DNA དང་ RNA ཚོས་འགོད་ཀྱི་མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོ། སྤྱིན་གཟུགས་དང་སྐྱི་མའི་བེད་སྤྱོད།

སློབ་མ་ཞིག་གིས་ཨ་ག་རོས་སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་གློག་གིས་འབྱེད་པ་བྱས་ཏེ། མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོས་ཚོས་འགོད་བྱས་ཀྱང་། གསལ་བའི་ཐིག་ཤར་ཞིག་མཐོང་རྒྱུའི་རེ་བ་ཡོད་སར་ཅི་ཡང་མཐོང་མ་བྱུང་། ཉེ་འཁོར་གྱི་ལས་སྟེགས་སུ། འབུམ་རམས་པའི་རྗེས་ཀྱི་ཞིབ་འཇུག་པ་ཞིག་གིས་ཚོས་རྫས་སྔོན་པོའི་དམ་བུ་དེ་རང་སྤྱད་ནས་ Northern སྐྱི་མ་ཞིག་ལ་ཚོས་འགོད་བྱས་པས། སྐར་མ་གསུམ་ནང་རི་བོ་སོམ་གྱི་ཐིག་ཤར་གསལ་པོ་ཐོན་བྱུང་། སློབ་མས་སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་ཚོད་ལྟ་མ་འགྲུབ་པར་བསམས། སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་ཚོད་ལྟ་མ་འགྲུབ་པ་མ་ཡིན། ལས་ཀ་གཉིས་ཀྱི་དམིགས་ཡུལ་མི་འདྲ་བ་ཡིན་པས། ཚོས་རྫས་གཅིག་གིས་ལས་ཀ་དེ་གཉིས་ལ་ཚོར་ནུས་དང་། རྒྱབ་ལྗོངས་ཚོས་གཞི། རྗེས་ཀྱི་ལས་རིམ་གྱི་སྒྲིག་ལམ་བཅས་མི་འདྲ་བའི་ཐོག་ནས་ལན་སྟེར།

མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོས་ DNA ཚོས་འགོད་དང་ RNA ཚོས་འགོད་ཀྱི་རྫས་འགྱུར་གཞི་རྩ་གཅིག་ཡིན་ཡང་། དམིགས་ཡུལ་གཅིག་མིན། སྤྱིན་གཟུགས་ནང་། ཚོས་རྫས་ཀྱིས་བུ་ག་ཅན་གྱི་གཞི་རྒྱུའི་ནང་ཉིང་སྐྱུར་ག་ཚོད་ཡོད་པ་སྟོན། སྐྱི་མའི་ཐོག་ཏུ། དེས་སྤོ་འགོད་ལེགས་པར་འགྲུབ་ཡོད་མེད་དང་། རྒྱུག་ལམ་རྣམས་སུ་མ་དཔེ་སྙོམས་པར་བླུགས་ཡོད་མེད་སྟོན། ཁྱད་པར་དེ་གསལ་པོ་ཤེས་རྗེས། བྱ་ཐབས་དང་། ངོས་འཛིན་གྱི་ཚད། མཐུན་འཇུག་གི་ཚད་བཅས་གོ་བདེ་བར་འགྱུར།

ལན་མདོར་བསྡུས།

མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོ་ནི་ཁ་སྙོམས་གཟུགས་ཀྱི་ཕོ་གློག་ཚོས་རྫས་ཤིག་ཡིན། དེས་ཕོས་ཕེཊ་ལ་གློག་འཇགས་ཀྱི་འཐེན་ཤུགས། གཞི་རྡུལ་ཟུང་གི་བར་དུ་འཛུལ་འབྲེལ། འབུར་ཤུར་ཆུང་བར་འབྲེལ་བ་བཅས་མཉམ་དུ་བྱེད་པ་བརྒྱུད། ཉིང་སྐྱུར་དང་མཉམ་འབྲེལ་མིན་པའི་ལྡོག་རུང་འབྲེལ་བ་བྱེད། ལྡོག་རུང་བ་དེ་ནི་གནད་འགག་ཡིན། ཐིག་ཤར་རྣམས་ལ་ཚོས་འགོད་བྱས་ཏེ་མཐོང་རུང་འོད་འོག་མཐོང་བར་བྱས་ནས་ཟིན་ཐོ་བཟོ་ཐུབ། དེ་རྗེས་ཚོས་གཞི་བསལ་བའམ་གཙང་སྦྱངས་བྱས་ཏེ། འདྲ་བཤུས་བཟོ་བ་དང་། ཟུང་སྦྱོར། ཡང་བསྐྱར་འཚོལ་རྫས་ཀྱིས་བརྟག་པར་སྤྱོད་ཐུབ།

ཕྲེང་བ་གཉིས་ལྡན་གྱི་ DNA ལ་མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོས་ཨ་ག་རོས་སྤྱིན་གཟུགས་ནང་ཚོས་འགོད་བྱེད་པའི་ཚད་ལྡན་མྱུར་ཐབས་ནི། ཆུའི་ནང་ 0.02 percent w/v (200 micrograms per mL) སྤྱད་དེ། ཚོས་འགོད་ལ་སྐར་མ་ 15 ཙམ་དང་། ཆུས་ཚོས་གཞི་བསལ་བར་སྐར་མ་ 15 ཙམ་བཏང་ནས། འོད་དཀར་སྒྲོམ་ཐོག་ལྟ་བ་དེ་ཡིན། སྐྱི་མའི་ཆེད་དུ་སྲོལ་རྒྱུན་གྱི་ Northern blot སྦྱོར་ཐབས་ནི། pH 5.2 ཙམ་གྱི་སོ་ཌི་ཡམ་ཨ་སི་ཊེཊ་ནང་ཚོས་རྫས་ 0.02 ནས་ 0.04 percent སྤྱད་དེ། སྤོ་འགོད་དང་གནས་སུ་བརྟན་པོ་བཟོས་རྗེས་སྐར་མ་འགའ་ཚོས་འགོད་བྱེད། དེ་རྗེས་ཆུས་བཤལ་ནས། ཟུང་སྦྱོར་མ་བྱས་གོང་ཚོས་གཞི་ཡོངས་སུ་བསལ། ཚོར་ནུས་མཐོ་པོ་མེད། ཆ་རྐྱེན་ལེགས་པོའི་འོག་སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་ཐིག་ཤར་རེར་ nanograms བཅུ་ཕྲག་ནས་བརྒྱ་ཕྲག་དགོས་པ་དང་། ཚད་བཟུང་བའི་ལམ་སྟོན་ཁག་ཏུ་ 0.5 ནས་ 1 microgram ཞེས་བཀོད་ཡོད། དེ་ནི་ཨེ་ཐི་ཌི་ཡམ་བྲོ་མའིཌ་དང་ SYBR ཚོས་རྫས་ལས་གྲངས་རིམ་མང་པོས་མཐོ་བའི་མ་དཔེའི་འབོར་ཚད་ཡིན། སྐྱི་མའི་ཐོག་ཏུ་ཚོས་རྫས་ཀྱིས་གཙོ་བོ་འབོར་མང་བའི་རི་བོ་སོམ་གྱི་ RNA དང་བླུགས་པའི་རྒྱུ་ཆ་ཡོངས་སྟོན་པས། འདྲ་བཤུས་ RNA རེ་རེའི་ངོས་འཛིན་ཚད་གཅིག་གཏན་འཁེལ་བྱས་པ་ཕན་ཐོགས་ཅན་ཞིག་མེད། སྦྱོར་ཐབས་གང་རུང་ནང་སིལ་ཚོང་གི་ཁ་གསབ་ཐོན་རྫས་གཤེར་ཁུ་ཚབ་ཏུ་མ་སྤྱོད། ར་སྤྲོད་བྱས་པའི་བྱ་ཐབས་རྣམས་ཀྱིས་དབྱེ་ཞིབ་རིམ་པའི་ཚོས་རྫས་དང་། གྲུབ་ཆ་གཏན་འཁེལ་བའི་བརྟན་གཤེར། RNA ཡོད་སྐབས་ RNase མེད་པའི་ལག་ལེན་བཅས་གཞི་ལ་འཇོག

འབྲེལ་བ་ཇི་ལྟར་བྱེད་པ་དང་འཁྲུལ་བ་གང་དུ་བྱུང་སྲིད་པ།

ཕན་ཐོགས་ཅན་གྱི་དཔེ་དབྱིབས་འདིར་ཆ་ཤས་གསུམ་ཡོད། དང་པོ། ཕོ་གློག་ཁུར་ལྡན་གྱི་རིང་གཟུགས་མ་ལག་དེ་མོ་གློག་ཁུར་ལྡན་གྱི་ཕོས་ཕེཊ་རྩ་ཕྲེང་ལ་འཐེན་པ་ཡིན། འོད་རྣམ་དཔྱད་ཞིབ་ཀྱིས་ཚྭ་ཉུང་སྐབས་གློག་འཇགས་ཀྱི་ཆ་འདི་གཙོ་བོ་ཡིན་པ་རྙེད་ཡོད། དཔེ་དབྱིབས་བཟོ་བ་དང་འདུས་རྡུལ་གྱི་འགུལ་སྐྱོད་རིག་པས། ཕྲེང་བ་གཉིས་ལྡན་གྱི་ DNA ལ་གཞི་རྡུལ་བར་འཛུལ་འབྲེལ་དང་འབུར་ཤུར་ཆུང་བར་འབྲེལ་བ་གཉིས་ཀ་བརྟན་པོའི་རྣམ་པ་ཡིན་པ་སྟོན། དེ་ནི་མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོ་དང་ DNA འབྲེལ་བའི་འོད་རྣམ་ཞིབ་འཇུག་ནང་མདོར་བསྡུས་ཡོད། གཉིས་པ། GC ལ་འབྲེལ་བའི་འདེམས་ཕྱོགས་ཅུང་ཟད་ཡོད། མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོའི་བར་འཛུལ་འབྲེལ་བའི་འདེམས་ཕྱོགས་ཀྱི་ཞིབ་འཇུག་ནང་། དཔེ་དབྱིབས་ཀྱིས་ CpG དང་ GpC ཡི་རིམ་ཚིགས་ལ་ཕྱོགས་པ་དང་། ཚོད་ལྟས་ GC མང་བའི་ཕྲེང་ཟུང་ལ་འབྲེལ་བ་མང་བ་སྟོན། འོན་ཀྱང་ AT ཕྲེང་ཟུང་ལའང་འབྲེལ་བ་བྱེད། རྒྱུན་ལྡན་གྱི་ཚོས་འགོད་ནི་གོ་རིམ་བྱེ་བྲག་ལ་དམིགས་པ་མིན། གསུམ་པ། ཕྲེང་རྐྱང་ DNA དང་ RNA གཙོ་བོ་གློག་འཇགས་ཀྱི་འཐེན་ཤུགས་དང་། འབྲེལ་ཐུབ་པའི་གཞི་རྡུལ་དང་ཕྲེང་ཟུང་ཁུལ་གྱི་བརྩེགས་འབྲེལ་བརྒྱུད་འབྲེལ། དེས་ན་ཚོས་འགོད་ཀྱི་ཤུགས་ནི་རིང་ཚད་དང་། གོ་རིམ། གྲུབ་ཚུལ་གཉིས་པ་བཅས་ལ་བརྟེན་ནས་འགྱུར།

དེ་ལས་མཇུག་འབྲས་གཉིས་འབྱུང་། འབྲེལ་བ་དེ་མཉམ་འབྲེལ་མིན་པས། ཚོས་རྫས་ཆུས་བཤལ་ནས་འཐོན་འགྲོ། པོ་ལི་ཨ་ཀྲི་ལ་མའིཌ་ཀྱི་ཐིག་ཤར་རྣམས་ཆེད་དུ་བརྟན་འཇགས་མ་བྱས་ན་མྱུར་དུ་ཡལ་འགྲོ། རྒྱུན་ལྡན་གྱི་ཚོས་འགོད་གནས་སྐབས་ཙམ་ཡིན་པས། རྟག་ཏུ་བརྟན་འཇགས་བྱེད་པའི་ཆེད་དམིགས་བྱ་ཐབས་ཤིག་ཡོད། དེ་ནི་Soto དང་ Draper གྱི་ PAGE སྤྱིན་གཟུགས་སྐོར་གྱི་གསལ་བཤད་ནང་བཀོད་ཡོད། ཚོས་རྫས་དེ་འོད་ཚོར་སྐུལ་རྫས་ཡིན་པས། ཨོག་སི་ཇེན་ཡོད་སར་ཚོས་འགོད་བྱས་པའི་ DNA ལ་འོད་གསལ་པོ་ཡུན་རིང་ཕོག་ན། གྷུ་ཨ་ནིན་ལ་འཚོ་རླུང་འགྱུར་བ་བྱེད་ཐུབ་པ་དང་། མཐར་ཕྲེང་བར་གཅོད་རྨ་བཟོ་སྲིད། བྱེད་ཚུལ་དེ་མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོས་འོད་ཚོར་སྐུལ་བའི་གྷུ་ཨ་ནིན་འཚོ་རླུང་འགྱུར་བ་ཡི་ཞིབ་འཇུག་ནང་ཞིབ་ཕྲ་བཀོད་ཡོད། འོད་དཀར་འོག་ཡུན་ཐུང་ལྟ་བས། སྲོལ་རྒྱུན་གྱི་ཨེ་ཐི་ཌི་ཡམ་བྲོ་མའིཌ་ལས་རིམ་ནང་གི་ཤེས་གསལ་ UV གནོད་པ་སྤོང་ཐུབ། རྒྱུ་ཆ་སླར་ལེན་གྱི་ཆེད་དུ་འདི་ནི་དངོས་ཡོད་ཀྱི་ཁྱད་ཡོན་ཡིན། མཐོང་རུང་འོད་ནི་འཇམ་པ་ཡིན་ཡང་གནོད་པ་མེད་པ་མིན། DNA འདྲ་བཤུས་བཟོ་རྒྱུ་ཡིན་ན་འོད་འཕྲོ་ཡུན་ཐུང་ངུ་བྱེད། དེའི་ཉེན་བརྡའི་རྒྱབ་ཀྱི་འོད་རྫས་རིག་པ་རྒྱ་ཆེ་བ་ཤེས་འདོད་ན། མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོའི་འོད་རྫས་རིག་པའི་ལམ་གཉིས་ལ་གཟིགས། འཚོ་རླུང་འགྱུར་བའི་རྣམ་པ་འབྲེལ་ཐུབ་ཀྱང་། བསྐྱུར་བའི་རྣམ་པ་འབྲེལ་མི་ཐུབ་པའི་རྒྱུ་མཚན་འགྲེལ་བའི་འཚོ་འགྱུར་–བསྐྱུར་བའི་ཟུང་དང་གློག་ཁུར་གནས་སྟངས་སྐོར་ལ། མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོའི་གྲུབ་ཚུལ་དང་ཁྱད་ཆོས་ཀྱི་རྫས་རིག་པ་ལ་གཟིགས།

ལས་ཀ་དང་པོ། སྤྱིན་གཟུགས་ནང་ཚོས་འགོད།

སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་ཚོས་འགོད་ཀྱིས་དྲི་བ་གཅིག་ལ་ལན་སྟེར། ཐིག་ཤར་འདིའི་ནང་མིག་གིས་མཐོང་ཐུབ་པའི་ཉིང་སྐྱུར་འབོར་ཚད་འདང་ངེས་ཡོད་དམ། ཨ་ག་རོས་ནང་གི་ཕྲེང་བ་གཉིས་ལྡན་ DNA ནི་ཞིབ་འཇུག་གསལ་ཤོས་བྱས་པའི་གནས་ཚུལ་ཡིན། Flores དང་ལས་རོགས་ཚོའི་ཐོག་མའི་མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོའི་སྤྱིན་གཟུགས་བྱ་ཐབས་ཀྱིས་ 1 percent ཨ་ག་རོས་ཐོག་ 0.02 percent མྱུར་ཐབས་ར་སྤྲོད་བྱས་པ་དང་། དེ་རྗེས་རྒྱུ་ཆ་སླར་ལེན་དང་འདྲ་བཤུས་བཟོ་བ་ལེགས་པར་འགྲུབ་པ་སྟོན་ཡོད། མཁོ་སྤྲོད་པའི་བྱ་ཐབས་དེ་རང་IBI Scientific གི་མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོའི་ཐོན་རྫས་ཤོག་ངོས་ཐོག་ཏུའང་ཡོད། དེར་ 0.04 percent སྐྱི་མའི་སྦྱོར་ཐབས་དང་སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་མྱུར་ཐབས་མཉམ་དུ་བཀོད་ཡོད།

ལག་ལེན་གྱི་ལས་རིམ།

1. སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་གློག་གིས་འབྱེད་པ་རྒྱུན་ལྡན་ལྟར་བྱེད། བསྒྱུར་བའི་བྱ་ཐབས་ཤིག་གི་སྤོ་འགོད་དམ་འབྱེད་གསལ་ནུས་པ་ར་སྤྲོད་བྱས་མེད་ན། གློག་གིས་འབྱེད་པའི་རྗེས་སུ་ཚོས་འགོད་བྱེད་པ་ལས་དེའི་རིང་མ་བྱེད།
2. རླངས་བསྡུས་ཆུའི་ནང་གི་ 0.02 percent w/v མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོར་སྐར་མ་ 15 ཙམ་སྦངས་ནས། དལ་བུར་སྒུལ།
3. ཆུ་ཐེངས་འགའ་བརྗེ་བཞིན་བསྡོམས་སྐར་མ་ 15 ཙམ་ཚོས་གཞི་བསལ་ཏེ། གཞི་རྒྱུའི་རྒྱབ་ལྗོངས་ཚོས་གཞི་ཉུང་དུ་སོང་ནས་ཐིག་ཤར་གསལ་དུ་ཐོན་པར་བྱེད།
4. འོད་དཀར་འཕྲོ་ཆས་ཐོག་མྱུར་དུ་པར་ལེན།

ཨ་ག་རོས་དང་པོ་ལི་ཨ་ཀྲི་ལ་མའིཌ་ཀྱི་སྤྱོད་ཚུལ་མི་འདྲ། ཨ་ག་རོས་ཀྱིས་གཞི་རྒྱུའི་ནང་ཚོས་རྫས་ཉར་བས། ཚོས་གཞི་བསལ་བ་ནི་ལས་རིམ་འགོར་ཤོས་ཡིན། སྲབ་པའི་པོ་ལི་ཨ་ཀྲི་ལ་མའིཌ་སྤྱིན་གཟུགས་ལ་ཚོས་མྱུར་དུ་འགོད་ཀྱང་། ཚོས་རྫས་ཀྱང་མྱུར་དུ་འཐོན་འགྲོ། དེས་རྒྱུ་ཆ་སླར་ལེན་ཆེད་གཅོད་ལེན་ལ་ཕན་ཐོགས་ཡོད་ཀྱང་། ཡུན་རིང་གི་ཟིན་ཐོ་ཉར་བར་མི་ཕན། གཏན་འཁེལ་བྱས་པའི་ Current Protocols ལུགས་ཀྱི་ PAGE བྱ་ཐབས་ལྟར། པོ་ལི་ཨ་ཀྲི་ལ་མའིཌ་ནང་གི་བཅོས་བཟོས་ཨོ་ལི་གོ་ནུའུ་ཀླི་ཨོ་ཊའིཌ་རྣམས་ 0.02 percent སྦྱོར་ཐབས་དེ་རང་དང་ཆུས་ཡང་ཡང་བཤལ་བ་བརྒྱུད་སྐར་མ་ 20 ནས་ 30 ནང་གནས་ས་ངོས་འཛིན་ཐུབ། རྒྱུ་ཆ་སླར་ལེན་གྱི་ཨོ་ལི་གོ་རྣམས་ལ། སླ་པོའི་ TBE ནང་ 0.0002 percent ཙམ་གྱི་ཧ་ཅང་སླ་པོའི་བྱ་ཐབས་སྤྱད་དེ་ཆུ་ཚོད་འགའ་བཏང་བའི་སྙན་ཞུ་ཡོད་ཀྱང་། དཔང་རྟགས་ཀྱི་གཞི་ཉམས་ཞན་ཡིན།

DNA དང་ RNA ཡི་ཁྱད་པར་གལ་ཆེ། ཕྲེང་བ་གཉིས་ལྡན་ DNA ཡིས་གྲུབ་ཚུལ་ལ་བརྟེན་པའི་འབྲེལ་བ་ཤུགས་ཆེ་ཤོས་བྱེད། RNA དང་ཕྲེང་རྐྱང་ DNA ལ་ཚོས་འགོད་ཐུབ་ཀྱང་། ཤུགས་ཞན་པ་དང་སྔོན་དཔག་བྱེད་དཀའ་བ་ཡིན། ཕོར་མལ་ཌི་ཧའིཌ་ཨ་ག་རོས་ RNA སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་ཐད། ཚོད་ལྟ་ཁང་མང་ཆེ་བས་སྤྱིན་གཟུགས་ནང་སྔོན་པོས་ཚོས་འགོད་མི་བྱེད་པར། ཐོག་མར་ RNA སྐྱི་མར་སྤོས་ནས་དེར་ཚོས་འགོད་བྱེད། སྤོ་འགོད་དེས་སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་བརྡ་རྟགས་ཞན་པའི་ཚབ་ཏུ། སྐྱི་མའི་བརྡ་རྟགས་གསལ་བ་དང་མ་དཔེ་བླུགས་པའི་ཟིན་ཐོ་ཐོབ་པར་བྱེད།

ལས་ཀ་གཉིས་པ། སྐྱི་མའི་ཐོག་ཚོས་འགོད།

སྐྱི་མའི་ཚོས་འགོད་ཀྱིས་དྲི་བ་མི་འདྲ་བ་ཞིག་ལ་ལན་སྟེར། སྤོ་འགོད་ལེགས་པར་འགྲུབ་ཡོད་དམ། རྒྱུག་ལམ་རྣམས་ཕན་ཚུན་བསྡུར་རུང་ཡིན་ནམ། སྲོལ་རྒྱུན་གྱི་བེད་སྤྱོད་ནི་ Herrin དང་ Schmidt གྱི་ལྡོག་རུང་ Northern blot ཚོས་འགོད་ཡིན། ཐོག་མའི་བྱ་ཐབས་སུ། pH 5.0 ཡི་ 50 mM སོ་ཌི་ཡམ་ཨ་སི་ཊེཊ་ནང་ཚོས་རྫས་ 0.04 percent སྤྱད་དེ་སྐར་མ་ 2 ནས་ 3 ཚོས་འགོད་བྱས་ནས་ཆུས་བཤལ། ཟུང་སྦྱོར་མ་བྱས་གོང་ SSPE ནང་གི་སླ་པོའི་ SDS ཡིས་ཚོས་རྫས་བསལ་ཐུབ།

དེང་སང་རྒྱ་ཁྱབ་ཏུ་སྤྱོད་པའི་བྱ་ཐབས་ཀྱི་ལས་རིམ་གཤམ་གསལ་ལྟར་ཡིན།

1. RNA འམ་རང་བཞིན་བསྒྱུར་བའི་ DNA ནའི་ལོན་ནམ་ནའི་ཊྲོ་སེ་ལུ་ལོས་ཐོག་སྤོ་འགོད་བྱེད། དེ་རྗེས་ UV ཕན་ཚུན་འབྲེལ་སྦྱོར་རམ་སྲོ་བ་བརྒྱུད་གནས་སུ་བརྟན་པོ་བཟོས་ཏེ། ཚོས་འགོད་སྐབས་མ་དཔེ་མི་ཤོར་བར་བྱེད།
2. ངེས་པར་མི་དགོས་ཀྱང་རྒྱུན་དུ་བྱེད་པ་ཞིག་ནི། སྐྱི་མ་ 5 percent ཨ་སི་ཊིག་སྐྱུར་ནང་སྐར་མ་ 15 ཙམ་བརླན་པ་དེ་ཡིན།
3. pH 5.2 ཙམ་གྱི་ 0.3 ནས་ 0.5 M སོ་ཌི་ཡམ་ཨ་སི་ཊེཊ་ནང་། མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོ་ 0.02 ནས་ 0.04 percent སྤྱད་དེ་སྐར་མ་ 5 ནས་ 10 ཚོས་འགོད་བྱེད།
4. ཆུས་བཤལ་ནས་སྐར་མ་ 5 ནས་ 15 ཚོས་གཞི་བསལ། ཟིན་ཐོ་བཟོས་རྗེས། ཟུང་སྦྱོར་མ་བྱས་གོང་ལྷག་པའི་ཚོས་རྫས་བསལ།

Northern ལས་ཀར་ཕོ་གློག་ཁུར་ལྡན་གྱི་ནའི་ལོན་གཙོ་བོ་སྤྱོད། ནའི་ཊྲོ་སེ་ལུ་ལོས་ལའང་ཨ་སི་ཊིག་སྐྱུར་དང་ཨ་སི་ཊེཊ་ཀྱི་ལས་རིམ་དེ་རང་སྤྱད་ན་འགྲིག པར་རིས་དེ་སྤོ་འགོད་གཏན་འཁེལ་བྱེད་པ་དང་། 28S དང་ 18S ཐིག་ཤར་བསྡུར་བ་ (འབུ་ཕྲའི་ RNA ཡིན་ན་ 23S དང་ 16S)། ཚད་རིམ་མ་དཔེ་དང་ཚད་གཞི་ལ་རྟགས་འགོད་པ། RNA ཡོངས་ཀྱི་ཚད་སྙོམས་ཟིན་ཐོ་རགས་པ་ཉར་བ་བཅས་ལ་སྤྱོད། པར་སྐྲུན་བྱས་པའི་ Northern བྱ་ཐབས་ཁག་གིས་མ་དཔེ་བླུགས་པ་ཞིབ་བཤེར་ཆེད་ཚོས་འགོད་བྱས་པའི་རི་བོ་སོམ་ཐིག་ཤར་གྱི་འབོར་ཚད་འཇལ། དེའི་ནང་ཚད་སྙོམས་ཆེད་མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོའི་རི་བོ་སོམ་ཐིག་ཤར་སྤྱད་པ་ཡི་འོ་མའི་ཚན་རིག་ཞིབ་འཇུག་ཀྱང་ཚུད། Southern སྐྱི་མའང་ཐབས་དེ་ལྟར་མཐོང་བར་བྱེད་ཐུབ། འོན་ཀྱང་ཚོས་རྫས་དེ་ Northern གྱི་མ་དཔེ་བླུགས་པ་དང་སྤོ་འགོད་ཞིབ་བཤེར་ཆེད་དུ་སྤྱོད་པ་ཧ་ཅང་རྒྱུགས་ཆེ་བ་ཡིན། Southern DNA སྤོ་འགོད་མ་བྱས་གོང་རང་བཞིན་བསྒྱུར་བས། སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་ཚོར་ནུས་གྲངས་ཐོ་དེ་རང་ཐད་ཀར་སྤྱོད་མི་རུང་།

ངོས་འཛིན་ཚད་དང་རྒྱབ་ལྗོངས་ཚོས་གཞི། སྔོན་པོ་གང་དུ་ཞན་པ།

གཤམ་གྱི་བསྡུར་བ་ནི་ཆེད་དུ་ཚད་རགས་པའི་ཐོག་བཀོད་པ་ཡིན། ཚོས་རྫས་ཀྱི་ནུས་པ་ནི་སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་བརྒྱ་ཆ་དང་། ཐིག་ཤར་གྱི་ཞེང་ཚད། འོད་རིག་སྒྲིག་ཆས། ཚོས་གཞི་བསལ་བའི་ལག་ལེན་བཅས་ལ་བརྟེན། གྲངས་ཀ་རེ་རེ་གྲངས་རིམ་ཙམ་དུ་བརྩི་བ་ལས་གཏན་འཁེལ་ཚད་གཞི་རུ་མ་བརྩི།

རྒྱབ་ལྗོངས་ཚོས་གཞིའི་ཚོད་འཛིན་གྱིས་བརྡ་རྟགས་ཞན་པ་དེ་སྤྱོད་རུང་ཡིན་མིན་ཐག་གཅོད་བྱེད། འབྲེལ་མེད་ཚོས་རྫས་ཀྱི་ཁ་དོག་ཧ་ཅང་སྟུག་པས། འབྲེལ་ཡོད་ཚོས་རྫས་མ་བསལ་བར་འབྲེལ་མེད་ཚོས་རྫས་བསལ་བ་ལས་ཁ་དོག་གི་ཁྱད་པར་ཐོབ། ཚོས་རྫས་ཀྱི་གར་ཚད་ཆེ་རུ་བཏང་བས་ཚོར་ནུས་འཕར་བ་ཧ་ཅང་དཀོན། དེས་གཙོ་བོ་ཚོས་གཞི་བསལ་བའི་དུས་ཡུན་རིང་དུ་གཏོང་། དངོས་སུ་སྤྱོད་རྒྱུའི་སྤྱིན་གཟུགས་དང་། སྐྱི་མ། པར་ཆས་དེ་རང་ཐོག་སླ་བཟོའི་རིམ་པ་ཚོད་ལྟ་བྱས་ཏེ། བསྡོམས་པའི་ཁ་དོག་སྟུག་ཚད་དེ་བླུགས་པའི་འབོར་ཚད་དང་བསྡུར་ཚད་མཐུན་པའི་ཁྱབ་ཚད་ཁོ་ན་སྤྱོད། མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོས་མ་དཔེ་བླུགས་པའི་འབོར་ཚད་ཕྱེད་ཙམ་འཇལ་བའི་ཚད་སྙོམས་ལ་རོགས་བྱེད། འོན་ཀྱང་སྐྱི་མའི་ཉར་ནུས་དང་། སྤོ་འགོད་ནུས་ཚད། འབྲེལ་བ་ཚད་ལོན་པ། ཚོས་གཞི་བསལ་བ་བཅས་རྒྱུག་ལམ་རེ་རེར་མི་འདྲ་བས། དེ་ནི་འཇལ་ཐུབ་པའི་འབོར་ཚད་ཁྱབ་ཚད་རྒྱ་ཆེ་བའི་ཚད་འཇལ་ཚོད་ལྟ་ཞིག་མིན།

མཐུན་འཇུག་གི་ཚད། ཚོས་འགོད་རྗེས་ཅི་ཞིག་སྤྱོད་རུང་གནས་པ།

སྔོན་པོས་ཚོས་འགོད་བྱས་རྗེས་འདྲ་བཤུས་བཟོ་ཐུབ་པ་སྟོན་ཡོད། Flores དང་ལས་རོགས་ཚོས་ཚོས་འགོད་བྱས་པའི་ཨ་ག་རོས་ཐིག་ཤར་གཅོད་ལེན་བྱས་ཏེ། DNA སླར་བླངས་ནས་སྦྲེལ་སྦྱོར་དང་ཕྲ་ཕུང་ནང་འཇུག་པ་བྱས། ཁོང་ཚོས་ཨེ་ཐི་ཌི་ཡམ་བྲོ་མའིཌ་དང་ UV སྤྱད་པའི་རྗེས་ལས་འདྲ་བཤུས་བཟོ་བ་ལེགས་པ་བྱུང་བར་སྙན་ཞུ་བྱས། རྒྱུ་མཚན་ཡིན་སྲིད་པ་ནི་འོད་ཀྱི་གནོད་པ་ཉུང་བ་དེ་ཡིན་པ་ལས། ཚོས་རྫས་རང་གིས་ཕན་ནུས་བྱས་པ་མིན། འོད་དཀར་ཕོག་པའི་དུས་ཡུན་ཐུང་ངུ་བྱས་ནས། སླར་བླངས་པའི་ DNA རྒྱུན་ལྡན་གྱི་སྤྱིན་གཟུགས་ནས་འདོན་ལེན་གཙང་སྦྱངས་བརྒྱུད་གཙང་མ་བཟོ།

PCR དང་གོ་རིམ་འཇལ་བའི་དཔང་རྟགས་དེ་ལས་ཉུང་། ལྷག་པའི་ཚོས་རྫས་ཉིང་སྐྱུར་ལ་འབྲེལ་བས། སྨིན་རྫས་ཀྱི་ལས་རིམ་མ་བྱས་གོང་ཚོས་གཞི་བསལ་ནས་གཙང་སྦྱངས་བྱེད། སྔོན་པོས་ཚོས་འགོད་བྱས་པའི་སྤྱིན་གཟུགས་ནས་ཚུལ་མཐུན་གཙང་སྦྱངས་བྱས་པའི་ DNA སྤྱོད་རུང་ཡིན་པའི་རེ་བ་ཡོད། འོན་ཀྱང་ཚོས་རྫས་ཐད་ཀར་ལྷག་འདྲེས་བྱུང་སྐབས། པོ་ལི་མེ་རེས་དང་གོ་རིམ་འཇལ་བའི་རྫས་འགྱུར་བྱ་ཐབས་མི་འདྲ་བས་ག་ཚོད་བཟོད་ཐུབ་པ་ལེགས་པར་ཚད་འཇལ་བྱས་མེད། བཟོད་ཐུབ་པར་སྔོན་དཔག་མ་བྱེད།

Blot ཟུང་སྦྱོར་དང་མཐུན་འཇུག་བྱེད་པར་ལས་རིམ་གྱི་གོ་རིམ་དམ་པོ་དགོས། སྤོ་འགོད། གནས་སུ་བརྟན་པོ་བཟོ་བ། ཚོས་འགོད། ཟིན་ཐོ་བཟོ་བ། ཚོས་གཞི་བསལ་བ། ཟུང་སྦྱོར་བྱེད་པ་བཅས་ཡིན། གོ་རིམ་དེ་ནི་ Herrin དང་ Schmidt གྱི་འཆར་འགོད་ཡིན། སྤོ་འགོད་མ་བྱས་གོང་ཚོས་འགོད་བྱེད་པའམ། ཚོས་གཞི་བསལ་བ་མི་བྱེད་པ་ནི་བྱ་ཐབས་གཞན་ཞིག་ཡིན་པས་རང་གི་ར་སྤྲོད་དགོས། ཚོས་རྫས་བསལ་རྗེས། ཚད་ལྡན་འཚོལ་རྫས་བསལ་བ་དང་ཡང་བསྐྱར་འཚོལ་རྫས་ཀྱིས་བརྟག་པ་རྒྱུན་ལྡན་ལྟར་བྱེད་ཐུབ། ཚོས་རྫས་རིགས་དེ་རང་གིས་ཕྲ་ཕུང་རིམ་པར་ཚོས་འགོད་བྱེད་པ་དང་། བརྟན་འཇགས་བྱས་པའི་སྲབ་ཤུན་གྱི་རིགས་པ་ཕྲ་ཕུང་གསོན་པོའི་བྱ་ཐབས་ལ་སྤྱོད་མི་རུང་བའི་རྒྱུ་མཚན་སྐོར་ལ། ཕྲ་མཐོང་ཚོས་འགོད་ཀྱི་པར་རིས་དེབ་ལ་གཟིགས།

རྟག་ཏུ་བརྟན་འཇགས་བྱེད་པའི་བྱ་ཐབས་མ་སྤྱད་ན། རྒྱུ་ཆ་སླར་ལེན་གྱི་ཨ་ག་རོས་དང་། སྔོན་པོས་གནས་ས་ངོས་འཛིན་བྱས་པའི་ PAGE ཨོ་ལི་གོ་གཉིས་ཀར་ཐིག་ཤར་གཅོད་ལེན་བྱེད་ཐུབ། ལྡོག་རུང་འབྲེལ་རྫས་ཤིག་ཡིན་པས། ཚོས་གཞི་བསལ་རྗེས་གློག་གིས་འདོན་ལེན་བྱེད་པ་རྫས་རིག་པའི་ཐོག་ནས་འགྲིག་སྲིད། འོན་ཀྱང་མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོ་ལ་ཆེད་དམིགས་པའི་ཚོད་འཛིན་ཅན་གྱི་ཐོབ་ཚད་གཞི་གྲངས་དཀོན་པོ་ཡིན། འདོན་ལེན་རྗེས་ཚྭ་བསལ་བའམ་འབབ་རྫས་བཟོ།

ཡང་ཡང་འབྱུང་བའི་མ་འགྲུབ་པའི་གནས་ཚུལ།

སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་ཐིག་ཤར་མི་གསལ་བ་ནི་རྒྱུན་དུ་ཁ་དོག་གིས་འཇལ་བའི་ཚོས་རྫས་ལ་དགོས་པའི་གདོས་ཚད་མ་འདང་བའི་རྟགས་ཡིན། ལྷག་པར་དུ་དམིགས་རྒྱུ་ཕྲེང་རྐྱང་ཐུང་བའམ་ RNA ཡིན་སྐབས་དེ་ལྟར་ཡིན། མ་དཔེ་མང་དུ་བླུགས་པ་དང་། ཚོས་རྫས་གསར་པ་སྤྱོད་པ། གར་ཚད་མཐོ་རུ་མ་བཏང་གོང་ཚོས་འགོད་ཀྱི་དུས་ཡུན་རིང་དུ་གཏོང་བ། ཚོས་གཞི་བསལ་བ་སྔ་ཙམ་མཚམས་འཇོག་པ་བཅས་བྱེད། ཁ་དོག་གི་ཁྱད་པར་མེད་པར་སྤྱིན་གཟུགས་ཡོངས་སྔོན་པོ་སྟུག་པོ་ཆགས་པ་ནི། རྒྱུན་དུ་ཚོས་འགོད་ཚད་ལས་བརྒལ་བའམ་ཆུ་བརྗེ་ཐེངས་མ་འདང་བ་ཡིན། PAGE ཐིག་ཤར་ཡལ་བ་ནི་རྫས་འགྱུར་གྱི་རང་བཞིན་ལྟར་འབྱུང་བ་ཡིན་པ་ལས་ཚོས་འགོད་མ་འགྲུབ་པ་མིན། མྱུར་དུ་པར་ལེན། སྐྱི་མའི་རྒྱབ་ལྗོངས་ཚོས་གཞི་མི་སྙོམས་པ་ནི། ལྟེབ་གཉེར་དང་། ལྒང་བུ། མཛུབ་རྗེས། སྒུལ་བ་མི་སྙོམས་པ། སྤོ་འགོད་ཁུལ་རེར་མི་སྙོམས་པ་བཅས་སྟོན། ཟུང་སྦྱོར་གྱི་ཚོད་འཛིན་མ་དཔེ་མེད་པར་དེ་མ་དཔེ་བླུགས་པ་མི་མཉམ་པར་མ་བརྩི། རི་བོ་སོམ་གྱི་ཐིག་ཤར་འཁྱར་བ་དང་ཞན་པའི་རྣམ་པས་རྒྱུ་ཆ་ཞིག་རལ་བ་སྟོན་སྲིད། འོན་ཀྱང་སྤོ་འགོད་ཆ་ཚང་མ་འགྲུབ་པའམ། RNA ཡོངས་ཀྱི་འབོར་ཚད་མ་འདང་བ་ (རྒྱུན་ལྡན་གྱི་རྒྱུག་ལམ་རེར་ micrograms འགའ་ནས་བཅུ་ཕྲག་བླུགས་པ་ཡིན)། ཚོས་གཞི་ཚད་ལས་བརྒལ་བར་བསལ་བ་བཅས་ཀྱང་ཡིན་སྲིད། ཚོས་རྫས་ཀྱིས་འབོར་མང་བའི་རི་བོ་སོམ་གྱི་ RNA སྟོན། དེས་འདྲ་བཤུས་ RNA བྱེ་བྲག་ཅིག་མི་སྟོན། ལས་ཀ་དེ་ནི་འཚོལ་རྫས་ཀྱི་ལས་འགན་ཡིན།

བཤད་པ་ཚད་ལས་མ་བརྒལ་བའི་བདེ་འཇགས་དང་ལག་ལེན།

མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོ་ནི་ཨེ་ཐི་ཌི་ཡམ་བྲོ་མའིཌ་ལས་ལག་ལེན་བྱེད་བདེ་ཡང་། གནོད་པ་མེད་པ་མིན། ད་ལྟའི་ MilliporeSigma བདེ་འཇགས་གཞི་གྲངས་ཤོག་བུས་ཚོས་རྫས་དེ་ཁ་ནས་མིད་པའི་མྱུར་དུག་རིགས་ Category 4 རུ་དབྱེ་ཡོད་དེ། མིད་ན་གནོད་པ་ཡོད། Sigma-Aldrich གི་མེ་ཐི་ལིན་སྔོན་པོའི་ SDS་ལྟར། ཆོག་མཆན་ཐོབ་པའི་སྙིགས་རོ་སྒྲིག་གཅོད་ལམ་བརྒྱུད་དོར་དགོས། ཨེ་ཐི་ཌི་ཡམ་བྲོ་མའིཌ་ལ་རྒྱུད་འཛིན་རྒྱུ་ཆར་དུག་གནོད་ཀྱི་ཉེན་བརྡ་དེ་ལས་ཤུགས་ཆེ་བ་ཡོད། དེའི་Sigma-Aldrich ཨེ་ཐི་ཌི་ཡམ་བྲོ་མའིཌ་ SDS་ནང་སྐྱེ་འཕེལ་ཕྲ་ཕུང་ལ་གནོད་སྲིད་པའི་དོགས་གཞི་ཚུད་ཡོད། Thermo Fisher གྱི་ཉིང་སྐྱུར་ཚོས་རྫས་ལམ་སྟོན་ནང་བཀོད་པ་ལྟར། དེའི་སྤྱིན་གཟུགས་དང་གཤེར་ཁུ་རྣམས་རྒྱུན་དུ་ཉེན་ཁ་ཅན་གྱི་རྫས་འགྱུར་སྙིགས་རོ་རུ་ལོགས་སུ་དབྱེ། གཉིས་ཀའི་ཆེད་དུ་ SDS དང་ལས་ཁུངས་ཀྱི་སྒྲིག་ལམ་ལ་བསྟུན། ཚོས་རྫས་སྐམ་པོ་དམ་པོར་ཁ་བརྒྱབ་ནས་སྐམ་པོར་ཉར། ལག་ལེན་གྱི་ཚོས་རྫས་བྱ་ཐབས་ཀྱིས་ཆོག་པའི་ཚད་ནང་ཁོ་ན་བསྐྱར་སྤྱོད་བྱེད། ཚོས་འགོད་བྱས་པའི་སྐྱི་མ་འཚག་ཤོག་གི་བར་དུ་སྐམ་པོར་ཉར། ཐིག་ཤར་རྣམས་ཁྱབ་ནས་ཡལ་མ་སོང་གོང་སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱི་པར་ལེན།

ཚོད་ལྟའི་ལས་སྟེགས་ཐོག་གི་ཚིག་འདི་དྲན་པར་བྱེད། སྤྱིན་གཟུགས་ཀྱིས་མ་དཔེ་འབོར་མང་པོ་བླུགས་སྐབས་འོད་དཀར་འོག་མཐོང་ཐུབ་མིན་བརྟག སྐྱི་མས་འཚོལ་རྫས་ཀྱིས་ཚོར་ནུས་མཐོ་བའི་ལས་ཀ་མ་བྱས་གོང་། སྤོ་འགོད་དང་མ་དཔེ་བླུགས་པ་བརྟག ཚོས་རྫས་གཅིག་གིས་ལས་ཀ་གཉིས་ཀ་བྱེད་ཐུབ་ཀྱང་། ཚོར་ནུས་ཚད་འབྲིང་དང་། ལྡོག་རུང་འབྲེལ་བ། ལས་རིམ་གྱི་གོ་རིམ་དམ་པོ་བཅས་ལྡན།