Glas methylen ac afu brasterog: canfyddiadau'r astudiaethau arbrofol

Mae afu brasterog yn un label ar gyfer sawl problem wahanol. Mewn un person, y sbardun yw defnydd trwm parhaus o alcohol. Mewn un arall, cyflenwad gormodol o faetholion ydyw, ynghyd ag ymwrthedd i inswlin a mwy o fraster yn cael ei gludo i'r afu. Gall y microsgop ddangos braster wedi'i storio yn y ddau achos, ond mae'r achosion sylfaenol yn wahanol. Y gwahaniaeth hwnnw sy'n pennu beth y gall unrhyw arbrawf ei brofi.

Mae'r llenyddiaeth am las methylen ac afu brasterog yn fach ac yn gwbl gyn-glinigol ar y cwestiwn hwn. Tair astudiaeth mewn llygod mawr a llygod sy'n cael eu dyfynnu amlaf, ac nid ydynt i gyd yn pwyntio i'r un cyfeiriad. Cywirodd un astudiaeth bwydo ethanol newid redox ond gadawodd fraster yr afu heb ei newid. Gostyngodd un astudiaeth deiet braster uchel fraster yr afu ochr yn ochr â newid mewn signalau. Canfu un astudiaeth mewn anifeiliaid iach ganlyniadau gwrthgyferbyniol ar gyfer perocsidiad lipidau yn yr afu a'r arennau. Gyda'i gilydd, maent yn dangos pam mae'n rhaid cadw tri phwynt terfyn ar wahân: newid redox, actifadu signalau, a chronni braster mewn meinwe.

Tri phwynt terfyn sy'n hawdd eu cymysgu

Mae mesur redox yn disgrifio sut mae electronau'n cael eu trin. Mae cymhareb NAD+ i NADH yn yr afu yn dangos a yw'r amgylchedd cellog wedi'i ocsidio neu ei rydwytho yn gymharol. Mae ocsidio ethanol yn trosi NAD+ yn NADH, felly mae yfed cronig yn gwthio'r gymhareb i lawr. Gall llifyn sy'n derbyn electronau ei gwthio'n ôl i fyny. Cemeg yw hynny, nid prawf bod llai o fraster wedi'i storio.

Mae mesur signalau yn disgrifio rheoleiddio. Mae SIRT1 yn ensym rheoleiddiol sy'n dibynnu ar NAD+ ac sy'n addasu proteinau sy'n ymwneud â gweithrediad mitocondria a thrin lipidau. Mae AMPK yn gweithredu fel synhwyrydd ynni isel sy'n ffafrio ocsidio tanwydd ac yn cyfyngu ar synthesis lipidau pan gaiff ei actifadu. Pan fo papur yn adrodd am actifadu SIRT1 yn yr afu gan las methylen, mae'n adrodd am newid rheoleiddiol. Nid yw wedi adrodd am ganlyniad i glaf eto.

Mae mesur histolegol neu fiocemegol yn disgrifio'r afu ei hun. Mae enghreifftiau cyffredin yn cynnwys cynnwys triglyseridau fesul gram o feinwe, staenio braster niwtral ag Oil Red O, asesu chwyddo balŵnaidd ac anaf drwy hematocsylin ac eosin, a gweithgarwch ALT mewn plasma. Dim ond y trydydd dosbarth hwn sy'n ateb a wnaeth glas methylen wella steatosis yr afu yn yr arbrawf hwnnw.

Mae cadw'r dosbarthiadau hyn ar wahân yn atal y camddehongliad mwyaf cyffredin: nid yw canlyniad ffafriol o ran redox neu signalau yn golygu llai o fraster yn yr afu.

Model ethanol: cywiro redox, braster heb newid

Daw'r canfyddiad negyddol cliriaf o astudiaeth bwydo ethanol cronig mewn llygod mawr Wistar gwrywaidd. Derbyniodd yr anifeiliaid ethanol fel rhan o ddeiet hylifol, gan godi i 36 y cant o gyfanswm yr egni, gyda grwpiau rheoli a fwydwyd mewn parau yn derbyn glwcos yn lle egni ethanol. Derbyniodd un grŵp ethanol ac un grŵp rheoli las methylen hefyd ar 130 mg fesul litr o ddeiet, tua 42 mg fesul kg y dydd, o ddiwrnod 5 i ddiwrnod 30.

Amcangyfrifwyd y cyflwr redox o barau safonol o fetabolion: lactad i byrwfad ar gyfer y cytosol a 3-hydroxybutyrate i acetoacetate ar gyfer mitocondria. Yn gynnar yn y cyfnod bwydo ethanol dos uchel, dangosodd y grwpiau ethanol newidiadau mawr, gyda chymhareb NAD+ i NADH yn y cytosol i lawr tua 62 y cant ac yn y mitocondria i lawr tua 71 y cant, ynghyd â glycerol 3-phosphate uwch. Gwrthdrodd glas methylen y newidiadau hynny i raddau helaeth ac adferodd glycerol 3-phosphate i lefelau agos at werthoedd y grŵp rheoli, heb newid cymeriant ethanol, cynnydd ym mhwysau'r corff, nac ethanol yn y serwm.

Roedd braster yr afu yn adrodd stori wahanol. Ar ddiwrnod 12, cyn i lawer o fraster gronni, nid oedd triglyseridau'n wahanol rhwng y grwpiau. Ar ddiwrnod 27, roedd gan y grwpiau ethanol gynnydd mawr mewn triglyseridau, ni waeth a oeddent wedi derbyn glas methylen. Ar ddiwrnod 30, cododd cyfanswm y lipidau tua 89 y cant a thriglyseridau tua 196 y cant mewn anifeiliaid a fwydwyd ag ethanol, eto heb i'r llifyn effeithio arnynt. Roedd ymdreiddiad brasterog yng nghanol y llabedynnau yn edrych yr un fath gyda thriniaeth neu hebddi. Daeth yr awduron i'r casgliad nad y newid redox a achosir gan ethanol yw prif achos afu brasterog ar ôl bwydo hirdymor yn y model hwn. Mae dysgu gwahaniaethu rhwng sut mae canfyddiadau mewn anifeiliaid a chelloedd yn trosi i risg i bobl yn helpu yma: gall mecanwaith fod yn wirioneddol ond dal i beidio â rheoli'r canlyniad.

Dyma'r astudiaeth i'w dyfynnu pan fydd rhywun yn honni bod yn rhaid i unrhyw gywiriad redox glirio braster yr afu. Yn y dyluniad hwn, ni wnaeth hynny.

Model metabolaidd: signalau ynghyd â llai o fraster, mewn llygod

Daw darlun gwahanol o astudiaeth o hepatocytau a llygod ar ddeiet braster uchel a luniwyd o amgylch SIRT1 ac AMPK. Mewn celloedd HepG2, celloedd AML-12, a hepatocytau cynradd llygod mawr, cododd glas methylen y gymhareb NAD+ i NADH, cynyddodd brotein SIRT1, gostyngodd asetyleiddiad y rheoleiddiwr PGC-1alpha, cododd gynnwys DNA mitocondriaidd a defnydd ocsigen, ac actifadu AMPK gyda chynnydd dilynol mewn CPT-1 a PPARalpha. Pan gafodd mynegiant SIRT1 ei leihau, collwyd actifadu AMPK, sy'n cysylltu'r gadwyn â SIRT1 yn y system gellog honno. Roedd y llifyn hefyd yn gwrthweithio signalau sy'n hyrwyddo ffurfio lipidau o'r agonydd LXR T0901317 ac o amlygiad i balmitad, gan gynnwys anwytho SREBP-1c, FAS, ac ACC.

Defnyddiodd rhan anifeiliaid yr astudiaeth lygod C57BL/6 gwrywaidd a fwydwyd â deiet 60 y cant o fraster am 8 wythnos, gyda glas methylen yn cael ei roi drwy'r geg bedair gwaith yr wythnos yn ystod y 4 wythnos olaf ar 3 neu 10 mg fesul kg y dydd. Dangosodd llygod a gafodd driniaeth lai o staenio Oil Red O, triglyseridau is yn yr afu, llai o chwyddo balŵnaidd a dirywiad brasterog ar histoleg, ac ALT is mewn plasma na llygod ar ddeiet braster uchel heb driniaeth. Canfu gwaith ffarmacocinetig yn yr un papur fioargaeledd drwy'r geg o tua 31 i 35 y cant, gydag amsugniad bron yn gyflawn yn y coluddyn ond metabolaeth sylweddol, a'r gymhareb uchaf o feinwe i blasma yn yr afu, sy'n gwneud effaith ar yr afu yn gredadwy o leiaf o ran dosbarthiad.

Mae hynny'n arwydd gwirioneddol o effaith yn erbyn steatosis, ond mae ei derfynau'n gul. Arbrawf byr mewn llygod ydyw gyda 9 i 10 anifail ym mhob grŵp, un deiet, dau ddos, a phedair wythnos o driniaeth. Mae'n profi nodweddion steatosis metabolaidd a steatohepatitis, nid clefyd sy'n gysylltiedig ag alcohol, ac nid yw'n profi sirosis, gwrthdroi ffibrosis, nac unrhyw ganlyniad mewn pobl. Rôl mesurau mitocondriaidd a redox wrth ddehongli canlyniadau o'r fath yw dangos eu bod yn cefnogi rhagdybiaeth, nid eu bod yn ddos neu'n brotocol.

Cipolwg ar feinwe iach: yr un dos, effeithiau gwrthgyferbyniol mewn organau

Mae trydedd astudiaeth yn aml yn cael ei chynnwys mewn honiadau am yr afu lle nad yw'n perthyn. Mewn arbrawf 30 diwrnod mewn llygod mawr Wistar benywaidd iach, derbyniodd pum anifail las methylen 1 mM mewn dŵr yfed a gweithredodd pump fel grŵp rheoli. Ni newidiodd superocsid dismwtas, catalas, na glutathion wedi'i rydwytho yn yr afu na'r arennau. Cododd perocsidiad lipidau ychydig yn yr afu a gostyngodd yn yr arennau. Gostyngodd ALT a chreatinin yn y serwm, heb newid yn nitrogen wrea'r gwaed.

Y dehongliad gonest yw effeithiau penodol i feinwe mewn anifeiliaid iach, nid trin clefyd. Roedd yr un amlygiad yn ymddangos yn ysgafn o blaid ocsidio yn ôl un marciwr yn yr afu ac yn ysgafn o blaid amddiffyn yn ôl yr un marciwr yn yr arennau, tra arhosodd amddiffynfeydd gwrthocsidiol safonol yn ddigyfnewid. Gyda phum anifail ym mhob grŵp a dim model clefyd, mae'r papur hwn yn rhybuddio rhag galw glas methylen yn wrthocsidydd cyffredinol ar gyfer yr afu. Mae hefyd yn dangos pam mae angen cyd-destun clefyd diffiniedig ar newidiadau mewn ensymau'r afu cyn iddynt olygu gwelliant.

Cymhariaeth o'r tri arbrawf ar yr afu

Mae'r tabl yn gwneud y prif bwynt yn amlwg. Llifyn glas tebyg, bioleg wahanol. Mae'r astudiaeth ethanol yn gwahanu llwyddiant redox oddi wrth fethiant i leihau braster. Mae'r astudiaeth deiet yn cyfuno signalau a gwelliant mewn braster mewn un model. Mae'r astudiaeth mewn anifeiliaid iach yn dangos y gall marcwyr redox symud i gyfeiriadau gwrthgyferbyniol yn ôl yr organ.

Pam nad yw hyn yn sail i honiad am driniaeth

Ni wnaeth yr un o'r astudiaethau hyn gynnwys pobl ag afu brasterog. Mae dosau, llwybrau rhoi, a hyd y driniaeth yn wahanol rhwng papurau ac nid ydynt yn trosi'n drefn ar gyfer pobl drwy raddio syml. Mae grwpiau bach, yn enwedig tri anifail fesul pwynt amser redox yn y gwaith ethanol a phump ym mhob grŵp yn y gwaith ar anifeiliaid iach, yn gadael ansicrwydd sylweddol. Mae rhyw, straen, cyfansoddiad y deiet, ac amseriad y driniaeth mewn perthynas â'r anaf i gyd yn wahanol. Ac mae'r ddau fodel clefyd yn cynrychioli achosion sylfaenol gwahanol, felly ni all canlyniad cadarnhaol y deiet wneud iawn am ganlyniad negyddol yr ethanol, nac i'r gwrthwyneb.

I unrhyw un sydd wedi cael diagnosis o glefyd yr afu, rhagofalus yn hytrach na therapiwtig yw'r dehongliad mwy brys. Mae'r trosolwg o ragofalon arennau ac afu ar gyfer glas methylen yn egluro pam mae nam ar organau yn newid y cwestiynau diogelwch hyd yn oed pan fo papur ar anifeiliaid yn edrych yn ffafriol. Ewch â'r diagnosis, canlyniadau labordy diweddar, yr union gynnyrch a'r llwybr rhoi, a rhestr lawn o feddyginiaethau at glinigydd, a gofynnwch pa dystiolaeth sy'n cefnogi'r cynnyrch hwnnw at y diben hwnnw mewn rhywun â'r radd honno o nam.

Y casgliad: newidiodd glas methylen gyflwr redox yr afu mewn un model ethanol heb leihau braster wedi'i storio, actifadu SIRT1 ac AMPK wrth leihau braster mewn un model metabolaidd mewn llygod, a dangos effeithiau redox penodol i organau mewn llygod mawr iach. Mae hynny'n gyfres o drywyddau ar gyfer ymchwil, nid yn driniaeth sefydledig ar gyfer afu brasterog.