Sut i ddarllen ymchwil glas methylen: canllaw i fathau o astudiaeth

Ystyriwch ddau ganfyddiad cyhoeddedig. Mewn un, cynyddodd un dos llafar o las methylen weithgarwch yr ymennydd yn ystod tasgau sylw a chof a gwella adalw cof 7 y cant. Yn y llall, gostyngodd glas methylen lif gwaed yr ymennydd a metabolaeth ocsigen yr ymennydd mewn gwirfoddolwyr iach. Yr un moleciwl, cyfeiriadau gwrthgyferbyniol. Bydd darllenydd sy'n trin y ddau fel dyfarniadau ar yr un cwestiwn yn dod i'r casgliad bod yn rhaid i un ohonynt fod yn anghywir.

Nid yw'r naill na'r llall yn anghywir. Gofynnwyd cwestiynau gwahanol, mewn systemau gwahanol, ar ddosau gwahanol, drwy lwybrau gwahanol, a mesurwyd diweddbwyntiau gwahanol ar adegau gwahanol. Mae'r erthygl hon yn eich dysgu i weld y gwahaniaethau hynny fel y mae ymchwilydd yn eu gweld, fel y gellir dosbarthu'r honiad nesaf y dewch ar ei draws cyn ei gredu. Trafodir y cefndir ar yr hyn y mae'r moleciwl yn ei wneud ar y lefel gemegol yn yr esboniad o'r mecanwaith, ac ymdrinnir â'r cwestiwn o sut mae dos yn siapio effaith yn yr adolygiad o'r dystiolaeth ynghylch dosio. Yma, y dystiolaeth ei hun yw'r pwnc.

Mae pob papur yn ateb cwestiwn cul

Nid yw canlyniad astudiaeth byth yn ddatganiad am las methylen yn gyffredinol. Mae'n ddatganiad am las methylen mewn model penodol, wedi'i roi drwy lwybr penodol, ar ddos penodol, o'i gymharu â rheolaeth benodol, wedi'i fesur â diweddbwynt penodol, ar adeg benodol. Newidiwch unrhyw un o'r rhain a gall yr ateb newid. Saith slot, i'w llenwi ar gyfer pob papur rydych yn ei ddarllen:

Model. Celloedd mewn dysgl, llygoden, meinwe ddynol a gedwir yn fyw y tu allan i'r corff, neu bobl. Mae pob cam i fyny yn ychwanegu realaeth ac yn lleihau rheolaeth.
Llwybr. Wedi'i lyncu, wedi'i chwistrellu i wythïen, wedi'i chwistrellu i gymal, neu wedi'i bibedu ar gelloedd. Mae'r llwybr yn pennu faint sy'n cyrraedd y feinwe a pha mor gyflym.
Unedau dos. Miligramau fesul cilogram ar gyfer anifeiliaid a phobl, micromolar ar gyfer celloedd a baddonau meinwe. Ni ellir trosi'r unedau hyn i'w gilydd drwy rifyddeg yn unig, oherwydd mae amsugniad, dosbarthiad, rhwymo protein, a chlirio rhyngddynt.
Cymharydd. Plasebo, hydoddiant cyfrwng, anifeiliaid heb driniaeth, neu waelodlin cyn dos. Mae canlyniad heb gymharydd yn arsylwad, nid yn ganfyddiad.
Diweddbwyntiau. Beth a fesurwyd mewn gwirionedd: signal sgan o'r ymennydd, lefel ensym, dwysedd esgyrn, sgôr prawf. Nid yw marcwyr dirprwyol (pethau sy'n sefyll yn lle canlyniad) yr un peth â'r canlyniad.
Amseru. Mae un dos a fesurir ar ôl un awr yn honiad gwahanol i ddosio dyddiol am flwyddyn.
Ansicrwydd. Maint y sampl, gwirfoddolwyr iach yn erbyn cleifion, ac a yw'r awduron eu hunain yn tynnu sylw at gyfyngiadau. Mae astudiaethau peilot bach yn cynhyrchu damcaniaethau; nid ydynt yn eu setlo.

Mae'r pedair enghraifft isod yn llenwi'r daflen waith hon ar gyfer papurau go iawn, gan gynnwys dau sy'n ymddangos fel pe baent yn anghytuno.

Enghraifft 1: treial gwirfoddolwyr a ganfu fwy o weithgarwch yr ymennydd

Mewn treial delweddu wedi'i hap-drefnu, dwbl-ddall, dan reolaeth plasebo, cyflawnodd 26 o oedolion iach rhwng 22 a 62 oed dasgau sylw parhaus a chof tymor byr mewn sganiwr, yna llyncu naill ai 280 mg o las methylen gradd fferyllol (tua 4 mg/kg) neu blasebo o liw bwyd glas, ac ailadrodd y tasgau awr yn ddiweddarach. Dangosodd y grŵp lliw ymatebion cryfach yn y cortecs ynswlaidd yn ystod sylw ac ar draws rhwydweithiau rhagflaenol, parietal, ac occipital yn ystod cof, ynghyd â 7 y cant yn fwy o atebion cywir wrth adalw. Ni ddangosodd her carbon deuocsid unrhyw newid mewn adweithedd fasgwlaidd, a ddehonglodd yr awduron fel tystiolaeth bod y signal yn adlewyrchu defnydd o ocsigen yn hytrach nag effeithiau ar bibellau gwaed.

Darlleniad y daflen waith: model, pobl iach. Llwybr, capsiwl llafar. Dos, un 4 mg/kg. Cymharydd, plasebo gyda'r dallu wedi'i ddiogelu drwy ofyn i'r cyfranogwyr beidio â throethi yng nghanol y sesiwn (byddai wrin glas yn datgelu pa driniaeth a gafwyd). Diweddbwyntiau, signal sgan ynghyd â sgoriau tasg. Amseru, awr ar ôl un dos. Ansicrwydd, 26 o bobl, iach, un sesiwn, dirprwy delweddu yn hytrach na chanlyniad clinigol.

Mae'r hyn y mae hyn yn ei brofi yn gul ac yn real: newidiodd un dos llafar isel weithgarwch yr ymennydd sy'n gysylltiedig â thasg mewn oedolion iach y diwrnod hwnnw. Nid yw'n profi triniaeth ar gyfer unrhyw gyflwr, defnydd hirdymor, nac unrhyw ddos arall. Dylid pwyso a mesur honiadau am gof a pherfformiad gwybyddol gyda'r ffin honno mewn golwg.

Enghraifft 2: y gwrthddywediad nad yw'n wrthddywediad

Yn ddiweddarach, mesurodd tîm lif gwaed a metabolaeth yn uniongyrchol ar ôl glas methylen mewnwythiennol, mewn wyth o wirfoddolwyr iach (0.5 a 1 mg/kg) ac mewn llygod mawr (2 a 4 mg/kg). Dangosodd y ddwy rywogaeth ostyngiad mewn llif gwaed yr ymennydd yn fyd-eang; gostyngodd metabolaeth ocsigen mewn pobl a gostyngodd defnydd glwcos mewn llygod mawr. Esboniad yr awduron eu hunain oedd ymddygiad y dos: mae glas methylen yn ddeuffasig, yn ysgogol ar amlygiad isel ac yn ataliol ar amlygiad uwch, gyda'r ystod isel fel arfer yn cael ei disgrifio o gwmpas 0.5 i 4 mg/kg a gwrthdroad uwchlaw tua 7 i 10 mg/kg, yn dibynnu ar y model.

Rhowch y ddwy daflen waith ochr yn ochr ac mae'r gwrthdaro'n diflannu. Llwybr gwahanol (mewnwythiennol yn erbyn llafar), dosau gwahanol, diweddbwyntiau gwahanol (cyfradd metabolig yn erbyn gweithgarwch a ysgogwyd gan dasg), amseru gwahanol (trwyth 30 munud cyn sganio yn erbyn capsiwl awr cyn hynny). Nid yw dos mewnwythiennol sy'n cyrraedd ar unwaith yr un amlygiad â chapsiwl sy'n cael ei amsugno drwy'r perfedd, ac nid yw cyfradd metabolig wrth orffwys yr un mesuriad â gweithgarwch yn ystod tasg cof. Yn aml, dim ond papurau sy'n ateb cwestiynau gwahanol yw papurau sy'n ymddangos fel pe baent yn gwrthddweud ei gilydd, ac mae'r stori ymateb i ddos sy'n eu cysylltu wedi'i gosod allan yn y trosolwg o hormesis a dosio.

Enghraifft 3: meinwe ddynol a astudiwyd y tu allan i'r corff

Mewn astudiaeth beilot, deorwyd samplau braster a gymerwyd yn ystod llawdriniaeth ar y galon gyda glas methylen. Daeth y samplau gan 25 o gleifion â methiant y galon: meinwe adipos epicardiaidd a pherifasgwlaidd, y dyddodion braster o amgylch y galon a'r pibellau sy'n cyfrannu at straen ocsideiddiol. Ar ôl eu deor am 24 awr gyda 0.1 micromolar o las methylen, dangosodd y feinwe fynegiant is o ensymau monoamin ocsidas (MAO-A yn bennaf) a llai o rywogaethau ocsigen adweithiol. Cododd ychwanegu serotonin, swbstrad MAO-A, y straen ocsideiddiol eto, a gwrthdrodd glas methylen y cynnydd hwnnw yn rhannol.

Meinwe ddynol yw hon ac mae'n effaith fiolegol wirioneddol, ond nid treial triniaeth mewn pobl mohono. Ni roddwyd dos i neb. Nid oedd cylchrediad, dim metabolaeth gan yr afu, dim canlyniad clinigol, ac nid yw'r crynodiad yn y ddysgl ar ei ben ei hun yn dweud dim am ba ddos llafar a fyddai'n ei ail-greu. Mae gwaith ex vivo (meinwe a astudir y tu allan i'r corff byw) yn eistedd rhwng diwylliant celloedd ac ymchwil glinigol: mae'n dangos bod effaith yn bosibl mewn deunydd dynol o dan amodau rheoledig, ac ni all sefydlu effeithiolrwydd, diogelwch, na dosio. Pan fyddwch yn darllen adroddiadau am ganfyddiadau meinwe, gwiriwch a yw'r pennawd yn disgrifio'r hyn a ddigwyddodd yn y ddysgl neu'n neidio at yr hyn a fyddai'n digwydd mewn claf. Mae'r cyd-destun ehangach ar gyfer y math hwn o ganfyddiad redocs yn yr adolygiad o'r dystiolaeth am straen ocsideiddiol.

Enghraifft 4: yr astudiaeth lygod lle na barhaodd canlyniad celloedd

Mewn astudiaeth ar heneiddio mewn llygod, profwyd glas methylen hirdymor yn erbyn colli esgyrn sy'n gysylltiedig ag oedran. Yfodd llygod benywaidd oedrannus ddŵr yn cynnwys 250 micromolar o las methylen am 6 neu 12 mis, a thriniwyd llygod â geneteg amrywiol o oedolaeth hyd at henaint. Mewn diwylliant celloedd roedd y cyfansoddyn wedi lleihau gwahaniaethu osteoclastau, y math o ganlyniad sy'n sbarduno penawdau. Yn yr anifeiliaid byw ni newidiodd ddim: heneiddiodd morffoleg esgyrn cortigol a thrabecwlaidd yn union fel mewn llygod heb eu trin, a methodd cangen MitoQ gyfochrog yn yr un modd.

Dyma'r bwlch trosi yn ei ffurf buraf. Mae dysgl yn cadw'r crynodiad yn gyson, yn dileu pob system organ, ac yn mesur un ymddygiad cellog. Mae anifail yn ychwanegu'r perfedd, yr afu, yr arennau, hormonau, a misoedd o iawndal. Nid methiant gwyddoniaeth yw canlyniad nwl fel hwn; gwyddoniaeth yn gweithio ydyw, gan ddiystyru damcaniaeth (bod triniaeth gwrthocsidiol ar ei phen ei hun yn diogelu esgyrn sy'n heneiddio) cyn i unrhyw un ei hailadrodd mewn pobl. Mae canfyddiadau anifeiliaid yn cefnogi neu'n gwanhau mecanwaith. Nid ydynt yn rhagnodi defnydd dynol, ffin sy'n bwysig pryd bynnag y mae honiadau am hirhoedledd a heneiddio yn dyfynnu data o lygod.

Y daflen waith, yn barod i'w chopïo

Ar gyfer y papur neu'r erthygl nesaf am bapur, llenwch hwn cyn penderfynu beth rydych yn ei feddwl:

Model: celloedd, anifail (pa rywogaeth, iach neu afiach), meinwe ddynol ex vivo, gwirfoddolwyr iach, neu gleifion?
Llwybr: llafar, mewnwythiennol, chwistrelliad lleol, neu wedi'i roi'n uniongyrchol ar gelloedd neu feinwe?
Unedau dos: mg/kg (corff) neu micromolar (dysgl)? Peidiwch byth â throsi un i'r llall drwy bwysau moleciwlaidd yn unig.
Cymharydd: plasebo, cyfrwng, grŵp heb driniaeth, neu waelodlin cyn dos? A ddiogelwyd y dallu?
Diweddbwyntiau: wedi'u mesur yn uniongyrchol neu'n ddirprwyol? Mae signal sgan, lefel ensym, a chanlyniad clefyd yn cynrychioli tair cryfder honiad wahanol.
Amseru: un dos neu gronig? Wedi'i fesur ar ôl munudau, oriau, neu fisoedd?
Ansicrwydd: faint o gyfranogwyr, a beth ddywedodd yr awduron eu hunain oedd yn gyfyngedig? Mae astudiaethau peilot, gwirfoddolwyr iach, ac un dos yn cynhyrchu damcaniaethau.

Mae dau arfer yn gwneud y daflen waith yn gyflym. Yn gyntaf, darllenwch y dulliau cyn y casgliad; mae'r casgliad yn dweud wrthych beth mae'r awduron yn ei gredu, mae'r dulliau'n dweud wrthych beth y mae ganddynt sail i'w gredu. Yn ail, pan fydd dwy astudiaeth yn anghytuno, cymharwch y taflenni gwaith cyn cymharu'r dyfarniadau. Mae gwahaniaethau mewn model, llwybr, dos, a diweddbwynt yn datrys y rhan fwyaf o wrthddywediadau ymddangosiadol heb fod unrhyw un yn anghywir. :::