Metüleensinise sissetungimise katsed viaalidele ja ampullidele

Metüleensinise sissetungimise katsega uuritakse, kas väline värvainelahus saab kindlaksmääratud katsetingimustes suletud pakendisse tungida. Sinine värvaine ampulli või viaali sees võib osutada lekkeavale. Tuvastatava värvaine puudumine tähendab, et katse ei tuvastanud nendes tingimustes sissetungimist. See ei tõenda iseenesest toote steriilsust.

See eristus määrab, kuidas katse tuleks kavandada. Purunenud viaaliga on lihtne teha visuaalselt veenev demonstratsioon. Märksa rohkem tööd nõuab tõendamine, et meetod suudab usaldusväärselt tuvastada konkreetse toote seisukohast olulisi defekte.

Jälgige värvaine teekonda läbi pakendi

Tüüpilises sukelduskatses asetatakse suletud mahutid värvainevanni ja rakendatakse neile kindlaksmääratud rõhumuutuste jada. Välisrõhu vähendamine võib võimaldada gaasil lekkivast mahutist väljuda. Rõhu taastamine ajal, mil mahuti on endiselt vedelikku sukeldatud, võib suruda värvainelahuse sisse. Seejärel puhastatakse välispind ning sisu uuritakse visuaalselt või analüüsitakse märkaine tuvastamiseks.

Oluline on kogu teekond: katsetingimused peavad mõjutama lekkekohta, vedelik peab selle läbima ja piisav kogus värvainet peab jääma sees tuvastatavaks. Katse võib ebaõnnestuda mis tahes etapis. Toote või lõksu jäänud gaasiga blokeeritud väike kanal ei pruugi käituda samamoodi nagu sama nimiläbimõõduga avatud auk.

Kinnisulatatud klaasampulli puhul võib asjakohane defekt olla pragu või puudulik sulgemine. Korgiga suletud viaali puhul hõlmab süsteem ka klaasist sulgemisala, elastomeeri ja sulguri kinnitamise viisi. Läbitorgatud korgi isesulgumisvõime katsetamine käsitleb täiendavat kasutusaegset küsimust. Need on omavahel seotud pakendiprobleemid, kuid katseobjektidena ei ole need üksteisega asendatavad.

Kontsentratsioon on meetodi osa, mitte meetod ise

Küsimusele „Millist metüleensinise kontsentratsiooni kasutatakse lekkekatses?” ei ole üht vastust, kui protseduur pole määratletud. Värvaine kontsentratsioon, lahuse koostis, kokkupuuteaeg, rõhk, täitemaht ja tuvastamismeetod toimivad koos.

USP Pharmacopeial Forumi 2008. aasta arhiividokument kirjeldab konkreetse elastomeerse sulguri isesulgumiskatse jaoks 0.1% lahust, väljendatuna kujul 1 g/L. See ajalooline näide ei ole universaalne retsept ampullide, eeltäidetud süstalde ega kõigi praeguste viaalisüsteemide jaoks.

Praeguse meetodivaliku puhul annab USP peatükk 1207 steriilsete toodete pakendi terviklikkuse hindamise raamistiku, samal ajal kui peatükk 1207.2 käsitleb lekkekatsete tehnoloogiaid. Selle sissejuhatuses rõhutatakse selgesõnaliselt vajadust kontrollida viidatud standardite käsitlusala ja uusimaid versioone. USP peatükk 382 käsitleb elastomeerseid komponente sisaldavate parenteraalsete toodete pakendisüsteemide funktsionaalset sobivust. Vana töötoa eelnõu ei saa asendada kohaldatavat ametlikku teksti ja valideeritud protseduuri.

Praktiline küsimus on seega järgmine: kas see terviklik meetod tuvastab selle toote ja pakendi seisukohast olulise lekke? Tumedama värvainevanni valimine sellele ei vasta. Dokumenteerige lahuse koostis ja kontsentratsioon üheselt, sealhulgas lisandid ning see, mille alusel on protsent väljendatud.

Kontrollid eristavad kasutatavat tulemust ebaõnnestunud katsest

Meetodi või katsearuande ülevaatamisel kasutage järgmist tõlgendamise töövoogu. Enne tundmatute proovide tõlgendamist peavad kontrollproovid ja vastuvõtukriteeriumid olema kindlaks määratud.

Etapp	Nõutavad tõendid	Kui tõendid puuduvad	Välditav ekslik järeldus
Määratlege eesmärk	Toode, pakendi konfiguratsioon, elutsükli etapp ja uuritav lekkeprobleem	Katse võib vastata valele pakendit puudutavale küsimusele	„Iga lekkekatse sobib.”
Kontrollige lekketee toimimist	Teadaolevate defektidega pakendid, mis esindavad meetodi väidetavat tuvastamisvõimet	Tundmatu proovi värvitu sisu võib tuleneda ebatõhusatest katsetingimustest	„Suure purunemisega kontrollproov toimis, seega on väikesed defektid tuvastatavad.”
Kontrollige taustsignaali	Terved negatiivsed kontrollproovid, mida käsitletakse koos proovidega	Välispinna saastumist või maatriksi värvust võidakse ekslikult pidada sissetungimiseks	„Iga sinine signaal pärines lekkest.”
Kontrollige tuvastamist	Värvainega rikastatud sisu või sobivad analüütilised standardid	Sisu võib varjata värvaine väikest kontsentratsiooni	„Tundlik instrument tagab tundliku pakendikatse.”
Tõlgendage proovi	Nõuetele vastavad kontrollid ja eelnevalt määratletud otsustusreegel	Tulemus vajab uurimist	„Värvaine puudumine tähendab steriilsust ja pürogeenide puudumist.”

Värvainega rikastatud proov ja tahtlikult defektne pakend vastavad eri küsimustele. Rikastatud proov näitab, kas juba sees olevat värvainet saab tuvastada. Defektne pakend näitab, kas värvaine saab siseneda ja seejärel kogu töövoo käigus tuvastatavaks jääda. Range uuring peab neid võimeid eristama.

Kaht avastamispiiri on lihtne segi ajada

Analüütiline avastamispiir puudutab värvaine kogust, mida tuvastamismeetod suudab taustsignaalist eristada. Pakendikatse tuvastamisvõime puudutab seda, milliseid defekte kogu meetod tuvastab ja kui järjekindlalt. Suurepärane analüütiline avastamispiir ei korva katsetingimusi, mis ei vii värvainet läbi asjakohase lekkekoha.

Seetõttu on värvaine sissetungimise tulemused tõenäosuslikud: olemasolev defekt ei taga märkaine jälgitavat läbipääsu igal katsel. Toimivuse kindlakstegemiseks on vaja korduskatseid ja nõuetekohaselt iseloomustatud defekte, mitte universaalse minimaalse augu suuruse määramist.

Alusuuringud illustreerivad sõltuvust süsteemist. 2016. aasta eeltäidetud süstalde uuringus teatasid Lu ja kolleegid, et metüleensinine ei sobinud väikeste lekkeavade usaldusväärseks tuvastamiseks nende uuritud ravimpreparaati sisaldavates süstaldes. Nad töötasid välja lähenemisviisi, milles kasutati fluorestseeruvat värvainet ja spektroskoopilist tuvastamist. See leid toetab märkaine ja tuvastamismeetodi koos hindamist; see ei kehtesta üht asendusmeetodit kõigi pakendite jaoks.

Teises, 2000. aastal avaldatud värvaine sissetungimise uuringus kasutati metüleensinise asemel värvainet FD&C Red No. 40 ning võrreldi värvaine ja mikroobide sissetungimist mikrotorudega varustatud lekkivate viaalide abil. Sarnane tundlikkus selles katsesüsteemis ei muuda iga sinise värvainega katseprotokolli mikroobse koormuskatsega samaväärseks.

Hoidke neli kvaliteediküsimust lahus

Pakendi lekkimine: Kas aine saab katsetingimustes läbida pakendi piiri? Värvaine sissetungimine annab selle küsimuse kohta tõendeid.

Mikroobse barjääri terviklikkus: Kas pakend suudab säilitada oma mikroobse barjääri asjakohastes säilitamis- ja kasutustingimustes? Füüsikalise katse sidumine selle väitega nõuab asjakohast valideerimispõhjendust. FDA juhend terviklikkuse katsetamise kohta stabiilsusuuringute protokollides toetab valideeritud lähenemisviise pakendi jätkuva terviklikkuse tõendamiseks. See välistab selgesõnaliselt toote esmase steriilsuskatse asendamise: terve pakend võib olla täidetud saastunud materjaliga.

Pürogeenid ja endotoksiinid: Lekkekatse ei mõõda neid saasteaineid. FDA tootmis- ja protsessikontrollide juhend käsitleb mikroobse saastumise kontrollimist ning pürogeenide või bakteriaalsete endotoksiinide määramist eraldi kvaliteedinõuetena. Värvaine puudumist näitav tulemus ei saa anda kummagi kohta mõõtetulemust.

Klaaspinna vastupidavus: Mahuti võib olla lekkekindel, samal ajal kui selle sisepinnal tekivad osakesed või delaminatsioon. USP peatükk 1660 käsitleb sisepinna vastupidavust ja klaasiosakeste teket. Klaasi uurimiseks kasutatav pinna värvimine või mikroskoopia ei ole sama vaatlus mis värvaine tungimine suletud viaali.

Lõpuks on fistulite ja anatoomiliste lekete kliinilistel värvainekatsetel teistsugune uurimisobjekt, eesmärk ja tõlgendus. Ravimipakendi katse ei anna kliinilist protokolli. Metüleensinise analüütiliste kasutusviiside raames on värvaine siin märkaine: järeldus sõltub katsetatud teekonnast ja selle kontrollidest, mitte lihtsalt sinise värvuse olemasolust või puudumisest.