EMB agar li hember MacConkey agar: hilbijartin û şirovekirina medyayê

Xwendekarek heman nimûneya avê li ser du tabaxan bi rêza streak dike. Li ser yekê, koloniyên tarî yên bi biriqînek metalî ya kesk xuya dibin. Li ser ya din, koloniyên pembe yên ronahî bi haloyek nezelal xuya dibin. Her du tabax jî ji heman lûleyê hatine inokulekirin, li kêleka hev hatine inkubekirin û di heman saetê de hatine xwendin. Xwendekar dipirse kîjan tabax rast e.

Her du tabax rast in. Ew bersiva pirsên cuda didin. Tevlihevî ji vê yekê tê ku ev du medya wek ekranên ku dikarin li şûna hev ji bo bakteriyên rûvî werin bikaranîn tên dîtin. Armancek wan a hevpar heye: hilbijartina organîzmayên enterîk ên Gram-negatîf û cudakirina fermantkerên laktozê ji nefermantkeran, lê ew vê armancê bi kîmyaya cuda û mantiqa dîtbarî ya cuda pêk tînin. Gava ku hûn van du têgehên bingehîn bibînin, hilbijartina tabaxê û xwendina koloniyan dibe karek asayî.

Bersiva kurt

EMB agar du boyaxan, eosin Y û methylene blue, bikar tîne ku her du karan bi hev re dikin: ew mezinbûna Gram-pozîtîfan asteng dikin û li dora hilberînerên asîdê yên xurt çökin, da ku koloniyên tarî çêbibin; bi awayê klasî ji bo Escherichia coli biriqînek metalî ya kesk tê dîtin. MacConkey agar karan ji hev vediqetîne: xwêyên safra bi crystal violet re Gram-pozîtîfan asteng dikin, laktoz ji bo fermantasyonê substrate dide, û neutral red asîdê wek koloniyên pembe an sor nîşan dide. Heke kar nîşandana pêşîn a eşkere ya E. coli be, EMB cihê xwe heye. Heke kar cudakirina zelal a pembe li hember bê-reng a fermantkerên laktozê ji nefermantkeran be, nemaze di pêvajoyên feqîr an mîzê de, MacConkey bi gelemperî hêsantir tê xwendin. Tu tabax bi rengê tenê organîzmek nasnake.

EMB: boyaxên ku di heman demê de hilbijêrin û agahdar dikin

Têgeha EMB hilbijartin û nîşandanê di heman molekulan de dicivîne. Protokola ASM ya eosin methylene blue agar EMB hem wek medya hilbijêr û hem jî cudaker danasîne; cotê boyaxan gelek organîzmayên Gram-pozîtîf asteng dike, di heman demê de fermantasyona laktozê wergirtin û çökmendina boyaxê bi pêş ve dibe. Formulasyona standard a Levine peptone, lactose, phosphate, eosin Y, methylene blue û agar dihewîne, wek ku di rêbaza FDA BAM ji bo Levine EMB agar de hatine lîstekirin. Bala xwe bidin ku hin receptên kevn ên EMB li gel lactose sucrose jî zêde dikirin, lê Levine EMB lactose heye û sucrose tune ye; ji ber vê yekê qeyd bikin laboratuwara we kîjan formulan hildigire.

Xwendina EMB tê wateya xwendina tevgera boyaxê. Fermantasyona xurt a lactose têra asîdê hilberîne ku çökmendina giran a boyaxê pêş bixe, û ji E. coli re navendên şîn-tarî heta reş û, di rewşa klasîk de, di ronahiya vegeriyayî de biriqînek metalî ya kesk bide. Fermantkerên lawaztir wek Enterobacter û Klebsiella bi gelemperî wek koloniyên mukoyîd ên pembe heta mor mezin dibin bêyî wê biriqînê. Nefermantkerên wek Salmonella, Shigella û Proteus bi gelemperî wek koloniyên bê-reng an nîv-şeffaf mezin dibin, ji ber ku ew pêla asîdê ya ku boyaxan dicöke nahilberînin. Gram-pozîtîf bi gelemperî tên astengkirin, lê asta astengkirinê mutleq nîne û li gorî strain û hilberê diguhere. Kîmyaya temam a amadekirina boyaxê, di nav de sedema ku methylene blue ji destpêkê ve wek boyaxek katyonîk tevdigere, girêdayî nîqaşek cuda ya formulasyonên boyaxan e, û çarçoveya giştî ya mîkroskopiyê di atlasek rêbazên boyaxkirinê de heye. Ev gotar li ser hilbijartin û xwendina tabaxê dimîne.

Wêneya li jor nimûneyî ye. Ew mantiqa dîtbarî ya ku divê hûn li bendê bin nîşan dide: li ser EMB koloniyên tarî yên bi biriqînê, celebên mukoyîd ên pembe û celebên zerik; li hember wan, li ser MacConkey celebên pembe li hember zerik. Ji bo fêrbûna patternê wê bikar bînin, piştre her encamê li hember kontrolên wênekirî û belavoka hilberê ya ji bo heman medyaya li ser maseya we piştrast bikin.

MacConkey: karên ji hev veqetandî, qaîdeya dîtbarî ya hêsantir

Têgeha MacConkey her karî dide hêmanek cuda. Protokola ASM ya MacConkey agar heman çarçoveya hilbijêr û cudaker pêşkêş dike, û rêbaza FDA BAM ji bo MacConkey agar hêmanên karî lîste dike: peptones, lactose, bile salts, salt, neutral red, crystal violet û agar. Xwêyên safra bi crystal violet re li dijî Gram-pozîtîfan hilbijartin dikin. Lactose substrateya fermantasyonê peyda dike. Neutral red wek nîşandera pH tevdigere û li cihê ku asîd çêdibe dibe pembe heta sor, carinan li dora fermantkerên xurt safra jî dicöke.

Qaîdeya xwendinê bi mebest hêsan e: pembe tê wateya fermantkera lactose, bê-reng an zerik tê wateya nefermantker. E. coli pembe heta sor xuya dike, gelek caran bi haloyek çökmendina safra. Klebsiella û Enterobacter pembe xuya dibin û ji ber kapsulên xwe pir caran mukoyîd in. Salmonella, Shigella, Proteus û gelek rodên din ên Gram-negatîf bê-reng xuya dibin. Qezencek din di laboratuwarên perwerdehiyê de girîng e: xwêyên safra bi gelemperî swarming-a Proteus kêm dikin, ji ber vê yekê li ser MacConkey ji medyayên nehilbijêr hêsantir e ku koloniyên veqetandî werin bidestxistin; lê astengkirin mutleq nîne û li cihên ku kontrola swarming armanca sereke ye, alternatîfên bê-xwê hene.

Sedema molekularî ya vê tevgera boyaxan vedigere bar û avahiyê. Methylene blue boyaxek phenothiazine ya katyonîk e ku avahî û taybetmendiyên wê meyla wê ya ber bi rûberên bakteriyel ên asîdî rave dikin; heman meyl dema ku ew di herêmên asîdî li ser EMB dicöke jî kar dike.

Berawirdkirin bi awirekê

Tabloyê wek pêvajoyek biryardanê bixwînin. Dema ku pratîk hewce dike xwendekar gradienta hêza fermantasyonê bi yek encama pir eşkere bibînin, EMB wê nîşan dide. Dema ku pratîk hewce dike berî piştrastkirina biyokîmyayî cudakirinek binary ya bilez bike, MacConkey wê nîşan dide.

Kîjan medya ji bo kîjan nimûneyê

Ji bo pratîkên avê yên ku armanca wan naskirina pêşîn a fecal coliform an E. coli ye, EMB balkêş e ji ber ku biriqîn ji aliyê dîtbarî ve taybet e. MacConkey jî Gram-negatîfên enterîk dikare rêve bibe û di dîrokê de ji bo avê hatiye bikaranîn, lê tu tabax li şûna rêbazek rêziknameyî ya avê nagire; dibe ku ew rêbaz li gorî testê medya wek modified mTEC an MI tayîn bike. Rêbaza ku laboratuwara we mecbûr e bişopîne kontrol bikin.

Ji bo cudakirina bi şêwaza feqîrê ya fermantkeran ji nefermantkeran, MacConkey bi gelemperî ji van her duyan bikêrhatîtir e. Karê pratîk ê feqîrê ji bo Salmonella an Shigella bi gelemperî medyayên enterîk ên hilbijêrtir wek XLD an Hektoen enteric jî zêde dike, li şûna ku tenê xwe bispêre MacConkey.

Ji bo perwerdehiya bi şêwaza mîzê ku pêvajoya klînîk teqlîd dike, MacConkey bi blood agar re cot bikin. MacConkey cudakirina destpêkê ya Gram-negatîf dide, di heman demê de blood agar organîzmayên ku MacConkey asteng dike vedigire. Ev cotkirin di danasînên klînîk ên sazkirina çanda mîzê de standard e.

Ji bo perwerdehiya saf a têgehî, her duyan bi kar bînin. EMB fêr dike ku hêza fermantasyonê girîng e û molekulek dikare du rolan bi cih bîne. MacConkey sêwirana modular fêr dike: hilbijêr, substrate û nîşander ji hev veqetandî dimînin. Xwendekarên ku E. coli ya naskirî, Klebsiella aerogenes ya naskirî û Salmonella ya naskirî li kêleka hev li ser her du medyayan streak dikin, kêm caran dîsa van du mantiqan tevlihev dikin.

Xetereyên xwendinê yên ku her termê dubare dibin

Şaşiya herî gelemperî naskirin bi rengê tenê ye. Pembe li ser MacConkey dikare E. coli, Klebsiella, Enterobacter an fermantkerek din be. Bê-reng dikare Salmonella, Shigella, Proteus, Pseudomonas an nefermantkerek din be. Reng phenotipek screening e ku karê piştrastkirinê wek Gram stain, oxidase, panelên biyokîmyayî an naskirina bi amûr rêberî dike; ew navê species nîne.

Şaşiya duyemîn zêde-şirovekirina nebûna biriqînê ye. Hin koloniyên rastîn ên E. coli, nemaze yên veqetandî, li ser EMB biriqîna metalî ya hindik an tu biriqînê nabin. Nebûna biriqînê E. coli dernakeve, û hebûna biriqînê jî wê nepiştrast dike. Biriqînê wek nîşanek pêşîn bibînin.

Şaşiya sêyemîn berawirdkirina tabaxên bi temenên cuda ye. Fermantkerên lactose yên dereng piştî inkubasyona dirêj dikarin li ser MacConkey pembe bibin, ku cudahiya zelal a fermantker li hember nefermantker nezelal dike. Di saeta ku laboratuwar diyarkiriye de bixwînin û dema inkubasyonê bi encamê re qeyd bikin.

Şaşiya çaremîn xwendina mezinbûna tevlihev wek yek organîzm e. Koloniyek pembe li kêleka koloniyek bê-reng du phenotipan tomar dike, ne yek phenotypeya navîn. Koloniyên baş veqetandî hilbijêrin û her morphotype bi serê xwe bixebitînin. Tekstûra mukoyîd xetereyek heman rengî çêdike: hem Klebsiella hem jî Enterobacter dikarin mukoyîd xuya bibin, ji ber vê yekê kapsul bi tenê navê diyar nake. Organîzmê ku berê wek Enterobacter aerogenes dihat hînkirin niha wek Klebsiella aerogenes tê klasîfîkekirin, û ev rave dike çima chartên kevn û etîketên nû wek ku nakok bin xuya dibin.

Kontrol û qaîdeyek dawîn

Her danişînê kontrolên wênekirî an nû bi kar bînin: E. coli ji bo reaksiyona fermantkera xurt, Klebsiella aerogenes ji bo fermantasyona mukoyîd bê biriqîna klasîk, strain-ek Salmonella ji bo reaksiyona nefermantkera bê-reng, û Staphylococcus aureus ji bo piştrastkirina astengkirina Gram-pozîtîf li ser heman hilbera we. Hejmarên strain û krîterên pejirandinê bi belavoka çêker re hevaheng bikin, ji ber ku hilbijartin bi naveroka bile, crystal violet û boyaxê diguhere.

Li ser maseya karê yek hevok bîr bînin. EMB boyaxan bikar tîne ku hem hilbijêrin û hem jî agahdar dikin; ev nîşanek eşkere ya E. coli dide, lê xwendina wê hinekî hûrtir e. MacConkey hilbijartin ji agahdarkirinê vediqetîne; ev cudakirinek sade ya pembe li hember zerik dide, lê hûrguliyên fermantasyonê kêmtir in. Medyaya ku têgeha wê bi pirsê re li hev tê hilbijêrin, rengê bi testên guncan piştrast bikin, û wê demê ev du tabax dev ji pêşbaziyê berdidin û dest bi hevkariyê dikin.