Methylene blue n’ule G6PD nke ụlọ nyocha: ihe ihe agba ahụ na-eme n’ezie

Otu nwa akwụkwọ na-ele tube abụọ mgbe e debere ha n’ọnọdụ ọkụ kwesịrị ekwesị. Otu agbanweela gaa n’agba a tụrụ anya ya. Nke ọzọ agbanwebeghị. Nwa akwụkwọ ahụ kwubiri na onye ọrịa nke abụọ nwere ụkọ glucose-6-phosphate dehydrogenase. Mkpebi ahụ nwere ike ịbụ eziokwu, ma echiche e ji ruo na ya gafere isi ihe na-eme ka ule ahụ rụọ ọrụ. Ọ dịghị ihe dị na tube ahụ na-atụ ensaim ahụ ozugbo. Tube ahụ na-atụ ihe ensaim ahụ na-emepụta, na-eji methylene blue dị ka onye etiti.

Ozugbo a ghọtara ụzọ a na-apụtachaghị ìhè, usoro ule, ihe nlele njikwa, na ogologo ndepụta nsonaazụ na-eduhie eduhie anaghịzi adị ka ihe e mere n’enweghị ihe kpatara ya.

Azịza dị mkpirikpi

Methylene blue n’ule G6PD bụ ihe na-egosi redox. Ensaim G6PD na-emepụta NADPH, usoro ndị dabere na NADPH na-ebelatakwa methylene blue na-acha anụnụ anụnụ gaa n’ụdị leuco ya na-enweghị agba (ma ọ bụ na-eji ya ebufe eletrọn). Ọrụ ensaim dị mma na-eme ka mbelata a gaa nke ọma. Ọrụ ensaim dị ụkọ na-eme ka mbelata ahụ jiri nwayọọ gaa ma ọ bụ ghara izu ezu. Nke ahụ bụ ihe mgbaàmà ule ahụ dum dabere na ya.

Usoro ule abụọ e ji mee ihe n’oge gara aga na-eji otu ihe agba ahụ, ma ihe a na-ele anya na njedebe ha dị iche. Ọ bụrụ na ị kewapụ ha, ọtụtụ mgbagwoju anya ga-apụ.

Ule abụọ, otu ihe agba, ihe njedebe dị iche

Nke mbụ bụ ule mbelata methylene blue ozugbo, nke Sass na ndị ọrụ ibe ya kọwara, Gibbs nyochakwara ya mgbe e mesịrị. N’ebe a, ihe njedebe bụ ihe agba ahụ n’onwe ya: a na-ebelata methylene blue nke oxidation mere ka ọ na-acha anụnụ anụnụ gaa na leucomethylene blue na-enweghị agba, ọsọ mgbanwe ahụ na-egosikwa ikike ịmepụta NADPH. E depụtara akwụkwọ mbụ banyere ule nzacha a na PubMed n’okpuru Sass na ndị ọzọ (1966).

Nke abụọ bụ ule mbelata methemoglobin nke Brewer. Sodium nitrite na-ebu ụzọ mee oxidation nke hemoglobin ka ọ ghọọ methemoglobin na-acha aja aja. Methylene blue na-arụzi ọrụ dị ka onye etiti n’ịnyefe eletrọn: methylene blue e belatara na-enyefe methemoglobin ihe ndị nwere ikike mbelata, na-eme ka ọ laghachi bụrụ hemoglobin na-acha uhie uhie. Ya mere, ihe njedebe a na-ahụ anya bụ agba aja aja ma e jiri ya tụnyere agba uhie uhie, ọ bụghị agba anụnụ anụnụ ma e jiri ya tụnyere enweghị agba. Usoro mbụ ahụ pụtara na Bulletin of the World Health Organization (Brewer na ndị ọzọ, 1960).

Ịkpọ ule Brewer ule iwepụ agba nke ihe agba ezughị oke n’ihe gbasara kemịstrị. Ihe agba ahụ na-agagharị n’etiti ọnọdụ ya dị iche iche; ọ bụ hemoglobin na-agbanwe agba. Eserese dị n’okpuru na-egosi ụzọ abụọ ahụ.

Mmeghachi omume dị n’okpuru ya

G6PD na-akwalite nzọụkwụ oxidation mbụ n’ụzọ pentose phosphate:

Glucose-6-phosphate + NADP+ becomes 6-phosphogluconolactone + NADPH + H+

Mkpụrụ ndụ ọbara uhie tozuru etozu na-adabere nke ukwuu n’ụzọ a iji nweta NADPH, dịka e nyochara na Blood site n’aka Luzzatto na ndị ọrụ ibe ya (2020). NADPH na-edobe glutathione n’ọnọdụ mbelata ma na-echebe mkpụrụ ndụ pụọ na mmebi oxidation. Methylene blue na-esonye n’usoro a dị ka ihe na-anabata eletrọn. G6PD zuru ezu na-enye NADPH zuru ezu, nke na-eme ka mbelata gaa nke ọma. G6PD dị ala na-agbaji usoro ahụ na njikọ mbụ ya.

Were ihe agba ahụ dị ka ihe nlele mmanụ ụgbọala, ọ bụghị injin. Ọ na-egosi ole NADPH dị. Ihe ọ bụla ọzọ na-agbanwe ọnụọgụ NADPH ahụ, ma ọ bụ otú e si agụ nsonaazụ, nwere ike ịgbanwe ihe nlele ahụ n’enweghị mgbanwe ọ bụla na jin.

Otú e si eme usoro ụdị Brewer

Ngwakọta ihe ndị e ji eme mmeghachi omume agbanweela kemgbe ọtụtụ iri afọ, ya mere, a gaghị ewere nkọwa e nyere maka nkuzi dị ka usoro ule maka ndị ọrịa. Ụlọ nyocha ọ bụla na-agbaso usoro ọrụ ọkọlọtọ nke ya nke a nwalere ma kwado. N’iburu ịdọ aka ná ntị ahụ n’uche, nhazi tube oge ochie na-arụ ọrụ dị ka ndị a, n’ụdị e dekọrọ na-eji tube atọ ma na-edebe ha n’ọnọdụ ọkụ kwesịrị ekwesị ruo awa 3 na usoro a e bipụtara:

1. Tube onye ọrịa: ọbara zuru ezu tinyere glucose, sodium nitrite, na methylene blue. Nitrite na-emepụta methemoglobin, glucose na-enye usoro mgbanwe nri nke mkpụrụ ndụ ọbara uhie ihe ọ chọrọ, ihe agba ahụ na-enyekwa ụzọ mbufe eletrọn nke dabere na NADPH.
2. Ihe nlele njikwa oxidation: ọbara tinyere nitrite na glucose ma na-enweghị methylene blue. Ọ na-egosi agba aja aja nke methemoglobin na njedebe, nke bụ ụdị nsonaazụ ụkọ.
3. Ihe nlele njikwa hemoglobin: ọbara tinyere mmiri. Ọ na-egosi agba uhie uhie nke hemoglobin na njedebe, nke bụ ụdị nsonaazụ nkịtị.
4. Debe n’ọnọdụ ọkụ kwesịrị ekwesị tube niile na okpomọkụ dị nso na 37 C, na-abụkarị ruo awa 3, na-agwakọta ha nwayọọ.
5. Tinye mmiri ka ọ dị nro site n’itinye obere akụkụ a tụrụ atụ nke ihe dị na tube ọ bụla n’ime mmiri e mere distillation, iji gbawaa mkpụrụ ndụ ma mee ka ntụnyere agba doo anya.
6. Tụnyere tube onye ọrịa na ihe nlele njikwa abụọ ahụ. Ịlaghachi n’agba uhie uhie na-egosi ikike mbelata dị ukwuu. Ịnọgide na agba aja aja na-atụ aro ụkọ dị ukwuu.

Otu ngwakọta e ji mee ihe n’oge gara aga ji ihe dị ka 1 mL ọbara na ihe ndị e ji eme mmeghachi omume nwere ihe dị nso na 180 mM sodium nitrite, 280 mM dextrose, na 0.4 mM methylene blue. Were ọnụọgụ ndị ahụ dị ka ihe atụ sitere n’akwụkwọ nyocha, ọ bụghị ụkpụrụ a ga-eji n’ebe niile.

Ịgụ nsonaazụ

Ule nzacha na-enye nkọwa na-enweghị ọnụọgụ na-akacha akpa iche mgbe ọrụ ensaim dị ihe dị ka pasent 30 ruo 40 nke ọrụ nkịtị, dịka a tụlere na nyocha Malaria Journal a banyere oghere dị n’ịchọpụta G6PD. Ya mere, nsonaazụ ule nzacha nkịtị pụtara na ule ahụ achọpụtaghị ụkọ siri ike. Ọ naghị egosi na ọrụ ensaim ahụ bụ nke nkịtị kpamkpam.

Ihe mere ule nzacha ji eduhie

Mmụba reticulocyte mgbe mkpụrụ ndụ ọbara uhie gbasasịrị bụ ihe a maara nke ọma na-enye nsonaazụ nkịtị ụgha. Mkpụrụ ndụ ọbara uhie ọhụrụ na reticulocyte nwere G6PD karịa mkpụrụ ndụ ochie. N’oge mgbasasị ọbara uhie mberede, mkpụrụ ndụ ndị kacha ochie ma nwee ụkọ kachasị nwere ike ịbụ na e bibiela ha, nke na-ahapụ ọtụtụ mkpụrụ ndụ ọhụrụ ndị ọrụ ha na-apụta dị ka nke nkịtị n’ule. Otu ihe gbasara ndụ a na-eduhiekwa ule ọnụọgụ, ọ bụghị naanị ule nzacha ihe agba.

Ịnata ọbara n’oge na-adịbeghị anya na-ekpuchi ụkọ n’ihi na mkpụrụ ndụ ọbara uhie nke onye nyere ọbara na-etinye ensaim nke ha n’ihe nlele. Mayo Clinic Laboratories depụtara ịnata ọbara n’etiti ihe ndị na-eme ka nsonaazụ ensaim ghara ịbụ nke a pụrụ ịtụkwasị obi, yana mmụba reticulocyte na nnyonye anya mkpụrụ ndụ ọbara ọcha.

Ụmụ nwanyị heterozygous bụ ndị kacha sie ike ịkọwa. Ịkwụsị ọrụ kromosom X n’enweghị usoro a kara aka na-emepụta ngwakọta mkpụrụ ndụ ọbara uhie nkịtị na ndị nwere ụkọ, ọrụ ensaim niile jikọtara ọnụ nwekwara ike ịdị ebe ọ bụla site n’ụkọ siri ike ruo n’ihe yiri ọrụ nkịtị. Ule nzacha na-enweghị ọnụọgụ anaghị achọpụta phenotype ndị dị n’etiti mgbe niile. Akwụkwọ WHO gbasara ule G6PD na-atụle ihe mgbochi a nke ọma.

Ogologo oge ihe nlele nọ, okpomọkụ e ji chekwaa ya, ọdịiche n’otú ndị mmadụ si ekpebi agba njedebe, hematocrit, na ịdị mma ihe ndị e ji eme mmeghachi omume na-agbakwunye nnyonye anya n’ule n’elu mmetụta ndị a metụtara ndụ.

Ule nzacha abụghị nchọpụta ọrịa

Nsonaazụ ule nzacha nke na-egosi ụkọ, nke dị n’etiti, ma ọ bụ nke na-ekwekọghị n’ọnọdụ onye ọrịa chọrọ ule ọnụọgụ ensaim G6PD. WHO na-ewere quantitative spectrophotometry nke a na-achịkwa okpomọkụ ya dị ka usoro ntụaka. N’ule ahụ, a na-etinye glucose-6-phosphate na NADP+ n’ihe nlele e mere site n’ịgbawa mkpụrụ ndụ ọbara uhie, a na-esokwa NADPH a na-emepụta site n’ịrị elu nnabata ìhè na 340 nm. Ọsọ mgbanwe ahụ kwekọrọ n’ọrụ ensaim, a na-akọkarị ya n’ihe metụtara hemoglobin dị ka nkeji ọrụ n’otu gram. E chịkọtara usoro a na-eji ugbu a n’ụlọ nyocha ndị ọrịa na ndekọ katalọgụ ule Mayo maka ọrụ G6PD.

Ịkọwa nsonaazụ na-eji oke ntụaka ụlọ nyocha nwalere ma kwado, nke a na-egosikarị n’ihe metụtara ọrụ nkịtị n’etiti ndị mmadụ. A na-atụlekarị ụkọ nso n’oke pasent 30, na ọrụ dị n’etiti n’elu oke ahụ. Nkọwa njirimara ngwaahịa WHO chọrọ maka ule G6PD (2022) kọwara usoro nchọpụta ahụ. Ọ bụrụ na mgbasasị ọbara uhie ma ọ bụ ịnata ọbara n’oge na-adịbeghị anya na-eme ka ịmata phenotype ghara ịbụ nke a pụrụ ịtụkwasị obi, a na-emeghachi ule mgbe ngwakọta mkpụrụ ndụ ọbara uhie laghachiri n’ọnọdụ nguzozi. Ule molekụla nwere ike ịgbakwunye ozi ma ọ naghị edochi ịtụ ensaim.

Oke kwesịrị idobe

Methylene blue n’ule ndị a bụ ihe mmeghachi omume ụlọ nyocha e ji arụ ọrụ n’èzí ahụ (ex vivo). Nke a bụ okwu dị iche na nchekwa inye onye ọrịa methylene blue, nke a kọwara na ntụziaka gbasara ọnọdụ ndị a na-ekwesịghị iji methylene blue. Kemịstrị nke ndụ na-ejikọta ha, n’ihi na ọgwụ ahụ na-adaberekwa na mbelata nke NADPH na-akwado, ma ihe agba dị na tube ule abụghị ọnụọgụ ọgwụ dị n’ọbara. Maka nkọwa otú ihe agba ahụ si arụ ọrụ dị ka ihe e ji agba ihe n’ọnọdụ ọzọ, lee ụkpụrụ iji methylene blue agba ihe, yana ihe gbasara ihe agba redox n’ụlọ nyocha maka ezinụlọ kemịstrị ọ nọ na ya.

Ule nzacha na-ajụ ma ikike mbelata ọ dị ka ọ ka zuru ezu. Ule nkwenye na-ajụ ole ensaim dị n’ezie. Ihe agba ahụ na-aza ajụjụ mbụ nke ọma, ma ọ bụrụ na ọ dịghị onye na-arịọ ya ka ọ zaa nke abụọ.