མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོས་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡ་ལ་ཐེབས་པའི་ཤུགས་རྐྱེན་ཚད་འཇལ་བ། གསོ་རླུང་། ATP དང་སྐྱི་མོའི་གློག་རྟིང་ཁྱད།

ཚོད་ལྟ་ཁང་ཞིག་གིས་དབུགས་ལེན་ནུས་པ་ཉམས་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡར་མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོ་བསྣན་ཏེ། གསོ་རླུང་ཟད་ཚད་འཕར་བ་མཐོང་བར་ཆ་བཞག སྐབས་དེར་རང་བཞིན་གྱིས་འབྲི་འདོད་པའི་ཚིག་ནི་ཚོས་རྫས་དེས་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡའི་བྱེད་ནུས་སླར་གསོ་བྱས་ཞེས་པ་དེ་ཡིན། ཚིག་དེ་ནོར་སྲིད། གསོ་རླུང་གི་རྒྱུན་ཚད། ATP སྦྱོར་འགྲུབ་དང་སྐྱི་མོའི་གློག་རྟིང་ཁྱད་ནི་གོ་དོན་མི་འདྲ་བ་གསུམ་ཡིན། དེ་དག་ཕྲ་ཕུང་གི་དབང་པོ་གཅིག་ནང་གནས་པ་ནི། ཉར་ཚགས་འདྲ་བཤུས། མཉམ་སྒྲིག་དང་མཉམ་སྤྱོད་གསུམ་སྤྲིན་མཛོད་ཀྱི་ཡིག་སྣོད་གཅིག་ལ་བརྟེན་པ་དང་འདྲ་སྟེ། འབྲེལ་བ་ཡོད་ཀྱང་ལས་འགྲོའི་སྒྲིག་ལུགས་མི་འདྲ། གཅིག་གི་ཚབ་ཏུ་གཞན་ཞིག་ལ་ནོར་འཁྲུལ་བྱས་ན། ཚད་འཇལ་ཚང་མ་ལག་རྩལ་གྱི་ཆ་ནས་ཡང་དག་ཡིན་རུང་། འགྲེལ་བཤད་དེ་མི་འགྲིག

མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོ་ནི་རང་གིས་ཚད་འཇལ་བྱེད་པའི་མ་ལག་ནང་ཞུགས་པས། ནོར་འཁྲུལ་དེ་འབྱུང་སླ་བར་བྱེད། དེ་ནི་གོ་རིམ་གྱི་སྔ་ཕྱོགས་ནས་གློག་རྡུལ་ལེན་ཞིང་ཕྱི་ཕྱོགས་སུ་སྟེར་བའི་གསོ་འགྱུར་དང་བསྐྱར་འགྱུར་རེས་འཁོར་བྱེད་པའི་རྫས་ཤིག་དང་། ནུས་པ་ལྡན་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡ་ནང་འདུ་བའི་ཚིལ་ལ་འདྲེས་སླ་བའི་གདངས་ཡོན་གྱི་ཨ་ཡོན་ཞིག དེ་བཞིན་རྒྱུན་སྤྱོད་ཚོར་འདྲེན་དང་འོད་ཀྱི་རླབས་ཁུལ་གཅིག་ནང་འོད་འཇིབ་པ་དང་འོད་འཕྲོ་བའི་མདོག་སྔོན་པོ་ཤུགས་ཆེ་བའི་འདུས་རྫས་ཤིག་ཀྱང་ཡིན། ཚད་འཇལ་གྲུབ་འབྲས་གཅིག་གིས་གནས་ཚུལ་དེ་ཚང་མ་མཚོན་མི་ཐུབ། བུ་ཌ་པེསཊ་ཀྱི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡའི་ཞིབ་འཇུག་རྣམས་སུ་སྟོན་པའི་ཡིད་ཆེས་རུང་བའི་ཐབས་ལམ་ནི། གསོ་རླུང་གི་རྒྱུན་ཚད་དང་། ATP སྦྱོར་འགྲུབ་ཀྱི་མྱུར་ཚད། སྐྱི་མོའི་གློག་རྟིང་ཁྱད། ཧ་ཡི་ཌྲོ་ཇེན་པེ་རོག་སའིཌ་གློད་ཚད་བཅས་ཚད་འཇལ་བྱེད་པ་དང་། རིམ་པ་རེ་རེར་ཚོས་རྫས་དེར་དམིགས་པའི་ཚོད་འཛིན་འཇོག་པ་དེ་ཡིན།

དབུགས་ལེན་ཚད་འཇལ་གྱིས་གསོ་རླུང་གི་རྒྱུན་ཚད་འཇལ་གྱི། ནུས་རྒྱུ་ཐོན་ཚད་མི་འཇལ།

Oroboros Oxygraph ཡིན་ནམ་ Seahorse ཕྲ་ཕུང་ཕྱིའི་རྒྱུན་ཚད་དཔྱད་ཆས་ཡིན་རུང་། དབྱེ་འབྱེད་ནུས་པ་མཐོ་བའི་དབུགས་ལེན་ཚད་འཇལ་གྱིས་གནས་ཚུལ་གཅིག་ཁོ་ན་སྟོན། དེ་ནི་གསོ་རླུང་བསྐྱར་འགྱུར་བྱེད་པའི་མྱུར་ཚད་ཡིན། དེས་གློག་རྡུལ་རེར་པྲོ་ཊོན་ག་ཚོད་ཕར་འདེད་བྱས་པ། རིམ་ཁྱད་ག་ཚོད་རང་སོར་བཞག་པའམ། ATP སྦྱོར་འགྲུབ་རྩབས་ཀྱིས་དེ་བེད་སྤྱད་མིན་མི་སྟོན།

ཐ་སྙད་གལ་ཆེ། ལོགས་སུ་བཏོན་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡ་ནང་། ADP མེད་པའི་འགྱུར་གཞིས་འཛག་ཐོན་དབུགས་ལེན་སྟོན་པ་དང་། ཚད་ངེས་ཟིན་པའི་ ADP དང་མཉམ་པའི་འགྱུར་གཞིས་གསོ་འགྱུར་ཕོས་ཕོ་རི་ལེ་ཤན་གྱི་ནུས་ཚད་སྟོན། སྦྲེལ་འབྱེད་རྫས་ཀྱི་ཚད་རིམ་བཞིན་སྤོར་ནས་བརྟག་པས་གློག་རྡུལ་སྤོ་སྒྱུར་གྱི་ནུས་ཚད་མཐོ་ཤོས་སྟོན། ཆ་ཚང་བའི་ཕྲ་ཕུང་ནང་ Seahorse ཡི་དེ་དང་མཚུངས་པའི་ཚད་རྣམས་ནི། གཞི་རྩའི་དབུགས་ལེན། oligomycin ལ་ཚོར་བའི་ ATP དང་འབྲེལ་བའི་དབུགས་ལེན། པྲོ་ཊོན་འཛག་ཐོན། FCCP ཡིས་ངེས་འཛིན་བྱས་པའི་དབུགས་ལེན་མཐོ་ཤོས། དེ་བཞིན་ rotenone དང་ antimycin གཉིས་ཀྱིས་མི་འགོག་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡ་མིན་པའི་གསོ་རླུང་ཟད་ཚད་བཅས་ཡིན། Agilent Mito Stress Test གི་སྒྲོམ་གཞིཡིས་གསལ་པོར་སྟོན་པ་ལྟར། Seahorse ཡི་གྲུབ་འབྲས་ལ་ State 3 དང་ State 4 ཞེས་འབོད་པ་ནི། དཔེ་དངོས་ཀྱི་གྲ་སྒྲིག་དེས་རྒྱབ་སྐྱོར་མི་ཐུབ་པའི་ཞིབ་ཚད་ཅིག་གཡར་བ་ཡིན།

མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོས་གསོ་རླུང་མང་བ་དང་ནུས་རྒྱུ་མང་བ་གཉིས་དབར་གྱི་རང་བཞིན་དུ་སྣང་བའི་འབྲེལ་བ་གཏོར། ལོགས་སུ་བཏོན་པའི་ཀླད་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡའི་ཞིབ་འཇུགལྟར་ན། གི་ནི་ཕག་གི་ཀླད་པ་ནས་ལོགས་སུ་བཏོན་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡ་ནང་། 100 nM ནས་ 1 uM བར་གྱི་ཚོས་རྫས་ཀྱིས་ glutamate དང་ malate མཉམ་བསྡེབས། succinate དང་ alpha-glycerophosphate འགྱུར་གཞི་རྣམས་སྤྱད་པའི་ངལ་གསོའི་སྐབས་ཀྱི་གསོ་རླུང་ཟད་ཚད་སྤར། alpha-glycerophosphate སྤྱད་པའི་སྐབས་སུ་འཕར་ཚད་ཧ་ལམ་ 64 percent ཡིན། འོན་ཀྱང་བདེ་ཐང་ཡིན་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡའི་ནང་ ADP ཡིས་སྐུལ་བའི་དབུགས་ལེན་ལ་ཕལ་ཆེར་འགྱུར་བ་མེད། འཛག་ཐོན་འཕར་ཡང་ ADP ཡིས་སྐུལ་བའི་རྒྱུན་ཚད་མ་འགྱུར་བས། རྩིས་བརྒྱབ་པའི་དབུགས་ལེན་ཚོད་འཛིན་གྱི་བསྡུར་ཚད་མར་འབབ། མར་འབབ་པ་དེས་ཚོས་རྫས་ཀྱིས་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡར་གནོད་སྐྱོན་བཏང་བ་མཚོན་གྱི་མེད། དེས་ཚོས་རྫས་ཀྱིས་རྒྱུན་ལྡན་གྱི་དབུགས་ལེན་སྟེང་གསོ་རླུང་ཟད་བྱེད་ཀྱི་གསོ་འགྱུར་དང་བསྐྱར་འགྱུར་རེས་འཁོར་ཞིག་ཁ་སྣོན་བྱས་པ་མཚོན། འཕར་ཚད་ཁོ་ན་སྟོན་པའི་མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོའི་གསོ་རླུང་ཟད་ཚད་བརྟག་དཔྱད་ཀྱིས། དངོས་སུ་འབྱུང་བའི་རྫས་འགྱུར་ཚད་འཇལ་བྱས་པ་ཡིན་ཡང་། ནུས་རྒྱུ་སྲུང་ཉར་སྐོར་གང་ཡང་བཤད་མེད།

སླར་གསོའི་ཚོད་ལྟ་རྣམས་ཀྱིས་ཀྱང་ཁྱད་པར་དེ་རྒྱ་ཆེ་བའི་ཚད་ཐོག་སྟོན། འདུས་ཚོགས་ I བཀག་པའི་སྐབས། གསོ་རླུང་གི་རྒྱུན་ཚད་ཧ་ལམ་ལྡབ་གསུམ་དུ་སླར་གསོ་བྱུང་ཡང་། ATP སྦྱོར་འགྲུབ་ཧ་ལམ་ 1.5 ལྡབ་ཙམ་ལས་སླར་གསོ་མ་བྱུང་། གསོ་རླུང་མང་བ་གློག་སྣེར་སླེབས་ཀྱང་། ATP བཟོ་བར་ཕན་པའི་ཆ་དེ་ཉུང་བ་ཡིན། གསོ་འགྱུར་ཕོས་ཕོ་རི་ལེ་ཤན་ལེགས་སུ་ཕྱིན་པའི་བཤད་ཚུལ་གང་ཡིན་རུང་། རྩིས་ཐོའི་ ATP ཕྱོགས་ཀྱི་གྲངས་ཐོ་དགོས། ཡག་ཤོས་ནི་གསོ་རླུང་རེར་ ATP ཡི་བསྡུར་ཚད་དུ་སྟོན་པ་དང་། མ་གྲངས་ཇི་ལྟར་ངེས་འཛིན་བྱས་པ་གསལ་བཤད་བྱེད་པ་དེ་ཡིན།

ATP བརྟག་དཔྱད་ཀྱིས་སྦྱོར་འགྲུབ་ཀྱི་མྱུར་ཚད་འཇལ་བས། ཡོད་ཚད་ཀྱིས་དེའི་ཚབ་བྱེད་མི་ཐུབ།

ATP བརྟག་དཔྱད་ཀྱིས་དྲི་བ་གཞན་ཞིག་ལ་ལན་སྟེར། དེ་ནི་དུས་ཚོད་ཀྱི་ཚད་གཞི་རེར་ ATP ག་ཚོད་བཟོ་བ་ཡིན། སྐར་མ་ཁ་ཤས་རིང་མེ་འབུའི་ luciferase ཡི་འོད་འཕྲོ་བ་རྗེས་འདེད་བྱེད་པའམ། 340 nm ལ་ཀློག་པའི་ hexokinase དང་ glucose-6-phosphate dehydrogenase མཉམ་སྦྲེལ་བརྟག་དཔྱད་སྤྱོད་པའི་དུས་རིམ་ཚད་འཇལ་གྱིས་མྱུར་ཚད་སྟེར། མཐའ་མཚམས་གཅིག་ལ་ ATP ཡོངས་རྫོགས་ཚད་འཇལ་བྱས་ན་ཡོད་ཚད་སྟོན། དེས་སྦྱོར་འགྲུབ་ནས་ཟད་ཚད་འཐེན་པའི་གྲུབ་འབྲས་མཚོན་ཞིང་། དེ་གཅིག་པུས་གསོ་འགྱུར་ཕོས་ཕོ་རི་ལེ་ཤན་སྐོར་གནས་ཚུལ་ཅུང་ཉུང་ཙམ་ལས་མི་སྟོན།

བུ་ཌ་པེསཊ་ཚོགས་པས་ adenylate kinase བཀག་ནས་རྩབས་མཉམ་སྦྲེལ་གྱི་ཐབས་ལམ་སྤྱད། དེ་དག་གིས་ 1 ནས་ 2 uM བར་གྱི་མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོས་ rotenone དང་ antimycin གྱིས་ལས་སྣོན་བྱས་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡའི་ནང་ ATP ཐོན་ཚད་ཅུང་ཙམ་སྤར་བ་དང་། དེ་ནི་སྡོམ་རྩིས་ཀྱི་ཆ་ནས་དོན་སྙིང་ལྡན་པ་རྙེད། དེ་ནི་དངོས་ཡོད་ཀྱི་སླར་གསོ་ཡིན་ཡང་། ཆ་ཤས་ཙམ་གྱི་སླར་གསོ་ཡིན། TEGDMA ཡི་དུག་གཤིས་ཞིབ་འཇུགགིས་མི་འདྲ་བའི་ཚོད་ལྟའི་དཔེ་གཞི་ཞིག་ནང་དེ་དང་འདྲ་བའི་གྲུབ་འབྲས་རྙེད། སོའི་ལས་ཀར་སྤྱོད་པའི་མོ་ནོ་མེར་ TEGDMA ཡི་ 5 mM གྱིས་འདུས་ཚོགས་ I དང་འབྲེལ་བའི་དབུགས་ལེན་ཧ་ལམ་ 286 ནས་ 28 རྒྱུན་ཚད་ཀྱི་ཚད་གཞིར་མར་བཅག་པ་དང་། 2 uM ཚོས་རྫས་ཀྱིས་དེ་ཧ་ལམ་ 86 ལ་སླར་གསོ་བྱས།

ཚོས་མདོག་ལྡན་པའི་གསོ་འགྱུར་དང་བསྐྱར་འགྱུར་འདུས་རྫས་ལ། ཚོད་འཛིན་གཉིས་ངེས་པར་དུ་དགོས། དང་པོ། ཚད་འཇལ་བྱས་པའི་ ATP སྦྱོར་འགྲུབ་ནས་ག་ཚོད་ ATP སྦྱོར་འགྲུབ་རྩབས་ལ་བརྟེན་པ་ངེས་གཏན་བཟོ་ཆེད་ oligomycin སྤྱོད། གཉིས་པ། ཚད་ཤེས་པའི་ ATP དང་། ཚང་བའི་བརྟག་རྫས། ཚོད་ལྟར་སྤྱད་པ་དང་ཏག་ཏག་མཚུངས་པའི་ཚོས་རྫས་གར་ཚད་བཅས་སྤྱད་ནས། ཕྲ་ཕུང་མེད་པའི་དཔེ་དངོས་སུ་ཚད་ཤེས་པའི་ ATP བསྣན་རྗེས་ཕྱིར་ཚད་འཇལ་ཐུབ་ཚད་བརྟག གར་ཚད་ཉུང་མཐར་ 0, 100 nM, 300 nM, 1 uM དང་ 2 uM ཚུད་དགོས། ཚོས་རྫས་ཀྱིས་འཕྲོས་པའི་འོད་འཇིབ་པ། བརྡ་སྟོན་རྩབས་འགོག་པའམ། བརྟག་རྫས་ཀྱི་གསོ་འགྱུར་དང་བསྐྱར་འགྱུར་རྫས་འགྱུར་བསྒྱུར་སྲིད། སྤྱིར་བཏང་གི་ luciferase བརྟག་དཔྱད་ལམ་སྟོནགྱིས་ཀྱང་། དེ་འདྲའི་འགལ་རྐྱེན་རིགས་ལ་སྐྱེ་དངོས་རྫས་འགྱུར་གྱི་ཟུར་བརྟག་བྱེད་རྒྱུའི་གྲོས་འདོན་བྱེད། འོད་ཉམས་པ་རྒྱུན་དུ་གར་ཚད་མཐོ་བར་ཚབས་ཆེ་བ་ཡིན་པས། 1 uM ལ་ཚད་འཇལ་གྱི་བཅོས་སྣང་མེད་པ་ཡིན་ཞེས་མ་བསམ།

སྐྱི་མོའི་གློག་རྟིང་ཁྱད་ཚོར་འདྲེན་གྱིས་ཚོས་རྫས་ཀྱི་ཁྱབ་ཚུལ་འཇལ་གྱི། རྒྱུན་ཚད་མི་འཇལ།

Safranine O, TMRM དང་ TMRE, rhodamine 123 དང་ JC-1 ཚང་མ་སྐྱི་མོ་བརྒལ་ཐུབ་པའི་གདངས་ཡོན་གྱི་ཨ་ཡོན་ཡིན། དེ་དག་གློག་རྫས་ཀྱི་དོ་མཉམ་ལ་བསྟུན་ནས་གདངས་མོའི་གློག་ཁུར་ལྡན་པའི་ནང་གཞིར་འདུ་བས། ཡོངས་ཀྱི་འོད་འཚེར་ཚད་ཀྱིས་ཚོར་འདྲེན་གང་དུ་གནས་པ་བརྒྱུད་ནས་གློག་རྟིང་ཁྱད་ཤུགས་བསྟན་བྱེད། དེ་དག་གང་གིས་ཀྱང་ ATP ཡམ་གློག་རྡུལ་གྱི་རྒྱུན་ཚད་མི་འཇལ།

ཚོར་འདྲེན་རེ་རེ་ལ་འཚམ་ཤོས་ཀྱི་དཔེ་དངོས་གྲ་སྒྲིག་མི་འདྲ་བ་ཡོད། Safranine O ནི་ལོགས་སུ་བཏོན་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡ་དང་སྐྱི་མོ་བརྟོལ་བའི་ཕྲ་ཕུང་ལ་འཚམ། རྒྱུན་དུ་ 2 uM ཉེ་འགྲམ་སྤྱོད་ཅིང་། སྐུལ་འོད་ 495 nm ཉེ་འགྲམ་དང་འཕྲོ་འོད་ 585 nm ཉེ་འགྲམ་ཡིན། དེ་ནི་ནང་དུ་འཇུག་ཚད་ཀྱི་འགྱུར་བས་ཡོངས་ཀྱི་འོད་འཚེར་ཚད་བསྒྱུར་བའི་འོད་ཉམས་ལས་ཚུལ་ནང་སྤྱོད། TMRM དང་ TMRE ནི་ཆ་ཚང་བའི་ཕྲ་ཕུང་ལ་ནེ་ནོ་མོ་ལར་གྱི་ཚད་དམའ་བ་བསྣན་ཏེ། འོད་མི་ཉམས་པའི་ལས་ཚུལ་ནང་སྤྱོད་པར་འཚམ། དེའི་སྐབས་གློག་རྟིང་ཁྱད་ཉམས་པས་ཚོས་རྫས་ཕྱིར་གློད་པ་དང་། མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡའི་འོད་འཚེར་ཚད་མར་འབབ། ཚད་མཐོ་པོ་བསྣན་ན་རང་ཉིད་ཀྱིས་འོད་ཉམས་སུ་འཇུག་པ་བརྒྱུད་ནས་བརྡའི་ཁ་ཕྱོགས་ལྡོག་སྲིད། JC-1 ཡིས་ལྗང་མདོག་དང་དམར་མདོག་གི་བསྡུར་ཚད་སྟབས་བདེ་པོ་སྟེར་ཡང་། བསྣན་ཚད་དང་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡའི་འབོར་ཚད་ལ་བརྟེན་པས། གྲངས་ཚད་ཀྱི་ཞིབ་འཇུག་ལ་ཞིབ་ཚགས་པོར་ཚོད་འཛིན་བྱས་པའི་ TMRM ལས་ནུས་པ་ཞན། དགེ་སྐྱོན་དེ་དག་རྒྱ་ཁྱབ་ཏུ་སྤྱོད་པའི་ མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡའི་སྐྱི་མོའི་གློག་རྟིང་ཁྱད་ཚོར་འདྲེན་གྱི་ཕྱོགས་བསྡོམསནང་སྙིང་བསྡུས་བྱས་ཡོད།

མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོས་དངོས་སུ་སྤྱོད་པའི་གར་ཚད་དེ་རང་ལ་འོད་ཀྱི་འགལ་རྐྱེན་བཟོ། དེའི་ 600 ནས་ 665 nm ཉེ་འགྲམ་གྱི་འོད་འཇིབ་རླབས་ཁུལ་རྣམས་ཚོར་འདྲེན་གྱི་དམར་མདོག་འཕྲོ་འོད་དང་བརྩེགས་པས། ནང་ཚགས་ཤུགས་རྐྱེན། འོད་ཉམས་པ་དང་སྐུལ་འོད་འཇིབ་པ་ཚང་མ་འབྱུང་སྲིད། ཚོས་རྫས་དེ་ནི་ཚིལ་ལ་འདྲེས་སླ་བའི་གདངས་ཡོན་གྱི་ཨ་ཡོན་གཉིས་པ་ཞིག་ཀྱང་ཡིན་ཞིང་། དེ་རང་གི་ཁྱབ་ཚུལ་ཡང་ཚད་འཇལ་བྱེད་བཞིན་པའི་གློག་རྟིང་ཁྱད་དང་མཉམ་དུ་འགྱུར། སྲུང་ཐབས་ནི་ཚད་འཇལ་ཐབས་ལམ་མང་པོ་དང་སྟོང་དཔེ་སྤྱོད་པ་ཡིན། དེ་དག་ནི་ཚོར་འདྲེན་རྐྱང་པ། ཚོས་རྫས་རྐྱང་པ། ཚོར་འདྲེན་དང་ཚོས་རྫས་ཀྱི་གར་ཚད་རེ་རེ་མཉམ་བསྡེབས། ཀླད་ཀོར་གྱི་གཞི་འཛིན་དུ་ FCCP ཡིས་གློག་རྟིང་ཁྱད་ཆ་ཚང་ཉམས་སུ་འཇུག་པ་བཅས་ཡིན། ཡག་ཤོས་ལ་འོད་ཀྱི་ཁྱད་ཆོས་མི་འདྲ་བའི་ཚོར་འདྲེན་གཉིས་པ་ཞིག་ཀྱང་སྤྱོད། འདུས་ཚོགས་ III གཡོལ་བའི་ཞིབ་འཇུགགིས་དེའི་དཔེ་བཞག་སྟེ། antimycin དང་ myxothiazol གྱིས་བཀག་རྗེས་ safranine O དང་ TMRM གཉིས་ཀ་སྤྱད་ནས་སྐྱི་མོའི་གློག་རྟིང་ཁྱད་སླར་གསོའི་ཚོད་ལྟ་བསྐྱར་བྱས་པ་དང་། ངོ་བོའི་ཆ་ནས་འདྲ་བའི་སླར་གསོ་རྙེད། འོད་ཀྱི་བརྡ་སྟོན་གཅིག་ནི་སྣེ་མོ་ཙམ་ཡིན། རང་རྐྱ་བའི་བརྡ་སྟོན་གཉིས་ནི་དཔང་རྟགས་ཡིན།

དཔེ་དངོས་གྲ་སྒྲིག་གསུམ་དང་དྲི་བ་མི་འདྲ་བ་གསུམ།

ལོགས་སུ་བཏོན་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡ། སྐྱི་མོ་བརྟོལ་བའི་ཕྲ་ཕུང་དང་ཆ་ཚང་བའི་ཕྲ་ཕུང་ནི། བརྟག་དཔྱད་གཅིག་གི་ཕན་ཚུན་བརྗེ་རུང་བའི་ཚོར་ནུས་སྒྲིག་སྟངས་མིན། དེ་དག་ནི་ལས་འགྲོའི་རྩ་དོན་མི་འདྲ་བ་ལྡན་པའི་གོ་དོན་མི་འདྲ་བ་ཡིན།

ལོགས་སུ་བཏོན་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡས་གློག་རྡུལ་སྐྱེལ་འདྲེན་གྱི་ཕྲེང་བ། ནང་སྐྱི་དང་ནང་གཞིའི་ལས་སྒྲིག་རང་སོར་འཇོག་ཅིང་། ཕྲ་ཕུང་གི་ཕྱི་སྐྱི། ཕྲ་ཕུང་ནང་གཤེར་དང་དྲ་རྒྱའི་གྲུབ་ཚུལ་བཅས་བསལ། བསལ་བ་དེ་རང་དམིགས་ཡུལ་ཡིན། འགྱུར་གཞི། ADP དང་། འགོག་རྫས། ཚོས་རྫས་ཀྱི་གར་ཚད་བཅས་ཏག་ཏག་ངེས་འཛིན་བྱེད་ཐུབ་པས། ལས་ལམ་ངེས་གཏན་བྱེད་ཐུབ། དེའི་རིན་དོད་ནི་རང་བྱུང་གི་འགྱུར་གཞི་མཁོ་སྤྲོད། བརྡ་འཕྲིན་དང་མཁོ་ཚད་རྣམས་ཤོར་བ་དེ་ཡིན།

སྐྱི་མོ་བརྟོལ་བའི་ཕྲ་ཕུང་གིས་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡ་ཕྲ་ཕུང་གི་གྲུབ་ཚུལ་མང་ཆེ་བའི་ནང་རང་སོར་འཇོག་ཅིང་། ཁ་ཕྱེ་བའི་ཕྲ་ཕུང་ཕྱི་སྐྱི་བརྒྱུད་ནས་ཕྱི་ནས་བསྣན་པའི་འགྱུར་གཞི་དང་ ADP ནང་དུ་འཇུག་ཏུ་འཇུག དེ་དག་ནི་ཕྲ་ཕུང་གི་ཁོར་ཡུག་ནང་འགྱུར་གཞིའི་ལས་ལམ་གྱི་སྐྱོན་ངེས་འཛིན་བྱེད་པའི་ཡོ་བྱད་འཚམ་པོ་ཡིན། སྐྱི་མོ་བརྟོལ་དྲགས་ན་ཕྱི་སྐྱིར་གནོད་སྐྱོན་འབྱུང་བ་དང་། ཕྲ་ཕུང་ནང་གཤེར་གྱི་སྙོམས་སྒྲིག་ནུས་པ་བཀྲུས་ནས་ཤོར།

ཆ་ཚང་བའི་ཕྲ་ཕུང་གིས་ཚང་མ་རང་སོར་འཇོག དེ་དག་ནི་ཕྲ་ཕུང་ཕྱི་སྐྱིའི་བཀག་རྒྱ། ཕྲ་ཕུང་ནང་གཤེར་གྱི་བསྐྱར་འགྱུར་རྫས། ནང་བྱུང་འགྱུར་གཞིའི་སྐྱེལ་འདྲེན། མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡའི་དྲ་རྒྱ་དང་ ATP མཁོ་ཚད་བཅས་ཡིན། དེ་དག་ལུས་ཁམས་ཀྱི་གནས་ཚུལ་དང་ཉེ་ཤོས་ཡིན་ཞིང་། བྱེད་ཚུལ་ངེས་འཛིན་དང་ཐག་རིང་ཤོས་ཡིན། རྒྱུ་མཚན་ནི་ཚོས་རྫས་ནང་དུ་འཇུག་པ། བསྐྱར་འགྱུར་དང་ལོགས་སུ་འདུ་ཉར་བཅས་ཚང་མས་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡར་དངོས་སུ་ཕོག་པའི་ཚོས་རྫས་ཚད་གཏན་འབེབས་བྱེད་པས་ཡིན།

TEGDMA ཞིབ་འཇུག་གིས་རིམ་པ་གསུམ་ཀ་དམིགས་བསལ་གྱིས་སྤྱད། ཚོས་རྫས་ཀྱིས་གསོ་འགྱུར་དང་གློག་རྟིང་ཁྱད་སླར་གསོ་བྱེད་པ་བརྟག་ཆེད་ལོགས་སུ་བཏོན་པའི་ཀླད་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡ་སྤྱད། སྐྱོན་གྱི་གནས་ནི་འདུས་ཚོགས་ I དང་འབྲེལ་བའི་འགྱུར་གཞིའི་གསོ་འགྱུར་ཡིན་པ་ངེས་འཛིན་བྱེད་ཆེད་གཙོ་བོར་སྐྱི་མོ་བརྟོལ་བའི་སོའི་ནང་ཤའི་མ་ཕྲ་ཕུང་སྤྱད། དམའ་རུ་བཏང་བའི་གསོ་རླུང་ཟད་ཚད་ལ་ 2 uM ཚོས་རྫས་ཀྱིས་ཐེབས་པའི་ལུས་ཁམས་ཀྱི་བསྡོམས་འབྲས་བརྟག་ཆེད་ཆ་ཚང་བའི་མ་ཕྲ་ཕུང་སྤྱད། དཔེ་དངོས་གྲ་སྒྲིག་མི་འདྲ་བའི་དབར་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡའི་ཚད་འཇལ་གྲུབ་འབྲས་བསྡུར་བའི་ཀློག་པ་པོ་རྣམས་ལ། མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོས་དབུགས་ལེན་ཕྲེང་བ་བརྒྱུད་ནས་གློག་རྡུལ་ཇི་ལྟར་སྤོ་བའི་འབྲེལ་ཡོད་འགྲེལ་བཤད་རྩོམ་གྱིས་ལས་ལམ་གྱི་རྒྱབ་ལྗོངས་སྟོན། མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོའི་དབུགས་ལེན་ཞིབ་འཇུག་ཀློག་པའི་ལམ་སྟོན་གྱིས་བསྣན་ཚད་དང་འགོག་རྫས་ཀྱི་གཏན་ཚིགས་གསལ་བཤད་བྱེད།

གསོ་འགྱུར་དང་བསྐྱར་འགྱུར་གྱི་བྱེད་ནུས་ལྡན་པའི་ཚོས་རྫས་ལ་དགོས་པའི་ཚོད་འཛིན།

གསོ་འགྱུར་དང་བསྐྱར་འགྱུར་རེས་འཁོར་བྱེད་པའི་རྫས་ལ། རྒྱུན་ལྡན་གྱི་འགོག་རྫས་ལས་ཚོད་འཛིན་གྱི་ཐོ་གཞུང་རིང་བ་དགོས། རྒྱུ་མཚན་ནི་ཚོས་རྫས་རྐྱང་པའི་རྫས་འགྱུར་གྱིས་སྐྱེ་དངོས་ཀྱི་གནས་ཚུལ་དང་འདྲ་བའི་སྣང་ཚུལ་བཟོ་ཐུབ་པས་ཡིན།

དབུགས་ལེན་ཚད་འཇལ་ལ། ཚད་འཇལ་གྱི་རིམ་འགྱུར་བརྟག་ཆེད་བུ་ཕར་གཤེར་ཁུ་རྐྱང་པའི་ཚད་འཇལ་ཁང་། སྐྱེ་དངོས་རྒྱུ་ཆ་མེད་པའི་བུ་ཕར་གཤེར་ཁུ་དང་ཚོས་རྫས་མཉམ་པའི་ཚད་འཇལ་ཁང་། ཚོས་རྫས་དང་བརྟག་དཔྱད་ནང་ཡོད་པའི་ཕྲ་ཕུང་ཕྱིའི་བསྐྱར་འགྱུར་རྫས་གང་ཡིན་མཉམ་བསྡེབས་བཅས་བརྟག ཆ་ཚང་བའི་ཕྲ་ཕུང་ནང་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡ་མིན་པའི་གསོ་རླུང་ཟད་ཚད་ངེས་འཛིན་བྱེད་ཆེད་མཐའ་མར་ rotenone དང་ antimycin མཉམ་དུ་སྤྱོད། བསྐྱར་འགྱུར་བྱས་པའི་ཚོས་རྫས་ཀྱིས་གློག་རྡུལ་གསོ་རླུང་ལ་སྤྲད་དེ་ཧ་ཡི་ཌྲོ་ཇེན་པེ་རོག་སའིཌ་བཟོ་བ་བརྒྱུད་ནས་བསྐྱར་དུ་གསོ་འགྱུར་བྱེད་པ་ཡིད་ལ་འཇོག་དགོས། དེས་ན་གློག་རྡུལ་སྟེར་བྱེད་མེད་པའི་ཚོས་རྫས་རྐྱང་པའི་སྟོང་དཔེ་ཡིས། NADH ཡམ་ NADPH ཐོབ་པའི་སྐབས་སུ་འབྱུང་བའི་ཕྲ་ཕུང་མེད་པའི་གསོ་རླུང་ཟད་བྱེད་ཀྱི་ཚད་དམའ་རུ་ཚོད་དཔག་བྱེད།

ཧ་ཡི་ཌྲོ་ཇེན་པེ་རོག་སའིཌ་ལ། འདེམས་ནུས་མེད་པའི་ DCFDA ཚོས་རྫས་རྣམས་ལས། ཚད་སྒྲིག་བྱས་པའི་ Amplex UltraRed དང་ horseradish peroxidase མཉམ་དུ་སྤྱོད་པ་འདེམས། catalase ཡིས་ར་སྤྲོད་བྱེད་པ་དང་། ཚོས་རྫས་དེ་འོད་ཚོར་རྫས་ཡིན་པས་འོད་འཕོག་པ་ལ་བརྟེན་ཚད་བརྟག ཀླད་པའི་མི་ཊོ་ཀོན་ཌྲི་ཡའི་ཞིབ་འཇུག་གིས། 100 nM ཚོས་རྫས་ཙམ་ལ་པེ་རོག་སའིཌ་ཀྱི་བོཇ་ཁུར་ལྡབ་བཞི་ལས་མང་བ་འཕར་ཞིང་། སེལ་བའི་མྱུར་ཚད་དམའ་རུ་ཕྱིན་པ་རྙེད། པེ་རོག་སའིཌ་དེ་ནི་ superoxide བར་རྫས་མ་བརྒྱུད་པར་བསྐྱར་འགྱུར་བྱས་པའི་ཚོས་རྫས་ལས་ཐད་ཀར་བྱུང་། ཚོར་འདྲེན་འདེམས་པ་དང་འོད་ཀྱི་ཚོད་འཛིན་གྱི་ཞིབ་ཕྲ་ནི་ ཚོས་རྫས་ཀྱི་ཚོད་ལྟར་རྫས་འགྱུར་ནུས་པ་ལྡན་པའི་གསོ་རླུང་གི་རིགས་ཚད་འཇལ་བའི་འབྲེལ་ཡོད་རྩོམ་ནང་ཡོད། པེ་རོག་སའིཌ་ག་དུས་བརྡ་འཕྲིན་དང་ག་དུས་བོཇ་ཁུར་དུ་གྱུར་བའི་རྒྱ་ཆེ་བའི་དྲི་བ་ནི་ ཕྲ་ཕུང་གི་གསོ་འགྱུར་དང་བསྐྱར་འགྱུར་དོ་མཉམ་དང་གསོ་འགྱུར་འགོག་རྫས་ཀྱི་བཤད་ཚུལདང་མཉམ་དུ་གསལ་བཤད་བྱས་ཡོད།

ལས་ལམ་གྱི་བཤད་ཚུལ་ལ། འདུས་ཚོགས་ III ཡི་འགོག་རྫས་ཀྱི་གནས་གཉིས་ཀ་བརྟག་དགོས། དེ་ནི་ Qi གནས་ལ་ antimycin A དང་ Qo གནས་ལ་ myxothiazol ཡིན། དེ་དང་མཉམ་དུ་ cyanide སྤྱད་ནས་འདུས་ཚོགས་ IV ཡི་མཐའ་མཚམས་ཀྱང་བརྟག སྔ་མའི་བྱི་བའི་ཀླད་པའི་ཞིབ་འཇུག་ཅིག་གིས། ཚོས་རྫས་ཀྱིས་ rotenone ཡིས་བཀག་པའི་དབུགས་ལེན་སླར་གསོ་བྱས་ཀྱང་ antimycin གྱིས་བཀག་པ་སླར་གསོ་མ་བྱས་པ་སྙན་ཞུ་བྱས། ཕྱིས་ཀྱི་སྐྱེ་དངོས་རིགས་གསུམ་གྱི་ཞིབ་འཇུག་གིས། འགོག་རྫས་གཉིས་ཀའི་སྐབས་ཆ་ཤས་ཀྱི་སླར་གསོ་དང་ cytochrome c ཐད་ཀར་བསྐྱར་འགྱུར་བྱེད་པའི་དཔང་རྟགས་རྙེད། གཡོལ་ལམ་དེ་ལ་ཐག་ཆོད་པའི་གནས་ཚུལ་ཞིག་ཏུ་མི་ལྟ་བར། གྲངས་ཐོ་གསར་པ་དང་མཐུན་རུང་བ་ཞིག་ཏུ་ལྟ་དགོས། རྒྱུ་མཚན་ནི་ཚོས་རྫས་གར་ཚད། འགོག་རྫས་ཀྱི་གནས། འགྱུར་གཞིའི་གནས་སྟངས་དང་ཚོས་རྫས་ཀྱི་ཁྱབ་ཚུལ་ཚང་མས་མཐོང་བའི་ལམ་བུ་བསྒྱུར་བས་ཡིན།

བརྟག་དཔྱད་འདེམས་པའི་རེའུ་མིག

རེའུ་མིག་འདི་སྤྱད་ནས་དྲི་བ་ལ་གཞིགས་ཏེ་ཚད་འཇལ་འདེམས་པ་ལས། ཚད་འཇལ་ལ་གཞིགས་ཏེ་དྲི་བ་མ་འདེམས།

ཡིད་ཆེས་སྐྱེད་ཐུབ་པའི་བཤད་ཚུལ་གྱི་ཉུང་མཐའི་དགོས་མཁོ་ནི། ཚོས་རྫས་ཀྱི་གར་ཚད་གཅིག་མཚུངས་ 100 nM, 300 nM, 1 uM དང་ 2 uM སྤྱད་ནས། འཛག་ཐོན། ADP དང་། oligomycin། སྦྲེལ་འབྱེད་རྫས་བཅས་ཀྱི་ཆ་རྐྱེན་འོག་གསོ་རླུང་གི་རྒྱུན་ཚད་འཇལ་བ་དང་། ATP སྦྱོར་འགྲུབ་ཀྱི་མྱུར་ཚད། ཡག་ཤོས་ལ་ཚོར་འདྲེན་གཉིས་སྤྱད་པའི་སྐྱི་མོའི་གློག་རྟིང་ཁྱད། catalase དང་ཕྲ་ཕུང་མེད་པའི་ཚོད་འཛིན་ཚུད་པའི་ཚད་སྒྲིག་བྱས་པའི་པེ་རོག་སའིཌ་གློད་ཚད་བཅས་ཚད་འཇལ་བྱེད་པ་དེ་ཡིན། འབྲེལ་བ་ཅན་གྱི་ཚན་པ་ཆ་ཚང་སྙན་ཞུ་བྱེད་དགོས། དེ་ནི་གསོ་རླུང་གི་རྒྱུན་ཚད་དང་ ATP མྱུར་ཚད། གསོ་རླུང་རེར་ ATP ཚད། གློག་རྟིང་ཁྱད་དང་པེ་རོག་སའིཌ་བཅས་ཡིན། གྲངས་ཀ་དེ་དག་གང་རུང་གཅིག་པུ་ནི་དོན་སྙིང་འཚོལ་བཞིན་པའི་ཚད་འཇལ་ཞིག་ཙམ་ཡིན།