ಲೋಫ್ಲರ್‌ನ ಕ್ಷಾರೀಯ ಮತ್ತು ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ರಂಜಕಗಳ ವಿವರಣೆ

ರಂಜನೆ ಮಾಡುವ ಮೇಜಿನ ಮೇಲೆ ಮೂರು ಬಾಟಲಿಗಳು ಅಕ್ಕಪಕ್ಕದಲ್ಲಿರಬಹುದು; ಪ್ರತಿಯೊಂದರ ಮೇಲೂ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂನ ಯಾವುದೋ ರೂಪದ ಹೆಸರು ಇರುತ್ತದೆ. ಒಂದರ ಮೇಲೆ ಜಲೀಯ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ 1% ಎಂದು ಬರೆಯಲಾಗಿದೆ. ಇನ್ನೊಂದರ ಮೇಲೆ ಲೋಫ್ಲರ್‌ನ ಕ್ಷಾರೀಯ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಎಂದಿದೆ. ಮತ್ತೊಂದರ ಮೇಲೆ ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಎಂದಿದೆ. ಕೆಲಸದ ಒತ್ತಡದಲ್ಲಿರುವ ಸಿಬ್ಬಂದಿ ಹತ್ತಿರದಲ್ಲಿರುವ ಬಾಟಲಿಯನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತಾರೆ. ನಂತರ ಲೇಪಿತ ಮಾದರಿಯ ರಂಜನೆ ತುಂಬಾ ಮಸುಕಾಗುತ್ತದೆ, ಅಥವಾ ಎಲ್ಲವೂ ಒಂದೇ ರೀತಿಯ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣಕ್ಕೆ ತಿರುಗುತ್ತದೆ, ಅಥವಾ ಅನಿರೀಕ್ಷಿತ ನೇರಳೆ ಛಾಯೆಗಳು ಕಾಣಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಫಲಿತಾಂಶಕ್ಕೆ ಮಾದರಿಯನ್ನೇ ದೂಷಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಇದು ದ್ರಾವಣದ ಸಂಯೋಜನೆಯ ಸಮಸ್ಯೆ, ಮಾದರಿಯ ಸಮಸ್ಯೆಯಲ್ಲ. ಈ ಮೂರು ದ್ರಾವಣಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಬಂಧಿತ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯಗಳಿದ್ದರೂ, ಅವುಗಳ ರಂಜನಾ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಗಳು ಭಿನ್ನವಾಗಿವೆ. ಒಂದು, ಬಹುತೇಕ ತಟಸ್ಥ pH ಹೊಂದಿರುವ ಸರಳ ಧನಾಯನಿಕ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯ. ಇನ್ನೊಂದು, ಅದೇ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯವನ್ನು ಕ್ಷಾರದಿಂದ ಹೆಚ್ಚು ತೀವ್ರವಾಗಿ ರಂಜಿಸುವಂತೆ ಮಾಡಿರುವ ದ್ರಾವಣ. ಮೂರನೆಯದು ಒಂದೇ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯವಲ್ಲ; ಉದ್ದೇಶಪೂರ್ವಕವಾಗಿ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಿಸಿದ ಮಿಶ್ರಣ. ತಪ್ಪಾದದ್ದನ್ನು ಬಳಸಿದರೆ, ನಿಮ್ಮ ಕೈಯಲ್ಲೇ ರಂಜನಾ ತತ್ವ ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತ ಉತ್ತರ

ಸರಳ ಜಲೀಯ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮೂಲ ಮಾನದಂಡವಾಗಿದೆ: ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 1% ವರ್ಣದ್ರವ್ಯ ಹೊಂದಿರುವ ಇದು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳ ಆಕಾರಶಾಸ್ತ್ರ ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ ಬಳಸುವ ಸರಳ ಧನಾಯನಿಕ ರಂಜಕ. ಲೋಫ್ಲರ್‌ನ ಕ್ಷಾರೀಯ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ತಯಾರಿಸುವಾಗ, ನೀರಿನಲ್ಲಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿದ ಆಲ್ಕೋಹಾಲೀಯ ಮೂಲ ದ್ರಾವಣಕ್ಕೆ ಅಳೆಯಲಾದ ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣದ ದುರ್ಬಲ ಕ್ಷಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು pH ಹೆಚ್ಚಿಸಿ, ಧನಾಯನಿಕ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯವು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಆಮ್ಲೀಯ ರಚನೆಗಳಿಗೆ ಹೆಚ್ಚು ಬಲವಾಗಿ ಬಂಧಿಸುವಂತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಎಂದರೆ ಕ್ಷಾರದಲ್ಲಿ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣದ ಮೂಲಕ ಉದ್ದೇಶಪೂರ್ವಕವಾಗಿ ಪರಿಪಕ್ವಗೊಳಿಸಿದ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ. ಹೀಗಾಗಿ ಅದರ ಬಾಟಲಿಯಲ್ಲಿ ಉಳಿದ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಜೊತೆಗೆ ಮೀಥೈಲ್ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಕಳೆದುಕೊಂಡ ಸಮವರ್ಗೀಯ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು (azure A, azure B, azure C), ಥಯೋನಿನ್ ಮತ್ತು ಮೆಥಿಲೀನ್ ವಯಲೆಟ್‌ಗಳ ಮಿಶ್ರಣವಿರುತ್ತದೆ. ಈ ಮಿಶ್ರಣವು ವಿಭಿನ್ನ ರಚನೆಗಳಿಗೆ ವಿಭಿನ್ನ ಬಣ್ಣದ ಛಾಯೆಗಳನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ.

ಒಂದೇ ವಾಕ್ಯವನ್ನು ನೆನಪಿಟ್ಟುಕೊಳ್ಳುವುದಾದರೆ: ಕ್ಷಾರೀಕರಣವು ರಂಜನೆಯ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು ಬದಲಿಸುತ್ತದೆ; ಪಾಲಿಕ್ರೋಮಿಂಗ್ ರಂಜನೆಯ ಬಣ್ಣಗಳನ್ನು ಬದಲಿಸುತ್ತದೆ.

ಸಾಮಾನ್ಯ ಜಲೀಯ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ: ಹೋಲಿಕೆಯ ಮೂಲ ಮಾನದಂಡ

ಅತ್ಯಂತ ಸರಳ ಸಂಯೋಜನೆಯೆಂದರೆ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಿದ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ, ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 1% w/v ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ, ಕ್ಷಾರವಿಲ್ಲದೆ ಮತ್ತು ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣವಿಲ್ಲದೆ. ಬಣ್ಣ ನೀಡುವ ರಾಸಾಯನಿಕ ರೂಪವೆಂದರೆ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ಪ್ರತಿಅಯಾನ್ ಹೊಂದಿರುವ ಮೀಥೈಲ್‌ಥಯೋನಿನಿಯಮ್ ಧನಾಯಾನ್. ಇದು ಸಣ್ಣ, ಸಮತಟ್ಟಾದ ಫೀನೋಥಯಾಜಿನ್ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯವಾಗಿದ್ದು, PubChem‌ನ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ದಾಖಲೆಯಲ್ಲಿ ಮೀಥೈಲ್‌ಥಯೋನಿನಿಯಮ್ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ಎಂದು ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಧನಾಯಾನ್ ಆಗಿರುವುದರಿಂದ ಇದು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಬೆನ್ನೆಲುಬುಗಳಿಗೆ ಮತ್ತು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಕೋಶಭಿತ್ತಿಗಳ ಮೇಲಿನ ಆಮ್ಲೀಯ ಗುಂಪುಗಳಿಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ಇದರಿಂದ ತಿಳಿ ಹಿನ್ನೆಲೆಯ ವಿರುದ್ಧ ಕೋಶಗಳು ನೀಲಿಯಾಗಿ ಕಾಣಿಸುತ್ತವೆ.

ಇದರ ಗುಣವೆಂದರೆ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಊಹಿಸಬಹುದಾಗಿರುವುದು. ಕೋಶಕೇಂದ್ರಗಳು ಮತ್ತು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳು ನೀಲಿಯಾಗಿ ಕಾಣಿಸುತ್ತವೆ. ಬಣ್ಣವ್ಯತ್ಯಾಸವು ಮಧ್ಯಮವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಮಸುಕಾಗಿ ಕಾಣುವ ಜೀವಿಗಳು ದುರ್ಬಲವಾಗಿ ರಂಜಿಸಬಹುದು; ಇದೇ ಮಿತಿಯನ್ನು ಸರಿಪಡಿಸಲು ಲೋಫ್ಲರ್ ಮುಂದಾದರು. ಈ ದ್ರಾವಣವು ಸೇರಿರುವ ಸರಳ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ರಂಜಕಗಳ ವಿಶಾಲ ವರ್ಗದ ಕುರಿತು ತಿಳಿಯಲು, ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳ ಸರಳ ರಂಜನೆಯ ಅವಲೋಕನವನ್ನು ನೋಡಿ. ಇಲ್ಲಿಯೂ ಸರಿಯಾದ ರಾಸಾಯನಿಕ ಗುರುತನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳುವುದು ಮುಖ್ಯ: ಮೀಥೈಲ್ ಬ್ಲೂ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ವಿಭಿನ್ನ ಅಣುವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಮೀಥೈಲ್ ಬ್ಲೂ ಮತ್ತು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸ ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಬಣ್ಣದ ಹೆಸರನ್ನು ಮಾತ್ರ ಆಧರಿಸಿ ಉತ್ಪನ್ನ ಪಟ್ಟಿಯಲ್ಲಿ ಹುಡುಕಿದರೆ, ತಪ್ಪಾದ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯ ವರ್ಗದ ಉತ್ಪನ್ನ ಸಿಗಬಹುದು.

ಲೋಫ್ಲರ್‌ನ ಕ್ಷಾರೀಯ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ: ಅದೇ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯ, ಹೆಚ್ಚು ತೀವ್ರವಾದ ಕ್ರಿಯೆ

ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಲೋಫ್ಲರ್ ಸಂಯೋಜನೆಯಲ್ಲಿ ಆಲ್ಕೋಹಾಲೀಯ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮೂಲ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ನೀರಿನಲ್ಲಿರುವ ದುರ್ಬಲ ಕ್ಷಾರದೊಂದಿಗೆ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪಠ್ಯಪುಸ್ತಕದ ವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ 30 mL 95% ಎಥನಾಲ್‌ನಲ್ಲಿ 0.3 g ವರ್ಣದ್ರವ್ಯ ಮತ್ತು 100 mL 0.01% ಜಲೀಯ ಪೊಟ್ಯಾಸಿಯಮ್ ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸೈಡ್ ಬಳಸಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದಕ್ಕೆ ಸಮಾನವಾಗಿ, 30 mL ಸಾಂದ್ರತೃಪ್ತ ಆಲ್ಕೋಹಾಲೀಯ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ, 100 mL ಬಟ್ಟಿ ಇಳಿಸಿದ ನೀರು ಮತ್ತು 1 mL 1% KOH ಬಳಸಬಹುದು. ಇದರಿಂದ ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಕ್ಷಾರೀಯ pH ಹೊಂದಿರುವ, ಸುಮಾರು 0.3% ವರ್ಣದ್ರವ್ಯ ಇರುವ ಬಳಕೆಯ ದ್ರಾವಣ ದೊರೆಯುತ್ತದೆ. ವಾಣಿಜ್ಯ ಉತ್ಪನ್ನಗಳೂ ಇದೇ ತತ್ವವನ್ನು ಅನುಸರಿಸುತ್ತವೆ. Thermo Fisher ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಶಾಸ್ತ್ರ ರಂಜಕಗಳ ಉತ್ಪನ್ನ ಪಟ್ಟಿ ಲೋಫ್ಲರ್‌ನ ಕ್ಷಾರೀಯ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ, ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ಮತ್ತು ಜಲೀಯ ರೂಪಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಉದ್ದೇಶಗಳಿರುವ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಉತ್ಪನ್ನಗಳಾಗಿ ಪಟ್ಟಿಮಾಡುತ್ತದೆ.

ಇಲ್ಲಿ ಮುಖ್ಯ ಪಾತ್ರ ವಹಿಸುವುದು ಕ್ಷಾರ. pH ಹೆಚ್ಚಿಸುವುದರಿಂದ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿನ ಕಾರ್ಬಾಕ್ಸಿಲ್ ಮತ್ತು ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಗುಂಪುಗಳು ಪ್ರೋಟಾನ್‌ಗಳನ್ನು ಕಳೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ; ಇದರಿಂದ ಋಣವಿದ್ಯುದಾವೇಶಿತ ಬಂಧನಸ್ಥಳಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆ ಹೆಚ್ಚುತ್ತದೆ. ಆಲ್ಕೋಹಾಲೀಯ ಮೂಲ ದ್ರಾವಣವು ವರ್ಣದ್ರವ್ಯವನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಕರಗಿದ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಇಡುವುದರಿಂದ ಅದು ಆ ಸ್ಥಳಗಳನ್ನು ಏಕಾಣು ರೂಪದಲ್ಲಿ ತಲುಪುತ್ತದೆ. ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ತಟಸ್ಥ ಜಲೀಯ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯಕ್ಕಿಂತ ವೇಗವಾಗಿ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚು ತೀವ್ರವಾಗಿ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳ ರಂಜನೆ ಆಗುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಲೇಪಿತ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಪರಿಚಿತವಾದ ಗಾಢ ನೀಲಿ ದಂಡಾಕಾರ ಮತ್ತು ಗೋಳಾಕಾರ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳು ಕಾಣಿಸುತ್ತವೆ. ರಂಜನೆಯ ಸಮಯ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಒಂದರಿಂದ ಮೂರು ನಿಮಿಷಗಳು; ನಂತರ ನೀರಿನಿಂದ ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಇದರ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಬಳಕೆಯೆಂದರೆ ಲೋಫ್ಲರ್ ಸೀರಮ್ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಬೆಳೆಸಿದ ಕೊರಿನೆಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಮ್ ಡಿಫ್ಥೀರಿಯೇಯ ರಂಜನೆ: ತೆಳುವಾದ, ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ತುದಿಯಲ್ಲಿ ದಪ್ಪವಾಗಿರುವ ದಂಡಾಕಾರ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳು, ಸಂಗ್ರಹಿತ ಪಾಲಿಫಾಸ್ಫೇಟ್‌ನ ಬಲವಾಗಿ ರಂಜಿತ ಮೆಟಾಕ್ರೋಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಬೇಬ್ಸ್-ಎರ್ನ್ಸ್ಟ್ ಕಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. ಮಾಧ್ಯಮ ಮತ್ತು ರಂಜಕದ ಈ ಜೋಡಣೆಗೆ ಐತಿಹಾಸಿಕ ಹಿನ್ನೆಲೆಯಿದೆ; ಎರಡರ ಶ್ರೇಯಸ್ಸೂ ಅದೇ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಶಾಸ್ತ್ರಜ್ಞರಿಗೆ ಸಲ್ಲುತ್ತದೆ. ಕಣಗಳು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಎದ್ದು ಕಾಣುವುದು ರೋಗನಿರ್ಣಯದ ದೃಷ್ಟಿಯಿಂದ ಇದರ ಪ್ರಯೋಜನ. ಡಿಫ್ಥೀರಿಯಾ ಸಂಬಂಧಿತ ಕೆಲಸದ ಹೊರತಾಗಿ, ಈ ರಂಜಕವನ್ನು ಕಲ್ಚರ್‌ಗಳಿಂದ ತಯಾರಿಸಿದ ಲೇಪಿತ ಮಾದರಿಗಳ ಸಾಮಾನ್ಯ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ರಂಜನೆಗೆ, ವೈದ್ಯಕೀಯ ಲೇಪಿತ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ನೈಸೀರಿಯಾದ ಆಕಾರ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ, ಹಾಗೂ ಗ್ರಾಮ್ ರಂಜನೆ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲದಿದ್ದರೂ ಸರಳ ಜಲೀಯ ನೀಲಿ ರಂಜಕವು ತುಂಬಾ ಮಸುಕಾಗುವ ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಏಕವರ್ಣ ರಂಜಕ. ಆಮ್ಲೀಯವಾದ ಎಲ್ಲವೂ ನೀಲಿಯ ಯಾವುದಾದರೂ ಛಾಯೆ ಪಡೆಯುತ್ತವೆ. ವಿಧಾನವು ವಿಭಿನ್ನ ಬಣ್ಣಗಳ ಮೂಲಕ ವ್ಯತ್ಯಾಸ ತೋರಿಸುವುದನ್ನು ನಿರೀಕ್ಷಿಸಿದರೆ, ಕ್ಷಾರವೊಂದರಿಂದಲೇ ಅದು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ.

ಒಂದು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಎಚ್ಚರಿಕೆ: ಕ್ಷಾರೀಯ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯ ದ್ರಾವಣಗಳು ಸಂಗ್ರಹಣೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಬನ್ ಡೈಆಕ್ಸೈಡ್ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯಿಂದ ಹಾಳಾಗುತ್ತವೆ ಹಾಗೂ ಅವಕ್ಷೇಪಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳು ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ದ್ರಾವಣ ತಯಾರಿಸುತ್ತವೆ ಅಥವಾ ಪಟ್ಟಿಯಲ್ಲಿರುವ ಸಿದ್ಧ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಖರೀದಿಸಿ ಅದರ ಸಂಗ್ರಹಣಾ ಅವಧಿಯನ್ನು ಪಾಲಿಸುತ್ತವೆ. ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಸ್ಲೈಡ್ ಮೇಲೂ ಕೆಸರು ಬೀಳಿಸುತ್ತಿರುವ ಹಳೆಯ ಬಾಟಲಿಯನ್ನು ಹೇಗಾದರೂ ಬಳಸುತ್ತಲೇ ಇರುವುದಿಲ್ಲ.

ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ: ಒಂದು ಹೆಸರು, ಹಲವು ವರ್ಣದ್ರವ್ಯಗಳು

ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಅದೇ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯದಿಂದ ಆರಂಭವಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಅದನ್ನು ಕ್ಷಾರದಲ್ಲಿ ನಿಯಂತ್ರಿತ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣಕ್ಕೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಐತಿಹಾಸಿಕವಾಗಿ ಇದನ್ನು ಪರಿಪಕ್ವಗೊಳಿಸುವಿಕೆ ಅಥವಾ ಪಾಲಿಕ್ರೋಮಿಂಗ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು. ಕ್ಷಾರೀಯ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಕಾಲಕ್ರಮೇಣ ಪರಿವರ್ತಿಸುವುದು, ಕಾರ್ಬೊನೇಟ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಬಿಸಿಮಾಡುವುದು ಅಥವಾ ಡೈಕ್ರೊಮೇಟ್‌ನಂತಹ ಕಾರಕಗಳಿಂದ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಿಸುವುದು ಡೈಮೀಥೈಲ್‌ಅಮಿನೋ ಪ್ರತಿಸ್ಥಾಪಕಗಳಿಂದ ಮೀಥೈಲ್ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಹಂತ ಹಂತವಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕುತ್ತದೆ. ಫಲಿತಾಂಶವು ಒಂದು ಮಿಶ್ರಣ: ಉಳಿದ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಜೊತೆಗೆ azure B (ಒಂದು ಮೀಥೈಲ್ ಗುಂಪು ಕಳೆದುಕೊಂಡದ್ದು), azure A ಮತ್ತು azure C (ಇನ್ನಷ್ಟು ಮೀಥೈಲ್ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಕಳೆದುಕೊಂಡವು), ಥಯೋನಿನ್ (ಎಲ್ಲ ಮೀಥೈಲ್ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಕಳೆದುಕೊಂಡದ್ದು) ಮತ್ತು ಮೆಥಿಲೀನ್ ವಯಲೆಟ್ ವರ್ಗದ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣದ ಉಪಉತ್ಪನ್ನಗಳು. ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಘಟಕಕ್ಕೂ ತನ್ನದೇ ಬಣ್ಣದ ಛಾಯೆ ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶದೊಂದಿಗೆ ಬಂಧಿಸುವ ಒಲವು ಇರುತ್ತದೆ. ಹೀಗಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣವು ಮೆಟಾಕ್ರೋಮ್ಯಾಟಿಕ್ ರಂಜನೆ ನೀಡುತ್ತದೆ: ಕೋಶಕೇಂದ್ರಗಳು, ಕಣಗಳು, ಮ್ಯೂಸಿನ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಮೃದ್ವಸ್ಥಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾದ ನೀಲಿಯಿಂದ ಕೆಂಪು-ನೇರಳೆಯವರೆಗಿನ ಛಾಯೆಗಳನ್ನು ಪಡೆಯುತ್ತವೆ.

ಪ್ರಸಿದ್ಧ ರಕ್ತ ರಂಜಕಗಳ ಹಿಂದೆಯೂ ಇದೇ ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರವಿದೆ. ಕ್ಷಾರೀಕರಿಸಿದ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮಲೇರಿಯಾ ಪರಾವಲಂಬಿಯ ಕೋಶಕೇಂದ್ರಗಳಿಗೆ ನೇರಳೆ ಛಾಯೆ ನೀಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ಆರಂಭಿಕ ಸಂಶೋಧಕರು ಕಂಡುಕೊಂಡರು. ಆದರೆ ಅವರ ಜಲೀಯ ಪರಿಪಕ್ವ ದ್ರಾವಣಗಳು ಅಸ್ಥಿರವಾಗಿದ್ದು, ಕೆಲವೇ ದಿನಗಳಲ್ಲಿ ಅವಕ್ಷೇಪಗೊಳ್ಳುತ್ತಿದ್ದವು. ನೇರಳೆ ರಕ್ತ ರಂಜಕವನ್ನು ಹೇಗೆ ಆವಿಷ್ಕರಿಸಲಾಯಿತು ಎಂಬ ವಿಮರ್ಶೆಯು, 1891ರಲ್ಲಿ ಮಲಾಖೋವ್ಸ್ಕಿ ಮತ್ತು ರೊಮಾನೋವ್ಸ್ಕಿ ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ಈ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಹೇಗೆ ಬಳಸಿಕೊಂಡರು, ವರ್ಣದ್ರವ್ಯದ ಅವಕ್ಷೇಪವನ್ನು ಸ್ಥಿರಗೊಳಿಸಲು ಮತ್ತು ಬಿಸಿಮಾಡದೆ ತೆಳು ಲೇಪಗಳನ್ನು ಸ್ಥಿರೀಕರಿಸಲು ಮೆಥನಾಲ್ ಅನ್ನು ಹೇಗೆ ಪರಿಚಯಿಸಲಾಯಿತು, ಹಾಗೂ ನಂತರ ಗೀಮ್ಸಾ ಅಳೆಯಲಾದ azure B ಮತ್ತು ಇಯೋಸಿನ್‌ಗಳ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಗ್ಲಿಸರಾಲ್ ಸ್ಥಿರೀಕರಣದೊಂದಿಗೆ ಹೇಗೆ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಿದರು ಎಂಬುದನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ಆಧುನಿಕ ಗೀಮ್ಸಾ-ಮಾದರಿಯ ರಂಜಕಗಳು ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮತ್ತು ಇಯೋಸಿನ್ ಸಂಯೋಜನೆಯಿಂದ ನೇರವಾಗಿ ರೂಪುಗೊಂಡಿವೆ; ಈ ಸಂಯೋಜನೆಯೇ ರೊಮಾನೋವ್ಸ್ಕಿ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ. ಇಯೋಸಿನ್‌ನ ಜೋಡಣೆ ಮತ್ತು azure B ಘಟಕದ ವಿವರಗಳಿಗೆ, ರೊಮಾನೋವ್ಸ್ಕಿ-ಮಾದರಿಯ ರಂಜಕಗಳು ಮತ್ತು azure B–ಇಯೋಸಿನ್ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆ ನೋಡಿ.

ಮಿಶ್ರಣವಾಗಿರುವುದರಿಂದ ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಸ್ವಭಾವತಃ ಈ ಮೂರರಲ್ಲಿ ಅತಿ ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣ ಹೊಂದಿದೆ. ಅದರ ನಿಖರವಾದ ಬಣ್ಣದ ಸಮತೋಲನವು ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣದ ವಿಧಾನ ಮತ್ತು ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ. ಅದಕ್ಕಾಗಿಯೇ ಅಂಗಾಂಶಶಾಸ್ತ್ರದ ಪೂರೈಕೆದಾರರು ಅದನ್ನು ಹಳೆಯದಾದ ಲೋಫ್ಲರ್ ದ್ರಾವಣವಾಗಿ ಮಾರುವುದಿಲ್ಲ; ಅದರದೇ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತಾ ಪರೀಕ್ಷೆ ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಉತ್ಪನ್ನವಾಗಿ ಮಾರುತ್ತಾರೆ. ಸಾಮಾನ್ಯ ಬಳಕೆಗಳಲ್ಲಿ ಮಾಸ್ಟ್ ಕೋಶಗಳ ಕಣಗಳು, ಮ್ಯೂಸಿನ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಮೃದ್ವಸ್ಥಿಯ ಮೆಟಾಕ್ರೋಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಪ್ರದರ್ಶನ, ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ ಕೋಶಗಳ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ವಿವರಗಳು ಮತ್ತು ಗುಡ್‌ಪಾಸ್ಚರ್-ಮಾದರಿಯ ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ವಿಧಾನಗಳ ಮೂಲಕ ಅಂಗಾಂಶ ಛೇದಗಳಲ್ಲಿ ಹೆಲಿಕೋಬ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಪೈಲೋರಿಯನ್ನು ತೋರಿಸುವುದು ಸೇರಿವೆ. ಬಣ್ಣದಿಂದ ವ್ಯತ್ಯಾಸ ಗುರುತಿಸುವುದು ಉದ್ದೇಶವಾಗಿದ್ದರೆ ಇದು ಸರಿಯಾದ ಆಯ್ಕೆ. ವಿಧಾನವು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಸ್ಪಷ್ಟ ಏಕವರ್ಣ ರೂಪರೇಖೆಯನ್ನು ನಿರೀಕ್ಷಿಸುತ್ತಿದ್ದರೆ ಇದು ತಪ್ಪಾದ ಆಯ್ಕೆ.

ಸಂಯೋಜನೆ ಮತ್ತು ಉದ್ದೇಶಗಳ ಹೋಲಿಕೆ

ಈ ಕೋಷ್ಟಕವನ್ನು ನಿರ್ಧಾರ ಕೈಗೊಳ್ಳುವ ವಿಧಾನವಾಗಿ ಓದಿ. ಮಾದರಿಯ ರಂಜನೆ ತುಂಬಾ ಮಸುಕಾಗಿದ್ದರೆ, pH ಪರಿಕಲ್ಪನೆಯನ್ನು ಬದಲಿಸಿ ಲೋಫ್ಲರ್‌ನ ರಂಜಕವನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ. ಎಲ್ಲವೂ ರಂಜಿಸಿದರೂ ಯಾವುದೂ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಎದ್ದು ಕಾಣದಿದ್ದರೆ, ವರ್ಣದ್ರವ್ಯದ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಯನ್ನು ಬದಲಿಸಿ ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ. ಲೋಫ್ಲರ್‌ನಿಂದ ರಂಜಿಸಿದ ಲೇಪಿತ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಕಣಗಳು ಸುಂದರವಾಗಿ ಕಾಣಿಸಿದರೂ, ಕೋಶಕೇಂದ್ರ ಮತ್ತು ಕೋಶದ್ರವ್ಯ ಎರಡೂ ಒಂದೇ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣ ಹೊಂದಿರುವುದೇಕೆ ಎಂದು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಕರು ಕೇಳಿದರೆ, ಯಾವುದೇ ಕ್ಷಾರೀಯ ಏಕವರ್ಣ ರಂಜಕದಿಂದ ಆ ಬಣ್ಣಭೇದವನ್ನು ತೋರಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ ಎಂಬುದೇ ಉತ್ತರ. ಆ ಪ್ರಶ್ನೆ ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ವರ್ಗ ಮತ್ತು ಅದರ ರಕ್ತ ರಂಜಕ ಉತ್ಪನ್ನಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ.

ಸಾಮಾನ್ಯ ಗೊಂದಲಗಳನ್ನು ತಪ್ಪಿಸುವುದು

ಹೆಚ್ಚಿನ ಗೊಂದಲಗಳಿಗೆ ಎರಡು ತಪ್ಪುಗಳು ಕಾರಣ. ಮೊದಲನೆಯದು, ಬಾಟಲಿಯಲ್ಲಿ ಎರಡೂ ನೀಲಿಯಾಗಿ ಕಾಣುವುದರಿಂದ ಲೋಫ್ಲರ್‌ನ ರಂಜಕವನ್ನು ಸರಳ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂಗೆ ಪರಸ್ಪರ ಬದಲಿಯಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು ಎಂದು ಭಾವಿಸುವುದು. ಅವುಗಳ pH ಮತ್ತು ತೀವ್ರತೆ ಭಿನ್ನವಾಗಿವೆ. ಲೋಫ್ಲರ್‌ನ ರಂಜಕವನ್ನು ನಿರ್ದಿಷ್ಟಪಡಿಸಿದ ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ ತಟಸ್ಥ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯವನ್ನು ಬದಲಿಯಾಗಿ ಬಳಸಿದರೆ, ಆ ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ ಮುಖ್ಯವಾದ ಕಣಗಳ ಬಣ್ಣವ್ಯತ್ಯಾಸವೇ ಕಳೆದುಹೋಗುತ್ತದೆ. ಎರಡನೆಯದು, ಯಾವುದೇ ಹಳೆಯ ಅಥವಾ ಆಕಸ್ಮಿಕವಾಗಿ ಕಾಲಕ್ರಮೇಣ ಬದಲಾಗಿರುವ ಕ್ಷಾರೀಯ ನೀಲಿ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸುವುದು. ಅನಿಯಂತ್ರಿತ ಕಾಲಕ್ರಮದ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ತಿಳಿಯದ ಸಾಂದ್ರತೆಯ, ತಿಳಿಯದ ಸಂಯೋಜನೆಯ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತವೆ. ನಿಜವಾದ ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್ ದ್ರಾವಣಗಳನ್ನು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣ ವಿಧಾನಗಳಿಂದ ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ; ರಕ್ತ ರಂಜಕಗಳ ಪರಂಪರೆಯಲ್ಲಿ ಅವುಗಳನ್ನು ಅಳೆಯಲಾದ ಇಯೋಸಿನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇತಿಹಾಸ ಇಲ್ಲಿ ಪಾಠ ಕಲಿಸುತ್ತದೆ: ಅನಿಯಂತ್ರಿತ ಮಿಶ್ರಣಗಳನ್ನು ಅದೇ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಪುನಃ ತಯಾರಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗದ ಕಾರಣಕ್ಕಾಗಿಯೇ 1890ರ ದಶಕದ ಅಸ್ಥಿರ ಜಲೀಯ ಪರಿಪಕ್ವ ದ್ರಾವಣಗಳ ಸ್ಥಾನವನ್ನು ಮೆಥನಾಲ್‌ನಿಂದ ಸ್ಥಿರಗೊಳಿಸಿದ ಸಂಯೋಜನೆಗಳು ಪಡೆದವು. ಎಷ್ಟು ಹಳೆಯದು ಎಂಬುದು ತಿಳಿಯದ ಬಾಟಲಿಯಿಂದ ರೋಗನಿರ್ಣಯದ ಸ್ಲೈಡ್‌ಗೆ ರಂಜನೆ ಮಾಡುವ ಮೊದಲು ಈ ಪಾಠವನ್ನು ನೆನಪಿಸಿಕೊಳ್ಳುವುದು ಸೂಕ್ತ.

ಹೆಸರಿನ ನಿಖರತೆಯೂ ಮುಖ್ಯ. ಬಣ್ಣದಿಂದ ಊಹಿಸುವ ಬದಲು, ಉತ್ಪನ್ನ ಪಟ್ಟಿಯಲ್ಲಿನ ಗುರುತು (ಜಲೀಯ, ಲೋಫ್ಲರ್ ಅಥವಾ ಪಾಲಿಕ್ರೋಮ್), ವರ್ಣದ್ರವ್ಯದ ಪ್ರಮಾಣ ಮತ್ತು ಉದ್ದೇಶಿತ ಬಳಕೆಯನ್ನು ಲೇಬಲ್‌ನಲ್ಲಿ ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ. ಈ ಮೂರು ಸಂಯೋಜನೆಗಳ ಮೂಲ ಕ್ರೋಮೋಫೋರ್ ಒಂದೇ. ಆದರೆ ಅವುಗಳ ಉದ್ದೇಶ ಒಂದೇ ಅಲ್ಲ.