿಂದ ಭ್ರೂಣಗಳನ್ನು 10 micromolar ವರೆಗಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಿಗೆ ಒಡ್ಡಿತು. 4ನೇ ದಿನದವರೆಗೆ ದ್ರಾವಣಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿದಿನ ಬದಲಾಯಿಸಿ, ನಂತರ 5 ಮತ್ತು 6ನೇ ದಿನಗಳಿಗೆ ಲಾರ್ವಾಗಳನ್ನು ವರ್ಣಕರಹಿತ ಮಾಧ್ಯಮಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿತು; 6ನೇ ದಿನ ಬೆಳಕು-ಕತ್ತಲೆ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಚಲನೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿತು. ಫಲಿತಾಂಶ: ಸಾವಿನ ಪ್ರಮಾಣ, ಮೊಟ್ಟೆಯಿಂದ ಹೊರಬರುವಿಕೆ ಅಥವಾ ದೇಹಾಕೃತಿಯ ಮೇಲೆ ಗಮನಾರ್ಹ ಪರಿಣಾಮ ಇರಲಿಲ್ಲ; ಚಲನೆಯ ಮೇಲೂ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪರಿಣಾಮ ಇರಲಿಲ್ಲ. ತಮ್ಮ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ 10 micromolar ಅನ್ನು ಮೇಲಿನ ಮಿತಿಯಾಗಿ ಲೇಖಕರು ಸಮಂಜಸವಾಗಿ ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಿದರು.

ಚಯಾಪಚಯ ಅಧ್ಯಯನದ ಕೆಲವು ಲೇಖಕರನ್ನೂ ಒಳಗೊಂಡಿದ್ದ ಎರಡನೇ ಗುಂಪು, ಸಾಕಣೆಯಲ್ಲಿ ನಿಜವಾಗಿ ನಡೆಯುವ ರೀತಿಯಲ್ಲೇ ವರ್ಣಕಕ್ಕೆ ಒಡ್ಡಿತು: ನಿಷೇಚನದ ನಂತರ 2 ರಿಂದ 3 ಗಂಟೆಗಳ ಅವಧಿಯಿಂದ ವರ್ಣಕ ಇತ್ತು, ಪ್ರತಿದಿನ ಮಾಧ್ಯಮದ ಒಂದು ಭಾಗವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಲಾಯಿತು, ಮತ್ತು ವರ್ಣಕದ ಸಂಪರ್ಕ ಮುಂದುವರಿಯುತ್ತಿದ್ದಾಗ ಅಥವಾ ಇತ್ತೀಚೆಗೆ ಕೊನೆಗೊಂಡಿದ್ದಾಗ ವರ್ತನೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಲಾಯಿತು. ಇದೇ ಸಾಮಾನ್ಯ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಲ್ಲಿ, 24-ಗಂಟೆಗಳ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಲಾರ್ವಾಗಳ ಚಲನೆ ಕಡಿಮೆಯಾಯಿತು. ಈ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ವಿವಿಧ ತಳಿಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳಲ್ಲಿ ಪುನರಾವರ್ತಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಯಿತು. ವರ್ತನೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಗೊಂದಲಗೊಳಿಸುವ ಪರಿಣಾಮದ ಅಧ್ಯಯನ ಈ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಸೆರೋಟೋನಿನ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಮಟ್ಟದೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿತು; ಇದು ವರ್ಣಕದ ತಿಳಿದಿರುವ ಮೊನೊಅಮೈನ್ ಆಕ್ಸಿಡೇಸ್ ಪ್ರತಿಬಂಧನಕ್ಕೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುತ್ತದೆ. ಅತ್ಯಂತ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ, ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಹೊಂದಿದ್ದ ಭ್ರೂಣ ಮಾಧ್ಯಮವು SSRI ಫ್ಲುಆಕ್ಸೆಟೀನ್‌ಗೆ ನಿರೀಕ್ಷಿತ ಚಲನೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಮರೆಮಾಡಿತು. ಆದ್ದರಿಂದ ನೀಲಿ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ನಡೆಸುವ ತಪಾಸಣಾ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಬಣ್ಣರಹಿತ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಕಾಣಿಸಬಹುದಾದ ಔಷಧದ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು.

ನಿಜವಾದ ವಿರೋಧಾಭಾಸ ಇಲ್ಲ. ಒಂದು ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಸಂಯುಕ್ತವನ್ನು ತೊಳೆದು ತೆಗೆದುಹಾಕಿದ ಎರಡು ದಿನಗಳ ನಂತರ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದಾದ ಉಳಿದ ಪರಿಣಾಮ ಇಲ್ಲದಿರಬಹುದು; ಆದರೂ ಮತ್ತೊಂದು ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಅದು ಇರುವವರೆಗೂ ಸಕ್ರಿಯವಾಗಿರಬಹುದು. ಪ್ರಾಯೋಗಿಕವಾಗಿ ಇದರ ಅರ್ಥವೆಂದರೆ, ಪರಿಣಾಮ ಕಂಡುಬರದ ಫಲಿತಾಂಶವು ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಮೇಲಿನ ಮಿತಿಯನ್ನು ಸಮರ್ಥಿಸುತ್ತದೆ, ತಟಸ್ಥತೆಯ ಹೇಳಿಕೆಯನ್ನಲ್ಲ. ಪರಿಣಾಮ ಕಂಡುಬಂದ ಫಲಿತಾಂಶವು ಮುಖ್ಯವಾದ ಅಪಾಯವನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ: ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳು ಬಳಸುವ ಅದೇ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ, ಅಳೆಯುವ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ ನಡೆಯುತ್ತಿರುವ ಸಕ್ರಿಯ ಸಂಪರ್ಕ.

ರೆಡಾಕ್ಸ್ ಪರೀಕ್ಷೆಯೊಳಗೆ ಒಂದು ರೆಡಾಕ್ಸ್ ವರ್ಣಕ

ಇನ್ನೊಂದು ಬಲೆ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಚರ್ಚೆಗೆ ಅರ್ಹವಾಗಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಅದು ಪ್ರಾಣಿಯ ಬದಲು ಅಳತೆಯ ಸಾಧನವನ್ನು ವಿಕೃತಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. Alamar Blue ಶಕ್ತಿವ್ಯಯ ಪರೀಕ್ಷೆಯೇ ರೆಡಾಕ್ಸ್ ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರವಾಗಿದೆ: ರೆಸಾಜುರಿನ್ ಅಪಚಯಗೊಂಡು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ರೆಸೊರುಫಿನ್ ಆಗುತ್ತದೆ. ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಕೂಡ ರೆಡಾಕ್ಸ್ ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರದಲ್ಲೇ ಪಾಲ್ಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಕೋಶರಹಿತ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳಲ್ಲಿ, ಸಾಕಣೆಯ ಎರಡೂ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು 24 ಗಂಟೆಗಳ ನಂತರ Alamar Blue ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿಯನ್ನು ಸ್ವಲ್ಪವಾದರೂ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿದವು. ಪ್ರಾಣಿ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ, ವರ್ಣಕಕ್ಕೆ ಒಡ್ಡಿದ ಭ್ರೂಣಗಳನ್ನು ಪರೀಕ್ಷೆಗೆ ಮೊದಲು ವರ್ಣಕರಹಿತ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಕನಿಷ್ಠ ಮೂರು ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಲಾಯಿತು. ಮೊಟ್ಟೆಯಿಂದ ಹೊರಬಂದ ಲಾರ್ವಾಗಳಲ್ಲಿನ ಜೈವಿಕ ಪರಿಣಾಮವು ಕೋಶರಹಿತ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಾಗಿತ್ತು. ಆದ್ದರಿಂದ ಎರಡೂ ಸಂಗತಿಗಳು ನಿಜ: ತೊಳೆದ ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿ ನಿಜವಾದ ಚಯಾಪಚಯ ಪರಿಣಾಮ ಉಳಿಯುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ತೊಳೆಯದೆ ಉಳಿದ ವರ್ಣಕವು ಅದರ ಮೇಲೆ ನೇರ ರಾಸಾಯನಿಕ ಕೃತಕ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಸೇರಿಸುತ್ತದೆ. ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಈ ಎರಡನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಬೇಕು; ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ಎರಡೂ ಅಳತೆಗಳಿಗೆ ಅರ್ಥವಿರುವುದಿಲ್ಲ. ವರ್ಣಕಾಧಾರಿತ ಪರೀಕ್ಷಾ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಅರ್ಥೈಸುವ ಸಾಮಾನ್ಯ ಮಾರ್ಗದರ್ಶನ ಇಲ್ಲಿ ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಮಹತ್ವದ್ದಾಗಿದೆ.

ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಹಂತಗಳ ಕಾಲರೇಖೆ

ಈ ಲೇಖನಕ್ಕಾಗಿ ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಿದ ಮೂಲ ಸಂಪನ್ಮೂಲ. ಬೇರೆ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಸೂಚಿಸದಿದ್ದರೆ, ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು ಸಾಕಣೆಗೆ ಬಳಸುವ ಎರಡು ಮಾನದಂಡದ ಮೌಲ್ಯಗಳಾದ 0.00005% ಮತ್ತು 0.0001% ಆಗಿವೆ.

ನೆನಪಿಡಬೇಕಾದ ಮಾದರಿಯೆಂದರೆ ಚಯಾಪಚಯ ಸೂಚಕಗಳಲ್ಲಿ ಆರಂಭಿಕ ಏರಿಕೆ ಮತ್ತು ನಂತರದ ಇಳಿಕೆ. ವರ್ತನೆಯ ಪರಿಣಾಮಗಳು ವರ್ಣಕದ ಸಂಪರ್ಕದ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬಂದವು; ಅದನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದ ಒಂದು ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ, ವರ್ಣಕ ತೆರವಾದ ನಂತರ ಅವು ಪತ್ತೆಯಾಗಲಿಲ್ಲ.

ನಿಯಂತ್ರಣ ವಿನ್ಯಾಸದ ಪರಿಶೀಲನಾಪಟ್ಟಿ

ಎರಡನೆಯ ಮೂಲ ಸಂಪನ್ಮೂಲ. ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಳಸುವ ಜೀಬ್ರಾಫಿಶ್ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಪ್ರಯೋಗದೊಂದಿಗೆ ಬೆರೆತಾಗ ಇದನ್ನು ಬಳಸಿ.

1. ವರ್ಣಕವನ್ನು ನೀರೆಂದು ಅಲ್ಲ, ಅಭಿಕಾರಕವೆಂದು ವರದಿ ಮಾಡಿ. ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಶೇಕಡಾವಾರು ಮತ್ತು micromolar ಎರಡರಲ್ಲೂ, ಸಂಪರ್ಕದ ಆರಂಭ ಮತ್ತು ಅಂತ್ಯವನ್ನು ನಿಷೇಚನದ ನಂತರದ ಗಂಟೆಗಳಲ್ಲಿ ಅಥವಾ ದಿನಗಳಲ್ಲಿ, ಮಾಧ್ಯಮ ಬದಲಾಯಿಸುವ ವೇಳಾಪಟ್ಟಿಯನ್ನು, ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ ಅಳತೆಗೆ ಮೊದಲು ವರ್ಣಕ ತೆರವುಗೊಳಿಸುವ ಅವಧಿಯನ್ನು ತಿಳಿಸಿ.
2. ನಿಯಂತ್ರಣಗಳನ್ನು ಸಂಶೋಧನಾ ಪ್ರಶ್ನೆಗೆ ಹೊಂದಿಸಿ. ಪರೀಕ್ಷಾ ರಾಸಾಯನಿಕದ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ ವರ್ಣಕರಹಿತ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಬೇಕು; ಸಾಕಣೆಯ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ ವರ್ಣಕರಹಿತ ಮತ್ತು ವರ್ಣಕ ಹೊಂದಿರುವ ಗುಂಪುಗಳು ಬೇಕು, ಜೊತೆಗೆ ಶಿಲೀಂಧ್ರನಿರೋಧಕ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ದಾಖಲಿಸಬೇಕು. ಏಕೆಂದರೆ ಉಲ್ಲೇಖಿಸಿದ ಎರಡೂ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಯಾವುದೂ ಶಿಲೀಂಧ್ರನಿರೋಧಕ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವವನ್ನು ಅಳೆಯಲಿಲ್ಲ.
3. ರೆಡಾಕ್ಸ್ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳ ಮೊದಲು ತೊಳೆಯಿರಿ, ನಂತರ ಪರಿಶೀಲಿಸಿ. ವರ್ಣಕರಹಿತ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಕನಿಷ್ಠ ಮೂರು ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಿರಿ ಮತ್ತು ಜೊತೆಯಲ್ಲೇ ಕೋಶರಹಿತ ವರ್ಣಕ-ಮತ್ತು-ಅಭಿಕಾರಕ ನಿಯಂತ್ರಣವನ್ನು ನಡೆಸಿ, ಏಕೆಂದರೆ ವರ್ಣಕವು Alamar Blue ಸಂಕೇತವನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.
4. ವರ್ತನೆ ಮತ್ತು ಮೊನೊಅಮೈನ್ ಸೂಚಕಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಪಾಯದವು ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಿ. ಚಲನೆ, ಬೆಚ್ಚಿಬೀಳುವ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ, ಆತಂಕದಂತಹ ವರ್ತನೆ, ಖಿನ್ನತೆನಿರೋಧಕ ಮತ್ತು MAO-ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಅಳತೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ವರ್ಣಕವನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಬೇಕು ಅಥವಾ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸೂಚಕದ ದೃಷ್ಟಿಯಿಂದ ಅದರ ತಟಸ್ಥತೆಯನ್ನು ತೋರಿಸಬೇಕು. ಒಂದರಿಂದ ಎರಡು ದಿನಗಳ ವರ್ಣಕ ತೆರವು ಅವಧಿಯು ಒಂದು ಚಲನೆಯ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿತು, ಆದರೆ ಇತರ ಪರೀಕ್ಷಾ ವಿನ್ಯಾಸಗಳಿಗೆ ಅದು ಸಾಬೀತಾಗಿಲ್ಲ.
5. ಪ್ರತಿ ಹಂತದಲ್ಲೂ ಚಯಾಪಚಯ ಮತ್ತು ಮೈಟೋಕಾಂಡ್ರಿಯ ಸೂಚಕಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಪಾಯದವು ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಿ. ಆಮ್ಲಜನಕ ಬಳಕೆ, ಶಕ್ತಿವ್ಯಯ, ಪೊರೆಯ ವಿದ್ಯುತ್ ವಿಭವ ಮತ್ತು ಉಸಿರಾಟ ಸರಪಳಿಯ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟ್‌ಗಳು ಸಾಕಣೆಯ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಲ್ಲಿ ಬದಲಾಗುತ್ತವೆ; ಮೊಟ್ಟೆಯಿಂದ ಹೊರಬರುವ ಮೊದಲು ಮತ್ತು ನಂತರ ಅವು ವಿರುದ್ಧ ದಿಕ್ಕುಗಳಲ್ಲಿ ಬದಲಾಗುತ್ತವೆ.
6. ಒಂದು ವಿನ್ಯಾಸದಲ್ಲಿ ಕಂಡ ತಟಸ್ಥತೆಯನ್ನು ಮತ್ತೊಂದಕ್ಕೆ ಅನ್ವಯಿಸಬೇಡಿ. ವರ್ಣಕವನ್ನು ತೆರವುಗೊಳಿಸಿದ ನಂತರ ಪರಿಣಾಮ ಕಂಡುಬರದ ಫಲಿತಾಂಶವು ಮುಂದುವರಿಯುತ್ತಿರುವ ಸಂಪರ್ಕಕ್ಕೆ ಅನ್ವಯಿಸುವುದಿಲ್ಲ; ದೇಹಾಕೃತಿಯಲ್ಲಿ ಪರಿಣಾಮ ಕಂಡುಬರದಿರುವುದು ಚಯಾಪಚಯ ಅಥವಾ ಔಷಧದ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗೆ ಅನ್ವಯಿಸುವುದಿಲ್ಲ; ಒಂದು ತಳಿ, ತಾಪಮಾನ ಅಥವಾ ಪರೀಕ್ಷಾ ಅವಧಿಯ ಫಲಿತಾಂಶವು ಇತರವುಗಳಿಗೆ ಅನ್ವಯಿಸುವುದಿಲ್ಲ.
7. ನೀವು ಅನುಸರಿಸಿದ ಮಾರ್ಗಸೂಚಿ ಮತ್ತು ಅದರ ಪರ್ಯಾಯವನ್ನು ತಿಳಿಸಿ. CCAC, ಯುರೋಪಿನ ಅಥವಾ ಕೋಲ್ಡ್ ಸ್ಪ್ರಿಂಗ್ ಹಾರ್ಬರ್ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳನ್ನು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಹೆಸರಿಸಿ, ಮತ್ತು OECD ಭ್ರೂಣ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ವರ್ಣಕವನ್ನು ಸೇರಿಸದಿರುವುದನ್ನು ಸೂಚಿಸಿ. ಇದರಿಂದ ಓದುಗರು ನಿಮ್ಮ ಪ್ರಾಣಿಗಳನ್ನು ಯಾವ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಬೆಳೆಸಲಾಗಿದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು.

ಇದಾವುದೂ ಮೊಟ್ಟೆಗಳನ್ನು ಜೀವಂತವಾಗಿಡಲು ವರ್ಣಕ ಬಳಸುವುದರ ವಿರುದ್ಧ ವಾದವಲ್ಲ. ಸಾಕಣೆಯ ಆಯ್ಕೆಯೊಂದು ಪರಿಶೀಲನೆಯಿಲ್ಲದೆ ದತ್ತಾಂಶದೊಳಗೆ ನುಸುಳುವುದರ ವಿರುದ್ಧದ ವಾದ ಇದು. ಪಾತ್ರೆಯಲ್ಲಿರುವ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣವು ಔಷಧಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ಗುಣಗಳಿರುವ ಒಂದು ಅಣು. ವಿಕೃತಗೊಳ್ಳುವ ಸಾಧ್ಯತೆ ಅತ್ಯಧಿಕವಾಗಿರುವ ಪ್ರಯೋಗಗಳೆಂದರೆ, ಈಗ ಎಳೆಯ ಜೀಬ್ರಾಫಿಶ್‌ಗಳನ್ನು ಆದ್ಯತೆಯಿಂದ ಬಳಸುವ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ವೇಗವಾಗಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸುವ ಚಯಾಪಚಯ ಮತ್ತು ನರ-ವರ್ತನಾ ತಪಾಸಣೆಗಳೇ. ಅದನ್ನು ದಾಖಲಿಸಿ, ನಿಯಂತ್ರಿಸಿ, ಅಳೆಯುವ ಮೊದಲು ತೊಳೆದು ತೆಗೆದುಹಾಕಿ, ಮತ್ತು ಅದು ಸದ್ದಿಲ್ಲದೆ ಪಾಲ್ಗೊಳ್ಳುತ್ತಿರಬಹುದಾದ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಿ.