Àlàyé àwọn àwọ̀ methylene blue alákálì ti Loeffler àti èyí aláwọ̀ púpọ̀

Ìgò mẹ́ta lè wà lẹ́gbẹ̀ẹ́ ara wọn lórí tábìlì fífi àwọ̀ kun àpẹẹrẹ, tí àkọlé orí ọkọọkan sì ń tọ́ka sí irú methylene blue kan. Ọ̀kan sọ pé methylene blue nínú omi 1%. Ọ̀kan sọ pé methylene blue alákálì ti Loeffler. Ọ̀kan sọ pé methylene blue aláwọ̀ púpọ̀. Òṣìṣẹ́ tí ọwọ́ rẹ̀ dí nawọ́ sí èyíkéyìí tí ó sún mọ́ ọn jù. Àpẹẹrẹ tí a tẹ́ sí orí gíláàsì wá gba àwọ̀ díẹ̀ jù, tàbí gbogbo rẹ̀ di búlúù bákan náà, tàbí ó gba àwọn àwọ̀ pọ́pù tí a kò retí, a sì dá àbájáde náà lé àpẹẹrẹ lọ́rùn.

Ìṣòro àkópọ̀ ni èyí, kì í ṣe ìṣòro àpẹẹrẹ. Àwọn ojútùú mẹ́tẹ̀ẹ̀ta ní àwọn àwọ̀ tí ó jọra nínú, ṣùgbọ́n ìlànà fífi àwọ̀ kun wọn yàtọ̀. Ọ̀kan jẹ́ àwọ̀ lásán tí ó ní ṣáájì rere ní pH tí ó sún mọ́ àárín gbùngbùn. Ọ̀kan jẹ́ àwọ̀ kan náà tí alákálì mú kí ó ṣiṣẹ́ lágbára sí i. Ọ̀kan kò jẹ́ àwọ̀ kan ṣoṣo mọ́ rárá, ṣùgbọ́n ó jẹ́ àdàlù tí a mọ̀ọ́mọ̀ ṣe ìfèsì oxidation sí. Tí o bá lo èyí tí kò tọ́, ìlànà fífi àwọ̀ kun yóò yí padà lábẹ́ ọwọ́ rẹ.

Ìdáhùn ní ṣókí

Methylene blue lásán nínú omi ni ìpìlẹ̀: àwọ̀ tó fẹ́rẹ̀ẹ́ jẹ́ 1% nínú omi, àwọ̀ ṣáájì rere tí ó rọrùn fún ṣíṣàyẹ̀wò ìrísí àwọn bakitéríà àti iṣẹ́ maikirosikopu gbogbogbò. Methylene blue alákálì ti Loeffler fi ìwọ̀n kékeré alákálì tí a ti fomi pò sí ojútùú àwọ̀ inú ọtí tí a tún fi omi pò; èyí ń gbé pH sókè, ó sì ń mú kí àwọ̀ ṣáájì rere náà so mọ́ àwọn ẹ̀yà aláásídì inú bakitéríà lágbára sí i. Methylene blue aláwọ̀ púpọ̀ jẹ́ methylene blue tí a mọ̀ọ́mọ̀ jẹ́ kí ó dàgbà nípasẹ̀ ìfèsì oxidation nínú alákálì, nítorí náà ìgò náà ní àdàlù àwọn ọmọ ẹgbẹ́ kẹ́míkà tí a ti yọ àwọn ẹgbẹ́ methyl kúrò lára wọn (azure A, azure B, azure C), thionin, àti methylene violet pẹ̀lú methylene blue tó ṣẹ́ kù; àdàlù yẹn sì ń fún àwọn ẹ̀yà ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ ní àwọ̀ ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀.

Tí o bá máa rántí gbólóhùn kan ṣoṣo: fífi alákálì kún un ń yí bí àwọ̀ ṣe lágbára tó padà, ṣùgbọ́n mímú un di aláwọ̀ púpọ̀ ń yí àwọn àwọ̀ tí ó máa ń fún àpẹẹrẹ padà.

Methylene blue lásán nínú omi: ohun tí a fi ń ṣe àfiwé

Àkópọ̀ tí ó rọrùn jù ni methylene blue tí a tú sínú omi, tí ó sábà máa ń jẹ́ 1% w/v, láìsí alákálì àti láìsí ìfèsì oxidation. Ẹ̀yà kẹ́míkà tí ó ní àwọ̀ náà ni methylthioninium tí ó ní ṣáájì rere pẹ̀lú ion chloride tí ó ní ṣáájì òdì, àwọ̀ phenothiazine kékeré tí ó tẹ́jú, tí àkọsílẹ̀ methylene blue ti PubChem ṣàpèjúwe rẹ̀ gẹ́gẹ́ bí methylthioninium chloride. Nítorí ṣáájì rere rẹ̀, ó ń so mọ́ àwọn ẹ̀wọ̀n phosphate tó jẹ́ ẹ̀yìn àwọn ásídì núkílííkì àti àwọn ẹgbẹ́ aláásídì lórí ògiri sẹ́ẹ̀lì bakitéríà, ó sì ń sọ àwọn sẹ́ẹ̀lì di búlúù lórí abẹ́lẹ̀ tí kò dúdú.

Àǹfààní rẹ̀ ni pé a lè mọ ohun tí a ó rí. Àwọn núkílíọ̀sì àti bakitéríà máa ń hàn ní búlúù. Ìyàtọ̀ àwọ̀ náà kò pọ̀. Àwọn ohun alààyè tí kò hàn gbangba lè gba àwọ̀ díẹ̀, èyí sì gan-an ni àìpé tí Loeffler gbìyànjú láti ṣàtúnṣe. Fún ẹbí tó gbòòrò sí i ti àwọn àwọ̀ bakitéríà ẹyọ kan tí ojútùú yìí jẹ́ apá rẹ̀, wo àkótán fífi àwọ̀ ẹyọ kan kun bakitéríà. Ìṣọ́ra nípa ìdánimọ̀ ṣì ṣe pàtàkì níbí: methyl blue jẹ́ molikula mìíràn pátápátá, gẹ́gẹ́ bí àfiwé methyl blue àti methylene blue ṣe ṣàlàyé, nítorí náà wíwá nínú kátálọ́ọ̀gù nípa orúkọ àwọ̀ nìkan lè mú kí o rí àwọ̀ inú ẹbí tí kò tọ́.

Methylene blue alákálì ti Loeffler: àwọ̀ kan náà, tí a mú ṣiṣẹ́ lágbára sí i

Àkópọ̀ àtijọ́ ti Loeffler da ojútùú methylene blue inú ọtí pọ̀ mọ́ alákálì tí a fomi pò. Àwọn àkópọ̀ inú ìwé ẹ̀kọ́ sọ pé kí a lo 0.3 g àwọ̀ nínú 30 mL ethanol 95% pẹ̀lú 100 mL potassium hydroxide 0.01% nínú omi (tàbí, lọ́nà tó dọ́gba, 30 mL methylene blue inú ọtí tí ó ti kún dé ààlà yíyọ́ rẹ̀, 100 mL omi tí a ti sọ di mímọ́ nípasẹ̀ bíbọ̀ sí òru àti dídá òru náà padà sí omi, àti 1 mL KOH 1%), tí ó ń fúnni ní ojútùú fún lílò tó sún mọ́ àwọ̀ 0.3% ní pH alákálì tó ṣe kedere. Àwọn àkópọ̀ tí a ń tà tẹ̀lé ìlànà kan náà, kátálọ́ọ̀gù àwọn àwọ̀ ìmọ̀ ohun alààyè kéékèèké ti Thermo Fisher sì ṣe àkọsílẹ̀ methylene blue alákálì ti Loeffler lẹ́gbẹ̀ẹ́ èyí aláwọ̀ púpọ̀ àti èyí inú omi gẹ́gẹ́ bí ọjà ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ tí a pinnu fún lílò ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀.

Alákálì náà ni kókó tí ń ṣiṣẹ́. Gbígbé pH sókè ń yọ proton kúrò nínú àwọn ẹgbẹ́ carboxyl àti phosphate lórí àpẹẹrẹ, ó sì ń mú kí àwọn ibi tó ní ṣáájì òdì pọ̀ sí i, nígbà tí ojútùú inú ethanol ń jẹ́ kí àwọ̀ náà tú pátápátá kí ó lè dé àwọn ibi náà gẹ́gẹ́ bí ẹyọ molikula. Àbájáde rẹ̀ ni pé àwọn bakitéríà ń gba àwọ̀ kíákíá àti lágbára ju bí àwọ̀ inú omi tí kò jẹ́ ásídì tàbí alákálì ṣe ń ṣe lọ, pẹ̀lú àwọn bakitéríà onígi àti cocci búlúù dúdú tí a mọ̀ nínú àpẹẹrẹ bakitéríà tí a tẹ́ sí orí gíláàsì déédéé. Àkókò fífi àwọ̀ kun sábà máa ń jẹ́ ìṣẹ́jú kan sí mẹ́ta, lẹ́yìn náà a fi omi ṣàn án.

Lílò àtijọ́ tó gbajúmọ̀ ni fún Corynebacterium diphtheriae tí a gbin lórí ohun ìgbìn serum ti Loeffler: àwọn bakitéríà onígi tín-ín-rín, tí òpin wọn sábà máa ń wú bí ọ̀pá, pẹ̀lú àwọn hóró Babes-Ernst tí ó ń gba àwọ̀ tó yàtọ̀ sí àwọ̀ ìpilẹ̀ lágbára, tí wọ́n sì ní polyphosphate tí a tọ́jú sínú wọn. Sísopọ̀ ohun ìgbìn àti àwọ̀ náà jẹ́ ti ìtàn; onímọ̀ bakitéríà kan náà ni a fi ìyìn àwọn méjèèjì fún, ìyàtọ̀ àwọ̀ àwọn hóró náà sì ni àǹfààní rẹ̀ fún ìdánimọ̀. Yàtọ̀ sí iṣẹ́ lórí diphtheria, àwọ̀ náà wúlò gẹ́gẹ́ bí àwọ̀ bakitéríà gbogbogbò fún àwọn àpẹẹrẹ tí a mú láti inú ìgbìn bakitéríà tí a tẹ́ sí orí gíláàsì, fún ṣíṣàyẹ̀wò ìrísí Neisseria nínú àwọn àpẹẹrẹ ilé ìwòsàn tí a tẹ́ sí orí gíláàsì, àti níbikíbi tí fífi àwọ̀ Gram kun kò ṣe pàtàkì ṣùgbọ́n búlúù lásán nínú omi kò hàn gbangba tó. Àwọ̀ ẹyọ kan ni. Gbogbo ohun tí ó ní àbùdá ásídì ń gba irú búlúù kan. Nígbà tí ìlànà bá béèrè àwọ̀ ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ fún ìyàtọ̀, alákálì nìkan kò lè pèsè rẹ̀.

Ìkìlọ̀ kan fún iṣẹ́ ojoojúmọ́: àwọn ojútùú àwọ̀ alákálì ń bàjẹ́, wọ́n sì ń dá ohun líle sílẹ̀ nígbà ìpamọ́ àti bí wọ́n ṣe ń gba carbon dioxide sínú wọn. Àwọn yàrá ìdánwò máa ń pèsè ìwọ̀n tí kò pọ̀ tàbí wọ́n ra ojútùú inú kátálọ́ọ̀gù, wọ́n sì tẹ̀lé àkókò tí ó yẹ kí ó wà ní ìpamọ́, dípò kí wọ́n máa lo ìgò àtijọ́ kan tí ó ti ń fi ìdọ̀tí tó ti jókòó sílẹ̀ sí gbogbo gíláàsì àpẹẹrẹ.

Methylene blue aláwọ̀ púpọ̀: orúkọ kan, àwọn àwọ̀ mélòó kan

Methylene blue aláwọ̀ púpọ̀ bẹ̀rẹ̀ láti inú àwọ̀ kan náà, ṣùgbọ́n a ṣe ìfèsì oxidation sí i nínú alákálì lábẹ́ àkóso, èyí tí a ń pè ní mímú kí ó dàgbà tàbí mímú kí ó di aláwọ̀ púpọ̀ ní ìtàn. Fífi sílẹ̀ láti dàgbà nínú alákálì, fífi carbonate gbóná pẹ̀lú rẹ̀, tàbí ṣíṣe ìfèsì oxidation pẹ̀lú àwọn ohun bí dichromate ń yọ àwọn ẹgbẹ́ methyl kúrò lára àwọn ẹgbẹ́ dimethylamino ní ìpele kọ̀ọ̀kan. Ọjà náà jẹ́ àdàlù: methylene blue tó ṣẹ́ kù pẹ̀lú azure B (tí ó ti pàdánù methyl kan), azure A àti azure C (tí a ti yọ methyl síwájú sí i lára wọn), thionin (tí a ti yọ gbogbo methyl lára rẹ̀), àti àwọn ọjà ẹ̀gbẹ́ ìfèsì oxidation láti inú ẹbí methylene violet. Ẹ̀yà kọ̀ọ̀kan ní àwọ̀ tirẹ̀ àti bí ó ṣe ń fẹ́ so mọ́ àsopọ̀, nítorí náà àdàlù náà ń fún àwọn ẹ̀yà ní àwọ̀ tí ó yàtọ̀ sí àwọ̀ ìpilẹ̀: àwọn núkílíọ̀sì, hóró, mucin, àti kẹ̀rẹ̀kẹ̀rẹ̀ kọ̀ọ̀kan ń gba àwọ̀ ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ láti búlúù dé pupa-pọ́pù.

Kẹ́mísírì yìí ni kẹ́mísírì kan náà tó wà lẹ́yìn àwọn àwọ̀ ẹ̀jẹ̀ gbajúmọ̀. Àwọn òṣìṣẹ́ ìṣáájú rí i pé methylene blue tí a fi alákálì sí ń fún àwọn núkílíọ̀sì kòkòrò ibà ní àwọn àwọ̀ pọ́pù, ṣùgbọ́n àwọn ojútùú inú omi tí wọ́n ti jẹ́ kí ó dàgbà kò dúró ṣinṣin, wọ́n sì ń dá ohun líle sílẹ̀ láàárín ọjọ́ mélòó kan. Àtúnyẹ̀wò bí a ṣe dá àwọ̀ pọ́pù fún ẹ̀jẹ̀ sílẹ̀ tọpasẹ̀ bí Malachowski àti Romanowsky ṣe lo ipa yìí lọ́tọ̀ọ̀tọ̀ ní 1891, bí a ṣe fi methanol sí i láti mú kí ohun líle àwọ̀ tí ó dá sílẹ̀ dúró ṣinṣin àti láti mú kí àwọn àpẹẹrẹ tẹ́ńbẹ́lú tí a tẹ́ sí gíláàsì dúró láìlo ooru, àti bí Giemsa ṣe wá ṣe ìlànà àdàlù tó dúró ṣinṣin ní ayíká ìwọ̀n azure B pẹ̀lú eosin tí a wọn, tí glycerol sì ń mú kí ó dúró ṣinṣin. Àwọn àwọ̀ irú Giemsa òde òní wá tààrà láti inú methylene blue aláwọ̀ púpọ̀ pẹ̀lú eosin, àpapọ̀ tí ó ń mú ipa Romanowsky wá. Fún kúlẹ̀kúlẹ̀ sísopọ̀ rẹ̀ pẹ̀lú eosin àti ẹ̀yà azure B, wo àwọn àwọ̀ irú Romanowsky àti ìbáṣepọ̀ azure B pẹ̀lú eosin.

Nítorí pé àdàlù ni, methylene blue aláwọ̀ púpọ̀ ni èyí tí ìlànà àkópọ̀ rẹ̀ kò dúró ṣinṣin jù lọ lára mẹ́tẹ̀ẹ̀ta nípa àbùdá rẹ̀. Ìwọ̀ntúnwọ̀nsì àwọn àwọ̀ rẹ̀ gan-an sinmi lórí ọ̀nà àti ìwọ̀n ìfèsì oxidation, ìdí nìyẹn tí àwọn olùpèsè ohun èlò ìmọ̀ àsopọ̀ fi ń tà á gẹ́gẹ́ bí ọjà ọ̀tọ̀ pẹ̀lú àyẹ̀wò bí ó ṣe ń ṣiṣẹ́, dípò kí wọ́n pè é ní ti Loeffler tí ó ti dàgbà. Àwọn lílò tó wọ́pọ̀ ni fífi àwọn hóró sẹ́ẹ̀lì mast, mucin, àti kẹ̀rẹ̀kẹ̀rẹ̀ hàn ní àwọ̀ tí ó yàtọ̀ sí àwọ̀ ìpilẹ̀, fífi kúlẹ̀kúlẹ̀ sẹ́ẹ̀lì plasma hàn, àti fífi Helicobacter pylori hàn nínú àwọn ege àsopọ̀ tẹ́ńbẹ́lú nípasẹ̀ àwọn ọ̀nà aláwọ̀ púpọ̀ irú Goodpasture. Ó jẹ́ àṣàyàn tó tọ́ nígbà tí ìbéèrè bá jẹ́ bí a ṣe lè fi àwọ̀ ṣe ìyàtọ̀, ó sì jẹ́ àṣàyàn tí kò tọ́ nígbà tí ìlànà bá retí àwòrán ìrísí bakitéríà tó ṣe kedere ní àwọ̀ ẹyọ kan.

Àfiwé àkópọ̀ àti ète

Ka tábìlì náà gẹ́gẹ́ bí ìlànà ṣíṣe ìpinnu. Tí àpẹẹrẹ bá gba àwọ̀ díẹ̀ jù, yí èrò pH padà kí o sì lo ti Loeffler. Tí gbogbo ohun bá gba àwọ̀ ṣùgbọ́n tí kò sí ohun tó yàtọ̀ sí àwọn yòókù, yí èrò àwọ̀ padà kí o sì lo èyí aláwọ̀ púpọ̀. Tí àpẹẹrẹ tí a fi ti Loeffler kun bá fi àwọn hóró hàn dáadáa ṣùgbọ́n tí alábòójútó béèrè ìdí tí àwọn núkílíọ̀sì àti cytoplasm fi ní búlúù kan náà, ìdáhùn ni pé kò sí àwọ̀ alákálì ẹyọ kan tí ó lè ṣe iṣẹ́ yẹn. Ẹbí aláwọ̀ púpọ̀ àti àwọn àwọ̀ ẹ̀jẹ̀ tí a ṣẹ̀dá láti inú rẹ̀ ni ìbéèrè yẹn kàn.

Yíyẹra fún àwọn ìdàrúdàpọ̀ tó wọ́pọ̀

Àṣìṣe méjì ló fa ọ̀pọ̀lọpọ̀ ìdàrúdàpọ̀ náà. Èkíní ni ríri ti Loeffler gẹ́gẹ́ bí ohun tí a lè fi pààrọ̀ pẹ̀lú methylene blue lásán nítorí pé àwọn méjèèjì rí bí búlúù nínú ìgò. Wọ́n yàtọ̀ ní pH àti bí àwọ̀ ṣe lágbára tó, fífi àwọ̀ àárín gbùngbùn rọ́pò ti Loeffler níbi tí a ti sọ pé kí a lo ti Loeffler sì ń sọ ìyàtọ̀ àwọ̀ hóró tí a gbé ìlànà náà lé lórí nù. Èkejì ni ríri búlúù alákálì èyíkéyìí tí ó ti pé tàbí tí ó dàgbà láìròtẹ́lẹ̀ gẹ́gẹ́ bí èyí aláwọ̀ púpọ̀. Dídàgbà láìsí àkóso ń mú àdàlù tí a kò mọ̀ wá ní agbára tí a kò mọ̀, ṣùgbọ́n àwọn ojútùú aláwọ̀ púpọ̀ tòótọ́ ni a ń pèsè nípasẹ̀ àwọn ọ̀nà ìfèsì oxidation tí a ti ṣe àlàyé wọn, a sì ń da wọn pọ̀ mọ́ eosin tí a wọn ní ẹbí àwọn àwọ̀ ẹ̀jẹ̀. Ìtàn ń kọ́ wa ní ẹ̀kọ́ níbí: àwọn ojútùú inú omi tí a jẹ́ kí ó dàgbà tí kò dúró ṣinṣin ní àwọn ọdún 1890 fi àyè sílẹ̀ fún àwọn àkópọ̀ inú methanol tí a mú dúró ṣinṣin nítorí pé a kò lè tún àwọn àdàlù tí kò ní àkóso ṣe bákan náà. Ẹ̀kọ́ tí ó yẹ kí a rántí nìyẹn kí a tó fi àwọ̀ láti inú ìgò tí a kò dá ọjọ́ orí rẹ̀ lójú kun gíláàsì àpẹẹrẹ fún ìdánimọ̀.

Ìṣọ́ra nípa orúkọ parí ọ̀rọ̀ náà. Jẹ́rìí sí ọjà inú kátálọ́ọ̀gù (èyí inú omi, ti Loeffler, tàbí èyí aláwọ̀ púpọ̀), ìwọ̀n àwọ̀ inú rẹ̀, àti lílò tí a pinnu fún un lórí àkọlé, dípò kí o fi àwọ̀ rẹ̀ ṣe ìdájọ́. Àwọn àkópọ̀ mẹ́tẹ̀ẹ̀ta ní ẹ̀yà ìpilẹ̀ tó ń fún wọn ní àwọ̀ kan náà. Ète wọn kì í ṣe kan náà.