Iwulite eserese mmezi nha methylene anụnụ anụnụ: ihe atụ efu, oke nha, na ịdị n'ahịrị kwụ ọtọ

Ndị nyocha abụọ na-eji otu karama ihe ngwọta ntọala methylene anụnụ anụnụ, onye ọ bụla ewulitekwa eserese mmezi nha. Onye nke mbụ na-enweta ahịrị kwụ ọtọ nke na-agafe ebe efu, ma jiri ntụkwasị obi tụọ ihe atụ ndị a na-amaghị ịta ha. Onye nke abụọ na-enweta ahịrị nke na-ehulata n'elu, ebe ahịrị na-egbutu aksis nke na-adịghị abịaru efu, na nsonaazụ ihe atụ nke na-agbanwe mgbe a na-atụgharị ha mmiri. Otu ihe e ji esiji ákwà, otu ngwa, otu ogologo ebili mmiri. Ọdịiche ahụ abụghị nka. Ọ bụ nhazi: ihe ndị e tinyere n'ihe atụ efu, ịta ndị a họọrọ, na ma oke nha a nyochara nọgidere n'ime mpaghara ebe otu ụdị nkọwa dị mfe ka na-arụ ọrụ.

Eserese mmezi nha bụ nkwekọrịta n'etiti nzaghachi ngwa na ịta, nke na-arụ ọrụ naanị n'okpuru ọnọdụ e ji wulite ya. Maka methylene anụnụ anụnụ, nkwekọrịta ahụ nwere ebe adịghị ike a maara. Molekul ihe e ji esiji ákwà a na-ejikọta onwe ha n'ime mmiri, ya mere ụdị ihe na-anabata ìhè na-agbanwe ka ịta na-agbanwe. Eserese e wuru gafee mgbanwe ahụ agaghị adị n'ahịrị kwụ ọtọ, ọ dịghịkwa ọnụọgụgụ nyocha mgbakọ ga-edozi ya. Isiokwu a na-egosi otu e si hazie eserese ka ahịrị ahụ nwee ihe ọ pụtara: họrọ ihe atụ efu kwesịrị ekwesị, debe oke nha n'ime mpaghara monoma, mee nha ndị e mereghachiri n'eziokwu, ma were ịhulata ahịrị dịka ozi kama mkpọtụ nha.

Malite n'ihe atụ efu, ọ bụghị n'ihe atụ ọkọlọtọ

Ihe atụ efu na-akọwa efu, maka methylene anụnụ anụnụkwa, ọ ga-enwerịrị ihe niile ma e wezụga ihe e ji esiji ákwà ahụ. Otu ọkwa ịdị mma mmiri, otu ihe nchekwa pH na pH, otu nnu, otu oke ihe mgbaze agbakwunyere, otu okpomọkụ. Kwadebe ihe atụ mmezi nha n'otu ngwakọta ntọala ahụ. Ihe kpatara ya metụtara kemịstrị, ọ bụghị usoro nchịkwa. Nnu na ihe mgbaze na-agbanwe nguzozi dị n'etiti monoma, daịma, na ìgwè molekul ndị ka ukwuu, nke na-agbanwe ụdịdị nnabata ìhè n'ogologo ebili mmiri e ji atụ nha. Ihe atụ efu nwere naanị mmiri enweghị ike idozi mgbanwe ụdị kemịkal nke ngwakọta ntọala kpatara. Nnyocha jikọtara ụdịdị nnabata ìhè methylene anụnụ anụnụ n'ime mmiri, nke dị site na ndekọ ya a na-enweta n'efu, gbanwere sodium chloride site na 0 ruo 0.15 M kpọmkwem n'ihi na ike ayọn na-agbanwe nguzozi ahụ, njikọ molekul na-abawanyekwa ka nnu na-abawanye.

Otu ihe nke a pụtara n'ọrụ: emela mmezi nha n'ime mmiri e wepụrụ ayọn ya wee tụọ ihe atụ dị n'ime ihe nchekwa pH fosfet ma ọ bụ mmiri mkpofu a yọchara. Mgbe ngwakọta ntọala na-enweghị ihe a na-atụ adịghị, ịgbakwunye ihe ọkọlọtọ n'ime ihe atụ ahụ n'onwe ya ka mma karịa iji eserese mpụga nke ngwakọta ya na-adabaghị. Ntuziaka metụtara ime ka nyocha n'ime mmiri bụrụ nke a pụrụ ịtụkwasị obi dị na nkọwa ngwakọta ntọala na ihe ndabichi, ụkpụrụ izugbe nke nyocha ọnụọgụ ihe e ji esiji ákwà dịkwa na nkọwa nhazi nyocha.

Họrọ oke nha ebe otu ụdị kemịkal kacha dị

Ịtụ ọnụọgụ na mpaghara ogologo ebili mmiri dị nso na 664 nm na-ewere na ihe ka ukwuu n'ihe e ji esiji ákwà bụ monoma. N'ime mmiri nkịtị, echiche ahụ na-arụ ọrụ naanị mgbe ihe ngwọta dị gịrịgịrị, ihe dị ka mpaghara micromolar dị ala. Mkpọda ndị e nwetara site na nha ma bipụta na-egosi oke a: mmezi nha ndị e debere n'okpuru ihe dị ka 7 micromolar n'ime sel 1 cm na-enye mkpọda dị nso na 82,000 M-1 cm-1, ebe mmezi nha a gbasapụrụ ruo ihe dị ka 37 micromolar na-ada ruo ihe dị ka 67,100 n'ihi na ihe atụ ọkọlọtọ ndị dị elu enweelarị daịma a na-apụghị ileghara anya. Ọnụọgụ nkọwa ọ bụla e depụtara ebe a nwere akara ọnọdụ e ji nweta ya na akwụkwọ ntụaka ụdịdị nnabata ìhè methylene anụnụ anụnụ, nke bụ ebe kwesịrị ekwesị iji tụnyere ọnụọgụ; isiokwu a na-eji ha naanị akọwa oke nha.

Iwu nhazi ndị a na-esite na nke ahụ ozugbo:

1. Debe ihe atụ ọkọlọtọ kachasị elu ka ọ dị gịrịgịrị nke ọma ka ọdịdị ụdịdị nnabata ìhè kwụsie ike. Mgbe a na-emepụta usoro ahụ, nyochaa mpaghara ìhè a na-ahụ anya niile (ihe dị ka 550 ruo 750 nm) maka ọkwa ọ bụla kama ịgụ naanị otu ogologo ebili mmiri. Ọ bụrụ na ụdịdị nnabata ìhè ndị e haziri ka ha nwee otu ntọala na-agbanwe ọdịdị ka ịta na-agbanwe, kemịstrị na-agbanwe, oke nha ahụ sara mbara karịa ka o kwesịrị.
2. Soro oke dị n'etiti ogo nnabata ìhè dị nso na 610 nm na ogo nnabata ìhè dị nso na 665 nm n'ọkwa niile. Oke na-arị elu ka ịta na-abawanye pụtara na ubé mpụta daịma n'ụdịdị nnabata ìhè na-eto, ụdị nkọwa monoma anaghịzi arụ ọrụ. A kọwara ụzọ nchọpụta a nke ọma na ntuziaka mmetụta njikọ molekul na ịta.
3. Jiri sel 1 cm maka ọrụ micromolar dị ala. Mgbe mkpọda dị nso na 82,000, 5 micromolar na-enye ogo nnabata ìhè dị nso na 0.41, 10 micromolar na-enyekwa ihe dị ka 0.82; ha abụọ dị mma maka ọtụtụ ngwa.
4. Maka ihe ngwọta ntọala dị ịta, belata ogologo ụzọ ìhè kama ịnakwere ogo nnabata ìhè karịrị 1 nke ukwuu, mana cheta na ụzọ dị mkpụmkpụ na-edozi nha ìhè, ọ bụghị kemịstrị. Njikọ molekul na-adabere n'ịta, ọ bụghị ogologo ụzọ ìhè, ya mere ihe ngwọta ntọala dị ịta ka chọrọ usoro nke ya nke na-echebara ụdị kemịkal dị na ya echiche kama eserese monoma dị gịrịgịrị.

Nhazi mgbakọ jikọtara data nke ọtụtụ ihe ndị a dabeere na ya kpuchiri ụdịdị nnabata ìhè 224 site na 1.1 micromolar ruo 3.4 millimolar, wee chọpụta na a pụrụ ịhụrịrị mgbama tetramer n'okpuru 34 micromolar. Nchọpụta ahụ na-egosi ihe kwesịrị ịkpachara anya: mpaghara ahịrị kwụ ọtọ dị warara karịa ihe echiche mbụ nwere ike ịtụ aro, ya mere nyochaa ya kama iche na ọ dị.

Ọkwa, nha ndị e mereghachiri, na usoro ịgụ

Eserese nwere isi atọ anaghị egosi ihe ọ bụla nke ọma. Ntuziaka nkwenye na ICH Q2(R2) na-arịọ opekata mpe ịta ise iji nyochaa ịdị n'ahịrị kwụ ọtọ, ọkwa isii ruo asatọ na-abụghị efu na-enyekwa eserese ọrụ a pụrụ ịtụkwasị obi karịa, karịchaa nso n'elu ebe njikọ molekul na-amalite. Kesaa ọkwa ka ha kpuchie oke nha a chọrọ maka ihe atụ, ma tinye ọtụtụ ọkwa nso ebe ịhulata ahịrị nwere ike ime, ọ bụghị n'usoro ọnụọgụ ji otu oke amụba nke a họọrọ naanị n'ihi ịdị mfe.

Tụọ ọkwa ọ bụla ugboro abụọ ma ọ bụ ugboro atọ, site n'ihe ngwọta a kwadebere iche iche kama ịgụ otu flask ugboro atọ. Nha ndị e kwadebere iche iche na-ekpughe njehie nkwadebe; ịgụ otu flask ugboro ugboro na-ekpughe naanị mkpọtụ ngwa. Nnyocha jikọtara data nke 2020 tụrụ ihe ngwọta ọ bụla ugboro atọ, nke ka bụ ezigbo usoro ndabere. Họrọ usoro ịgụ n'enweghị usoro a na-atụ anya ya ka mgbanwe nwayọọ nwayọọ, ịrapara n'elu iko, ma ọ bụ mgbanwe okpomọkụ ghara iyi ka ịhulata ahịrị. Nnyocha banyere cuvette quartz chọpụtara na ihe dị ka 3 pasent nke ihe e ji esiji ákwà dị n'ihe ngwọta 34 micromolar rapara n'elu ya n'ime nkeji 10, ya mere debe oge mmetụ, cuvette, nhicha, na usoro ịgụ ka ha bụrụ otu n'oge usoro nha niile.

Ihe atụ a gbakọrọ iji kọwaa usoro (ọ bụghị data a tụrụ)

A chepụtara ọnụọgụ ndị dị n'okpuru iji gosi mgbakọ ahụ. Ha abụghị nha ụlọ nyocha, e kwesịghịkwa ịkpọ ha data methylene anụnụ anụnụ. Ihe dị mkpa bụ usoro nyocha ndị gbara ha gburugburu.

Ka e were na e nwere ihe atụ ọkọlọtọ isii n'ime ihe nchekwa pH kwekọrọ, ụzọ ìhè 1 cm, nke a gụrụ na 665 nm site n'iji ihe atụ efu kwekọrọ tụnyere ha:

Ịhaziri nkezi ogo nnabata ìhè megide ịta n'ahịrị kwụ ọtọ na-enye mkpọda dị nso na nkeji ogo nnabata ìhè 0.0805 kwa micromolar na ebe ahịrị na-egbutu aksis nke dị n'ime nkeji mili ole na ole nke ogo nnabata ìhè site na efu. Ịkewa mkpọda ahụ site n'ogologo ụzọ ìhè na-agbanwe ya gaa na ọnụọgụ ikike nnabata ìhè a na-ahụ: 0.0805 kwa micromolar bụ ihe dị ka 80,500 M-1 cm-1, nke kwekọrọ na oke nha ebe monoma kacha dị n'ime mmiri. Nyocha ndị dị mkpa abụghị R e buliri n'ike abụọ, nke ga-adị ezigbo mma n'agbanyeghị ọnọdụ ahụ. Ha bụ ebe ahịrị na-egbutu aksis dị nso na efu, oke A610/A665 na-adịghị agbanwe site na S2 ruo S5, na ọdịiche fọdụrụ nke gbasasịrị n'enweghị usoro. Obere ịrị elu n'oke ahụ na S6 bụ mgbama eziokwu iji wepụ ọkwa ahụ ma ọ bụ kaa 7 micromolar dịka oke elu nwa oge nke ngwakọta ntọala na ngwa a jikọtara.

Ihe atụ a na-amaghị ịta ya nke a gụrụ dị ka 0.245 n'okpuru otu ọnọdụ ahụ na-agbanwe ozugbo: 0.245 e kere site na 0.0805 kwa micromolar na-enye ihe dị ka 3.0 micromolar, tupu e tinye ọnụọgụ mgbazi ọ bụla maka ntụgharị mmiri nke ihe atụ. Kọọ nsonaazụ ya na ọnọdụ e ji nweta ya: ogologo ebili mmiri, ụzọ ìhè, ngwakọta ntọala ihe atụ efu, oke nha mmezi, na ụbọchị.

Mpempe akwụkwọ ọrụ mmezi nha a pụrụ idejupụta

Detuo ndebiri a n'ime ndekọ ụlọ nyocha maka ngwakọta ntọala ọhụrụ ọ bụla. Otu ngwakọta ntọala, otu mpempe akwụkwọ, otu eserese.

Ahịrị ụdị kemịkal e ji arụ ọrụ kwesịrị ịdị ebe ahụ. Methylene anụnụ anụnụ a na-ere nwere ike ịbụ nnu na-enweghị mmiri n'ime kristal ma ọ bụ nke nwere mmiri, dịka trihydrate, molar mass na-ezighi ezikwa na-ebute njehie n'ịta ọ bụla e zubere n'enweghị ihe na-egosi ya ozugbo. A kọwara nyocha ịdị ọcha na nkọwapụta nke ihe mbido na ntuziaka ịdị mma na ọkwa.

Jiri ihe atụ ọkọlọtọ nyocha e kwadebere iche kwado ya

Eserese mmezi nha ekwesịghị iji onwe ya kpebie ma ọ ziri ezi. Mgbe ịhazichara ahịrị ahụ, kwadebe otu ihe atụ ọkọlọtọ nyocha site n'ihe ngwọta ntọala ọzọ nke a tụrụ ibu ya iche, n'ịta dị nso n'etiti oke nha a nabatara, ma gụọ ya dịka ihe atụ a na-amaghị ịta ya. Nkwekọrịta n'ime pasent ole na ole na-akwado usoro nkwadebe; ọ bụrụ na ọ dabaghị, nke ahụ na-egosi nsogbu n'ihe ngwọta ntọala ma ọ bụ ntụgharị mmiri kama n'ngwa. Tụọ ihe atụ ọkọlọtọ nyocha ahụ ọzọ na ìgwè ihe atụ ọ bụla. Ọ bụrụ na ọ na-agbanwe nwayọọ nwayọọ ebe eserese ahụ agbanwebeghị, buru ụzọ chee na nsogbu dị n'ihe ngwọta ọrụ ma ọ bụ cuvette tupu iche na ọ dị n'ihe atụ. Otu omume a na-achọpụta ọtụtụ njehie ndị na-anaghị egosi onwe ha: iji molar mass nke nnu nwere mmiri n'ime kristal maka karama nnu na-enweghị mmiri, micropipette nke mmezi nha ya ezighị ezi, ihe nchekwa pH a kwadebere n'ike ayọn na-ezighi ezi. Dekọọ pasent nke uru a tụrụ anya ya e nwetara na nyocha ahụ na mpempe akwụkwọ ọrụ n'akụkụ mkpọda, ka onye na-agụ ya n'ọdịnihu wee hụ na a nwalere ahịrị ahụ, ọ bụghị naanị na e sere ya.

Ịgụ ihe na-adịghị eso ahịrị kwụ ọtọ dịka ụzọ nchọpụta

Mgbe eserese na-ehulata, ọdịdị ọdịda ahụ na-egosi ihe kpatara ya. Ịhulata ala n'ogo nnabata ìhè dị elu mgbe ọdịdị ụdịdị nnabata ìhè agbanweghị na-egosi nsogbu n'ngwa, ọtụtụ mgbe ìhè na-awagharị nke na-eme ka nha nnabata ìhè siri ike dị ala karịa ka ọ bụ. Ịhulata nke ubé mpụta na-arị elu na 610 nm so na-egosi nsogbu kemịstrị: daịma na ìgwè molekul ndị ka ukwuu na-anabata ìhè n'ụzọ dị iche na monoma. Ihe atụ efu nke na-adịghị eru efu, ma ọ bụ ihe atụ ọkọlọtọ nke nha ha na-ada ka oge na-aga, na-egosi nsogbu n'akpa: ịrapara n'elu iko ma ọ bụ cuvette, karịchaa ma ọ bụrụ na oge mmetụ dị iche iche n'oge usoro nha. Ahịrị dị ọcha nke na-agafe isi ndị ahụ ma ka na-enye nsonaazụ ihe atụ na-ezighi ezi na-egosi nsogbu ngwakọta ntọala: ihe atụ dị iche na ihe atụ mmezi nha, ya mere wulite eserese ọzọ n'ngwakọta ntọala ihe atụ ma ọ bụ gbanwee gaa n'ịgbakwunye ihe ọkọlọtọ. See ọdịiche fọdụrụ megide ịta n'ọnọdụ ọ bụla. Mgbasa na-enweghị usoro na-akwado ụdị nkọwa ahịrị kwụ ọtọ; ọdịdị ihu na-amụmụ ọnụ ọchị ma ọ bụ na-agbarụ ihu na-ajụ ya n'ụzọ a pụrụ ịtụkwasị obi karịa oke R e buliri n'ike abụọ ọ bụla, nke bụ isi okwu ntuziaka nkwenye na-akwado n'ụzọ doro anya.

Ịkpachara anya otú a na-enye ezigbo nsonaazụ maka methylene anụnụ anụnụ. Mpaghara nnabata ìhè monoma ya siri ike, a kọwawo kemịstrị ya nke ọma, ụzọ ndị ọ pụrụ isi ghara ịrụ ọrụ na-egosikwa onwe ha n'ụdịdị nnabata ìhè tupu ha emebie ọnụọgụ. Wulite eserese n'oke nha dị warara, jiri ihe atụ efu ziri ezi, mee nha ndị e mereghachiri site na nkwadebe iche iche, ma kwe ka ọdịdị ụdịdị nnabata ìhè kpebie oke nha. Ahịrị a ga-enweta dị mkpụmkpụ, mana isi ọ bụla dị na ya bụ eziokwu.

Mgbakọ ihe atụ dị n'isiokwu a na-eji ọnụọgụ e chepụtara egosi usoro. Ọnụọgụ nkọwa ntụaka ndị a tụrụ, tinyere ọnọdụ ha niile, dị n'akwụkwọ ntụaka ụdịdị nnabata ìhè e jikọtara, e debakwara nnyocha njikọ molekul nke ọ dabeere na ya na PMID 33251415.