په میتیلین بلو د اننګي د حجرو رنګول: څه باید ووینئ

یوه زده‌کوونکې د اننګي د حجرو د معلق مخلوط یو څاڅکی پر سلایډ ږدي، په مایکروسکوپ کې ګوري او نږدې هېڅ نه ویني. څو تتې، سیوري ته ورته بڼې په روښانه ساحه کې خوځېږي. فوکس سموي، بیا رڼا زیاتوي او په پای کې دې نتیجې ته رسېږي چې سلایډ تش دی. سلایډ تش نه دی. حجرې هلته شته. هغوی نږدې شفافې دي، او همدا شفافیت هغه اصلي ستونزه ده چې دا رنګ یې د حل لپاره کارول کېږي.

د تمې او انځور ترمنځ دا توپیر باید د کړنلارې له پیل مخکې روښانه شي. نوي زده‌کوونکي تمه لري چې مایکروسکوپ به جزئیات داسې ښکاره کړي لکه د کمرې زوم چې یوه لرې لوحه روښانه کوي. د روښانه ساحې مایکروسکوپ تر دې محدود کار کوي: د رڼا په جذب کې توپیرونه ښيي. د اننګي نارنګه حجره نږدې هېڅ رڼا نه جذبوي، نو په انځور کې نږدې هېڅ توپیر نه رامنځته کوي. میتیلین بلو دا توپیر زیاتوي. د حجرې دننه په ناهموار ډول نښلي او جوړښت په بصري توپیر بدلوي. کله چې زده‌کوونکي دا مفهوم درک کړي، ورپسې هر ګام د یوې منطقي پایلې په توګه ورته څرګندېږي، نه یوازې د یوې نسخې په توګه.

په ښوونیز لابراتوار کې د ساده رنګونو له لارې د بصري توپیر د زیاتېدو په اړه مخکیني معلومات دلته ګټور دي، او له رنګولو مخکې د روښانه ساحې مایکروسکوپ د تنظیمولو بیاکتنه د نیمایي ناکامو سلایډونو مخه نیسي. د دې رنګ تر شا کیمیا په مایکروسکوپي کې د میتیلین بلو په پېژندنه کې تشریح شوې، چې بیانوي ولې همدا ځانګړی رنګ بیا بیا د لابراتوار پر مېز کارول کېږي.

د ټولګي کړنلاره

لاندې لوند چمتووالی د عمومي ټولګیو لپاره تر ټولو ساده معمول انتخاب دی. نه لمبې ته اړتیا لري او نه د ثابتولو پړاو ته. د ثابتې شوې نرۍ نمونې بڼه، چې د ځینو کالجونو په لارښودونو کې کارول کېږي، په هوا کې وچول او بیا لنډ حرارتي ثابتول هم لري؛ لکه د North Central Texas College د اننګي د نرۍ نمونې فعالیت چې د Biology LibreTexts له لارې خپور شوی کې. خو حرارتي ثابتول په مایکروبیولوژۍ کې یو معمول کار دی، نه د پوښیزو حجرو د لیدلو شرط.

اړین توکي: پاک سلایډونه او پوښ ښیښې، تعقیم شوي یوځل‌کارېدونکي سوابونه (غوره انتخاب) یا نوي هوار غاښ‌خلالونه، د 0.5 تر 1 سلنې میتیلین بلو د اوبیز محلول څاڅکي اچوونکی بوتل، مقطرې یا له ایونونو پاکې اوبه، جاذبه کاغذ، دستکشې او مرکب مایکروسکوپ چې ټولیز غټوالی یې 100x او 400x وي.

1. خوله په ساده اوبو ووینځئ. دا د خوړو هغه ذرې لرې کوي چې وروسته ډېرې رنګېږي او له حجرو څخه پام اړوي.
2. هر زده‌کوونکی یوازې د خپل اننګي نمونه اخلي. د اننګي دننۍ برخه په یوه نوي تعقیم شوي سواب په نرمۍ ومښئ. فشار ورکړئ، خو مه یې توږئ. تر دې ډېر مخکې ودرېږئ چې ناراحتي یا وینه رامنځته شي.
3. سواب د پاک سلایډ پر منځ په نري ډول ورغړوئ. د نمونې نری پوښ د روښانه لید وړ سلایډ تر ټولو مهم شرط دی. یو پنډ سپین رسوب به له رنګېدو وروسته په داسې شنه کتله بدل شي چې هېڅ پکې نه شي بېلېدای.
4. پر خپره شوې نمونه د میتیلین بلو یو څاڅکی واچوئ. له 1 تر 3 دقیقو یې پرېږدئ. د کالج په ډېرو کړنلارو کې یوه دقیقه بس ده؛ د NCERT د نهم ټولګي د ساینس لابراتوار لارښود د موقتي چمتووالي لپاره شاوخوا 3 دقیقې کاروي. ډېر وخت غوره نه دی، او تر اړتیا ډېر رنګول د وخت ټاکلو تر ټولو عامه تېروتنه ده.
5. د ځايي کړنلارې له مخې، نمونه په مقطرو اوبو په نرمۍ ووینځئ یا اضافي رنګ په جاذبه کاغذ جذب کړئ. شالید باید تت شین شي، نه ډېر تیاره شین.
6. پوښ ښیښه په زاویه راښکته کړئ، څو لومړی یې یوه څنډه ولګېږي، بیا یې ورو پرېږدئ چې کښیني. دا د هوا د پوکاڼیو مخه نیسي.
7. د حجرو د موندلو لپاره له ټیټ غټوالي پیل وکړئ، فوکس او په منځ کې موقعیت یې تایید کړئ، بیا 100x او په پای کې 400x ته لاړ شئ. په 400x کې یوازې د فوکس نری تنظیم وکاروئ.

د رنګ د غلظت په اړه یوه دقیقه خبره اړینه ده. د ښوونځیو کړنلارې تر ډېره د میتیلین بلو شاوخوا 1 سلنه اوبیز محلول کاروي. ډېر غلیظ اصلي محلول یا اوږده تماس موده شالید تر هستې ژر تیاره کوي، چې په دې توګه هغه بصري توپیر سرچپه کوي چې دا تمرین پرې ولاړ دی.

د اننګي د نمونې خوندي سمبالول

د اننګي نمونې له لاړو او د خولې له عادي مایکروارګانېزمونو سره راځي، نو هره تازه خپره شوې نمونه احتمالي انتاني مواد وګڼئ، که څه هم نمونه ورکوونکي روغ ټولګیوال وي. د ښوونیزو لابراتوارونو لپاره د American Society for Microbiology د بیولوژیکي خوندیتوب لارښوونې عمومي اصول بیانوي: له ناستې مخکې خطر وارزوئ، دستکشې واغوندئ، چېرې چې د څاڅکو د شیندل کېدو امکان وي سترګې خوندي کړئ، وروسته لاسونه ووینځئ، د کار مېزونه ضدعفوني کړئ او ککړ یوځل‌کارېدونکي توکي د بیولوژیکي کثافاتو د منظورې شوې لارې له مخې وغورځوئ.

د ټولګي څلور اصول د ډېرو خطرونو مخه نیسي. هر سواب او هر سلایډ یوازې د یوه نمونه ورکوونکي لپاره دی او هېڅکله نه شریکېږي. هر څوک یوازې خپله نمونه اخلي، نه د څنګ ملګري نمونه. یوځل‌کارېدونکي سوابونه او غاښ‌خلالونه سمدستي د کثافاتو ټاکلي لوښي ته اچول کېږي، نه بېرته د کار پر مېز. میتیلین بلو پخپله پوستکی او کالي رنګوي او سترګې تحریكوي، نو دستکشې او د رنګ د کارولو عادي پاکوالي اصول مراعات کړئ. دا تمرین د خپرې شوې نمونې د کوم شي تر کلتور او روزلو مه غځوئ، او د ښوونځي له خوندیتوب کړنلارې بهر د تازه انساني نمونې د حرارتي ثابتولو لپاره له ځانه لارې مه جوړوئ.

څه باید ووینئ، او ولې داسې ښکاري

په 100x کې پراخې، هوارې او تتې شنې حجرې ولټوئ چې نامنظمې هګۍ‌شکلې یا څوګوټیزې پولې لري. هغوی یا جلا پرتې وي یا په سستو، یو پر بل پرتو پاڼو کې لیدل کېږي. هره حجره عموماً یوه تیاره شنه نقطه لري. دا نقطه هسته ده. ترتیب ته یې هم پام وکړئ: هوارې پوښیزې حجرې د نریو ټایلونو په څېر دي، نه د کرو، نو ځکه یې څنډې د ګردو پوکاڼیو پر ځای د چاودلي لعاب په څېر ښکاري.

په 400x کې درې ځانګړنې په روښانه ډول بېلېږي. د حجرې پوله د یوې نرۍ او نسبتاً تیاره کرښې په توګه ښکاري چې حجره راچاپېروي. سایتوپلازم دننۍ برخه په یوه روښانه او یوشان شنه رنګ ډکوي. هسته تیاره او ډېره متراکمه ښکاري، ډېری وخت هګۍ‌شکله وي او عموماً منځ ته نږدې وي، خو تل نه. له زده‌کوونکو وغواړئ چې دا درې واړه ځانګړنې، د حجرې بڼه او غټوالی ثبت کړي، ځکه کاري پاڼه همدا شیان غواړي.

دلته د کره‌والي یوه خبره مهمه ده چې په ډېرو کاري پاڼو کې ناسمه بیانېږي. لیدل کېدونکې پوله د پلازمايي غشا له سیمې سره سمون لري، خو خپله غشا، چې شاوخوا له 7 تر 10 نانومترو پنډ لیپیډي دوه‌پوړ دی، د ښوونځي د مایکروسکوپ د بېلولو تر وړتیا ډېره کوچنۍ ده. هغه څه چې زده‌کوونکي یې ویني، د حجرې نوري څنډه او هلته راټول شوی رنګ دی. همدا احتیاط د حجروي غړیو په اړه هم پکار دی. مایټوکانډریا، اندوپلازمي شبکه، ګولجي جسمونه او رایبوزومونه په دې چمتووالي کې نه ښکاري. یو دودیز نوري مایکروسکوپ په ښه شرایطو کې تر شاوخوا 0.2 مایکرومترو پورې جوړښتونه بېلولای شي، لکه چې د مایکروسکوپي وسایلو په اړه د NCBI د حجروي بیولوژۍ معلومات یې تشریح کوي، او ډېری فوق‌ریز جوړښتونه تر دې حد کوچني یا دې حد ته نږدې دي. لوړ بې‌ګټې غټوالی انځور لویوي، خو جزئیات نه ورزیاتوي.

هسته ولې تر ټولو تیاره رنګېږي؟ میتیلین بلو یو کاتیوني رنګ دی، چې په محلول کې مثبت چارج لري او د حجرې له منفي چارج لرونکو موادو، تر ټولو ډېر له نوکلېیک اسیدونو، سره نښلي. کروماتین په هسته کې DNA متمرکزوي، نو هسته تر ټولو ډېر رنګ راټولوي. سایتوپلازم RNA او نور چارج لرونکي مالیکولونه لري، نو هغه هم رنګېږي، خو رنګ یې ډېر خپور او روښانه وي. مهم قید دا دی: میتیلین بلو یوازې د DNA ځانګړی رنګ نه دی. د هستې په انځور اخیستنه کې د میتیلین بلو د وېش په اړه څېړنه له هغو سیمو سره د کاتیون نښلېدل بیانوي چې نوکلېیک اسیدونه پکې ډېر وي، او د حجروي چمتووالو کې د میتیلین بلو د نښلېدو په اړه پخوانۍ کمیتي څېړنې وموندله چې ډېری نښتی رنګ له نوکلېیک اسیدونو سره تړاو لري. له همدې امله، تیاره هسته او روښانه سایتوپلازم د بصري توپیر یوه بڼه ده، نه مالیکولي ازموینه.

د زده‌کوونکو احتمالي تېروتنې او د هغوی پېژندل

نږدې هر ناکام سلایډ له پنځو بڼو څخه په یوې کې راځي. زده‌کوونکو ته ورزده کړئ چې د سلایډ ستونزه وپېژني، نه دا چې بې له پوهېدو یې بیا جوړ کړي.

تر اړتیا ډېر رنګول حجرې او شالید دواړه یوشان تیاره کوي، نو هسته په ساحه کې ورکېږي. دا ستونزه د رنګولو د وخت په لنډولو یا په ښه وینځلو حل کړئ. کم رنګول داسې تتې بڼې پرېږدي چې د رڼا په زیاتېدو ورکېږي؛ وخت په دېرش‌ثانیه‌یي پړاوونو کې زیات کړئ. پنډې خپرې شوې نمونې متراکمې، یو پر بل پرتې کتلې جوړوي چې هېڅ پوله پکې نه شي تعقیبېدای؛ سمون یې میخانیکي دی: بل ځل نمونه نرۍ خپره کړئ، ځکه هېڅ وینځل د حجرو یوه انبار نه شي سمولای. د هوا پوکاڼۍ د بشپړو دایرو په توګه، له روښانه تیاره څنډو سره ښکاري او د نويو زده‌کوونکو پام اړوي، ځکه هغوی یې له حجروي جوړښتونو سره تېروتنه کوي؛ پوښ ښیښه بیا په زاویه او ورو کېږدئ. پر حجرو یا شاوخوا یې خپرې وړې تیاره نقطې عموماً د خولې عادي باکتریاوې وي، لکه د ښوونځي کړنلارې، د بېلګې په توګه د Ingrid Science د اننګي د حجرو کړنلاره، چې یادونه یې کوي. هغوی تاییدوي چې په خوله کې ژوندي موجودات شته، او دا خبره ښايي د زده‌کوونکو په یاد پاتې شي؛ خو په دې تمرین کې یې نوعه نه شي پېژندل کېدای او باید د حجرې د برخو په توګه ونه رسم شي. د خوړو پاتې شوني او د مخاط تارونه په نامنظم او ډېر شدید ډول رنګېږي؛ لومړنی وینځل د هغوی د کمولو لپاره دی.

دا تمرین څه نه شي کولای

دا یوه ښوونیزه مشاهده ده، نه تشخیصي ازموینه. په ټولګي کې په رنګ شوې نمونه کې د حجرې هېڅ بڼه د انتان، سرطان یا بلې ناروغۍ تشخیص نه شي کولای، او دا مقاله باید داسې ونه لوستل شي چې ګواکې بل څه وړاندیز کوي. دا چمتووالی په دوو غټوالو کې بڼه، پوله، سایتوپلازم او هسته ښيي. د غشا فوق‌ریز جوړښت، د حجروي غړیو جزئیات یا مالیکولي هویت نه ښيي. د دې حد څرګند بیان هم ساینس او هم زده‌کوونکي خوندي کوي: ښه پایله یو سم نښه شوی رسم دی چې غټوالی او کارول شوی رنګ پکې ثبت شوي وي، نه د روغتیا په اړه یوه نتیجه.

د زده‌کوونکي کاري پاڼه او نښه شوي مایکروسکوپي انځورونه

د دې پاڼې لپاره دوه ښوونیز توکي پورته نښه شوی مایکروسکوپي انځور او لاندې کاري پاڼه دي. د هر زده‌کوونکي لپاره یوه کاري پاڼه چاپ کړئ، یا یې پر پرده وښایئ او له زده‌کوونکو وغواړئ چې چوکاټونه خپلو کتابچو ته نقل کړي.

په یوه 45 دقیقه‌یي ناسته کې د کارولو طریقه: لس دقیقې د خوندیتوب لارښوونو او نمونې اخیستلو لپاره، لس دقیقې د رنګولو او چمتو کولو لپاره، پنځلس دقیقې په دواړو غټوالو کې د مشاهدې او رسم لپاره، او لس دقیقې د ارزونې لېست او له نښه شوي مایکروسکوپي انځور سره د پرتله کولو لپاره. د ارزونې لېست توکي په قصد د عملي ګامونو په بڼه ټاکل شوي دي. نرۍ خپره شوې نمونه، د رنګولو سم وخت، تر سایتوپلازم تیاره هسته، او ثبت شوی غټوالی. هغه زده‌کوونکی چې دا څلور واړه تاییدولای شي، هغه مفهوم یې درک کړی چې دا درس یې د ښوولو لپاره جوړ شوی: مایکروسکوپونه توپیرونه ښيي، او رنګونه هغه توپیرونه رامنځته کوي چې د ښودلو ارزښت لري.