آرٽيڪل
ميٿيلين بلو ۽ بارٽونيلا: ليبارٽري جا نتيجا ۽ ڪلينڪي ثبوتن جون حدون
ڪلچر جو ٿانو ۽ مريض هڪ لفظ، انفيڪشن، ونڊين ٿا، پر ساڳيو تصور نه. ٿانو ۾ انفيڪشن جو مطلب آگر تي ڪالونين جو انگ آهي. مريض ۾ ان جو مطلب خليات ۽ رت جي رڳن اندر بيڪٽيريا، رت ۽ بافتن مان گذرندڙ دوائون، ۽ ڪم جو ڪجهه حصو انجام ڏيندڙ مدافعتي نظام آهي. ٻنهي کي هڪ سمجهڻ سان ليبارٽري جو هڪ حيرت انگيز انگ علاج جهڙو ڏسڻ ۾ اچڻ لڳي ٿو. انهن کي ڌار رکڻ سان ساڳيو انگ پنهنجي اصل حيثيت ۾ رهي ٿو: ايندڙ تجربو ڪرڻ جو هڪ سبب.
ميٿيلين بلو ۽ بارٽونيلا بابت هن جائزي جو سڄو مقصد اهو فرق برقرار رکڻ آهي. هڪ ئي تحقيقي گروهه جي ٻن ليبارٽري اڀياسن، واڌ نه ڪندڙ حالتن ۾ Bartonella henselae جي خلاف ميٿيلين بلو کي آزمايو. ٻنهي شيشي ۽ پلاسٽڪ جي ٿانون ۾ مضبوط سرگرمي رپورٽ ڪئي. ڪنهن به اڀياس ۾ انسان کي نه آزمايو ويو.
محقق ساکن مرحلي کي ڇو آزمائين ٿا
اينٽي بايوٽڪ جي گهڻين آزمائشن ۾ وڌندڙ خليات استعمال ٿين ٿا. اهو نمونو هڪ وڌيڪ ڏکئي حالت کي نظرانداز ڪري ٿو: اهي خليات جن ورهائجڻ بند ڪري ڇڏيو آهي ۽ جيڪي انهن دوائن کي سهي وڃن ٿا، جيڪي سندن وڌندڙ ساٿي خليات کي مارين ٿيون.
بارٽونيلا جسم ۾ برقرار رهي سگهي ٿي، جنهن ۾ رت جي ڳاڙهن خليات ۽ رت جي رڳن جي اندروني تهه وارن خليات جو اندر به شامل آهي. تنهنڪري گروهه اهو سوال پڇيو ته ڪهڙيون منظور ٿيل دوائون B. henselae کي ساکن مرحلي ۾ داخل ٿيڻ کان پوءِ ماري سگهن ٿيون. وڌندڙ خليات جي خلاف گهٽ MIC، ساکن مرحلي ۾ مارڻ جي اڳڪٿي نه ڪئي. رفيمپن جي MIC تمام گهٽ هئي، پر ان ساکن خليات کي گهٽ ماريو، جڏهن ته وڌيڪ MIC قدرن وارن مرڪبن انهن کي چڱيءَ طرح ماريو. جيڪي پڙهندڙ اهڙي قسم جي مقالي کي پڙهڻ لاءِ عام طريقو چاهين ٿا، انهن کي اهو ميٿيلين بلو جي تحقيق پڙهڻ واري رهنمائي ۾ ملندو.
پهرين ڇنڊڇاڻ: Li ۽ ساٿي، 2019
Antibiotics ۾ 2019 جي ساکن مرحلي واري ڇنڊڇاڻ ۾ هڪ ئي اسٽرين، B. henselae JK53، استعمال ڪئي وئي، جنهن کي Schneider ميڊيم ۾ 10 percent جنيني ڳئون جي سيرم سان، 37 C تي ۽ 5 percent CO2 سان وڌايو ويو. هڪ ڏينهن پراڻن ڪلچرن ۾ گهڻو ڪري پکڙيل، ورهائجندڙ خليات هئا. پنج ڏينهن پراڻن ڪلچرن کي، جن ۾ في mL لڳ ڀڳ 10 to the 8th ڪالوني ٺاهيندڙ يونٽ هئا، ساکن مرحلي ۾ سمجهيو ويو ۽ انهن ۾ ڏسڻ جهڙا ڳُڇا موجود هئا.
جاچ ۾ SYBR Green I سان گڏ پروپيڊيم آئوڊائيڊ استعمال ڪيو ويو، ۽ ان جي ماپ کي زنده ۽ آئسوپروپانول سان ماريل خليات جي ميلاپن جي ڀيٽ ۾ ترتيب ڏنو ويو. ڇاڪاڻ ته ميٿيلين بلو جو رنگ گهرو آهي، تنهنڪري سرگرم نڪتل مرڪبن جي پهرين خوردبيني جاچ سان ۽ پوءِ بلڊ آگر تي ڪالونين جي ڳڻپ سان تصديق ڪئي وئي؛ اهو وڌيڪ سخت آخري معيار هو.
50 micromolar تي آزمايل 1,581 منظور ٿيل دوائن مان، ميٿيلين بلو کان پوءِ پليٽ ريڊر موجب 16 percent ۽ خوردبيني جاچ موجب 25 percent خليات زنده رهيا. ڊيپٽومايسن لاءِ اهو انگ 21 percent، ڪيترن ايزولن لاءِ 22 کان 27 percent، جينٽامايسن لاءِ 32 percent، ايريٿرومايسن لاءِ 66 percent ۽ سيپروفلوڪساسن لاءِ 74 percent هو. پائروينيم پاموئيٽ ريڊر تي وڌيڪ طاقتور لڳو، پر پنهنجي فلوريسنس سبب خوردبيني جاچ سان ان جو انگ طئي نه ٿي سگهيو.
وڌندڙ B. henselae جي خلاف ميٿيلين بلو جي MIC، 0.08 کان 0.16 micrograms per mL هئي. پنج ڏينهن پراڻن ساکن خليات جي خلاف، 5 micrograms per mL تي، هڪ ڏينهن جي سامهون رکڻ کان پوءِ ڪالونين جي ڳڻپ ايتري گهٽجي وئي جو ڪا به ڪالوني ڳولي نه سگهي وئي؛ اهو نتيجو ڊيپٽومايسن ۽ پائروينيم پاموئيٽ جي آزمايل ڪنسنٽريشنن جي برابر هو. وقت سان گڏ مارڻ جي هڪ الڳ آزمائش ۾ 10 micrograms per mL استعمال ڪيو ويو. اهي ليبارٽري ۾ سامهون رکڻ جون سطحون آهن، خوراکون نه، ۽ مقالو به انهن کي ائين ئي بيان ڪري ٿو. انسان ۾ پلازما جي لڳ ڀڳ 3.9 micrograms per mL واري چوٽي قدر جو حوالو مقالي ۾ رڳو پسمنظر طور اچي ٿو. ميٿيلين بلو جي فارماڪوڪائنيٽڪس جو جائزو وضاحت ڪري ٿو ته پلازما جي انگ کي بافتن جو انگ ڇو نٿو سمجهي سگهجي.
مقالي ۾ ٻه حدون چٽيءَ طرح بيان ڪيل آهن. نه بايوفلم جو ڪو نمونو هو ۽ نه ميٿيلين بلو جي ميلاپن جي ڪا آزمائش. پنج ڏينهن پراڻا ڳُڇا ساکن مائع ڪلچر ۾ خليات جا ميڙ هئا، ڪنهن تصديق ٿيل بايوفلم تجربي جو حصو نه. ليکڪن جانورن تي تحقيق، ميلاپن تي تحقيق، بايوفلم تي تحقيق ۽ بارٽونيلا جي ٻين نوعن ۾ آزمائش جي ضرورت بيان ڪئي.
ميلاپ ۽ بايوفلم مان حاصل ڪيل خليات: Zheng ۽ ساٿي، 2020
BMC Microbiology ۾ 2020 جي پيروي واري اڀياس ساڳي اسٽرين ۽ ميڊيم برقرار رکيا، پر ڇهن ڏينهن پراڻن ساکن ڪلچرن ڏانهن ويو ۽ ٻه شيون شامل ڪيون جيڪي پهرين مقالي ۾ نه هيون: ٻن دوائن جا ميلاپ ۽ بايوفلم مان حاصل ڪيل خليات جو نمونو.
24 ڪلاڪن لاءِ هڪجهڙي 5 micrograms per mL تي اڪيلي دوائن جي آزمائش ۾، ميٿيلين بلو کان پوءِ في mL، 3.2 times 10 to the 4th ڪالوني ٺاهيندڙ يونٽ بچيا، جڏهن ته ڪنٽرول ۾ اهو انگ لڳ ڀڳ 2.8 times 10 to the 10th هو. ساڳئي وقت تي سيپروفلوڪساسن، جينٽامايسن ۽ نائٽروفورانٽوئن کان پوءِ گهٽ ڪالونيون بچيون. اهو 2019 جي نتيجي کان مختلف آهي، جنهن ۾ ساڳي مقرر سطح تي هڪ ڏينهن کان پوءِ ڪا به ڪالوني ڳولي نه سگهي وئي هئي. ڪلچر جي عمر، گهاٽائي ۽ سنڀال جا طريقا مختلف هئا، تنهنڪري مارڻ جو رجحان ٻيهر مليو، پر ان جي مقدار ساڳي نه هئي. آزمائش کان آزمائش تائين اهو فرق انهن سببن مان هڪ آهي، جن جي ڪري معياري حفاظت ۽ دوائن جي باهمي اثرن جون چڪاسون ليبارٽري جي طاقت کي ڪلينڪي اثر کان ڌار رکن ٿيون.
ميلاپن واري ڇنڊڇاڻ هن اڀياس جو سڀ کان وڌيڪ حوالو ڏنل حصو آهي. هر جزو کي 5 micrograms per mL تي مقرر رکيو ويو. ايزيٿرومايسن سان ميٿيلين بلو ۽ رفيمپن سان ميٿيلين بلو، ٻنهي سان 24 ڪلاڪن تي ساکن مرحلي جون ڪي به ڪالونيون ڳولي نه سگهجن ٿيون؛ سيپروفلوڪساسن وارن ٻنهي جوڙن سان به ساڳيو نتيجو مليو، ۽ آزمايل 25 جوڙن مان رڳو اهي چار اهڙا هئا. گڏيل اثر جي واڌ، يعني سنرجي، جو ڪو باضابطه تجزيو نه ڪيو ويو، تنهنڪري درست اصطلاح انهن حالتن ۾ سرگرم ميلاپ آهي، ثابت ٿيل سنرجي نه.
بايوفلم واري تجربي ۾ نئين، ٽوڙيل بايوفلم مان حاصل ڪيل خليات کي آزمايو ويو، نه ڪنهن مڪمل ۽ پختي بايوفلم ۾ دوا جي اندر پهچڻ کي. ڪلچر پنج ڏينهن وڌايا ويا، پوءِ انهن کي ڇڊو ڪري ننڍن خانن وارين پليٽن ۾ وڌيڪ پنج ڏينهن رکيو ويو، ڪرسٽل وايوليٽ سان رنگڻ ذريعي تصديق ڪئي وئي، ۽ پوءِ دوا سان سامهون رکڻ کان اڳ کرچي ڪڍيا ويا. 5 micrograms per mL تي، اڪيلي ميٿيلين بلو سان ڏينهن 6 تائين انگ 2.3 times 10 to the 2nd تائين گهٽجي ويو؛ اها بهترين اڪيلين دوائن مان هڪ هئي، پر انگ صفر نه ٿيو. ميٿيلين بلو وارن ٻنهي ميلاپن سان ڏينهن 6 تائين انگ صفر تي پهتو، جيئن سيپروفلوڪساسن وارن ٻنهي ميلاپن سان ٿيو.
ليکڪن انهن ئي حدن ڏانهن ڌيان ڇڪايو جيڪي هڪ محتاط پڙهندڙ سڃاڻي ها: پراڻي، مڪمل بايوفلم بدران نئين، کرچي ڪڍيل بايوفلم؛ هر دوا کي ان جي پنهنجي حقيقت پسند چوٽي سطح تي رکڻ بدران سڀني دوائن لاءِ هڪ آسان ڪنسنٽريشن؛ رڳو چونڊيل جوڙا، جن جو مرڪز ايزيٿرومايسن يا رفيمپن هو؛ هڪ اسٽرين؛ نه جانور ۽ نه مريض. بعد ۾ ٽن دوائن تي ڪم ڪرڻ جي تجويز ڏني وئي، ان جا نتيجا رپورٽ نه ڪيا ويا.
اڀياسن جي جوڙجڪ جي ڀيٽ
| جوڙجڪ جو نڪتو | Li 2019 | Zheng 2020 | ڪهڙي شيءِ ڪلينڪي ثبوت ڳڻجي ٿي |
|---|---|---|---|
| جاندار | رڳو B. henselae JK53 | رڳو B. henselae JK53 | تصديق ٿيل بارٽونيلوسس وارا مريض، مقرر آخري معيار |
| وڌندڙ خليات لاءِ ميٿيلين بلو جي MIC | 0.08 کان 0.16 micrograms per mL | ساڳي، 0.08 کان 0.16 | لاڳو نٿو ٿئي |
| ساکن مرحلي جو نمونو | 5 ڏينهن جو ڪلچر، اڪيليون دوائون | 6 ڏينهن جو ڪلچر، اڪيليون دوائون ۽ 25 جوڙا | بافتن ۽ خليات جي اندر سرگرمي، فارماڪوڪائنيٽڪس |
| بايوفلم جو نمونو | ڪوبه نه، ڳُڇا بايوفلم ناهن | کرچي ڪڍيل 5 ڏينهن جي بايوفلم مان حاصل ڪيل خليات | مڪمل بايوفلم يا زنده جسم ۾ برقرار رهڻ بابت ڊيٽا |
| ميٿيلين بلو جو اهم نتيجو | 5 micrograms per mL، ڏينهن 1 تي ڪي به ڪالونيون نه | ساڳي سطح، 24 ڪلاڪن تي 3.2 times 10 to the 4th؛ ايزيٿرومايسن يا رفيمپن وارن جوڙن سان صفر | ردعمل جي شرح، ٻيهر ٿيڻ جي شرح، ناڪاري واقعا |
| سنرجي جي باضابطه آزمائش | نه ڪئي وئي | نه ڪئي وئي | خوراک جو تعين ۽ ڪنٽرول ٿيل ڀيٽ |
هي جدول هن مضمون جو مقصد مختصر صورت ۾ پيش ڪري ٿو. آخري ڪالم جي کاٻي پاسي سڀ ڪجهه ڪلچر تي ڪيل ڪم آهي. ٻنهي مقالن مان ڪا به شيءِ آخري ڪالم ۾ نٿي اچي.
بارٽونيلا، بوريليا ناهي
ٻئي مقالا Borrelia burgdorferi، لائم بيماري پيدا ڪندڙ اسپايروڪيٽ، جو ذڪر ڪن ٿا، ڇاڪاڻ ته رنگ واري جاچ ساڳئي ليبارٽري ۾ بوريليا جي ساکن مرحلي تي اڳ ٿيل ڪم مان آئي هئي، جتي ميٿيلين بلو ۽ ڊيپٽومايسن به سرگرم نڪتا هئا. اها تاريخ ڪارائتو پسمنظر آهي ۽ غلطي جو عام ذريعو به.
بارٽونيلا بابت ٻنهي مقالن مان ڪنهن به تجربي ۾ بوريليا کي بارٽونيلا سان گڏ هڪ ئي وقت نه آزمايو ويو آهي. جاندار مختلف آهن، ميڊيم مختلف آهن، ڪنسنٽريشنون مختلف آهن، ۽ بارٽونيلا ۾ ميٿيلين بلو جي جھلي تي مفروضاتي اثر کي اهڙي قياس آرائي طور بيان ڪيو ويو جنهن لاءِ وڌيڪ اڀياس جي ضرورت آهي. نتيجا هڪ نوع مان ٻي نوع تي لاڳو نه ڪرڻ گهرجن، ۽ ڪو به مقالو پيراسائيٽن بابت وسيع دعوائن جي حمايت نٿو ڪري. بوريليا ۽ بارٽونيلا جي برقرار رهندڙ خليات جي ڀيٽ انهيءَ سبب ٻنهي جي علمي ادب کي ڌار رکي ٿي.
ڪلچر جا نتيجا پروٽوڪول ۾ ڇو نٿا بدلجن
ميٿيلين بلو ۽ بارٽونيلا جي علاج واري پروٽوڪول کي ڳولڻ ۾ دلچسپي سمجهه ۾ اچي ٿي. اهي مقالا ئي سبب آهن ته ان عبارت کي خريداريءَ جي فهرست بدران خبرداريءَ جي نشاني سمجهڻ گهرجي.
پهريون، پليٽ جي هڪ خاني ۾ 5 micrograms per mL ڪا طبي تجويز ناهي. ان سان جذب، ورڇ، پروٽين سان ڳنڍجڻ، خليات جي اندر پهچڻ يا برداشت ڪرڻ جي ڪا ڄاڻ شامل ناهي. ليکڪن ان کي اينٽي بايوٽڪن جي چوٽي سطحن جي هڪ اندازي واري اوسط طور چونڊيو ۽ چيو ته مستقبل جي ڪم ۾ هر دوا کي ان جي پنهنجي حقيقت پسند سطح تي استعمال ڪرڻ گهرجي.
ٻيو، صفر ڪالونين جو مطلب انهن پليٽ تي پوکڻ وارين حالتن ۾ ڪالونيون نه ملڻ آهي، نه جراثيم کان پاڪ بافتون. برقرار رهندڙ خليات، خليات جي اندر موجود بيڪٽيريا ۽ نمونا وٺڻ جون حدون سڀ آگر پليٽ کان ٻاهر آهن.
ٽيون، اهي ميلاپ جيڪي پليٽ جي هڪ خاني کي جراثيم کان پاڪ ڪن ٿا، جسم ۾ ناڪام ٿي سگهن ٿا يا نقصان پهچائي سگهن ٿا. ايزيٿرومايسن سان ميٿيلين بلو ۽ رفيمپن سان ميٿيلين بلو، ليبارٽري جي سامهون رکڻ وارين سطحن تي ليبارٽري جا جوڙا آهن. جانورن جي فارماڪوڪائنيٽڪس ۽ انسانن جي ڪنٽرول ٿيل ڊيٽا کان سواءِ نه ڪا خوراک آهي، نه ڪو مدو، ۽ نه فائدي ۽ خطري جو تناسب. جيڪو به اختيارن تي غور ڪري رهيو هجي، ان کي انهن بابت ڪلينڪي معالج سان ڳالهائڻ گهرجي ۽ ٿاني جي ڊيٽا مان ڪو نتيجو ڪڍڻ کان اڳ اهو جائزو وٺڻ گهرجي ته ميٿيلين بلو جي استعمال لاءِ طبي نگراني ڪڏهن ضروري آهي.
انهن مقالن مان ثابت ٿيندڙ محدود نتيجو هي آهي: ميٿيلين بلو، ليبارٽري حالتن ۾، واڌ نه ڪندڙ B. henselae JK53 جي خلاف ٻيهر حاصل ٿيندڙ سرگرمي رکي ٿو، جنهن ۾ ٻن دوائن جا ليبارٽري ميلاپ به شامل آهن؛ ميلاپن ۽ بايوفلم مان حاصل ڪيل خليات بابت سڀ کان مضبوط نتيجا 2020 جي اڀياس مان اچن ٿا. باقي سڀ ڪجهه، جنهن ۾ اهو به شامل آهي ته اها سرگرمي انساني بارٽونيلوسس لاءِ اهم آهي يا نه، اڃا اڻآزمايل آهي.