يېڭى مېتىلېن كۆكى ۋە رېتىكۇلوسىت بوياش: ئايرىم بىر بوياق ۋە تىرىك ھۈجەيرە ئۇسۇلى

بىر ئوقۇغۇچى رېتىكۇلوسىت ساناشقا تەييارلىق قىلىپ، مېتىلېن كۆكى زاكاز قىلىدۇ، ئۇنى قان بىلەن ئارىلاشتۇرىدۇ، ئەمما ھېچنېمە دېگۈدەك كۆرەلمەيدۇ. بىر ساۋاقدىشى بولسا يېڭى مېتىلېن كۆكى دەپ بەلگە قويۇلغان بوتۇلكىنى ئىشلىتىپ، بىر قىسىم قىزىل قان ھۈجەيرىلىرىنىڭ ئىچىدە ئېنىق كۆك يىپچىلارنى كۆرىدۇ. بىرىنچى ئوقۇغۇچى ئىككىنچى بوتۇلكىدىكى بوياقنى تېخىمۇ يېڭى ياكى قويۇقلۇقى تېخىمۇ يۇقىرى دەپ ئويلايدۇ. ئەمەلىيەتتە ھەر ئىككىسى ئەمەس. ئۇنىڭدا باشقا بىر مولېكۇلا بار.

بۇ ساھەدىكى كۆپىنچە قالايمىقانچىلىقنىڭ تۈۋىدە دەل مۇشۇ ئۇقۇم خاتالىقى بار. ئىسمىغا قارىغاندا، يېڭى مېتىلېن كۆكى مېتىلېن كۆكىنىڭ ياخشىلانغان بىر تۈركۈمىدەك تۇيۇلىدۇ. خىمىيەلىك تەركىبى بولسا بۇنىڭ ئەكسىنى كۆرسىتىدۇ. يېڭى مېتىلېن كۆكى N ئۆزىگە خاس رەڭ ئىندېكسى نومۇرى، ئورۇنباسار گۇرۇپپىلارنىڭ ئورۇنلىشىشى ۋە قان ئىلمىدىكى ئۆلچەملەشتۈرۈلگەن رولى بار ئايرىم فېنوتىيازىـن بوياقتۇر. بۇ پەرق ئېنىق بولغاندىن كېيىن، ئۇسۇلنىڭ قالغان تەرەپلىرى — نېمە ئۈچۈن بويالغاندا ھۈجەيرىلەر تىرىك بولۇشى كېرەكلىكى، نېمىنىڭ رېتىكۇلوسىت دەپ سانىلىدىغانلىقى، خېينز تەنچىلىرىنىڭ قانداق ئورۇن تۇتىدىغانلىقى ۋە پارلاق كرېزىل كۆكىنىڭ قاچان ئىشلىتىلىدىغانلىقى — ئاسان چۈشىنىلىدۇ.

قىسقا جاۋاب

قان ئىلمى رېئاگېنتى بولغان يېڭى مېتىلېن كۆكى N ئادەتتە PubChem نىڭ يېڭى مېتىلېن كۆكى خاتىرىسىدە ئاساسلىق كۆك 24 دەپ تونۇشتۇرۇلغان، C.I. 52030، CAS 1934-16-3، فورمۇلاسى C18H22ClN3S. ئادەتتىكى مېتىلېن كۆكى بولسا ئۇنىڭ PubChem خاتىرىسىدىكى مېتىلتىيونىنىي خلورىد، ئاساسلىق كۆك 9، C.I. 52015، CAS 61-73-4، فورمۇلاسى C16H18ClN3S. قۇرۇلما جەھەتتىن، يېڭى مېتىلېن كۆكىدە ھالقىغا ئۇلانغان ئىككى مېتىل گۇرۇپپىسى ۋە ئېتىلئامىنو يان زەنجىرلىرى بار؛ مېتىلېن كۆكىدە بولسا ئۇلارنىڭ ئورنىدا دىمېتىلئامىنو گۇرۇپپىلىرى بار. بۇ پەرق بوياش خۇسۇسىيىتىنى ئۆزگەرتىدۇ. قان ئىلمى كىتابلىرىدا ئادەتتىكى مېتىلېن كۆكى رېتىكۇلوسىتنى نىسبەتەن ناچار بويىدىغان، يېڭى مېتىلېن كۆكى بولسا تېخىمۇ قېنىق ۋە تەكشى بويىدىغان بوياق دەپ تەسۋىرلىنىدۇ. بۇ سېلىشتۇرما ScienceDirect نىڭ يېڭى مېتىلېن كۆكى تېمىسىدا خۇلاسىلەنگەن.

شۇنداق، يېڭى مېتىلېن كۆكى سۇپراۋىتال بوياقتۇر. NCBI نىڭ سۇپراۋىتال بوياش پىرىنسىپلىرىغا ئائىت ئوبزورىدا بېرىلگەن ئېنىقلىمىغا ئاساسەن، سۇپراۋىتال بوياش تىرىك ھۈجەيرىلەرنى بەدەندىن چىقىرىۋالغاندىن كېيىن، مۇقىملاشتۇرۇشتىن بۇرۇن بوياشنى كۆرسىتىدۇ. يېڭى مېتىلېن كۆكى ۋە پارلاق كرېزىل كۆكى ھەر ئىككىسى بۇ تۈرگە كىرىدۇ، CLSI رېتىكۇلوسىت ئۆلچىمىدىمۇ يېڭى مېتىلېن كۆكى سۇپراۋىتال بوياق سۈپىتىدە ئېنىق كۆرسىتىلگەن. ئوقۇغۇچىلار بەزىدە بۇنى مۇقىملاشتۇرۇلغان سۈرمىلەرنى رومانوۋسكى ئۇسۇلى بىلەن بوياشقا ئوخشاش دەپ قارايدۇ. بۇ خىل چۈشەنچە بۇ يەردە توغرا كەلمەيدۇ. ئالدى بىلەن مۇقىملاشتۇرسىڭىز، بۇ ئۇسۇل ئىشلىمەيدۇ.

ئوخشىشىپ كېتىدىغان بوياق ئىسىملىرىنى پەرقلەندۈرۈۋاتقان ئوقۇرمەنلەر ئۈچۈن، مېتىل كۆكى بىلەن مېتىلېن كۆكىنىڭ سېلىشتۇرمىسى ئانىيونلۇق ترىئارىل مېتان بوياق بىلەن كاتىيونلۇق فېنوتىيازىـن ئائىلىسى ئوتتۇرىسىدىكى باشقا بىر، تېخىمۇ چوڭ قالايمىقانچىلىقنى چۈشەندۈرىدۇ. تەجرىبىخانا بوياش ئۇسۇللىرىنىڭ ئومۇمىي تونۇشتۇرۇشى سۇپراۋىتال خىزمەتنى مۇقىملاشتۇرۇلغان سۈرمە ئۇسۇللىرى بىلەن بىرلىكتە تونۇشتۇرىدۇ؛ قان ھۈجەيرىلىرىنىڭ مورفولوگىيە قوللانمىسى بولسا رېتىكۇلوسىت باھالاشنىڭ تېخىمۇ كەڭ دائىرىدىكى ھۈجەيرە تۈرلىرىنى پەرقلەندۈرۈشتە قەيەردە ئورۇن ئالىدىغانلىقىنى كۆرسىتىدۇ.

كاتالوگقا ئائىت بىر ئاگاھلاندۇرۇش: يېڭى مېتىلېن كۆكىنىڭ ئايرىم سىنىك خلورىد قوش تۇز شەكلىمۇ بار، ئۇنىڭ نومۇرى CAS 6586-05-6. شۇڭا ئۇسۇل بۆلىكىدە پەقەت ئادەتتىكى ئىسمىنىلا ئەمەس، تۇز شەكلى ۋە تەمىنلىگۈچىنىمۇ يېزىش كېرەك.

سۇپراۋىتال بوياش ئەمەلىيەتتە نېمە قىلىدۇ؟

رېتىكۇلوسىت يادروسىنى يوقاتقان، ئەمما قالدۇق رىبوسومىلىق RNA نى ساقلاپ قالغان ياش قىزىل قان ھۈجەيرىسىدۇر. بويالمىغان نەم تەييارلانمىدا بۇ RNA كۆرۈنمەيدۇ. سۇپراۋىتال بوياق تىرىك ھۈجەيرىگە كىرىپ، بۇ RNA نى كۆك دانچىلار ۋە يىپچىلار شەكلىدە چۆكتۈرىدۇ ياكى توپلايدۇ. ماي ئىممېرسىيەسىدە كۆرۈلىدىغان تورسىمان يىپچىلىق ماددا دەل مۇشۇ. شۇڭا بۇ تور رەڭلىنىشنى كۈتۈپ تۇرغان، ئالدىن شەكىللەنگەن بىر ئىسكىلىت ئەمەس، بەلكى بوياش جەريانىنىڭ مەھسۇلىدۇر. تەرتىپتىكى ئۆزگەرگۈچىلەرنىڭ — بوياق قويۇقلۇقى، بۇففېر، قان بىلەن بوياقنىڭ نىسبىتى، تېمپېراتۇرا ۋە ۋاقىتنىڭ — بوياق ئىسمىغا ئوخشاش مۇھىم بولۇشىنىڭ سەۋەبى مۇشۇ.

بۇنىڭ ئەمەلىي نەتىجىسى مەشغۇلات تەرتىپىنى قاتتىق ساقلاشنى تەلەپ قىلىدۇ: ئالدى بىلەن ئۇيۇشقا قارشى ماددا قوشۇلغان قاننى بوياق بىلەن ئارىلاشتۇرۇڭ، ئىنكۇباتسىيە قىلىڭ، ئاندىن سۈرمە تەييارلاپ، مۇقىملاشتۇرماي ۋە قارشى بويىغۇچ ئىشلەتمەي تەكشۈرۈڭ. بوياشتىن بۇرۇن مۇقىملاشتۇرۇش ياكى سۇس يىپچىلارنى توسۇپ قويىدىغان قارشى بويىغۇچ ئىشلىتىش ساناش تايىنىدىغان ئۇچۇرنى يوقىتىدۇ.

يېڭى مېتىلېن كۆكى بىلەن رېتىكۇلوسىت بوياشنىڭ ئەمەلىي تەرتىپى

ھەممە يەردە ئىشلىتىلىدىغان بىردىنبىر تەركىب يوق، شۇڭا قايسىسىنى ئىشلەتكەنلىكىڭىزنى دوكلات قىلىڭ. ھۆججەتلەشتۈرۈلگەن ئۈچ خىل ۋارىيانت بۇ دائىرىنى كۆرسىتىدۇ.

كلاسسىك برېخېر تىپىدىكى تەرتىپتە كالىي ئوكسالات بىلەن تەييارلانغان تەخمىنەن 0.5 پىرسەنتلىك يېڭى مېتىلېن كۆكى ئىشلىتىلىدۇ. ئۇ ياخشى ئارىلاشتۇرۇلغان EDTA قېنى بىلەن تەڭ ھەجىمدە ئارىلاشتۇرۇلۇپ، ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا تەخمىنەن 10 تىن 15 مىنۇتقىچە ئىنكۇباتسىيە قىلىنىدۇ. ئاستا قايتا ئارىلاشتۇرغاندىن كېيىن، نېپىز پونا شەكىللىك سۈرمىلەر تەييارلىنىپ، ھاۋادا قۇرۇتۇلىدۇ ۋە مۇقىملاشتۇرۇلمىغان ھالەتتە 100x ماي ئىممېرسىيەلىك ئوبيېكتىۋ بىلەن تەكشۈرۈلىدۇ. NCBI نىڭ رېتىكۇلوسىت ساناش تەرتىپى بۇ خىزمەت ئېقىمىنى ۋە ئۇنىڭدا ئىشلىتىلىدىغان ساناش رامكىسىنى تەسۋىرلەيدۇ.

دېيسى ۋە لېۋىس ۋارىيانتتا سىتراتلىق تۇزلۇق ئېرىتمىدىكى 1.0 پىرسەنتلىك يېڭى مېتىلېن كۆكى ئىشلىتىلىدۇ؛ ئۇنىڭغا 2 دىن 4 ھەسسە ھەجىمدىكى قان ئارىلاشتۇرۇلۇپ، سۈرمە تەييارلاشتىن بۇرۇن 37 C دا 15 تىن 20 مىنۇتقىچە ساقلىنىدۇ. CLSI H44 تەرتىپىنى بىرلىككە كەلتۈرۈشنىڭ يېقىنقى بىر ئەمەلىيلەشتۈرۈلۈشىدە، pH 7.4 بولغان فوسفات بۇففېرلىق تۇزلۇق ئېرىتمىدىكى تېخىمۇ سۇيۇق 0.1 پىرسەنتلىك ئېرىتمە ئىشلىتىلگەن؛ 20 C دا 10 مىنۇت ئىنكۇباتسىيە قىلىنغان ۋە مۇقىملاشتۇرۇلمىغان. بۇ 2026-يىللىق NMB نى بىرلىككە كەلتۈرۈش تەتقىقاتىدا دوكلات قىلىنغان.

ساناش قائىدىلىرى بارلىق ۋارىيانتلاردا ئوخشاش. بىر ھۈجەيرىدە ئاز دېگەندە ئىككى ئايرىم كۆك بويالغان دانچە ياكى يىپچە بۆلىكى بولسا، ئۇنى رېتىكۇلوسىت دەپ ساناڭ؛ بۇ قائىدە يالغۇز بوياق چۆكمىسىنى ساناشتىن چىقىرىۋېتىدۇ. ئادەتتىكى خىزمەتتە ئاز دېگەندە 1,000 قىزىل قان ھۈجەيرىسىنى ساناپ، رېتىكۇلوسىتنى پىرسەنت شەكلىدە دوكلات قىلىڭ. پىرسەنت تۆۋەن بولغاندا، ستاتىستىكا تېخىمۇ كۆپ ھۈجەيرە ساناشنى تەلەپ قىلىدۇ. CLSI H44 ئۇسۇلىغا ئائىت بىر ئوبزوردا، رېتىكۇلوسىت نىسبىتى 1 پىرسەنت ئەتراپىدا بولغاندا، ساناش ئۆزگىرىشچانلىقىنى 5 پىرسەنتكە چۈشۈرۈش ئۈچۈن تەخمىنەن 4,400 ھۈجەيرە ساناش كېرەكلىكى كۆرسىتىلگەن؛ بۇ De Gruyter دىكى CLSI H44 ئوبزورىدا بايان قىلىنغان. مىللېر ئوكۇلار دىسكىسى كۆپ ھۈجەيرە ساناشنى قولايلاشتۇرىدۇ. بوياقنى سۈزۈڭ ياكى يېڭى تەييارلاڭ، چۈنكى چۆكمە دانچە شەكىللىك ئىچكى تەنچىلەرگە ئوخشاپ قالىدۇ.

ئوخشاش تەييارلانمىدىكى خېينز تەنچىلىرى

ئوخشاش سۇپراۋىتال سۈرمىدە خېينز تەنچىلىرىنىمۇ كۆرگىلى بولىدۇ. ئۇلار قالدۇق RNA ئەمەس، بەلكى ئوكسىدلانغان ۋە دېناتۇراتسىيەگە ئۇچرىغان گېموگلوبىن توپلاملىرىدۇر. يېڭى مېتىلېن كۆكى بىلەن تەييارلانغان ئەۋرىشكىلەردە ئۇلار يۇمىلاق تەنچىلەر شەكلىدە كۆرۈنىدۇ؛ كۆپىنچە يالغۇز ۋە ھۈجەيرە پەردىسىگە يېقىن بولۇپ، تورسىمان يىپچىلىق ماددىدىن سۇسرەك كۆك رەڭدە بويىلىدۇ. مۇقىملاشتۇرۇش ۋە قارشى بوياش جەريانىدا ئۇلار ياخشى ساقلانمايدۇ، شۇڭا مۇقىملاشتۇرۇلمىغان سۈرمىنى تەكشۈرۈڭ. يېقىنقى بىر تەرتىپتە 20 مىكرولىتر EDTA قېنى 20 مىكرولىتر 1 پىرسەنتلىك يېڭى مېتىلېن كۆكى بىلەن ئارىلاشتۇرۇلۇپ، 15 مىنۇت ئىنكۇباتسىيە قىلىنغان؛ ئاندىن 250 ئېرىتروسىت ئىچىدىكى خېينز تەنچىلىرى مۇسبەت بولغان ھۈجەيرىلەرنىڭ سانى ھېسابلانغان. بۇ شۇ تەرتىپنى دوكلات قىلغان PMC تەتقىقاتىدا بايان قىلىنغان.

ئىككى پەرق خاتا چۈشەندۈرۈشنىڭ ئالدىنى ئالىدۇ. بىرىنچىدىن، ScienceDirect نىڭ خېينز تەنچىلىرى تېمىسىدا كۆرسىتىلگەندەك، مېتىل بىنەپشىسى ۋە كىرىستال بىنەپشىسى خېينز تەنچىلىرىنى يېڭى مېتىلېن كۆكىدىن تېخىمۇ قېنىق بويىيدۇ. يېڭى مېتىلېن كۆكى رېتىكۇلوسىت بىلەن خېينز تەنچىلىرى بىرلىكتە باھالانغاندا قولايلىق تاللاش، ئەمما خېينز تەنچىلىرى ئۈچۈن مەخسۇس ئەڭ كۈچلۈك بوياق ئەمەس. ئىككىنچىدىن، ئالفا تالاسېمىيە توشۇغۇچىلىقىدىكى HbH ئىچكى تەنچىلىرى سۇپراۋىتال بويالغاندىن كېيىن ھۈجەيرىنىڭ ھەممە يېرىدە نۇرغۇن ئىنچىكە چېكىتلەرنى پەيدا قىلىدۇ؛ كلاسسىك خېينز تەنچىلىرى بولسا ئازراق، چوڭراق ۋە كۆپىنچە ھۈجەيرە پەردىسى بىلەن مۇناسىۋەتلىك بولىدۇ. ئۈچىنچى ئوخشىشىپ قالىدىغان نەرسە بوياق چۆكمىسىدۇر: ئۇ ھۈجەيرىلەرنىڭ فوكۇس تەكشىلىكىنىڭ سىرتىدا بولۇپ، كۆرۈش مەيدانلىرى ئارىسىدا پەرقلىنىدۇ.

پارلاق كرېزىل كۆكى بىلەن يېڭى مېتىلېن كۆكىنىڭ سېلىشتۇرمىسى

ھەر ئىككى بوياق رېتىكۇلوسىت ئۈچۈن سۇپراۋىتال بوياق، ئەمما ئۆلچەملەشتۈرۈشتە ئۇلارنىڭ بىرىگە ئەۋزەللىك بېرىلىدۇ. خەلقئارا قان ئىلمىنى ئۆلچەملەشتۈرۈش كېڭىشى بىلەن بىرلىكتە تۈزۈلگەن ۋە CLSI H44 ئۆلچىمى بېتىدە كۆرسىتىلگەن CLSI H44-A2 رېتىكۇلوسىت ئۇسۇلى، EDTA قېنىنى يېڭى مېتىلېن كۆكى بىلەن بوياشنى قولدا سېلىشتۇرۇش ئۇسۇلى قىلىپ بەلگىلەيدۇ. كلاسسىك قان ئىلمى تەلىمىمۇ كۆرۈنۈشى توغرىسىدا ئوخشاش قاراشتا: يېڭى مېتىلېن كۆكى يىپچىلارنى تېخىمۇ قېنىق ۋە تەكشى بويىيدۇ، پارلاق كرېزىل كۆكىنىڭ نەتىجىسى بولسا بوياق تۈركۈملىرى ۋە ئەۋرىشكىلەر ئارىسىدا تېخىمۇ كۆپ پەرقلىنىدۇ.

بۇ ئورۇنغا بىر چەكلىمە قوشۇپ چۈشەندۈرۈش كېرەك. ICSH نىڭ ئانالىزاتور باھالاش يېتەكچىسى يېڭى مېتىلېن كۆكى بىلەن قولدا مىكروسكوپ تەكشۈرۈشنى پايدىلىنىش سېلىشتۇرما ئۇسۇلى سۈپىتىدە قوبۇل قىلىدۇ، ئەمما ئۇنى سۇبيېكتىپ ۋە نىسبەتەن ئېنىقلىقى تۆۋەن دەپ باھالايدۇ؛ مۇمكىن بولغاندا ئېقىم ھۈجەيرە ئۆلچەش پايدىلىنىش تەرتىپلىرىنى ئەۋزەل كۆرىدۇ. 2022-يىلى 100 ئەۋرىشكە سېلىشتۇرۇلغان بىر تەتقىقاتتا، ئىشلىتىلگەن ئانالىزاتورغا سېلىشتۇرغاندا پارلاق كرېزىل كۆكىنىڭ سىستېمىلىق ئېغىشى يېڭى مېتىلېن كۆكىدىن تۆۋەن بولغان. بۇ PMC دىكى بوياش ئۇسۇللىرى سېلىشتۇرمىسىدا دوكلات قىلىنغان. ئوقۇغۇچىلار ئۈچۈن ئاساسلىق خۇلاسە مۇنداق: يېڭى مېتىلېن كۆكىنى ئۆلچەملەشتۈرۈلگەن قولدا سېلىشتۇرۇش ئۆلچىمى سۈپىتىدە ئىشلىتىڭ؛ يەرلىك پارلاق كرېزىل كۆكى ئۇسۇلىنى ئۇنىڭغا ياكى ئاپتوماتىك ئۇسۇلغا سېلىشتۇرۇپ دەلىللەڭ؛ ھەر ئىككى ئەھۋالدا قولدا مىكروسكوپ تەكشۈرۈش نەتىجىلىرىنىڭ تارقىلىشى تېخىمۇ كەڭ بولىدىغانلىقىنى كۈتۈڭ. كونا ئۆلچەملەشتۈرۈش ئەدەبىياتلىرىدا سودا بوياق تۈركۈملىرى پەرقلىق بولغاچقا، خىمىيەلىك جەھەتتىن تېخىمۇ پاكىز تاللاش سۈپىتىدە ساپلاشتۇرۇلغان Azure B نىمۇ تەشەببۇس قىلغان. بۇ مارشالنىڭ Azure B ھەققىدىكى تەتقىقاتىدا بايان قىلىنغان بولۇپ، نېمە ئۈچۈن ئۇسۇل مۇنازىرىلىرىدە رېئاگېنت دەرىجىسىنىڭ يەنىلا تىلغا ئېلىنىدىغانلىقىنى چۈشەندۈرىدۇ.

كۆپ ئۇچرايدىغان خاتالىقلاردىن ساقلىنىش

تەييارلانمىلارنىڭ كۆپىنچە مەغلۇپ بولۇشى تۆت خاتالىقتىن كېلىپ چىقىدۇ. يېڭى مېتىلېن كۆكى N نىڭ ئورنىغا ئادەتتىكى مېتىلېن كۆكىنى زاكاز قىلىش بوياشنى سۇسلاشتۇرىدۇ؛ بۇ تېخنىكا سەۋەبىدىن ئەمەس، خىمىيەلىك پەرق سەۋەبىدىن بولىدۇ. كۆزىتىشتىن بۇرۇن مۇقىملاشتۇرۇش ياكى قارشى بوياش سۇپراۋىتال سىگنالنى يوقىتىدۇ. بوياق چۆكمىسىنى دانچە دەپ ساناش نەتىجىنى ئاشۇرۇۋېتىدۇ؛ ئىككى دانچە قائىدىسى ۋە سۈزۈلگەن بوياق بۇنىڭ ئالدىنى ئالىدۇ. رېتىكۇلوسىت پىرسەنتى تۆۋەن بولغاندا بەك ئاز ھۈجەيرە ساناش، ئېنىق كۆرۈنىدىغان، ئەمما ئىشەنچ چېكى كەڭ بولغان ساننى ھاسىل قىلىدۇ. بۇ خاتالىقلارنىڭ ھەممىسىدە ئوخشاش بىر كۆرۈنۈش بار: مىكروسكوپ تەكشۈرگۈچى رېئاگېنت باسقۇچىدا بەلگىلەنگەن نەتىجە ئۈچۈن مىكروسكوپنى ئەيىبلەيدۇ.