EMB agar ប្រៀបធៀបនឹង MacConkey agar៖ ការជ្រើសរើស និងការបកស្រាយមេឌៀ

និស្សិតម្នាក់អូសសំណាកទឹកដូចគ្នាលើចានមេឌៀពីរ។ នៅលើចានមួយ មានកូឡូនីពណ៌ងងឹតជាមួយពន្លឺចាំងលោហធាតុពណ៌បៃតង។ នៅលើចានមួយទៀត មានកូឡូនីពណ៌ផ្កាឈូកភ្លឺជាមួយរង្វង់ស្រអាប់នៅជុំវិញ។ ចានទាំងពីរត្រូវបានដាក់អ៊ីណូគូលុមពីបំពង់ដូចគ្នា បណ្តុះនៅក្បែរគ្នា និងអាននៅម៉ោងដូចគ្នា។ និស្សិតសួរថា ចានមួយណាត្រឹមត្រូវ។

ចានទាំងពីរត្រឹមត្រូវ។ ពួកវាឆ្លើយសំណួរខុសគ្នា។ ភាពច្រឡំកើតឡើងពេលគេយកមេឌៀទាំងពីរជាឧបករណ៍ស្គ្រីនដែលអាចជំនួសគ្នាបានសម្រាប់បាក់តេរីពោះវៀន។ ពួកវាមានគោលបំណងរួម គឺជ្រើសរើសមីក្រូសរីរាង្គ enteric ក្រាមអវិជ្ជមាន និងបែងចែកអ្នកបំបែក lactose ចេញពីអ្នកមិនបំបែក ប៉ុន្តែពួកវាសម្រេចគោលបំណងនោះដោយគីមីវិទ្យាខុសគ្នា និងតក្កវិជ្ជាផ្នែករូបភាពខុសគ្នា។ ពេលយល់គោលគំនិតមូលដ្ឋានទាំងពីរ ការជ្រើសចាន និងការអានកូឡូនីនឹងក្លាយជាការងារធម្មតា។

ចម្លើយខ្លី

EMB agar ប្រើសារធាតុពណ៌ពីរ eosin Y និង methylene blue ដែលធ្វើមុខងារពីរពេលតែមួយ៖ ពួកវាទប់ស្កាត់ការលូតលាស់របស់មីក្រូសរីរាង្គក្រាមវិជ្ជមាន និងកកជុំវិញអ្នកផលិតអាស៊ីតខ្លាំង ដើម្បីបង្កើតកូឡូនីពណ៌ងងឹត ដែលក្នុងករណីបុរាណ Escherichia coli មានពន្លឺចាំងលោហធាតុពណ៌បៃតង។ MacConkey agar បែងចែកមុខងារទាំងនេះដាច់ពីគ្នា៖ bile salts រួមជាមួយ crystal violet ទប់ស្កាត់ក្រាមវិជ្ជមាន lactose ផ្គត់ផ្គង់សារធាតុសម្រាប់ការបំបែកដោយ fermentation ហើយ neutral red បង្ហាញអាស៊ីតជាកូឡូនីពណ៌ផ្កាឈូក ឬក្រហម។ ប្រសិនបើភារកិច្ចគឺបង្ហាញ E. coli ជាបឋមឱ្យឃើញច្បាស់ EMB មានប្រយោជន៍។ ប្រសិនបើភារកិច្ចគឺបែងចែកអ្នកបំបែក lactose ពណ៌ផ្កាឈូកពីអ្នកមិនបំបែកដែលគ្មានពណ៌ឱ្យបានច្បាស់ ជាពិសេសក្នុងលំហូរការងារសំណាកលាមក ឬទឹកនោម MacConkey ជាទូទៅអានបានសាមញ្ញជាង។ គ្មានចានណាមួយកំណត់អត្តសញ្ញាណមីក្រូសរីរាង្គដោយផ្អែកលើពណ៌តែប៉ុណ្ណោះទេ។

EMB៖ សារធាតុពណ៌ដែលទាំងជ្រើសរើស និងបង្ហាញលទ្ធផលក្នុងពេលតែមួយ

គោលគំនិតរបស់ EMB បញ្ចូលមុខងារជ្រើសរើស និងមុខងារបង្ហាញសញ្ញាទៅក្នុងម៉ូលេគុលដូចគ្នា។ ពិធីការរបស់ ASM សម្រាប់ eosin methylene blue agar ពិពណ៌នា EMB ថាជាមេឌៀទាំងជ្រើសរើស និងបែងចែក ដោយគូសារធាតុពណ៌ទប់ស្កាត់មីក្រូសរីរាង្គក្រាមវិជ្ជមានជាច្រើន ខណៈការបំបែក lactose ជំរុញការស្រូបយក និងការកករបស់សារធាតុពណ៌។ រូបមន្ត Levine ស្តង់ដារមាន peptone, lactose, phosphate, eosin Y, methylene blue និង agar ដូចដែលបានរាយក្នុង វិធីសាស្ត្រ FDA BAM សម្រាប់ Levine EMB agar។ គួរកត់សម្គាល់ថា រូបមន្ត EMB ចាស់ៗខ្លះបន្ថែម sucrose ជាមួយ lactose ខណៈ Levine EMB មាន lactose ដោយគ្មាន sucrose ដូច្នេះត្រូវកត់ត្រាថាមន្ទីរពិសោធន៍របស់អ្នកស្តុករូបមន្តណា។

ការអាន EMB គឺការអានឥរិយាបថរបស់សារធាតុពណ៌។ ការបំបែក lactose ខ្លាំងបង្កើតអាស៊ីតគ្រប់គ្រាន់ដើម្បីជំរុញឱ្យសារធាតុពណ៌កកខ្លាំង ធ្វើឱ្យ E. coli មានកណ្តាលកូឡូនីពណ៌ខៀវងងឹតទៅខ្មៅ ហើយក្នុងករណីបុរាណ មានពន្លឺចាំងលោហធាតុពណ៌បៃតងនៅក្រោមពន្លឺឆ្លុះ។ អ្នកបំបែកខ្សោយជាង ដូចជា Enterobacter និង Klebsiella ជាទូទៅលូតលាស់ជាកូឡូនីមានសភាពរំអិល ពណ៌ផ្កាឈូកទៅស្វាយ ដោយគ្មានពន្លឺចាំងនោះ។ អ្នកមិនបំបែក ដូចជា Salmonella, Shigella និង Proteus ជាទូទៅលូតលាស់ជាកូឡូនីគ្មានពណ៌ ឬថ្លា ព្រោះពួកវាមិនបង្កើតការកើនអាស៊ីតភ្លាមៗដែលធ្វើឱ្យសារធាតុពណ៌កកទេ។ ក្រាមវិជ្ជមានជាទូទៅត្រូវបានទប់ស្កាត់ ប៉ុន្តែកម្រិតនៃការទប់ស្កាត់អាស្រ័យលើសំពាធ និងផលិតផល។ គីមីវិទ្យាលម្អិតនៃការរៀបចំសារធាតុពណ៌ រួមទាំងមូលហេតុដែល methylene blue មានឥរិយាបថជាសារធាតុជ្រលក់ពណ៌មានបន្ទុកវិជ្ជមាន គួរត្រូវបានពិភាក្សាដោយឡែកក្នុងប្រធានបទអំពីរូបមន្តសារធាតុពណ៌ ហើយបរិបទទូទៅនៃមីក្រូទស្សន៍មាននៅក្នុង អាត្លាសវិធីសាស្ត្រជ្រលក់ពណ៌។ អត្ថបទនេះផ្តោតលើការជ្រើសចាន និងការអានលទ្ធផល។

រូបខាងលើគឺសម្រាប់ពន្យល់។ វាបង្ហាញតក្កវិជ្ជាផ្នែករូបភាពដែលគួររំពឹង៖ នៅលើ EMB មានកូឡូនីងងឹតមានពន្លឺចាំង ប្រភេទរំអិលពណ៌ផ្កាឈូក និងប្រភេទស្លេក ខណៈនៅលើ MacConkey គឺប្រភេទពណ៌ផ្កាឈូកធៀបនឹងប្រភេទស្លេក។ ប្រើវាដើម្បីរៀនលំនាំ បន្ទាប់មកផ្ទៀងផ្ទាត់រាល់ការសន្និដ្ឋានជាមួយរូបថតគំរូត្រួតពិនិត្យ និងសន្លឹកណែនាំផលិតផលសម្រាប់មេឌៀជាក់លាក់នៅលើតុការងាររបស់អ្នក។

MacConkey៖ មុខងារបែងចែកដាច់ពីគ្នា និងច្បាប់អានរូបភាពសាមញ្ញជាង

គោលគំនិតរបស់ MacConkey កំណត់មុខងារនីមួយៗឱ្យសមាសធាតុដាច់ដោយឡែក។ ពិធីការរបស់ ASM សម្រាប់ MacConkey agar បង្ហាញស៊ុមគំនិតដូចគ្នាថាជាមេឌៀជ្រើសរើស និងបែងចែក ហើយ វិធីសាស្ត្រ FDA BAM សម្រាប់ MacConkey agar រាយសមាសធាតុសកម្ម៖ peptones, lactose, bile salts, salt, neutral red, crystal violet និង agar។ Bile salts រួមជាមួយ crystal violet ជ្រើសរើសដោយទប់ស្កាត់ក្រាមវិជ្ជមាន។ Lactose ផ្គត់ផ្គង់សារធាតុសម្រាប់ fermentation។ Neutral red ដើរតួជាសូចនាករ pH ដោយប្រែទៅជាពណ៌ផ្កាឈូកដល់ក្រហមនៅកន្លែងដែលអាស៊ីតកើតឡើង ហើយពេលខ្លះមាន bile កកជុំវិញអ្នកបំបែកខ្លាំង។

ច្បាប់អានត្រូវបានរៀបចំឱ្យសាមញ្ញដោយចេតនា៖ ពណ៌ផ្កាឈូកមានន័យថាជាអ្នកបំបែក lactose ខណៈគ្មានពណ៌ ឬស្លេកមានន័យថាជាអ្នកមិនបំបែក។ E. coli មានពណ៌ផ្កាឈូកទៅក្រហម ហើយជាញឹកញាប់មានរង្វង់ bile កក។ Klebsiella និង Enterobacter មានពណ៌ផ្កាឈូក ហើយជាញឹកញាប់មានសភាពរំអិលដោយសារកន្សោមរបស់ពួកវា។ Salmonella, Shigella, Proteus និងបាក់តេរីដំបងក្រាមអវិជ្ជមានជាច្រើនទៀតមើលទៅគ្មានពណ៌។ មានអត្ថប្រយោជន៍បន្ថែមមួយសម្រាប់មន្ទីរពិសោធន៍បង្រៀន៖ bile salts ជាទូទៅកាត់បន្ថយការរីករាលដាលរបស់ Proteus ដូច្នេះងាយទទួលបានកូឡូនីដាច់ដោយឡែកលើ MacConkey ជាងលើមេឌៀមិនជ្រើសរើស ទោះបីការទប់ស្កាត់មិនមែនពេញលេញ ហើយមានជម្រើសគ្មានអំបិលសម្រាប់ករណីដែលការគ្រប់គ្រងការរីករាលដាលជាអាទិភាពក៏ដោយ។

មូលហេតុតាមកម្រិតម៉ូលេគុលដែលសារធាតុពណ៌មានឥរិយាបថបែបនេះ ទាក់ទងនឹងបន្ទុក និងរចនាសម្ព័ន្ធ។ Methylene blue គឺជាសារធាតុពណ៌ phenothiazine មានបន្ទុកវិជ្ជមាន ដែល រចនាសម្ព័ន្ធ និងលក្ខណៈសម្បត្តិ របស់វាពន្យល់ពីទំនោរចាប់ភ្ជាប់នឹងផ្ទៃបាក់តេរីមានលក្ខណៈអាស៊ីត ដែលជាទំនោរដូចគ្នាដែលកើតឡើងពេលវាកកនៅតំបន់អាស៊ីតលើ EMB។

ការប្រៀបធៀបភ្លាមៗ

សូមអានតារាងនេះជានីតិវិធីសម្រេចចិត្ត។ នៅពេលលំហាត់ត្រូវការឱ្យនិស្សិតឃើញកម្រិតខុសៗគ្នានៃកម្លាំង fermentation ជាមួយចំណុចចុងក្រោយដែលលេចធ្លោ EMB បង្ហាញវាបាន។ នៅពេលលំហាត់ត្រូវការបែងចែកជាពីរក្រុមយ៉ាងលឿន មុនការផ្ទៀងផ្ទាត់ដោយជីវគីមី MacConkey បង្ហាញវាបាន។

តើមេឌៀណាសម្រាប់សំណាកណា

សម្រាប់លំហាត់សំណាកទឹកដែលមានគោលបំណងសម្គាល់ fecal coliform ឬ E. coli ជាបឋម EMB គួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ ព្រោះពន្លឺចាំងរបស់វាខុសប្លែកឃើញច្បាស់។ MacConkey ក៏អាចប្រើជាមួយបាក់តេរី enteric ក្រាមអវិជ្ជមាន និងមានប្រវត្តិប្រើក្នុងការតេស្តទឹកផងដែរ ប៉ុន្តែគ្មានចានណាមួយអាចជំនួសវិធីសាស្ត្រត្រួតពិនិត្យទឹកតាមបទប្បញ្ញត្តិបានទេ ដែលអាចកំណត់ឱ្យប្រើមេឌៀដូចជា modified mTEC ឬ MI អាស្រ័យលើការតេស្ត។ ត្រូវពិនិត្យវិធីសាស្ត្រដែលមន្ទីរពិសោធន៍របស់អ្នកតម្រូវឱ្យអនុវត្ត។

សម្រាប់ការបែងចែកបែបសំណាកលាមករវាងអ្នកបំបែក និងអ្នកមិនបំបែក MacConkey ជាទូទៅមានប្រយោជន៍ជាងក្នុងចំណោមទាំងពីរ។ ការងារជាក់ស្តែងលើសំណាកលាមកសម្រាប់ Salmonella ឬ Shigella ជាធម្មតាបន្ថែមមេឌៀ enteric ជ្រើសរើសខ្លាំងជាង ដូចជា XLD ឬ Hektoen enteric ជំនួសឱ្យការពឹងផ្អែកលើ MacConkey តែមួយ។

សម្រាប់ការបង្រៀនបែបសំណាកទឹកនោមដែលត្រាប់តាមលំហូរការងារគ្លីនិក សូមប្រើ MacConkey ជាគូជាមួយ blood agar។ MacConkey ផ្តល់ការបែងចែកក្រាមអវិជ្ជមានដំណាក់កាលដំបូង ខណៈ blood agar អនុញ្ញាតឱ្យមីក្រូសរីរាង្គដែល MacConkey ទប់ស្កាត់លូតលាស់ឡើងវិញ។ ការប្រើជាគូនេះជាវិធីសាស្ត្រស្តង់ដារដែលត្រូវបានពិពណ៌នាក្នុងការរៀបចំវប្បធម៌ទឹកនោមគ្លីនិក។

សម្រាប់ការបង្រៀនគោលគំនិតសុទ្ធ អាចប្រើទាំងពីរ។ EMB បង្រៀនថាកម្លាំង fermentation មានសារៈសំខាន់ ហើយម៉ូលេគុលមួយអាចបំពេញមុខងារពីរ។ MacConkey បង្រៀនការរចនាបែបម៉ូឌុល៖ សារធាតុជ្រើសរើស សារធាតុមូលដ្ឋាន និងសូចនាករត្រូវបានបែងចែកដាច់ពីគ្នា។ និស្សិតដែលអូស E. coli ដែលស្គាល់ច្បាស់ Klebsiella aerogenes ដែលស្គាល់ច្បាស់ និង Salmonella ដែលស្គាល់ច្បាស់ ជាប់គ្នាលើមេឌៀទាំងពីរ ជាទូទៅមិនសូវច្រឡំតក្កវិជ្ជាទាំងពីរម្តងទៀតទេ។

កំហុសពេលអានដែលកើតឡើងរាល់វគ្គ

កំហុសដែលជួបញឹកញាប់បំផុតគឺកំណត់អត្តសញ្ញាណដោយពណ៌តែមួយ។ ពណ៌ផ្កាឈូកលើ MacConkey អាចជា E. coli, Klebsiella, Enterobacter ឬអ្នកបំបែកផ្សេងទៀត។ គ្មានពណ៌អាចជា Salmonella, Shigella, Proteus, Pseudomonas ឬអ្នកមិនបំបែកផ្សេងទៀត។ ពណ៌គឺជាលក្ខណៈ phenotype សម្រាប់ស្គ្រីន ដែលណែនាំទៅរកការងារផ្ទៀងផ្ទាត់បន្ថែម ដូចជា Gram stain, oxidase, បន្ទះតេស្តជីវគីមី ឬការកំណត់អត្តសញ្ញាណដោយឧបករណ៍ មិនមែនជាឈ្មោះប្រភេទសត្វទេ។

កំហុសទីពីរគឺការបកស្រាយលើសកម្រិតពីការខ្វះពន្លឺចាំង។ កូឡូនី E. coli ពិតប្រាកដខ្លះ ជាពិសេសកូឡូនីដាច់ដោយឡែក អាចបង្កើតពន្លឺចាំងលោហធាតុតិចតួច ឬគ្មានសោះលើ EMB។ ការមិនមានពន្លឺចាំងមិនអាចដក E. coli ចេញបានទេ ហើយការមានពន្លឺចាំងក៏មិនអាចបញ្ជាក់វាបានដែរ។ ចាត់ទុកពន្លឺចាំងជាតម្រុយបឋម។

កំហុសទីបីគឺការប្រៀបធៀបចានដែលមានអាយុខុសគ្នា។ អ្នកបំបែក lactose ដែលឆ្លើយតបយឺតអាចប្រែជាពណ៌ផ្កាឈូកលើ MacConkey បន្ទាប់ពីបណ្តុះយូរ ដែលធ្វើឱ្យការបែងចែកច្បាស់រវាងអ្នកបំបែក និងអ្នកមិនបំបែកមិនសូវច្បាស់។ អាននៅម៉ោងដែលមន្ទីរពិសោធន៍កំណត់ ហើយកត់ត្រារយៈពេលបណ្តុះជាមួយលទ្ធផល។

កំហុសទីបួនគឺការអានការលូតលាស់ចម្រុះថាជាមីក្រូសរីរាង្គតែមួយ។ កូឡូនីពណ៌ផ្កាឈូកនៅជាប់កូឡូនីគ្មានពណ៌បង្ហាញ phenotype ពីរ មិនមែនលក្ខណៈកណ្ដាលមួយទេ។ ជ្រើសយកកូឡូនីដែលដាច់ពីគ្នាល្អ ហើយធ្វើការជាមួយ morphotype នីមួយៗដោយឡែក។ សភាពរំអិលក៏បង្កើតអន្ទាក់ស្រដៀងគ្នា៖ ទាំង Klebsiella និង Enterobacter អាចមើលទៅមានសភាពរំអិល ដូច្នេះកន្សោមតែមួយមិនអាចកំណត់ឈ្មោះបានទេ។ មីក្រូសរីរាង្គដែលមុននេះត្រូវបានបង្រៀនថា Enterobacter aerogenes ឥឡូវត្រូវបានចាត់ថ្នាក់ជា Klebsiella aerogenes ដែលពន្យល់ថាហេតុអ្វីតារាងចាស់ និងស្លាកថ្មីហាក់ដូចជាមិនត្រូវគ្នា។

ការត្រួតពិនិត្យ និងច្បាប់បញ្ចប់

ប្រើគំរូត្រួតពិនិត្យដែលមានរូបថត ឬគំរូស្រស់រាល់វគ្គ៖ E. coli សម្រាប់ប្រតិកម្មអ្នកបំបែកខ្លាំង Klebsiella aerogenes សម្រាប់ fermentation មានសភាពរំអិលដោយគ្មានពន្លឺចាំងបុរាណ សំពាធ Salmonella សម្រាប់ប្រតិកម្មអ្នកមិនបំបែកគ្មានពណ៌ និង Staphylococcus aureus ដើម្បីផ្ទៀងផ្ទាត់ការទប់ស្កាត់ក្រាមវិជ្ជមានលើផលិតផលជាក់លាក់របស់អ្នក។ ផ្គូផ្គងលេខសំពាធ និងលក្ខខណ្ឌទទួលយកជាមួយសន្លឹកណែនាំរបស់ក្រុមហ៊ុនផលិត ព្រោះកម្រិតជ្រើសរើសប្រែប្រួលតាមបរិមាណ bile, crystal violet និងសារធាតុពណ៌។

ចងចាំមួយប្រយោគនៅតុការងារ។ EMB ប្រើសារធាតុពណ៌ដែលទាំងជ្រើសរើស និងបង្ហាញសញ្ញា ដែលផ្តល់សញ្ញា E. coli លេចធ្លោ ប៉ុន្តែតម្រូវឱ្យអានលម្អិតជាង។ MacConkey បែងចែកមុខងារជ្រើសរើសចេញពីមុខងារបង្ហាញសញ្ញា ដែលផ្តល់ការបែងចែកពណ៌ផ្កាឈូកធៀបនឹងស្លេកយ៉ាងត្រង់ ប៉ុន្តែផ្តល់ព័ត៌មានលម្អិតអំពី fermentation តិចជាង។ ជ្រើសមេឌៀដែលគោលគំនិតរបស់វាត្រូវនឹងសំណួរ ផ្ទៀងផ្ទាត់ពណ៌ដោយតេស្តសមស្រប ហើយចានទាំងពីរនឹងឈប់ប្រកួតគ្នា ហើយចាប់ផ្តើមបំពេញគ្នាទៅវិញទៅមក។