Métilén biru jeung Bartonella: papanggihan laboratorium jeung wates bukti klinis

Cawan kultur jeung pasien sarua-sarua maké kecap inféksi, tapi konsépna béda. Dina cawan, inféksi mangrupa jumlah koloni dina agar. Dina pasien, inféksi ngalibetkeun baktéri di jero sél jeung pembuluh, ubar anu ngalir ngaliwatan getih jeung jaringan, sarta sistim imun anu ngalaksanakeun sabagian pagawéanana. Lamun duanana disaruakeun, angka laboratorium anu matak narik perhatian mimiti katingali siga pangobatan. Lamun duanana dipisahkeun, angka anu sarua tetep sakumaha kuduna: alesan pikeun ngalakukeun ékspérimén salajengna.

Ngabédakeun éta dua hal téh tujuan utama tinjauan ngeunaan métilén biru jeung Bartonella ieu. Dua panalungtikan laboratorium ti hiji kelompok panalungtik nguji métilén biru ngalawan Bartonella henselae dina kaayaan teu tumuwuh. Duanana ngalaporkeun aktivitas anu kuat dina wadah kaca jeung plastik. Taya hiji ogé anu nguji ka manusa.

Naha panalungtik nguji fase stasionér

Kalolobaan uji antibiotik maké sél anu keur tumuwuh. Modél éta henteu ngawengku kaayaan anu leuwih hésé: sél anu geus eureun ngabagi diri sarta tahan kana ubar anu maéhan sél sasamana anu keur tumuwuh.

Bartonella bisa tetep aya dina awak, kaasup di jero éritrosit jeung sél éndotél. Ku kituna, kelompok éta nalungtik ubar anu geus disatujuan mana waé anu bisa maéhan B. henselae sanggeus asup kana fase stasionér. MIC anu handap pikeun sél anu keur tumuwuh henteu bisa ngaramal kamampuh maéhan dina fase stasionér. Rifampin miboga MIC anu kacida handapna, tapi kurang hadé dina maéhan sél stasionér, sedengkeun sanyawa anu nilai MIC-na leuwih luhur bisa maéhanana kalayan hadé. Pamaca anu hayang métode umum pikeun maca makalah kawas kieu bisa manggihanana dina pituduh maca panalungtikan métilén biru.

Saringan munggaran: Li jeung batur sapagawéan, 2019

Saringan fase stasionér taun 2019 dina Antibiotics maké hiji galur, B. henselae JK53, anu dipelak dina médium Schneider kalayan 10 percent sérum janin sapi dina 37 C jeung 5 percent CO2. Kultur umur sapoé lolobana mangrupa sél anu sumebar sarta keur ngabagi diri. Kultur umur lima poé, kalayan kira-kira 10 pangkat 8 unit pembentuk koloni per mL, dianggap aya dina fase stasionér sarta ngandung agrégat anu katingali.

Ujina maké SYBR Green I jeung propidium iodide, anu dikalibrasi maké campuran sél hirup jeung sél anu dipaéhan ku isopropanol. Ku sabab métilén biru boga warna anu pekat, hasil anu némbongkeun aktivitas dikonfirmasi ku mikroskopi, tuluy ku cacah koloni dina agar getih, anu jadi titik ahir pangukuran anu leuwih ketat.

Tina 1,581 ubar anu geus disatujuan dina 50 micromolar, métilén biru nyésakeun viabilitas 16 percent dumasar kana alat pamaca pelat jeung 25 percent dumasar kana mikroskopi. Daptomycin ngahasilkeun 21 percent, sababaraha azol 22 nepi ka 27 percent, gentamicin 32 percent, erythromycin 66 percent, sarta ciprofloxacin 74 percent. Pyrvinium pamoate katingali leuwih kuat dina alat pamaca, tapi henteu bisa dipeunteun ku mikroskopi lantaran fluoresénsina sorangan.

Pikeun B. henselae anu keur tumuwuh, MIC métilén biru nyaéta 0.08 nepi ka 0.16 micrograms per mL. Pikeun sél stasionér umur lima poé dina 5 micrograms per mL, cacah koloni turun nepi ka euweuh koloni anu bisa kadétéksi sanggeus paparan sapoé, sarua jeung daptomycin sarta pyrvinium pamoate dina konséntrasi anu diuji. Uji maéhan dumasar waktu anu misah maké 10 micrograms per mL. Éta téh tingkat paparan laboratorium, lain dosis, sarta makalahna nyebutkeun kitu. Nilai puncak plasma manusa anu dicutat, deukeut 3.9 micrograms per mL, ngan muncul dina makalah minangka kontéks kasang tukang. Tinjauan farmakokinétik métilén biru ngajelaskeun naha angka dina plasma henteu bisa dianggap minangka angka dina jaringan.

Dua watesan disebutkeun sacara écés dina makalah. Teu aya modél biofilm sarta teu aya uji kombinasi métilén biru. Agrégat umur lima poé téh gugusan dina kultur cair stasionér, lain ékspérimén biofilm anu geus divalidasi. Panulis nyarankeun panalungtikan kana sato, kombinasi, biofilm, sarta uji kana spésiés Bartonella séjén.

Kombinasi jeung sél asal biofilm: Zheng jeung batur sapagawéan, 2020

Panalungtikan susulan taun 2020 dina BMC Microbiology tetep maké galur jeung médium anu sarua, tapi ngalih kana kultur stasionér umur genep poé sarta nambahan dua hal anu teu aya dina makalah munggaran: kombinasi dua ubar jeung modél sél asal biofilm.

Pikeun ubar tunggal dina konséntrasi anu disaruakeun, nyaéta 5 micrograms per mL salila 24 jam, métilén biru nyésakeun 3.2 kali 10 pangkat 4 unit pembentuk koloni per mL, dibandingkeun jeung kontrol anu deukeut 2.8 kali 10 pangkat 10. Ciprofloxacin, gentamicin, jeung nitrofurantoin nyésakeun koloni anu leuwih saeutik dina titik waktu anu sarua. Éta béda jeung hasil taun 2019, nalika konséntrasi nominal anu sarua ngahasilkeun euweuh koloni anu bisa kadétéksi sanggeus sapoé. Umur kultur, kapadetan, jeung cara nangananana béda, jadi pangaruh maéhanana bisa diulang dina arah anu sarua, tapi henteu sarua gedéna. Parobahan antaruji ieu jadi salah sahiji alesan naha pamariksaan kaamanan jeung interaksi standar ngabédakeun poténsi laboratorium tina pangaruh klinis.

Saringan kombinasi mangrupa bagian anu pangmindengna dicutat. Unggal komponén ditetepkeun dina 5 micrograms per mL. Boh azithromycin ditambah métilén biru boh rifampin ditambah métilén biru ngahasilkeun euweuh koloni fase stasionér anu bisa kadétéksi dina 24 jam, kitu ogé duanana pasangan ciprofloxacin. Ngan opat pasangan éta anu ngahasilkeun kitu tina 25 pasangan anu diuji. Teu aya analisis sinergi formal anu dilakukeun, jadi istilah anu luyu nyaéta kombinasi anu aktif dina kaayaan ieu, lain sinergi anu geus kabuktian.

Ékspérimén biofilm nguji sél anu dicokot tina biofilm ngora anu geus diruksak, lain penetrasi kana biofilm asak anu masih utuh. Kultur dipelak salila lima poé, diéncérkeun kana pelat sumur salila lima poé deui, dikonfirmasi ku ngawarnaan maké crystal violet, tuluy dikerok saméméh dipaparkeun kana ubar. Dina 5 micrograms per mL, métilén biru nyalira nurunkeun cacah koloni nepi ka 2.3 kali 10 pangkat 2 dina poé ka-6, kaasup di antara agén tunggal anu panghadéna, tapi henteu nepi ka nol. Duanana kombinasi métilén biru ngahontal nol dina poé ka-6, kitu ogé duanana kombinasi ciprofloxacin.

Panulis nyorot watesan anu sarua jeung anu bakal diperhatikeun ku pamaca anu taliti: biofilm ngora anu dikerok, lain biofilm heubeul anu utuh; hiji konséntrasi anu praktis pikeun sakabéh ubar, lain unggal ubar dina tingkat puncak réalistisna masing-masing; ngan pasangan pilihan anu museur kana azithromycin atawa rifampin; hiji galur; euweuh sato; euweuh pasien. Panalungtikan tilu ubar salajengna diusulkeun, lain dilaporkeun.

Babandingan rancangan panalungtikan

Tabél ieu nyimpulkeun inti artikel dina wangun ringkes. Sakabéh anu aya di kénca kolom pamungkas mangrupa panalungtikan kultur. Euweuh eusi tina dua makalah éta anu kaasup kana kolom pamungkas.

Bartonella lain Borrelia

Duanana makalah nyebut Borrelia burgdorferi, spirokéta panyabab panyakit Lyme, lantaran uji zat warna asalna tina panalungtikan fase stasionér Borrelia saméméhna di laboratorium anu sarua, nalika métilén biru jeung daptomycin ogé némbongkeun aktivitas. Riwayat éta mangrupa kontéks anu mangpaat sarta sumber kasalahan anu mindeng kajadian.

Teu aya ékspérimén dina dua makalah Bartonella éta anu nguji Borrelia babarengan jeung Bartonella pikeun dibandingkeun langsung. Organismena béda, médiumna béda, konséntrasina béda, sarta dugaan pangaruh métilén biru kana mémbran Bartonella disebut minangka spéculasi anu perlu ditalungtik deui. Hasil henteu meunang dilarapkeun ti hiji spésiés ka spésiés séjén, sarta duanana makalah henteu ngarojong klaim anu lega ngeunaan parasit. Ku alesan ieu, babandingan sél persister Borrelia jeung Bartonella tetep misahkeun dua kumpulan literatur éta.

Naha hasil kultur henteu bisa dirobah jadi protokol

Minat néangan protokol métilén biru pikeun bartonella bisa kaharti. Makalah-makalah ieu jadi alesan naha éta frasa kudu dianggap minangka tanda peringatan, lain daptar balanja.

Kahiji, 5 micrograms per mL dina sumur pelat lain resép. Angka éta henteu ngawengku nyerepna ubar, distribusi, beungkeutan kana protéin, penetrasi ka jero sél, atawa kamampuh awak pikeun narima ubar. Panulis milih éta angka minangka rata-rata kasar tingkat puncak antibiotik sarta nyebutkeun yén panalungtikan salajengna kudu maké tingkat réalistis pikeun unggal ubar.

Kadua, nol koloni hartina euweuh koloni dina kaayaan penanaman dina pelat éta, lain jaringan anu steril. Sél persister, baktéri di jero sél, jeung watesan pangambilan sampel sadayana aya di luar lingkup pelat agar.

Katilu, kombinasi anu ngajadikeun sumur pelat steril bisa gagal atawa ngabahayakeun dina awak. Azithromycin ditambah métilén biru jeung rifampin ditambah métilén biru téh pasangan laboratorium dina tingkat paparan laboratorium. Tanpa data farmakokinétik sato jeung data manusa anu dikontrol, teu aya dosis, teu aya lilana pangobatan, sarta teu aya babandingan mangpaat jeung résiko. Saha waé anu keur nimbang-nimbang pilihan kudu ngabahasna jeung klinisi sarta maca ngeunaan iraha pamakéan métilén biru merlukeun pangawasan médis saméméh nyieun kacindekan tina data cawan.

Kacindekan kawates anu memang dirojong ku makalah-makalah ieu nyaéta: métilén biru miboga aktivitas anu bisa diulang ngalawan B. henselae JK53 anu henteu keur tumuwuh sacara in vitro, kaasup dina kombinasi dua ubar di laboratorium, kalayan hasil kombinasi jeung sél asal biofilm anu pangkuatna asalna tina panalungtikan taun 2020. Sakabéh hal séjén, kaasup naha aktivitas éta penting pikeun bartonellosis dina manusa, masih can diuji.