ലേഖനം

മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ ആഗിരണ സ്പെക്ട്രവും മോളാർ അബ്സോർപ്റ്റിവിറ്റിയും: സാഹചര്യങ്ങൾ രേഖപ്പെടുത്തിയ ഒരു റഫറൻസ്

മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ ആഗിരണ സ്പെക്ട്രവും മോളാർ അബ്സോർപ്റ്റിവിറ്റിയും: സാഹചര്യങ്ങൾ രേഖപ്പെടുത്തിയ ഒരു റഫറൻസ്

മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ സ്പെക്ട്രത്തിൽ നിന്നുള്ള ഒരു സംഖ്യ മറ്റൊരു സാഹചര്യത്തിൽ ഉപയോഗിക്കാൻ ശ്രമിക്കുന്നതുവരെ ആ സ്പെക്ട്രം ലളിതമായി തോന്നും. ഒരു ലാബ് ഏകദേശം 82,000 എന്ന മോളാർ എക്സ്റ്റിങ്ക്ഷൻ ഗുണാങ്കം റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുന്നു. മറ്റൊന്ന് 67,000 റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുന്നു. മൂന്നാമത്തേത് 100,000-ൽ കൂടുതലുള്ള മൂല്യം റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുന്നു. മൂന്നും അതത് അളവുകളുടെ ശരിയായ വിവരണങ്ങളായിരിക്കാം; എന്നാൽ അവയിലൊന്നും ഈ ഡൈയുടെ സാർവത്രിക സ്ഥിരാങ്കമല്ല.

വ്യത്യസ്തമായ രണ്ട് ആശയങ്ങൾ കൂട്ടിക്കലർത്തുന്നതാണ് ആശയക്കുഴപ്പത്തിന് കാരണം. ഒരു നിർദിഷ്ട സെല്ലിലുള്ള നിർദിഷ്ട ലായനിയിൽ നടത്തുന്ന അളവാണ് അബ്സോർബൻസ്. സാധാരണയായി എപ്സിലോൺ എന്ന് എഴുതുന്ന മോളാർ അബ്സോർപ്റ്റിവിറ്റി, ആ ലായനിയുടെ ഒരു മോഡലിലെ പരാമീറ്ററാണ്. മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ കൂട്ടുചേരൽ അവസ്ഥ മാറുമ്പോൾ മോഡലും മാറുന്നു; അതിനാൽ പരാമീറ്ററും മാറുന്നു. ഓരോ ഗുണാങ്കത്തെയും സാഹചര്യങ്ങൾ രേഖപ്പെടുത്തിയ മൂല്യമായി കാണുന്നതാണ് പ്രയോജനകരമായ ശീലം: തരംഗദൈർഘ്യം, ലായകം, pH അല്ലെങ്കിൽ ബഫർ, താപനില, സാന്ദ്രതാ പരിധി, പ്രകാശപാതയുടെ നീളം എന്നിവ ആ സംഖ്യയ്‌ക്കൊപ്പം ഉണ്ടായിരിക്കണം.

നേർപ്പിച്ച ജലീയ ലായനിയിലെ മോണോമർ ബാൻഡ്

നേർപ്പിച്ച ജലീയ ലായനിയിൽ, മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ കാറ്റയോണിന്റെ പ്രധാന ബാൻഡ് 664 മുതൽ 665 nm വരെ വരുന്ന പ്രദേശത്താണ്. ഉപകരണങ്ങളും കാലിബ്രേഷൻ രീതികളും അനുസരിച്ച് ഇത് സാധാരണയായി 664 മുതൽ 668 nm വരെയായി റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെടുന്നു. ഡൈയുടെ ഭൂരിഭാഗവും മോണോമർ രൂപത്തിലായിരിക്കാൻ തക്കവണ്ണം ലായനി നേർപ്പിച്ചതാണെങ്കിൽ, അളവ് നിർണയിക്കാൻ ഈ ബാൻഡാണ് ഉചിതം.

പ്രധാനമായി എടുത്തുപറയുന്ന സംഖ്യയെക്കാൾ സാഹചര്യങ്ങൾ പ്രധാനമാകുന്നത് എന്തുകൊണ്ടെന്ന് പ്രസിദ്ധീകരണങ്ങളിലെ മൂന്ന് മൂല്യങ്ങൾ വ്യക്തമാക്കുന്നു. 1 cm സെല്ലുകളിൽ ജലീയ സാമ്പിളുകളുടെ സാന്ദ്രത ഏകദേശം 7 micromolar-ൽ താഴെയായി നിലനിർത്തിയ കളിമൺ ഗവേഷകർ, 665 nm-ൽ ഏകദേശം 82,000 M-1 cm-1 എന്ന എപ്സിലോൺ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു. വളരെ നേർപ്പിച്ച ജലീയ സാമ്പിളുകൾക്കായുള്ള പരീക്ഷണാധിഷ്ഠിത കാലിബ്രേഷൻ ചരിവെന്ന നിലയിൽ ഈ മൂല്യം അസാധാരണമായി വിശദമായി രേഖപ്പെടുത്തിയിട്ടുണ്ട്. പിന്നീട് നടത്തിയ ഡീഅയോണൈസ്ഡ് ജലത്തിലെ പ്രാഥമിക കാലിബ്രേഷൻ, 2.34 മുതൽ 37.52 micromolar വരെയുള്ള സാന്ദ്രതയും 1 cm പ്രകാശപാതയും ഉപയോഗിച്ച്, മൊത്തം ഡൈയ്ക്ക് 665 nm-ൽ ഏകദേശം 67,100 M-1 cm-1 എന്ന മൂല്യം നൽകി. ഈ കുറഞ്ഞ ഫലം പ്രതീക്ഷിക്കാവുന്നതാണ്, പരസ്പരവിരുദ്ധമല്ല; കാരണം ആ കാലിബ്രേഷൻ പരിധിയുടെ മുകളിലെ പകുതിയിൽ ഇതിനകം തന്നെ ഗണ്യമായ അളവിൽ ഡൈമർ ഉണ്ട്. മൂന്നാമത്തെ മൂല്യമായ, 664 nm-ൽ ഏകദേശം 73,460 M-1 cm-1 എന്നത്, pH 6.86-ലും 293 K-ലും നടത്തിയ പഠനത്തിൽ നിന്നാണ്. ആ പഠനം നിരീക്ഷിച്ച സ്പെക്ട്രത്തെ മോണോമർ, ഡൈമർ ഭാഗങ്ങളായി വേർതിരിച്ചു; മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ ഫോട്ടോഫിസിക്സിനെക്കുറിച്ചുള്ള സമീപകാല വിമർശനാത്മക അവലോകനത്തിൽ ഇത് സംഗ്രഹിച്ചിട്ടുണ്ട്. ആ സംഖ്യ ഡീകോൺവല്യൂഷനിലൂടെ വേർതിരിച്ച മോണോമർ ഘടകത്തിന്റേതാണ്; മൊത്തം ഡൈയുടെ സാന്ദ്രതയ്‌ക്കെതിരെയുള്ള അബ്സോർബൻസിന്റെ നേരിട്ടുള്ള ചരിവല്ല.

പ്രായോഗികമായി ചെയ്യേണ്ടത് ഇതാണ്: നിങ്ങളുടെ സാമ്പിളുകളുടെ സാഹചര്യങ്ങളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്ന ഗുണാങ്കം തിരഞ്ഞെടുക്കുക, അല്ലെങ്കിൽ സ്വന്തം കാലിബ്രേഷൻ നടത്തുക. 30 micromolar ഫോസ്ഫേറ്റ് ബഫർ അസേയിൽ 82,000 എന്ന മൂല്യം ഉപയോഗിച്ചിട്ട് രേഖീയത ഇപ്പോഴും നിലനിൽക്കുമെന്ന് കരുതരുത്.

കുറഞ്ഞ തരംഗദൈർഘ്യത്തിലെ ഷോൾഡർ ഒരു മിശ്രിതമാണ്

സാന്ദ്രത കൂടുമ്പോൾ, 664 nm പീക്കിനെ അപേക്ഷിച്ച് 600 മുതൽ 615 nm വരെ വരുന്ന പ്രദേശത്തെ ഷോൾഡർ വർധിക്കുന്നു. ആധുനിക പഠനങ്ങൾ സാധാരണയായി H തരത്തിലുള്ള ഡൈമറിന്റെ സംഭാവന 605 മുതൽ 610 nm വരെ വരുന്ന പ്രദേശത്താണ് കാണിക്കുന്നത്. ജലത്തിലെ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ സമഗ്ര സ്പെക്ട്രൽ വിശകലനം, ഡൈമറിന്റെ പരമാവധി 607 nm-ലും ഉയർന്ന അഗ്രിഗേറ്റിന്റെ പരമാവധി 600 nm-ലും വേർതിരിച്ചറിയുന്നു; മോണോമർ റെസൊണൻസ് ഘടകങ്ങൾ 664, 650 nm എന്നിവയിലാണ്. ഇതിന്റെ പൂർണ പാഠം PMID 33251415-ന്റെ ഓപ്പൺ ആക്സസ് രേഖയിലൂടെ ലഭ്യമാണ്.

ആ ഷോൾഡറിനെ ശുദ്ധമായ ഡൈമർ അബ്സോർബൻസ് എന്ന് വിശേഷിപ്പിക്കരുത്. അതേ പ്രദേശത്ത് മോണോമറിന്റെ വൈബ്രോണിക് ഘടനയും സംഭാവന നൽകുന്നതിനാൽ, അളക്കുന്ന ഉയരം പല സംഭാവനകളുടെയും സൂപ്പർപൊസിഷനാണ്. ഒരു സമഗ്ര ഫിറ്റിൽ, മോണോമറും ഡൈമറും മാത്രം ഉൾപ്പെടുത്തിയ മോഡൽ 1.1 micromolar മുതൽ 3.4 millimolar വരെയുള്ള മുഴുവൻ പരിധിയിലും യോജിച്ചില്ല. ടെട്രാമർ കൂടി ചേർത്തപ്പോൾ ഏറ്റവും മികച്ച ഫിറ്റ് ലഭിച്ചു; 34 micromolar-ൽ താഴെ തന്നെ ടെട്രാമർ സിഗ്നൽ കണ്ടെത്താനായി. ഫിറ്റിലൂടെ ലഭിച്ച ഘടകങ്ങളുടെ ആഗിരണ ശക്തികൾ ഉയർന്നതായിരുന്നു: പ്രധാന മോണോമർ ഘടകത്തിന് 664 nm-ൽ ഏകദേശം 107,800 M-1 cm-1, ഡൈമറിന് 607 nm-ൽ ഏകദേശം 101,400, ടെട്രാമറിന് 600 nm-ൽ ഏകദേശം 138,500. ബഫർ ചേർക്കാത്ത ഡീഅയോണൈസ്ഡ് ജലത്തിൽ, 0 മുതൽ 0.15 M വരെ സോഡിയം ക്ലോറൈഡും 282 മുതൽ 333 K വരെ താപനിലയും ഉപയോഗിച്ചാണ് ഇവ ലഭിച്ചത്. ഇവ മോഡൽ ഉപയോഗിച്ച് വേർതിരിച്ച ഘടകങ്ങളാണ്; അതിനാൽ പരീക്ഷണാധിഷ്ഠിത ബിയർ–ലാംബർട്ട് ചരിവിന് പകരമായി അവ ഉപയോഗിക്കരുത്.

ഡൈമറൈസേഷന്റെ ശക്തി നേരിട്ട് അളന്നിട്ടുണ്ട്. pH 6.86-ലും 293 K-ലും നടത്തിയ ഒരു പഠനത്തിൽ ഏകദേശം 3,900 M-1 എന്ന ഡൈമറൈസേഷൻ സ്ഥിരാങ്കം ലഭിച്ചു. 5 micromolar പ്രവർത്തന ലായനി ഏതാണ്ട് രേഖീയമായി പെരുമാറുമ്പോൾ 50 micromolar സ്റ്റോക്ക് ലായനി അങ്ങനെ പെരുമാറാത്തത് എന്തുകൊണ്ടെന്ന് ഈ മൂല്യത്തിന്റെ വലിപ്പം വിശദീകരിക്കുന്നു. രീതിവികസനത്തിനിടെ പ്രയോജനകരമായ ഒരു പരിശോധനയാണ് 610 nm-ന് സമീപമുള്ള അബ്സോർബൻസും 665 nm-ന് സമീപമുള്ള അബ്സോർബൻസും തമ്മിലുള്ള അനുപാതം. സാന്ദ്രതയ്‌ക്കൊപ്പം ആ അനുപാതം ഉയരുമ്പോൾ, 664 nm-ലെ എപ്സിലോൺ ഇനി മാറ്റമില്ലാത്ത ഒരൊറ്റ രാസരൂപത്തെ വിവരിക്കുന്നില്ല.

പരസ്പരം രൂപാന്തരപ്പെടുന്ന ഒരു ജോഡി രാസരൂപങ്ങൾ ആധിപത്യം പുലർത്തുന്ന സാന്ദ്രതാ ഇടവേളയിൽ, സ്പെക്ട്രങ്ങൾക്ക് ഒരു പൊതു ഐസോസ്ബെസ്റ്റിക് ബിന്ദു ഉണ്ടായിരിക്കാം. ജലീയ ലായനികളുടെ പരമ്പരകളിൽ ഇത് പരീക്ഷണപരമായി 625 nm-ന് സമീപമാണ് കണ്ടിട്ടുള്ളത്. വ്യക്തവും സ്ഥാനം മാറാത്തതുമായ ഒരു ബിന്ദു രണ്ട് പ്രധാന രാസരൂപങ്ങൾ ഉള്ളതുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു. സാന്ദ്രത കൂടുമ്പോൾ ആ ബിന്ദു നീങ്ങുകയോ അപ്രത്യക്ഷമാകുകയോ ചെയ്താൽ, അത് ഉപകരണത്തിലെ പിശകായി കാണാതെ, ഉയർന്ന അഗ്രിഗേറ്റുകളോ മാറുന്ന സന്തുലിതാവസ്ഥകളോ ഉൾപ്പെട്ടുതുടങ്ങിയതിന്റെ മുന്നറിയിപ്പായി കാണുക.

ലായകം, pH, താപനില എന്നിവ സ്പെക്ട്രത്തെ മാറ്റുന്നു

ജലം കൂട്ടുചേരലിനെ അനുകൂലിക്കുന്നു. ഡൈമെഥൈൽ സൾഫോക്സൈഡ് ചേർക്കുന്നത് ഡൈമറൈസേഷനെ കുറയ്ക്കുന്നു, ആഗിരണത്തിന്റെയും ഫ്ലൂറസെൻസിന്റെയും പരമാവധികളെ കൂടുതൽ തരംഗദൈർഘ്യത്തിലേക്ക് മാറ്റുന്നു, ഫ്ലൂറസെൻസ് ക്വാണ്ടം യീൽഡ് ഏകദേശം നാലുമടങ്ങാക്കുന്നു. ജലത്തിലും DMSO മിശ്രിതങ്ങളിലും മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിനെക്കുറിച്ചുള്ള ലായക പഠനം ഇതാണ് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുന്നത്; ഇത് PMID 30933781 ആയി സൂചികപ്പെടുത്തിയിട്ടുണ്ട്. ആ പഠനം ജലീയ സ്പെക്ട്രങ്ങളെ മോണോമർ–ഡൈമർ സന്തുലിതാവസ്ഥയായി പരിഗണിക്കുന്നു; മോണോമർ അബ്സോർബൻസ് 650 മുതൽ 670 nm വരെ വരുന്ന പ്രദേശത്തും ഡൈമർ അബ്സോർബൻസ് 580 മുതൽ 615 nm വരെ വരുന്ന പ്രദേശത്തുമാണ്. 293.15 K-ലെ സ്പെക്ട്രങ്ങളിൽ നിന്ന് അത് ഡൈമറൈസേഷൻ സ്ഥിരാങ്കങ്ങൾ കണക്കാക്കുന്നു.

ആൽക്കഹോളുകൾ സ്ഥാനവും പ്രത്യക്ഷ ആഗിരണ ശക്തിയും മാറ്റുന്നു; എന്നാൽ അഗ്രിഗേഷൻ ഇല്ലാതാക്കുന്നില്ല. മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിനെക്കുറിച്ചുള്ള ഒരു ലായക പഠനത്തിൽ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്ത, 31.3 micromolar സാന്ദ്രതയിലും മുറിയിലെ താപനിലയിലും നടത്തിയ ഒരു പ്രാഥമിക താരതമ്യത്തിൽ, നീണ്ട തരംഗദൈർഘ്യത്തിലെ പരമാവധി ജലത്തിൽ 665 nm ആയിരുന്നപ്പോൾ മെഥനോളിൽ 655 nm ആയിരുന്നു. മൊത്തം ലായനിയുടെ പ്രത്യക്ഷ മൂല്യങ്ങൾ ജലത്തിൽ ഏകദേശം 37,100-ഉം മെഥനോളിൽ 60,800-ഉം ആയിരുന്നു. ജലരഹിത എഥനോളിൽ 298 K-ൽ നടത്തിയ മറ്റൊരു സാധൂകരണത്തിൽ, പരമാവധി 655 nm-ലും എപ്സിലോൺ ഏകദേശം 68,000-ഉം ആയിരുന്നു.

സാധാരണ pH മാറ്റങ്ങൾ, പല പ്രോട്ടോക്കോളുകളും കരുതുന്നതിനെക്കാൾ കുറവാണ് സ്പെക്ട്രത്തെ മാറ്റുന്നത്. മുകളിൽ ഉദ്ധരിച്ച വിമർശനാത്മക അവലോകനം റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുന്നത്, ഏകദേശം pH 2 മുതൽ pH 12 വരെ പരമാവധി 665 nm-ന് സമീപം നിലനിന്നുവെന്നും pH 11 വരെ ആഗിരണ ശക്തിയിൽ ചെറിയ മാറ്റങ്ങൾ മാത്രമേ ഉണ്ടായിരുന്നുള്ളൂവെന്നുമാണ്. ബഫറിന്റെ തരവും അയോണിക് ശക്തിയും, രേഖപ്പെടുത്തിയ pH-നോളം തന്നെ ഫലങ്ങളെ മാറ്റാം. അതിനാൽ pH മീറ്ററിലെ വായന മാത്രം രേഖപ്പെടുത്താതെ, യഥാർഥ ബഫറും ലവണവും രേഖപ്പെടുത്തുക. ശക്തമായ അമ്ലമോ ശക്തമായ ക്ഷാരമോ ഉള്ള സാഹചര്യം വേറിട്ടതാണ്; കാരണം തിരിച്ചുമാറാവുന്ന കൂട്ടുചേരലിന് പകരം ഡൈ രാസമാറ്റത്തിന് വിധേയമാകാം. താപനിലയും ലവണവും സന്തുലിതാവസ്ഥയെ മാറ്റുന്നു; അതുകൊണ്ടാണ് 2020-ലെ ജല പഠനത്തിൽ ഇവ രണ്ടും ബോധപൂർവം വ്യത്യാസപ്പെടുത്തിയത്.

സംഖ്യയുടെ സാധുത നിലനിർത്തുന്ന അളക്കൽ

പരിമാണാത്മക പ്രവർത്തനത്തിന്റെ അടിസ്ഥാനം ബിയർ–ലാംബർട്ട് ബന്ധമാണ്: അബ്സോർബൻസ് എന്നത് എപ്സിലോൺ, സാന്ദ്രത, പ്രകാശപാതയുടെ നീളം എന്നിവയുടെ ഗുണനഫലമാണ്. അതോടൊപ്പം, നിങ്ങളുടെ സാഹചര്യങ്ങളിൽ രേഖീയ ഇടവേള യഥാർഥത്തിൽ നിലനിൽക്കുന്നുവെന്ന തെളിവും വേണം.

കുറഞ്ഞ micromolar സാന്ദ്രതകളിലെ പ്രവർത്തനത്തിന് 1 cm സെൽ ഉപയോഗിക്കുക. എപ്സിലോൺ ഏകദേശം 82,000 ആയിരിക്കുമ്പോൾ, 5 micromolar-ൽ അബ്സോർബൻസ് ഏകദേശം 0.41-ഉം 10 micromolar-ൽ ഏകദേശം 0.82-ഉം ലഭിക്കും. സാധാരണ ജലത്തിൽ മോണോമറിനെ കേന്ദ്രീകരിച്ചുള്ള അളക്കലിന്, പതിനുകളുടെ micromolar പരിധിയിലേക്ക് ഏറെ നീളുന്ന കാലിബ്രേഷൻ നടത്തുന്നതിനെക്കാൾ, ഏകദേശം 5 മുതൽ 7 micromolar വരെയോ അതിൽ താഴെയോ തുടരുന്നതാണ് കൂടുതൽ സുരക്ഷിതം. ഉയർന്ന സാന്ദ്രതയുള്ള സ്റ്റോക്ക് ലായനികൾക്ക്, 1-നെക്കാൾ വളരെ ഉയർന്ന അബ്സോർബൻസ് അംഗീകരിക്കുന്നതിനുപകരം പ്രകാശപാതയുടെ നീളം കുറയ്ക്കുക.

അതേ മാട്രിക്സ് ഉപയോഗിച്ച് ബ്ലാങ്ക് ചെയ്യുക: അതേ ഗുണനിലവാരത്തിലുള്ള ജലം, അതേ സഹലായക അംശം, അതേ ബഫറും ലവണങ്ങളും, ഡൈ മാത്രം ഒഴിവാക്കി. അതേ താപനിലയിൽ അതേ മാട്രിക്സിൽ കാലിബ്രേഷൻ ലായനികൾ തയ്യാറാക്കുക. രീതിവികസനത്തിനിടെ, ഒരൊറ്റ തരംഗദൈർഘ്യം മാത്രം വായിക്കുന്നതിനുപകരം മുഴുവൻ ദൃശ്യപ്രകാശ പരിധിയും സ്കാൻ ചെയ്യുക; ഏകദേശം 550 മുതൽ 750 nm വരെ ആയാൽ ഉചിതം. ഉയരം മാത്രമല്ല, ആകൃതിയും നിരീക്ഷിക്കുക. തുടർച്ചയായ നേർപ്പിക്കൽ നോർമലൈസ് ചെയ്ത ആകൃതിയെ മാറ്റുന്നുവെങ്കിൽ, ആ സംവിധാനത്തിന്റെ രാസസ്വഭാവം സാന്ദ്രതയെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു. സ്ഥിരമായ പരമാവധിയും സ്ഥിരമായ 610 മുതൽ 665 nm വരെയുള്ള അബ്സോർബൻസ് അനുപാതവും, ഉയർന്ന R സ്ക്വയർ മൂല്യം മാത്രം നൽകുന്നതിനെക്കാൾ, സ്വീകാര്യമായ പരിധിക്കുള്ള ശക്തമായ തെളിവുകളാണ്.

റിയാജന്റിന്റെ രൂപം രേഖപ്പെടുത്തുക. വാണിജ്യ ഉൽപ്പന്നം ജലരഹിത മെഥൈൽതയോണിനിയം ക്ലോറൈഡോ ട്രൈഹൈഡ്രേറ്റ് പോലുള്ള ഒരു ഹൈഡ്രേറ്റോ ആയിരിക്കാം. അതിനാൽ സ്റ്റോക്ക് ലായനിയുടെ കണക്കുകൾക്ക് ഉപയോഗിക്കുന്ന മോളാർ പിണ്ഡം യഥാർഥ കുപ്പിയിലെ വസ്തുവുമായി പൊരുത്തപ്പെടണം. ലാബുകൾക്കിടയിൽ രേഖപ്പെടുത്തിയ മോളാർ സാന്ദ്രതകളിലെ വ്യത്യാസത്തിന്റെ ഒരു ഭാഗം ഈ നടപടി മാത്രം വിശദീകരിക്കുന്നു. പരിമാണാത്മക അസേ കണക്കുകളിൽ ഫലങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുമ്പോഴും, ഫോർമുലേഷന്റെ സ്ഥിരതാ പരിശോധനകളെ സ്പെക്ട്രങ്ങൾ പിന്തുണയ്ക്കുമ്പോഴും, അശുദ്ധികളുടെ പ്രൊഫൈലുകൾക്ക് ശുദ്ധതയും സ്പെസിഫിക്കേഷനുകളും അവലോകനം ചെയ്യേണ്ടിവരുമ്പോഴും ഇതേ കൃത്യത ആവശ്യമാണ്.

സാഹചര്യങ്ങൾ രേഖപ്പെടുത്തിയ സംഗ്രഹം

ഈ പട്ടികയെ പരസ്പരം പകരം ഉപയോഗിക്കാവുന്ന സ്ഥിരാങ്കങ്ങളുടെ ഉറവിടമായി കാണാതെ, ലാബ് രേഖയ്‌ക്കുള്ള പ്രാരംഭ മാതൃകയായി ഉപയോഗിക്കുക.

രാസരൂപവും തരംഗദൈർഘ്യവുംസാഹചര്യങ്ങൾറിപ്പോർട്ട് ചെയ്ത എപ്സിലോൺ അല്ലെങ്കിൽ പെരുമാറ്റം
മോണോമർ, 665 nmജലം, ഏകദേശം 7 micromolar-ൽ താഴെ, 1 cm, pH റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തിട്ടില്ലഏകദേശം 82,000 M-1 cm-1, മൊത്തം ഡൈയുടെ പരീക്ഷണാധിഷ്ഠിത ചരിവ്
മോണോമർ ഘടകം, 664 nmജലം, pH 6.86, 293 K, ഡീകോൺവല്യൂഷനിലൂടെ ഡൈമറിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചത്ഏകദേശം 73,460 M-1 cm-1, മോണോമർ ഭാഗം മാത്രം
മൊത്തം ഡൈ, 665 nmഡീഅയോണൈസ്ഡ് ജലം, 2.34 മുതൽ 37.52 micromolar വരെ, 1 cmഏകദേശം 67,100 M-1 cm-1, ഭാഗികമായി അഗ്രിഗേഷൻ നടക്കുന്ന പരിധിയിലെ കാലിബ്രേഷൻ ചരിവ്
മോണോമർ റെസൊണൻസ്, 664 nmബഫർ ചേർക്കാത്ത ഡീഅയോണൈസ്ഡ് ജലം, 1.1 micromolar മുതൽ 3.4 millimolar വരെയുള്ള പരമ്പര, NaCl 0 മുതൽ 0.15 M വരെ, 282 മുതൽ 333 K വരെഏകദേശം 107,800 M-1 cm-1, മോഡൽ ഉപയോഗിച്ച് വേർതിരിച്ച ഘടകം
ഡൈമർ, 607 nmമുകളിലെ അതേ പരമ്പരഏകദേശം 101,400 M-1 cm-1, മോഡൽ ഉപയോഗിച്ച് വേർതിരിച്ച ഘടകം
ടെട്രാമർ, 600 nmമുകളിലെ അതേ പരമ്പരഏകദേശം 138,500 M-1 cm-1, മോഡൽ ഉപയോഗിച്ച് വേർതിരിച്ച ഘടകം
മൊത്തം ഡൈ, ജലത്തിൽ 665 nm, മെഥനോളിൽ 655 nm31.3 micromolar, മുറിയിലെ താപനിലജലത്തിൽ ഏകദേശം 37,100, മെഥനോളിൽ ഏകദേശം 60,800, ആ സാന്ദ്രതയിലെ പ്രത്യക്ഷ മൂല്യങ്ങൾ
മോണോമർ–ഡൈമർ സന്തുലിതാവസ്ഥജലം മുതൽ DMSO മിശ്രിതങ്ങൾ വരെ, 293.15 KDMSO ഡൈമർ രൂപീകരണം കുറയ്ക്കുന്നു, പരമാവധികൾ കൂടുതൽ തരംഗദൈർഘ്യത്തിലേക്ക് മാറുന്നു, ഉത്സർജന യീൽഡ് ഉയരുന്നു

അതിനാൽ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന്റെ അബ്സോർബൻസ് തരംഗദൈർഘ്യം എന്നത്, വിശദമായ അടിക്കുറിപ്പ് ആവശ്യമായ ഒരു ഹ്രസ്വ ഉത്തരമാണ്. നിങ്ങൾ അളന്ന ലായനിയിൽ, നിങ്ങൾ അളന്ന സാന്ദ്രതയിൽ, നിങ്ങൾ കണ്ടെത്തിയ പീക്ക് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുക. നേർപ്പിച്ച ഒരു ജലീയ ലായനിയിൽ 664 nm-ന് സമീപം ലഭിച്ച മൂല്യം തെറ്റായ ഒരു സാർവത്രിക സ്ഥിരാങ്കമായി മാറാതിരിക്കാൻ ആ ശീലം സഹായിക്കുന്നു.