Agar EMB lawan agar MacConkey: milih jeung napsirkeun médium

Hiji mahasiswa ngaguratkeun sampel cai anu sarua dina dua pelat. Dina hiji pelat, muncul koloni poék kalayan kilap métalik héjo. Dina pelat séjén, muncul koloni pink caang kalayan halo samar. Duanana pelat diinokulasi tina tabung anu sarua, diinkubasi gigireun-gigireun, sarta dibaca dina jam anu sarua. Mahasiswa éta nanya pelat mana anu bener.

Duanana pelat bener. Duanana ngajawab patalékan anu béda. Kabingungan timbul nalika dua médium ieu dianggap minangka skrining anu bisa silih gantikeun pikeun baktéri peujit. Duanana boga tujuan anu sarua, nyaéta milih organisme enterik Gram négatif sarta ngabédakeun fermenter laktosa ti nonfermenter, tapi tujuan éta dilaksanakeun ku kimia jeung logika visual anu béda. Sanggeus dua konsép dasarna kaharti, milih pelat jeung maca koloni jadi rutin.

Jawaban singget

Agar EMB ngagunakeun dua pewarna, eosin Y jeung methylene blue, anu ngalakukeun dua pancén sakaligus: ngahambat pertumbuhan Gram positif sarta ngendap di sabudeureun produsen asam anu kuat pikeun ngahasilkeun koloni poék, sacara klasik kalayan kilap métalik héjo pikeun Escherichia coli. Agar MacConkey misahkeun unggal pancén: uyah empedu ditambah crystal violet ngahambat Gram positif, laktosa jadi substrat fermentasi, sarta neutral red nunjukkeun asam salaku koloni pink atawa beureum. Lamun pancénna nyaéta demonstrasi presumtif E. coli anu écés sacara visual, EMB pantes dipaké. Lamun pancénna nyaéta ngabédakeun fermenter laktosa anu pink ti nonfermenter anu teu boga warna sacara écés, utamana dina alur kerja tai atawa cikiih, MacConkey biasana leuwih gampang dibaca. Teu aya hiji ogé tina dua pelat ieu anu bisa ngaidentipikasi organisme ngan tina warna.

EMB: pewarna anu milih jeung ngalaporkeun sakaligus

Konsép EMB ngahijikeun seleksi jeung indikasi dina molekul anu sarua. Protokol agar eosin methylene blue ASM ngajelaskeun EMB minangka médium selektif sakaligus diferensial, kalayan pasangan pewarna ngahambat loba organisme Gram positif bari fermentasi laktosa nyababkeun panyerepan jeung pengendapan pewarna. Formulasi Levine standar ngandung peptone, laktosa, phosphate, eosin Y, methylene blue, jeung agar, sakumaha didaptarkeun dina métode FDA BAM pikeun agar Levine EMB. Catet yén resep EMB anu leuwih heubeul kadang nambahkeun sucrose bareng jeung laktosa, sedengkeun Levine EMB ngandung laktosa tanpa sucrose, jadi catet formulasi mana anu disadiakeun ku laboratorium anjeun.

Maca EMB hartina maca paripolah pewarna. Fermentasi laktosa anu kuat ngahasilkeun cukup asam pikeun nyababkeun pengendapan pewarna anu loba, ngahasilkeun pusat koloni E. coli anu biru poék nepi ka hideung sarta, dina kasus klasik, kilap métalik héjo dina cahaya pantul. Fermenter anu leuwih lemah saperti Enterobacter jeung Klebsiella biasana tumuwuh minangka koloni mukoid warna pink nepi ka ungu tanpa kilap éta. Nonfermenter saperti Salmonella, Shigella, jeung Proteus umumna tumuwuh minangka koloni teu boga warna atawa transparan sabab henteu ngahasilkeun lonjakan asam anu nyababkeun pewarna ngendap. Gram positif biasana kahambat, sanajan tingkat panghambatan bisa béda gumantung galur jeung produk. Kimia lengkep pikeun nyiapkeun pewarna, kaasup naha methylene blue mimitina kalakuanana minangka pewarna kationik, leuwih merenah dibahas misah dina topik formulasi pewarna, sedengkeun kontéks mikroskopi umumna aya dina atlas métode pewarnaan. Artikel ieu museur kana pamilihan jeung maca pelat.

Gambar di luhur sipatna ilustratif. Éta némbongkeun logika visual anu dipiharep: koloni poék ngagurilap ditambah tipe mukoid pink jeung tipe pucet dina EMB, dibandingkeun jeung tipe pink lawan pucet dina MacConkey. Paké pikeun diajar polana, tuluy konfirmasi unggal penilaian maké kontrol anu dipoto jeung lembar sisipan produk pikeun médium anu persis dipaké di méja kerja anjeun.

MacConkey: pancén dipisahkeun, aturan visual leuwih basajan

Konsép MacConkey masrahkeun unggal pancén ka bahan anu béda. Protokol agar MacConkey ASM ngajelaskeun kerangka selektif jeung diferensial anu sarua, sarta métode FDA BAM pikeun agar MacConkey daptar komponén gawéna: peptones, laktosa, uyah empedu, uyah, neutral red, crystal violet, jeung agar. Uyah empedu ditambah crystal violet milih ngalawan Gram positif. Laktosa nyadiakeun substrat fermentasi. Neutral red jadi indikator pH, robah jadi pink nepi ka beureum di tempat asam kabentuk, kadang dibarengan ku empedu anu ngendap di sabudeureun fermenter anu kuat.

Aturan maca ngahaja dijieun basajan: pink hartina fermenter laktosa, sedengkeun teu boga warna atawa pucet hartina nonfermenter. E. coli katingali pink nepi ka beureum, mindeng kalayan halo endapan empedu. Klebsiella jeung Enterobacter katingali pink sarta mindeng mukoid lantaran kapsulna. Salmonella, Shigella, Proteus, jeung loba batang Gram négatif séjén katingali teu boga warna. Aya kauntungan tambahan anu penting dina laboratorium pangajaran: uyah empedu umumna ngurangan swarming Proteus, jadi koloni terisolasi leuwih gampang dicandak dina MacConkey tibatan dina médium nonselektif, sanajan panghambatanana henteu mutlak sarta aya alternatif tanpa uyah lamun kontrol swarming jadi prioritas.

Alesan molekular naha pewarna kalakuanana kieu patali jeung muatan sarta struktur. Methylene blue nyaéta pewarna phenothiazine kationik anu struktur jeung sipatna ngajelaskeun afinitasna kana permukaan baktéri anu asam, nyaéta afinitas anu sarua anu digawé nalika éta ngendap dina zona asam dina EMB.

Babandingan sakedapan

Baca tabel ieu minangka prosedur nyieun kaputusan. Lamun latihan merlukeun mahasiswa ningali gradién kakuatan fermentasi kalayan hiji titik ahir anu écés, EMB némbongkeun éta. Lamun latihan merlukeun pamisahan binér gancang saméméh konfirmasi biokimia, MacConkey némbongkeun éta.

Médium mana pikeun sampel mana

Pikeun latihan cai anu ditujukeun kana pangakuan presumtif fecal coliform atawa E. coli, EMB pikaresepeun sabab kilapna écés sacara visual. MacConkey ogé bisa dipaké pikeun Gram négatif enterik sarta boga sajarah pamakéan dina uji cai, tapi teu aya salah sahiji pelat anu bisa ngagantikeun métode cai régulasi, anu bisa netepkeun médium saperti modified mTEC atawa MI gumantung kana uji. Pariksa métode anu wajib dituturkeun ku laboratorium anjeun.

Pikeun pamisahan gaya sampel tai antara fermenter jeung nonfermenter, MacConkey umumna leuwih mangpaat tina dua pilihan ieu. Pagawean praktis sampel tai pikeun Salmonella atawa Shigella biasana nambahkeun médium enterik anu leuwih selektif saperti XLD atawa Hektoen enteric tibatan ngandelkeun MacConkey wungkul.

Pikeun pangajaran gaya sampel cikiih anu niron alur kerja klinis, pasangkeun MacConkey jeung blood agar. MacConkey nyadiakeun pamisahan awal Gram négatif, sedengkeun blood agar mulangkeun pertumbuhan organisme anu diteken ku MacConkey. Pasangan ieu baku dina pedaran klinis ngeunaan nyiapkeun kultur cikiih.

Pikeun ngajarkeun konsép murni, jalankeun duanana. EMB ngajarkeun yén kakuatan fermentasi penting sarta hiji molekul bisa ngalaksanakeun dua peran. MacConkey ngajarkeun desain modular: selector, substrate, jeung reporter dijaga misah. Mahasiswa anu ngaguratkeun E. coli anu dipikanyaho, Klebsiella aerogenes anu dipikanyaho, sarta Salmonella anu dipikanyaho gigireun-gigireun dina dua médium biasana henteu salah deui ngabédakeun dua logika ieu.

Kasalahan maca anu terus kajadian unggal période

Kasalahan anu pangumumna nyaéta ngaidentipikasi ngan tina warna. Warna pink dina MacConkey bisa jadi E. coli, Klebsiella, Enterobacter, atawa fermenter séjén. Teu boga warna bisa jadi Salmonella, Shigella, Proteus, Pseudomonas, atawa nonfermenter séjén. Warna nyaéta fenotipe skrining anu ngarahkeun pagawean konfirmasi saperti Gram stain, oxidase, panel biokimia, atawa identifikasi ku instrumén, lain ngaran spésiés.

Kasalahan kadua nyaéta kaleuleuwihan dina napsirkeun kilap anu teu aya. Sababaraha koloni E. coli anu bener, utamana anu terisolasi, ngahasilkeun saeutik atawa henteu ngahasilkeun kilap métalik dina EMB. Henteuna kilap henteu ngaluarkeun kamungkinan E. coli, sarta ayana kilap henteu ngabuktikeun éta. Anggap kilap minangka petunjuk presumtif.

Kasalahan katilu nyaéta ngabandingkeun pelat anu umurna béda. Fermenter laktosa anu reureuh bisa robah jadi pink dina MacConkey sanggeus inkubasi anu berkepanjangan, anu ngaburkeun pamisahan écés antara fermenter jeung nonfermenter. Baca dina jam anu ditetepkeun ku laboratorium sarta catet waktu inkubasi babarengan jeung hasilna.

Kasalahan kaopat nyaéta maca pertumbuhan campuran saolah-olah hiji organisme. Koloni pink gigireun koloni teu boga warna nunjukkeun dua fenotipe, lain hiji bentuk panengah. Pilih koloni anu terisolasi kalayan hadé sarta kerjakeun unggal morfotipe sacara misah. Téktur mukoid ogé nyieun jebakan anu sarupa: Klebsiella jeung Enterobacter duanana bisa katingali mukoid, jadi kapsul wungkul moal kungsi nangtukeun ngaranna. Organisme anu baheula diajarkeun minangka Enterobacter aerogenes ayeuna diklasifikasikeun minangka Klebsiella aerogenes, anu ngajelaskeun naha bagan heubeul jeung labél anyar siga henteu sarua.

Kontrol jeung aturan panutup

Jalankeun kontrol anu dipoto atawa kontrol seger dina unggal sési: E. coli pikeun réaksi fermenter kuat, Klebsiella aerogenes pikeun fermentasi mukoid tanpa kilap klasik, galur Salmonella pikeun réaksi nonfermenter teu boga warna, sarta Staphylococcus aureus pikeun mastikeun panghambatan Gram positif dina produk anu persis anjeun paké. Cocogkeun nomer galur jeung kriteria panarimaan kana lembar sisipan produsén, sabab selektivitas robah gumantung kana kandungan empedu, crystal violet, jeung pewarna.

Inget hiji kalimah nalika di méja kerja. EMB ngagunakeun pewarna anu sakaligus milih jeung "nyarita", anu méré sinyal E. coli anu dramatis kalayan konsekuensi bacaan anu leuwih halus. MacConkey misahkeun fungsi milih ti fungsi "nyarita", anu méré pamisahan pink lawan pucet anu basajan kalayan konsekuensi rinci fermentasi anu leuwih saeutik. Pilih médium anu konsépna saluyu jeung patalékan, konfirmasi warna ku uji anu merenah, sarta dua pelat éta moal deui siga silih saingan tapi bakal silih lengkepan.