Ònye mepụtara agba odo odo nke ọbara? Methylene blue, Malachowski, Romanowsky, na Giemsa

Eosin na-acha uhie. Methylene blue na-acha anụnụ anụnụ. Gwakọta ha abụọ, tee ngwakọta ahụ n'oyi akwa ọbara a mịrị amị, akụkụ ụfọdụ nke oyi akwa ahụ ga-acha odo odo.

Ọ bụghị akụkụ niile. N'ihe e doziri nke ọma, nukliọs nke mkpụrụ ndụ ọbara ọcha na-acha uhie-odo odo, kromatin dị n'ime nje ịba na-achakwa otu ụcha ahụ, ebe mkpụrụ ndụ ọbara uhie ndị gbara ya gburugburu ka na-acha pink, saịtịọplasm ana-achakwa ntụ ntụ-anụnụ anụnụ. Ụcha odo odo ahụ bụ ihe na-eme ka a mata ọdịiche dị n'etiti ụdị mkpụrụ ndụ ndị ahụ.

Ọ dịghị nke ọ bụla n'ime karama abụọ ahụ nwere ụcha odo odo. Ụcha ahụ na-apụta naanị mgbe otu ihe pụrụ iche sitere na mmebi methylene blue zutere eosin n'elu enyo nyocha, ma n'afọ ndị 1880 na 1890, ọ dịghị onye maara na ihe ahụ dị, ma ya fọdụ ịma ihe ọ bụ. Ndị na-achọ ụcha ahụ nọ na-eji agba ndị na-adịghị ọcha arụ ọrụ, onye ọ bụla n'onwe ya, n'enweghị ụzọ a pụrụ ịdabere na ya iji chọpụta ihe dị n'ime karama mgbe ọ nọrọla n'elu shelf ọnwa abụọ.

Ọ bụ ya mere ajụjụ dị n'isiokwu ahụ ji nwee ihe karịrị otu azịza a pụrụ ịkwado, nakwa ihe mere azịza ahụ ji gbanwee na 2011.

Ihe a hụrụ na-agbanwe ka ngwakọta gbanwere

Ọ dịghị onye chepụtara ihe e ji ete agba ahụ otu mgbe. Ọ gara n'ihu site n'ọrụ ndị na-esochi ibe ha. Mgbanwe ọ bụla e mere na ngwakọta ahụ wetara kpọmkwem otu ozi ọhụrụ a pụrụ ịhụ, usoro ozi ndị ahụ si pụta bụkwa ụzọ kacha doo anya isi ghọta akụkọ ahụ.

Usoro dị na kọlụm ikpeazụ bụ ihe dị mkpa. Ọganihu ọ bụla mụbara ụdị ụcha a pụrụ inweta, mmụba ọ bụla mekwara ka a hụ otu usoro ọzọ dị n'ime mkpụrụ ndụ. Ụcha odo odo abụghị ihe ịchọ mma n'usoro ahụ; ọ bụ ọdịiche dị n'etiti ịhụ na nje ndị ọzọ dị na ịhụ ihe mejupụtara ya. Otu agba ahụ n'onwe ya si n'ụlọ ọrụ agba BASF banye n'ọrụ ọgwụ bụ akụkọ ka ogologo nke nwere akwụkwọ akaebe nke ya. E debere usoro niile dị n'elu, ya na isi mmalite na-akwado ihe ọ bụla dị na ya, dị ka usoro oge nke ndị nyere aka nwere njikọ isi mmalite.

Eserese: otu ngwakọta isii ahụ, e sere iji gosi ihe dị n'efere na ihe sitere na ya pụta. Gburugburụ ndị ahụ na-egosi agba ndị e ji mee ya; igbe dị n'okpuru ha na-egosi ụcha agba ndị ahụ pụrụ imepụta n'oyi akwa ọbara. Ọ dịghị nke dị tupu 1890 nwere igbe uhie-odo odo, ọ dịghịkwa nke dị mgbe ya gachara nke na-enweghị otu.

Nwoke ji ebumnuche jiri borax

Ernst Malachowski bụ dọkịta nọ na Breslau, nke bụ Wrocław ugbu a. Ọ rụrụ ọrụ ndụ ya n'ụlọ ọgwụ onwe ya na n'obere ụlọ ọgwụ ya na otu onye ọrụ ibe ya na-elekọta, na-arụkwa ọrụ ụlọ nyocha n'oge nke ya. A mụrụ ya na Strzelno na 12 Machị 1857, ọ gụrụ ọgwụ na Mahadum Breslau, ma site na 1882 ruo 1887, ọ rụrụ ọrụ dịka onye enyemaka n'ịgwọ ọrịa ime ahụ na All Saints Hospital, nke bụ ụlọ ọgwụ nke abụọ kacha ibu na Germany n'oge ahụ.

Ọ malitere na 1888 site n'iji agba abụọ nke Chęciński na Plehn. N'ihe e doziri na 1889, ọ hụrụ na kromatin dị na nukliọs plasmodium na-acha iche na saịtịọplasm, ma mesịa chọpụta na ọ pụghị imepụtaghachi ya. Ọ nwara ime ka methylene blue bụrụ acidic, nke mere ka ihe ka njọ. Ọ nwara iji borax mee ka ọ bụrụ alkaline, nke rụrụ ọrụ mgbe ọ bụla. Ọ gosipụtara usoro ahụ n'ihu ọha na 15 Juun 1890 ma bipụta nkọwa zuru ezu karị na Ọgọst 1891, nke gụnyere ntụziaka iji borax. O kwuru na ịte agba ahụ were awa iri abụọ na anọ nakwa na ọ dị mfe imepụtaghachi ihe ọ rụpụtara.

Awa iri abụọ na anọ bụ ogologo oge n'ụlọ nyocha a na-eji achọpụta ọrịa, akwụkwọ ya ekwughịkwa ọtụtụ ihe banyere ụcha odo odo-uhie nke nukliọs nje ndị ọzọ ahụ. N'agbanyeghị ihe kpatara ya, ọ dịghị onye malitere iji ebumnuche eme ka methylene blue bụrụ alkaline ruo mgbe Nocht mere ya ọzọ na 1898. Malachowski edeghị banyere ịte ọbara agba ọzọ.

Ihe mere e ji mara ntakịrị ihe banyere ya ruo n'oge na-adịbeghị anya metụtara ebe nchekwa akwụkwọ, ọ bụghị ihe omimi. Ọ fọrọ nke nta ka ọ bụrụ na ọ dịghị ihe gbasara ndụ ya fọdụrụ n'akwụkwọ ọgwụ, ihe fọdụrụ bịakwara naanị site n'otu ụzọ. Ada ya Marie hapụrụ Germany gaa London na 1939, rụọ ọrụ n'Ụsụụ Ndị Agha Britain, ma biri na Canada. Nchịkọta akwụkwọ ezinụlọ ya mechara ruo Leo Baeck Institute na New York. E gburu nwanne ya nwoke Leo n'Agha Ụwa Mbụ. A chụpụrụ nwanne ya nwanyị Eva site na Breslau gaa n'ogige nkwụsị Izbica na Eprel 1942, ọ laghachighịkwa ọzọ. Nne ya Hedwig gburu onwe ya na 22 Eprel 1942 kama ichere ka a chụpụkwa ya otu ahụ. Malachowski anwụọla na 1934, tupu ihe ndị ahụ niile emee.

Akụkọ ezinụlọ nke kwụsịrị otu ahụ bụ akụkọ ezinụlọ ndị mmadụ na-akwụsị ihota. A chịkọtara akwụkwọ abụọ ahụ nke weghachiri Malachowski n'akụkọ mmepe agba ahụ, nke e bipụtara na 2011, site n'akwụkwọ ndị e chekwara na Poznań na Wrocław nakwa n'akwụkwọ Marie dị na New York.

Karama bu ebu na onye Russia nwere chi ọma

Dmitri Romanowsky gụrụ ọgwụ na Military Medical Academy dị na St Petersburg ma rụọ ọrụ banyere ịba n'ọtụtụ oge ọrụ ndụ ya. Na 1890, ọ bipụtara usoro nke, dịka e dere ya n'akwụkwọ, fọrọ nke nta ka ọ bụrụ otu ihe na nke Chęciński: methylene blue a na-agbanwebeghị na eosin, ya na eosin ntakịrị karịa.

Na Septemba 1891, ọ bipụtara usoro mere ka a mara aha ya, nkọwa dị mkpa nọkwa n'ime ntụziaka ahụ ebe a na-agaghị achọpụta ya ngwa ngwa. Ihe kacha mma ọ rụpụtara sitere na ngwọta methylene dị na nchekwa, ngwọta methylene blue e debere nke nọrọla ihe karịrị ọnwa abụọ ebe ebu na-eto n'elu ya. Ebu ahụ na oge ọ nọrọ mere ka a wepụ ụfọdụ otu methyl n'agba ahụ. Romanowsky amaghị nke ahụ, ọ pụghịkwa ịchịkwa ya, ndị ọrụ ndị ọzọ nwara usoro ya enweghịkwa ike inweta ụcha odo odo. O tinyela akwụkwọ nyocha ya na St Petersburg na Juun 1891, ọ bụ ya mere akụkọ a na-anabatakarị ji ewere 1891 dịka afọ nchọpụta ahụ.

Malachowski gosipụtara nke ya na Juun 1890, ihe karịrị otu afọ tupu nke ahụ, usoro ya rụkwara ọrụ n'ebumnuche.

Ihe mere e ji were aha onye na-ekwesịghị ya kpọọ ya

Kristine Krafts, Ernst Hempelmann na Barbara Oleksyn chịkọtara ihe akaebe na-akwado Malachowski, ọ dabere n'ihe anọ. Ụbọchị ngosi n'ihu ọha, Juun 1890 megide Septemba 1891. Okwu e ji ebumnuche mee megide okwu ihe chi ọma wetara na mberede. Eziokwu ahụ bụ na Malachowski bipụtara usoro ya, borax na ihe niile, ebe nke Romanowsky dabere n'ihe na-agbanwe nke a na-achịkwaghị. Nakwa nchọpụta ahụ bụ na nkọwa nukliọs plasmodium, ya na ụcha odo odo mere ka a hụ ya, fọrọ nke nta ka ọ pụọ n'akwụkwọ nyocha ruo afọ asaa, n'ihi na ọ dịghị onye pụrụ imepụtaghachi ụdị a nwetara na mberede ahụ.

Ha kwuru nkwubi okwu ha n'enweghị ịtụgharị okwu. N'akwụkwọ akụkọ ndụ ahụ, ha kpọrọ ikenye otuto ahụ “ihe gbagọrọ eziokwu”, ha hotakwara Ralph Lillie, onye dere na 1978 na “ikekwe anyị kwesịrị ịkpọ ezinụlọ agba ndị a agba Malachowski”.

A na-arụ ụka banyere ihe ha kwuru, dịka a na-emekarị maka onye mbụ mere nchọpụta, ọ dịkwa mkpa ịkọwa ụdị esemokwu ahụ kama ikpebi ya. Arụmụka banyere onye mbụ mere nchọpụta ga-ekwurịrị ihe nchọpụta ahụ bụ. Ọ bụrụ na nchọpụta ahụ bụ ụcha odo odo, Malachowski nwere ngosi mbụ nke e nwere akwụkwọ akaebe ya. Ọ bụrụ na nchọpụta ahụ bụ usoro e bipụtara, ụmụ nwoke abụọ ahụ bipụtara nke ha na 1891, e werekwa aha Romanowsky kpọọ ya. Ọ bụrụ na nchọpụta ahụ bụ nkọwa ihe kpatara ya, ọ dịghị nke ọ bụla n'ime ha nwere ihe ọ ga-adabere na ya, n'ihi na ọ dịghị onye n'ime ha maara na ime ka agba chara bụ iwepụ otu methyl, ọ dịghịkwa onye n'ime ha pụrụ ikwu ihe mere ụcha ahụ ji pụta ma ọlị. Isi ikpeazụ ahụ bụ nke akụkọ ndị a na-akọkarị na-awụpụ. Ihe na-arụ ọrụ bụ adịghị ọcha nke ọ dịghị onye chọpụtarala, onye mbụ ji ebumnuche mepụta ụcha ahụ mekwara ya site n'usoro nnwale a pụrụ imegharị, ọ bụghị site n'ịghọta ihe usoro ahụ mere.

Akwụkwọ abụọ nke 2011 ahụ bụ nkọwa e bipụtara nke kacha zuo ezu banyere ihe akaebe na-akwado Malachowski, ha abụọ dịkwa na PubMed ka a gụọ n'efu: ntụle ogologo ahụ na PMID 21235291 na akwụkwọ akụkọ ndụ ahụ na PMID 21660627. Ihe ndekọ PubMed maka ntụle ahụ depụtakwara okwu mmadụ kwuru banyere ya, nke e bipụtara n'otu akwụkwọ akụkọ nyocha ahụ ka afọ ahụ na-aga na 86(5):366. Nke ahụ bụ ihe kwesịrị ekwesị na-echetara anyị na a malitere ịrụ ụka banyere nkwupụta ahụ n'akwụkwọ ozugbo ọ pụtara.

Ihe esemokwu ahụ na-abụghị bụ enweghị nkwekọrịta banyere kemịkal. Ndị niile metụtara ya kwetara n'ihe ụcha odo odo ahụ bụ na ihe ndị na-emepụta ya. Enweghị nkwekọrịta ahụ bụ banyere onye rutere na ya mbụ, nakwa ma ihe mere na mberede nke ọ dịghị onye pụrụ imegharị ọ ga-abụ ihe a ga-ewere dịka iru na ya ma ọlị.

Ihe aha ndị sochiri wetara

Ọ bụrụ na Malachowski mepụtara ụcha odo odo mbụ, gịnị mere agba ahụ ji buru aha Romanowsky, Wright na Giemsa?

N'ihi na agba nke na-arụ ọrụ otu ugboro n'aka onye chepụtara ya abụghị ihe a pụrụ ịdabere na ya maka nyocha. Ọrụ ndị sochiri gbanwere ngwakọta na-arụ ọrụ mgbe ọ chọrọ ka ọ bụrụ ihe onye ọrụ ụlọ nyocha nọ n'obodo ọzọ pụrụ iji rụọ ọrụ n'ụbọchị Tuzdee.

Nocht ruru ebe ahụ site n'ịtụgharị uche. Mgbe ọ na-enwetaghị ihe a pụrụ ịdabere na ya site n'agba dị mfe na-anọpụ iche, o kwubiri na ụcha odo odo ga-esiterịrị n'ihe dị na methylene blue nke na-abụghị methylene blue, wee malite ịchọ ya. Unna achọpụtalarị na ngwọta methylene blue ndị merela agadi na-eme ka ụmụ irighiri ihe dị n'ime mkpụrụ ndụ mast na-acha uhie, o wee tụọ aro na ihe ọhụrụ na-apụta ka agba ahụ na-acha. Bernthsen egosila na 1885 na ọnọdụ alkaline na-ewepụ otu methyl na methylene blue, nakwa na ihe ndị si na ya pụta bụ ihe anyị na-akpọ azure ugbu a. Nocht ji chloroform wepụta akụkụ na-arụ ọrụ ma nwee ike ịkpọ ya naanị Uhie sitere na methylene blue, uhie sitere na methylene blue; Michaelis kpọrọ ya azure I na 1901. Jenner doziri nsogbu ịkwadebe na iji ya. Ịgbazekwa ihe methylene blue na eosin dapụtara n'ime methanol na-enweghị mmiri nyere otu ngwọta kwụsiri ike nke na-eme ka oyi akwa ahụ rapara mgbe ọ na-ete ya agba, nke kwụsịrị iji okpomọkụ eme ka ọ rapara. Leishman na Reuter jikọtara agba a gbanwere ka ọ na-enye ọtụtụ ụcha na ihe mgbaze alcohol, wee nweta nkwụsi ike na ụcha odo odo ọnụ. Wright dochiri idobe ya awa iri na abụọ na 65 °C na ịhapụ ya ka ọ nọrọ ụbọchị iri site n'itinye ya otu awa n'uzuoku na-asọ. Giemsa kwụsịrị ịdabere kpamkpam n'ngwọta chara n'enweghị njikwa; o jiri ọnụọgụ a tụrụ nke ọma nke agba ndị a maara, tinyere glycerol n'ime methanol ka ngwaahịa ahụ nwee ike iguzogide okpomọkụ mpaghara ụwa na-ekpo ọkụ. Ọ dịghị mgbe o bipụtara otú o si mepụta methylene azure dị ọcha. O rere ya n'ụlọ nyocha Dr Grübler dị na Leipzig, nke rere ya dịka azure I ma kwuo na naanị ụdị nke ya bụ ezigbo agba Giemsa.

A ka na-arụ ụka banyere ihe azure ahụ bụ kpọmkwem. Ụfọdụ kwenyere na ọ bụ naanị methylene blue a gbanwere ka ọ na-enye ọtụtụ ụcha; ndị ọzọ kwenyere na o nwere azure B buru ibu. Azịza ahụ sitere n'agha. Mgbe a na-enweghịzi ike inweta agba ndị Germany, otu ndị United States Public Health Service, Ralph Lillie na Maurice Roe na Aimee Wilcox, chọpụtara na ịte agba kacha mma sitere n'ihe atọ e kewapụrụ: methylene blue a na-agbanwebeghị, azure B nke sitere na mmebi ya mgbe e wepụsịrị otu methyl, na eosin. Azure B nọchiri azure I a na-enweghị ike inweta, ihe atọ ahụ ka bụkwa ntọala agba e ji achọpụta ịba taa.

Kemịkal nke otú ihe atọ ahụ si emekọrịta n'elu enyo nyocha bụ ajụjụ ọzọ na ibe ọzọ. Ibe ọrụ agba na kemịkal nke agba ụdị Romanowsky na-akọwa ihe azure B na eosin nke ọ bụla na-eme na ihe mere ha abụọ ọnụ ji emepụta ụcha nke ọ dịghị nke ọ bụla na-emepụta naanị ya. Ihe ibe iji mikroskopu na ọrụ ụlọ nyocha na-akọwa bụ akụkụ ọrụ: ihe otu ihe e doziri na-egosi, na otú a ga-esi kpebie ma otu ngwaahịa ọ dabara n'usoro ị chọrọ iji.

Akụkụ akụkọ ahụ nke ka dị ugbu a

Otu nkọwa dị n'akụkọ a akwụsịghị ịbụ eziokwu na 1902. Ruo ihe dị ka afọ iri ise, ihe kacha mkpa mejupụtara agba a na-eji achọpụta ịba nke ụwa niile nabatara bụ adịghị ọcha a na-akpọghị aha. Ọ nọ ebe ahụ na mberede, ọnụọgụ ya na-agbanwe site n'otu karama ruo na nke ọzọ, ihe ọ bụ bụ ihe nzuzo azụmahịa ruo akụkụ ụfọdụ nke oge ahụ, a na-arụkwa ụka banyere oke ya ruo n'afọ ndị 1940. Ndị na-eji agba ahụ arụ ọrụ abụghị ndị na-akpachapụghị anya. Ha enweghị ụzọ ha ga-esi mara ihe dị n'ime karama ahụ.

Ụdị nsogbu ahụ nke oge a bụ nkọwapụta nke na-akọwa naanị akụkụ nke ihe ahụ. Imezu ihe USP chọrọ bụ ụzọ isi nweta ịdị ọcha kachasị elu ahịa na-enye, n'ihi na ọ bụ ụkpụrụ zuru ezu e bipụtara, ọ bụghị naanị otu ihe a tụrụ: njirimara, ịdị ọcha, adịghị ọcha nke ogige organic gụnyere agba azure, ihe mgbaze fọdụrụ, adịghị ọcha sitere n'ihe ndị bụ isi, ihe fọdụrụ mgbe a gbachara ya ọkụ, ókè a nabatara nke ụmụ nje na endotoxin bakteria. Blupreme na-enweta methylene blue ya n'aka onye na-emepụta ọgwụ ma bipụta asambodo nyocha zuru ezu, ka e nwee ike inyocha ahịrị ọ bụla dị n'ndepụta ahụ kama naanị ikwu na e mezuru ya. Asambodo na-akọ nsonaazụ nyocha ọla dị arọ ma kpọọ ya imezu ihe USP chọrọ bụ ihe kwekọrọ n'oge a na karama a kpọrọ “methylene blue chara”: o nwere ike ịbụ ezigbo ihe e ji nyocha, ma akara ahụ anaghị agwa gị ihe dị n'ime ya.