ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಳಸಿ ಕೆನ್ನೆಯ ಕೋಶಗಳಿಗೆ ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚುವುದು: ಏನನ್ನು ಗಮನಿಸಬೇಕು

ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿನಿಯೊಬ್ಬಳು ಕೆನ್ನೆಯ ಕೋಶಗಳ ನಿಲಂಬನದ ಒಂದು ಹನಿಯನ್ನು ಸ್ಲೈಡ್ ಮೇಲೆ ಇಟ್ಟು ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದಲ್ಲಿ ನೋಡುತ್ತಾಳೆ. ಬಹುತೇಕ ಏನೂ ಕಾಣಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಉಜ್ಜ್ವಲ ದೃಶ್ಯಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ ಕೆಲವು ಮಸುಕಾದ ನೆರಳುಗಳು ತೇಲುತ್ತವೆ. ಅವಳು ಫೋಕಸ್ ಸರಿಪಡಿಸುತ್ತಾಳೆ, ನಂತರ ಬೆಳಕನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತಾಳೆ, ಕೊನೆಗೆ ಸ್ಲೈಡ್ ಖಾಲಿಯಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೀರ್ಮಾನಿಸುತ್ತಾಳೆ. ಸ್ಲೈಡ್ ಖಾಲಿಯಾಗಿಲ್ಲ. ಕೋಶಗಳು ಅಲ್ಲಿಯೇ ಇವೆ. ಅವು ಬಹುತೇಕ ಪಾರದರ್ಶಕವಾಗಿವೆ; ಈ ಪಾರದರ್ಶಕತೆಯ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಪರಿಹರಿಸುವುದೇ ಈ ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚುವಿಕೆಯ ಉದ್ದೇಶ.

ನಿರೀಕ್ಷೆ ಮತ್ತು ಕಾಣುವ ಚಿತ್ರದ ನಡುವಿನ ಈ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ವಿಧಾನ ಆರಂಭಿಸುವ ಮೊದಲೇ ವಿವರಿಸುವುದು ಉಪಯುಕ್ತ. ಕ್ಯಾಮೆರಾದ ಜೂಮ್ ದೂರದ ಫಲಕವನ್ನು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ತೋರಿಸುವಂತೆ, ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವೂ ವಿವರಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಆರಂಭಿಕರು ನಿರೀಕ್ಷಿಸುತ್ತಾರೆ. ಉಜ್ಜ್ವಲ ಕ್ಷೇತ್ರ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಕೆಲಸ ಹೆಚ್ಚು ಸೀಮಿತ: ಅದು ಬೆಳಕಿನ ಹೀರಿಕೆಯಲ್ಲಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚದ ಕೆನ್ನೆಯ ಕೋಶವು ಬಹುತೇಕ ಬೆಳಕನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವುದಿಲ್ಲ; ಆದ್ದರಿಂದ ಅದು ದೃಶ್ಯದಲ್ಲಿ ಬಹುತೇಕ ಯಾವುದೇ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನೂ ಉಂಟುಮಾಡುವುದಿಲ್ಲ. ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಆ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ. ಅದು ಕೋಶದೊಳಗೆ ಅಸಮಾನವಾಗಿ ಬಂಧಿಸಿ, ರಚನೆಯನ್ನು ದೃಶ್ಯ ವೈದೃಶ್ಯವಾಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ. ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳು ಈ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಯನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಂಡ ಬಳಿಕ, ಮುಂದಿನ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಹಂತವೂ ಕೇವಲ ಸೂಚನೆಯ ಬದಲು ಅದರ ಸಹಜ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಅರ್ಥವಾಗುತ್ತದೆ.

ಶಾಲಾ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದಲ್ಲಿ ಸರಳ ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚುವಿಕೆಗಳು ಹೇಗೆ ದೃಶ್ಯ ವೈದೃಶ್ಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತವೆ ಎಂಬ ಹಿನ್ನೆಲೆ ಇಲ್ಲಿ ನೆರವಾಗುತ್ತದೆ. ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚುವ ಮೊದಲು ಉಜ್ಜ್ವಲ ಕ್ಷೇತ್ರ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವನ್ನು ಸಿದ್ಧಪಡಿಸುವ ಕುರಿತು ಪುನರಾವಲೋಕನವು ವಿಫಲವಾಗುವ ಸ್ಲೈಡ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಅರ್ಧದಷ್ಟನ್ನು ತಪ್ಪಿಸುತ್ತದೆ. ಬಣ್ಣದ ಹಿಂದಿರುವ ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರವನ್ನು ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ ವೀಕ್ಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಳಕೆಯ ಪರಿಚಯ ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ; ಈ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ರಂಜಕವು ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ಮೇಜಿನ ಮೇಲೆ ಪದೇಪದೇ ಕಾಣಿಸಿಕೊಳ್ಳುವುದೇಕೆ ಎಂಬುದನ್ನೂ ಅದು ತಿಳಿಸುತ್ತದೆ.

ತರಗತಿಯಲ್ಲಿ ಅನುಸರಿಸುವ ವಿಧಾನ

ಕೆಳಗಿನ ತೇವ ಮಾದರಿ ಅಳವಡಿಕೆ ವಿಧಾನವು ಸಾಮಾನ್ಯ ತರಗತಿಗಳಿಗೆ ಹೆಚ್ಚು ಸರಳವಾದ ಆಯ್ಕೆ. ಇದಕ್ಕೆ ಜ್ವಾಲೆ ಅಥವಾ ಸ್ಥಿರೀಕರಣದ ಹಂತ ಬೇಕಾಗಿಲ್ಲ. ಕೆಲವು ಕಾಲೇಜು ಕೈಪಿಡಿಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸುವ ಸ್ಥಿರೀಕರಿಸಿದ ಲೇಪನ ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ ಗಾಳಿಯಲ್ಲಿ ಒಣಗಿಸುವುದು ಮತ್ತು ಅಲ್ಪಕಾಲ ಉಷ್ಣ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಮಾಡುವ ಹಂತಗಳಿರುತ್ತವೆ. Biology LibreTexts ಮೂಲಕ ಪ್ರಕಟಿಸಲಾದ North Central Texas College ಕೆನ್ನೆಯ ಕೋಶಗಳ ಲೇಪನ ಚಟುವಟಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಇದನ್ನು ಕಾಣಬಹುದು. ಆದರೆ ಉಷ್ಣ ಸ್ಥಿರೀಕರಣವು ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಶಾಸ್ತ್ರದ ರೂಢಿ; ಉಪಕಲಾ ಕೋಶಗಳನ್ನು ನೋಡಲು ಅದು ಅಗತ್ಯವಲ್ಲ.

ಬೇಕಾಗುವ ಸಾಮಗ್ರಿಗಳು: ಸ್ವಚ್ಛ ಸ್ಲೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಕವರ್‌ಸ್ಲಿಪ್‌ಗಳು, ಕ್ರಿಮಿರಹಿತ ಒಮ್ಮೆ ಮಾತ್ರ ಬಳಸುವ ಸ್ವ್ಯಾಬ್‌ಗಳು (ಇವು ಉತ್ತಮ ಆಯ್ಕೆ) ಅಥವಾ ಹೊಸ ಚಪ್ಪಟೆ ಹಲ್ಲುಕಡ್ಡಿಗಳು, 0.5 ರಿಂದ 1 ಪ್ರತಿಶತ ಜಲೀಯ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಇರುವ ಡ್ರಾಪರ್ ಬಾಟಲಿ, ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ಅಥವಾ ಅಯಾನುಗಳನ್ನು ತೆಗೆದ ನೀರು, ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಕಾಗದ, ಕೈಗವಸುಗಳು ಮತ್ತು 100x ಹಾಗೂ 400x ಒಟ್ಟು ವರ್ಧನೆಯುಳ್ಳ ಸಂಯುಕ್ತ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ.

1. ಸಾಮಾನ್ಯ ನೀರಿನಿಂದ ಬಾಯಿಯನ್ನು ತೊಳೆಯಿರಿ. ಇದರಿಂದ ನಂತರ ತೀವ್ರವಾಗಿ ಬಣ್ಣ ಹಿಡಿದು ಕೋಶಗಳಿಂದ ಗಮನವನ್ನು ಬೇರೆಡೆ ಸೆಳೆಯುವ ಆಹಾರದ ಕಣಗಳು ಹೊರಹೋಗುತ್ತವೆ.
2. ಪ್ರತಿಯೊಬ್ಬ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಯೂ ತನ್ನದೇ ಕೆನ್ನೆಯಿಂದ ಮಾತ್ರ ಮಾದರಿ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಬೇಕು. ಹೊಸ ಕ್ರಿಮಿರಹಿತ ಸ್ವ್ಯಾಬ್‌ನಿಂದ ಕೆನ್ನೆಯ ಒಳಭಾಗವನ್ನು ಮೃದುವಾಗಿ ಸವರಿ. ಒತ್ತಿರಿ, ಕೆರೆಯಬೇಡಿ. ಯಾವುದೇ ಅಸೌಕರ್ಯ ಅಥವಾ ರಕ್ತಸ್ರಾವ ಉಂಟಾಗುವ ಮುನ್ನವೇ ನಿಲ್ಲಿಸಿ.
3. ಸ್ವಚ್ಛ ಸ್ಲೈಡ್‌ನ ಮಧ್ಯಭಾಗದಲ್ಲಿ ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಅನ್ನು ಉರುಳಿಸಿ ತೆಳುವಾದ ಪದರವನ್ನು ಹರಡಿ. ಸುಲಭವಾಗಿ ವೀಕ್ಷಿಸಬಹುದಾದ ಸ್ಲೈಡ್ ಸಿಗುವುದನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವ ಪ್ರಮುಖ ಅಂಶವೆಂದರೆ ತೆಳುವಾದ ಪದರ. ದಪ್ಪ ಬಿಳಿ ಸಂಗ್ರಹವು ಬಣ್ಣ ಹಿಡಿದ ಬಳಿಕ ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಲಾಗದ ನೀಲಿ ರಾಶಿಯಾಗುತ್ತದೆ.
4. ಲೇಪನದ ಮೇಲೆ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂನ ಒಂದು ಹನಿ ಹಾಕಿ. ಅದನ್ನು 1 ರಿಂದ 3 ನಿಮಿಷ ಬಿಡಿ. ಅನೇಕ ಕಾಲೇಜು ವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದು ನಿಮಿಷ ಸಾಕಾಗುತ್ತದೆ; NCERT IXನೇ ತರಗತಿಯ ವಿಜ್ಞಾನ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ಕೈಪಿಡಿ ತಾತ್ಕಾಲಿಕ ಮಾದರಿ ಅಳವಡಿಕೆಗೆ ಸುಮಾರು 3 ನಿಮಿಷ ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚು ಸಮಯ ಬಿಡುವುದರಿಂದ ಉತ್ತಮ ಫಲಿತಾಂಶ ಸಿಗುವುದಿಲ್ಲ; ಅತಿಯಾಗಿ ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚುವುದೇ ಸಮಯಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಅತ್ಯಂತ ಸಾಮಾನ್ಯ ತಪ್ಪು.
5. ಸ್ಥಳೀಯ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ, ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ನೀರಿನಿಂದ ಮೃದುವಾಗಿ ತೊಳೆಯಿರಿ ಅಥವಾ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಕಾಗದದಿಂದ ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಬಣ್ಣವನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಿಸಿ. ಹಿನ್ನೆಲೆ ತಿಳಿ ನೀಲಿಯಾಗಬೇಕು, ಕಡು ನೀಲಿಯಾಗಬಾರದು.
6. ಕವರ್‌ಸ್ಲಿಪ್ ಅನ್ನು ಓರೆಯಾಗಿ ಇಳಿಸಿ, ಮೊದಲು ಒಂದು ಅಂಚು ತಾಗುವಂತೆ ಮಾಡಿ; ನಂತರ ಅದನ್ನು ನಿಧಾನವಾಗಿ ಕೆಳಗಿಳಿಸಿ. ಇದರಿಂದ ಗಾಳಿಯ ಗುಳ್ಳೆಗಳು ಒಳಗೆ ಸಿಲುಕುವುದಿಲ್ಲ.
7. ಕೋಶಗಳನ್ನು ಹುಡುಕಲು ಕಡಿಮೆ ವರ್ಧನೆಯಿಂದ ಆರಂಭಿಸಿ. ಫೋಕಸ್ ಮತ್ತು ಮಧ್ಯದಲ್ಲಿ ಇರಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿ, ನಂತರ 100x ಗೆ ಮತ್ತು ಕೊನೆಯಲ್ಲಿ 400x ಗೆ ಬದಲಿಸಿ. 400x ನಲ್ಲಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಫೋಕಸ್ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯನ್ನು ಮಾತ್ರ ಬಳಸಿ.

ಬಣ್ಣದ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಕುರಿತು ಒಂದು ಸ್ಪಷ್ಟನೆ ಅಗತ್ಯ. ಶಾಲಾ ವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸುಮಾರು 1 ಪ್ರತಿಶತ ಜಲೀಯ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚು ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಮೂಲ ದ್ರಾವಣ ಅಥವಾ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಸಂಪರ್ಕವು ಕೋಶಕೇಂದ್ರಕ್ಕಿಂತ ವೇಗವಾಗಿ ಹಿನ್ನೆಲೆಯನ್ನು ಗಾಢಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಇದರಿಂದ ಈ ಚಟುವಟಿಕೆ ಅವಲಂಬಿಸಿರುವ ದೃಶ್ಯ ವೈದೃಶ್ಯ ತಲೆಕೆಳಗಾಗುತ್ತದೆ.

ಕೆನ್ನೆಯ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸುರಕ್ಷಿತವಾಗಿ ನಿರ್ವಹಿಸುವುದು

ಕೆನ್ನೆಯ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಲಾಲಾರಸ ಮತ್ತು ಬಾಯಿಯ ಸಾಮಾನ್ಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳು ಇರುತ್ತವೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಮಾದರಿ ನೀಡಿದವರು ಆರೋಗ್ಯವಂತ ಸಹಪಾಠಿಗಳಾಗಿದ್ದರೂ, ಪ್ರತಿಯೊಂದು ತಾಜಾ ಲೇಪನವನ್ನೂ ಸೋಂಕಿನ ಸಾಧ್ಯತೆಯಿರುವ ವಸ್ತುವಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸಿ. ಬೋಧನಾ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳಿಗಾಗಿ American Society for Microbiology ನೀಡಿರುವ ಜೈವಿಕ ಸುರಕ್ಷತಾ ಮಾರ್ಗಸೂಚಿಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯ ತತ್ವಗಳನ್ನು ಹೇಳುತ್ತವೆ: ಚಟುವಟಿಕೆಗೆ ಮೊದಲು ಅಪಾಯವನ್ನು ಅಂದಾಜಿಸಿ, ಕೈಗವಸು ಧರಿಸಿ, ಚಿಮ್ಮುವ ಸಾಧ್ಯತೆಯಿದ್ದಲ್ಲಿ ಕಣ್ಣುಗಳಿಗೆ ರಕ್ಷಣೆ ಬಳಸಿ, ನಂತರ ಕೈಗಳನ್ನು ತೊಳೆಯಿರಿ, ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ಮೇಜುಗಳನ್ನು ಸೋಂಕುರಹಿತಗೊಳಿಸಿ ಮತ್ತು ಕಲುಷಿತವಾದ ಒಮ್ಮೆ ಬಳಕೆಯ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ಅನುಮೋದಿತ ಜೈವಿಕ ತ್ಯಾಜ್ಯ ವಿಲೇವಾರಿ ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ ವಿಲೇವಾರಿ ಮಾಡಿ.

ನಾಲ್ಕು ತರಗತಿ ನಿಯಮಗಳು ಬಹುತೇಕ ಅಪಾಯವನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತವೆ. ಪ್ರತಿ ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ ಸ್ಲೈಡ್‌ಗೆ ಒಬ್ಬ ಮಾದರಿದಾರ ಮಾತ್ರ ಇರಬೇಕು; ಅವನ್ನು ಎಂದಿಗೂ ಹಂಚಿಕೊಳ್ಳಬಾರದು. ಸ್ವಂತ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಮಾತ್ರ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಬೇಕು; ಪಕ್ಕದವರ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಎಂದಿಗೂ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಬಾರದು. ಒಮ್ಮೆ ಬಳಸುವ ಸ್ವ್ಯಾಬ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಹಲ್ಲುಕಡ್ಡಿಗಳನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ನಿಗದಿತ ತ್ಯಾಜ್ಯ ಪಾತ್ರೆಗೆ ಹಾಕಬೇಕು; ಮತ್ತೆ ಮೇಜಿನ ಮೇಲೆ ಇಡಬಾರದು. ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಸ್ವತಃ ಚರ್ಮ ಮತ್ತು ಬಟ್ಟೆಗೆ ಕಲೆ ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ ಹಾಗೂ ಕಣ್ಣುಗಳಿಗೆ ಕಿರಿಕಿರಿ ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಕೈಗವಸುಗಳು ಮತ್ತು ರಂಜಕಗಳ ನಿರ್ವಹಣೆಯ ಸಾಮಾನ್ಯ ಸ್ವಚ್ಛತಾ ನಿಯಮಗಳು ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತವೆ. ಲೇಪನದಲ್ಲಿರುವ ಯಾವುದನ್ನಾದರೂ ಬೆಳೆಸುವ ಚಟುವಟಿಕೆಯಾಗಿ ಈ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ವಿಸ್ತರಿಸಬೇಡಿ. ಶಾಲೆಯ ಸುರಕ್ಷತಾ ವಿಧಾನಕ್ಕೆ ಹೊರತಾಗಿ ತಾಜಾ ಮಾನವ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಉಷ್ಣದಿಂದ ಸ್ಥಿರೀಕರಿಸುವ ತಾತ್ಕಾಲಿಕ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಪ್ರಯತ್ನಿಸಬೇಡಿ.

ಏನನ್ನು ಗಮನಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಅದು ಹಾಗೆ ಕಾಣುವುದೇಕೆ

100x ನಲ್ಲಿ, ಅನಿಯಮಿತ ಅಂಡಾಕಾರದ ಅಥವಾ ಬಹುಭುಜಾಕಾರದ ಹೊರರೇಖೆಗಳಿರುವ, ತಿಳಿ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣದ ಅಗಲವಾದ ಚಪ್ಪಟೆ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಹುಡುಕಿ. ಅವು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಅಥವಾ ಸಡಿಲವಾಗಿ ಒಂದರ ಮೇಲೊಂದು ಅತಿಕ್ರಮಿಸುವ ಪದರಗಳಾಗಿ ಇರುತ್ತವೆ. ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಕೋಶದಲ್ಲೂ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಒಂದು ಗಾಢ ನೀಲಿ ಚುಕ್ಕೆ ಇರುತ್ತದೆ. ಆ ಚುಕ್ಕೆಯೇ ಕೋಶಕೇಂದ್ರ. ಅವುಗಳ ಜೋಡಣೆಯನ್ನೂ ಗಮನಿಸಿ: ಚಪ್ಪಟೆ ಉಪಕಲಾ ಕೋಶಗಳು ತೆಳುವಾದ ಹೆಂಚುಗಳಂತಿವೆ, ಗೋಳಗಳಂತಲ್ಲ. ಅದಕ್ಕಾಗಿಯೇ ಅವುಗಳ ಅಂಚುಗಳು ದುಂಡಾದ ಬಲೂನುಗಳಿಗಿಂತ ಬಿರುಕು ಬಿಟ್ಟ ಮೆರುಗುಲೇಪದಂತೆ ಕಾಣುತ್ತವೆ.

400x ನಲ್ಲಿ ಮೂರು ಲಕ್ಷಣಗಳು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಕಾಣುತ್ತವೆ. ಕೋಶದ ಗಡಿಯು ಕೋಶವನ್ನು ಸುತ್ತುವರೆದಿರುವ ತೆಳುವಾದ, ಗಾಢ ರೇಖೆಯಂತೆ ಕಾಣುತ್ತದೆ. ಕೋಶದ್ರವ್ಯವು ಒಳಭಾಗವನ್ನು ಏಕರೂಪವಾದ ತಿಳಿ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣದಿಂದ ತುಂಬಿರುತ್ತದೆ. ಕೋಶಕೇಂದ್ರವು ಹೆಚ್ಚು ಗಾಢವಾಗಿ ಮತ್ತು ಸಾಂದ್ರವಾಗಿ ಕಾಣುತ್ತದೆ; ಅದು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಅಂಡಾಕಾರವಾಗಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಮಧ್ಯಭಾಗದ ಸಮೀಪ ಇರುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಯಾವಾಗಲೂ ಅಲ್ಲ. ಈ ಮೂರನ್ನೂ, ಜೊತೆಗೆ ಆಕಾರ ಮತ್ತು ವರ್ಧನೆಯನ್ನೂ ದಾಖಲಿಸಲು ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳಿಗೆ ಹೇಳಿ, ಏಕೆಂದರೆ ಕಾರ್ಯಪತ್ರವು ನಿಖರವಾಗಿ ಇವುಗಳನ್ನೇ ಕೇಳುತ್ತದೆ.

ಇಲ್ಲಿ ನಿಖರತೆಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಒಂದು ಅಂಶ ಮುಖ್ಯ; ಅನೇಕ ಕಾರ್ಯಪತ್ರಗಳು ಇದನ್ನು ತಪ್ಪಾಗಿ ಹೇಳುತ್ತವೆ. ಕಾಣುವ ಗಡಿಯು ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ ಪೊರೆ ಇರುವ ಪ್ರದೇಶಕ್ಕೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುತ್ತದೆ. ಆದರೆ ಸುಮಾರು 7 ರಿಂದ 10 ನ್ಯಾನೋಮೀಟರ್ ದಪ್ಪದ ಲಿಪಿಡ್ ದ್ವಿಪದರವಾದ ಪೊರೆಯನ್ನೇ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಗುರುತಿಸಲು ಶಾಲಾ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕಕ್ಕೆ ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ. ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳಿಗೆ ಕಾಣುವುದು ಕೋಶದ ದೃಶ್ಯ ಅಂಚು ಮತ್ತು ಅಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹವಾಗಿರುವ ಬಣ್ಣ. ಕೋಶಾಂಗಗಳಿಗೂ ಇದೇ ಎಚ್ಚರಿಕೆ ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ. ಮೈಟೋಕಾಂಡ್ರಿಯಾ, ಅಂತಃಪ್ಲಾಸ್ಮೀಯ ಜಾಲ, ಗಾಲ್ಗಿ ಕಾಯಗಳು ಮತ್ತು ರೈಬೋಸೋಮ್‌ಗಳು ಈ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಕಾಣುವುದಿಲ್ಲ. ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ ಸಾಧನಗಳ ಕುರಿತು NCBIಯ ಕೋಶಜೀವಶಾಸ್ತ್ರದ ಹಿನ್ನೆಲೆ ವಿವರಣೆ ತಿಳಿಸುವಂತೆ, ಉತ್ತಮ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಬೆಳಕಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವು ಸುಮಾರು 0.2 ಮೈಕ್ರೋಮೀಟರ್‌ವರೆಗಿನ ವಿವರಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ತೋರಿಸಬಲ್ಲದು. ಅತ್ಯಂತ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ರಚನೆಗಳ ಬಹುಪಾಲು ಈ ಮಿತಿಗಿಂತ ಚಿಕ್ಕದಾಗಿರುತ್ತವೆ ಅಥವಾ ಅದರ ಸಮೀಪದಲ್ಲಿರುತ್ತವೆ. ವಿವರಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸದ ಹೆಚ್ಚಿನ ವರ್ಧನೆಯು ಚಿತ್ರವನ್ನು ದೊಡ್ಡದಾಗಿಸುತ್ತದೆಯೇ ಹೊರತು ಹೊಸ ವಿವರಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸುವುದಿಲ್ಲ.

ಕೋಶಕೇಂದ್ರವೇ ಅತ್ಯಂತ ಗಾಢವಾಗಿ ಬಣ್ಣ ಹಿಡಿಯುವುದೇಕೆ? ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಒಂದು ಧನಾಯನಿಕ ರಂಜಕ. ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಅದು ಧನ ವಿದ್ಯುದಾವೇಶ ಹೊಂದಿದ್ದು, ಕೋಶದಲ್ಲಿನ ಋಣ ವಿದ್ಯುದಾವೇಶವುಳ್ಳ ವಸ್ತುಗಳೊಂದಿಗೆ, ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳೊಂದಿಗೆ, ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದುತ್ತದೆ. ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಕೋಶಕೇಂದ್ರದಲ್ಲಿ DNAಯನ್ನು ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಕೋಶಕೇಂದ್ರದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚು ರಂಜಕ ಸಂಗ್ರಹವಾಗುತ್ತದೆ. ಕೋಶದ್ರವ್ಯದಲ್ಲಿ RNA ಮತ್ತು ಇತರ ವಿದ್ಯುದಾವೇಶವುಳ್ಳ ಅಣುಗಳಿರುವುದರಿಂದ ಅದಕ್ಕೂ ಬಣ್ಣ ಹಿಡಿಯುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಹೆಚ್ಚು ಹರಡಿಕೊಂಡು, ಹೆಚ್ಚು ತಿಳಿಯಾಗಿ ಕಾಣುತ್ತದೆ. ಮುಖ್ಯ ಸ್ಪಷ್ಟನೆ ಹೀಗಿದೆ: ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ DNAಗೆ ಮಾತ್ರ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ ರಂಜಕವಲ್ಲ. ಕೋಶಕೇಂದ್ರದ ಚಿತ್ರಣದಲ್ಲಿನ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಹಂಚಿಕೆ ಕುರಿತ ಅಧ್ಯಯನ ಈ ಧನಾಯನವು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಸಮೃದ್ಧ ಪ್ರದೇಶಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದುವುದನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ಕೋಶ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಂಧನ ಕುರಿತ ಹಿಂದಿನ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಅಧ್ಯಯನ ಬಂಧಿತ ರಂಜಕದ ಬಹುಪಾಲು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿರುವುದನ್ನು ಕಂಡಿತ್ತು. ಹೀಗಾಗಿ ಗಾಢ ಕೋಶಕೇಂದ್ರ ಮತ್ತು ತಿಳಿ ಕೋಶದ್ರವ್ಯವು ದೃಶ್ಯ ವೈದೃಶ್ಯದ ಮಾದರಿಯೇ ಹೊರತು ಅಣುಮಟ್ಟದ ವಿಶ್ಲೇಷಣಾ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲ.

ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳು ಮಾಡುವ ತಪ್ಪುಗಳು ಮತ್ತು ಅವನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳುವ ವಿಧಾನ

ಬಹುತೇಕ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ವಿಫಲ ಸ್ಲೈಡ್ ಐದು ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಕ್ಕೆ ಸೇರುತ್ತದೆ. ಸ್ಲೈಡ್ ಅನ್ನು ಯೋಚಿಸದೆ ಮರುಮಾಡುವ ಬದಲು, ಅದರ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳಿಗೆ ಕಲಿಸಿ.

ಅತಿಯಾಗಿ ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚಿದಾಗ ಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ಹಿನ್ನೆಲೆ ಒಂದೇ ರೀತಿಯಾಗಿ ಗಾಢವಾಗುತ್ತವೆ; ಕೋಶಕೇಂದ್ರವು ದೃಶ್ಯಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ ಬೆರೆತು ಕಾಣದಂತಾಗುತ್ತದೆ. ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚುವ ಸಮಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಅಥವಾ ಹೆಚ್ಚು ಸಮರ್ಪಕವಾಗಿ ತೊಳೆಯುವ ಮೂಲಕ ಇದನ್ನು ಸರಿಪಡಿಸಿ. ಕಡಿಮೆ ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚಿದಾಗ ಮಸುಕಾದ ನೆರಳುಗಳು ಉಳಿಯುತ್ತವೆ; ಬೆಳಕನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿದಾಗ ಅವು ಕಾಣದಾಗುತ್ತವೆ. ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚುವ ಸಮಯವನ್ನು ಮೂವತ್ತು ಸೆಕೆಂಡ್‌ಗಳ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ. ದಪ್ಪ ಲೇಪನವು ಯಾವುದೇ ಹೊರರೇಖೆಯನ್ನು ಗುರುತಿಸಲಾಗದ ದಟ್ಟವಾದ, ಒಂದರ ಮೇಲೊಂದು ಅತಿಕ್ರಮಿಸಿದ ರಾಶಿಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ. ಇದಕ್ಕೆ ಸರಿಪಡಿಸುವಿಕೆ ಭೌತಿಕವಾದದ್ದು: ಮುಂದಿನ ಬಾರಿ ತೆಳುವಾಗಿ ಹರಡಿ, ಏಕೆಂದರೆ ಎಷ್ಟು ತೊಳೆದರೂ ಕೋಶಗಳ ರಾಶಿಯನ್ನು ಸರಿಪಡಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಗಾಳಿಯ ಗುಳ್ಳೆಗಳು ತೀಕ್ಷ್ಣವಾದ ಗಾಢ ಅಂಚುಗಳಿರುವ ಪರಿಪೂರ್ಣ ವೃತ್ತಗಳಂತೆ ಕಾಣುತ್ತವೆ. ಅವನ್ನು ಕೋಶ ರಚನೆಗಳೆಂದು ತಪ್ಪಾಗಿ ಭಾವಿಸುವ ಆರಂಭಿಕರ ಗಮನವನ್ನು ಅವು ಬೇರೆಡೆ ಸೆಳೆಯುತ್ತವೆ. ಕವರ್‌ಸ್ಲಿಪ್ ಅನ್ನು ಮತ್ತೆ ಓರೆಯಾಗಿ ನಿಧಾನವಾಗಿ ಇಡಿ. Ingrid Science ಕೆನ್ನೆಯ ಕೋಶಗಳ ವಿಧಾನ ಮುಂತಾದ ಶಾಲಾ ವಿಧಾನಗಳು ತಿಳಿಸುವಂತೆ, ಕೋಶಗಳ ಮೇಲೆ ಅಥವಾ ಸುತ್ತಲೂ ಚದುರಿರುವ ಚಿಕ್ಕ ಗಾಢ ಚುಕ್ಕೆಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಾಯಿಯ ಸಹಜ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳಾಗಿರುತ್ತವೆ. ಬಾಯಿಯಲ್ಲಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳು ವಾಸಿಸುತ್ತವೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಅವು ದೃಢಪಡಿಸುತ್ತವೆ; ಇದು ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳಿಗೆ ನೆನಪಿನಲ್ಲಿ ಉಳಿಯಬಹುದು. ಆದರೆ ಈ ಚಟುವಟಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಅವುಗಳ ಪ್ರಭೇದವನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಅವನ್ನು ಕೋಶದ ಭಾಗಗಳಾಗಿ ಚಿತ್ರಿಸಬಾರದು. ಆಹಾರದ ಅವಶೇಷಗಳು ಮತ್ತು ಲೋಳೆಯ ಎಳೆಗಳು ಅನಿಯಮಿತವಾಗಿ ಹಾಗೂ ತೀವ್ರವಾಗಿ ಬಣ್ಣ ಹಿಡಿಯುತ್ತವೆ; ಮಾದರಿ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಮೊದಲು ಬಾಯಿ ತೊಳೆಯುವುದು ಅವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು.

ಈ ಚಟುವಟಿಕೆಯಿಂದ ಏನು ಮಾಡಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ

ಇದು ಶೈಕ್ಷಣಿಕ ವೀಕ್ಷಣೆಯೇ ಹೊರತು ರೋಗನಿರ್ಣಯ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲ. ತರಗತಿಯಲ್ಲಿ ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚಿದ ಕೋಶಗಳ ನೋಟದಿಂದ ಸೋಂಕು, ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಅಥವಾ ಯಾವುದೇ ರೋಗವನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ. ಈ ಲೇಖನವು ಅದಕ್ಕೆ ವಿರುದ್ಧವಾದ ಸೂಚನೆ ನೀಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ಅರ್ಥೈಸಬಾರದು. ಈ ಮಾದರಿಯು ಎರಡು ವರ್ಧನೆಗಳಲ್ಲಿ ಆಕಾರ, ಗಡಿ, ಕೋಶದ್ರವ್ಯ ಮತ್ತು ಕೋಶಕೇಂದ್ರವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಇದು ಪೊರೆಯ ಅತಿಸೂಕ್ಷ್ಮ ರಚನೆ, ಕೋಶಾಂಗಗಳ ವಿವರ ಅಥವಾ ಅಣುಗಳ ಗುರುತನ್ನು ತೋರಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಈ ಮಿತಿಯನ್ನು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಹೇಳುವುದು ವಿಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳಿಬ್ಬರನ್ನೂ ರಕ್ಷಿಸುತ್ತದೆ: ಉತ್ತಮ ಫಲಿತಾಂಶವೆಂದರೆ ವರ್ಧನೆ ಮತ್ತು ಬಳಸಿದ ಬಣ್ಣವನ್ನು ದಾಖಲಿಸಿರುವ, ಸರಿಯಾಗಿ ಭಾಗಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಿದ ಚಿತ್ರ; ಆರೋಗ್ಯದ ಕುರಿತ ತೀರ್ಮಾನವಲ್ಲ.

ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿ ಕಾರ್ಯಪತ್ರ ಮತ್ತು ಭಾಗಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಿದ ಸೂಕ್ಷ್ಮಚಿತ್ರಗಳು

ಈ ಪುಟದ ಯೋಜನೆಗೆ ಬಳಸುವ ಎರಡು ಸಾಮಗ್ರಿಗಳೆಂದರೆ ಮೇಲಿನ ಭಾಗಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಿದ ಸೂಕ್ಷ್ಮಚಿತ್ರ ಮತ್ತು ಕೆಳಗಿನ ಕಾರ್ಯಪತ್ರ. ಪ್ರತಿಯೊಬ್ಬ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗೂ ಒಂದೊಂದು ಕಾರ್ಯಪತ್ರ ಮುದ್ರಿಸಿ ಅಥವಾ ಅದನ್ನು ಪರದೆಯ ಮೇಲೆ ಪ್ರದರ್ಶಿಸಿ, ಅದರ ಚೌಕಗಳನ್ನು ನೋಟ್‌ಪುಸ್ತಕದಲ್ಲಿ ನಕಲಿಸಲು ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳಿಗೆ ಹೇಳಿ.

45 ನಿಮಿಷಗಳ ತರಗತಿಯಲ್ಲಿ ಇದನ್ನು ಬಳಸುವ ವಿಧಾನ: ಸುರಕ್ಷತಾ ಸೂಚನೆಗಳು ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ಸಂಗ್ರಹಕ್ಕೆ ಹತ್ತು ನಿಮಿಷ, ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ಅಳವಡಿಕೆಗೆ ಹತ್ತು ನಿಮಿಷ, ಎರಡೂ ವರ್ಧನೆಗಳಲ್ಲಿ ವೀಕ್ಷಣೆ ಮತ್ತು ರೇಖಾಚಿತ್ರ ರಚನೆಗೆ ಹದಿನೈದು ನಿಮಿಷ, ಪರಿಶೀಲನಾ ಪಟ್ಟಿ ಮತ್ತು ಭಾಗಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಿದ ಸೂಕ್ಷ್ಮಚಿತ್ರದೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಕೆಗೆ ಹತ್ತು ನಿಮಿಷ. ಪರಿಶೀಲನಾ ಪಟ್ಟಿಯ ಅಂಶಗಳನ್ನು ಉದ್ದೇಶಪೂರ್ವಕವಾಗಿ ನೇರವಾಗಿ ಪರಿಶೀಲಿಸಬಹುದಾದ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಇಡಲಾಗಿದೆ. ತೆಳುವಾದ ಲೇಪನ, ಸರಿಯಾದ ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚುವ ಸಮಯ, ಕೋಶದ್ರವ್ಯಕ್ಕಿಂತ ಗಾಢವಾದ ಕೋಶಕೇಂದ್ರ, ದಾಖಲಿಸಿದ ವರ್ಧನೆ. ಈ ನಾಲ್ಕನ್ನೂ ಸರಿಯೆಂದು ಗುರುತಿಸಬಲ್ಲ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಯು ಈ ಪಾಠ ಕಲಿಸಲು ಉದ್ದೇಶಿಸಿರುವ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಯನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಂಡಿದ್ದಾನೆ: ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕಗಳು ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ, ಮತ್ತು ಬಣ್ಣಗಳು ತೋರಿಸಲು ಯೋಗ್ಯವಾದ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಸೃಷ್ಟಿಸುತ್ತವೆ.