Biru metilen lan Bartonella: temuan laboratorium lan wates bukti klinis

Cawan kultur lan pasien padha nggunakake tembung infeksi, nanging konsep sing dimaksud beda. Ing cawan, infeksi diukur minangka cacah koloni ing agar. Ing pasien, infeksi nyakup bakteri ing njero sel lan pembuluh getih, obat sing ngliwati getih lan jaringan, sarta sistem kekebalan sing nindakake sapérangan pakaryan. Yen loro iki dicampurake, angka laboratorium sing nggumunake bisa katon kaya terapi. Yen tetep dibedakake, angka sing padha nuduhake apa sing sejatine: alesan kanggo nindakake eksperimen sabanjure.

Mbedakake loro perkara kasebut dadi tujuan utama tinjauan babagan biru metilen lan Bartonella iki. Rong panaliten laboratorium saka siji klompok panaliti nguji biru metilen tumrap Bartonella henselae ing kahanan ora tuwuh. Loro-lorone nglaporake aktivitas sing kuwat ing wadhah kaca lan plastik. Ora ana siji-sijia sing nguji ing manungsa.

Sebab panaliti nguji fase stasioner

Umume pengujian antibiotik nggunakake sel sing lagi tuwuh. Model kasebut ora nyakup kahanan sing luwih angel: sel sing wis mandheg mbelah lan bisa tahan marang obat sing mateni sel liyane sing isih tuwuh.

Bartonella bisa tetep urip ing awak, kalebu ing njero eritrosit lan sel endotel. Mula, klompok kasebut nyelidiki obat sing wis disetujoni endi sing bisa mateni B. henselae sawise mlebu fase stasioner. MIC sing endhek tumrap sel sing tuwuh ora bisa prédhiksi kemampuan mateni sel fase stasioner. Rifampin nduweni MIC sing endhek banget, nanging kurang bisa mateni sel stasioner, dene senyawa kanthi nilai MIC sing luwih dhuwur bisa mateni sel kasebut kanthi apik. Pamaca sing kepengin metode umum kanggo maca makalah kaya iki bisa nemokake ing pandhuan maca panaliten biru metilen.

Skrining kapisan: Li lan kanca-kancane, 2019

Skrining fase stasioner taun 2019 ing Antibiotics nggunakake siji galur, B. henselae JK53, sing dituwuhake ing medium Schneider kanthi 10 persen serum janin sapi ing 37 C kanthi 5 persen CO2. Kultur umur sedina umume ngemot sel sing nyebar lan lagi mbelah. Kultur umur limang dina, kanthi watara 10 pangkat 8 unit pembentuk koloni per mL, dianggep ana ing fase stasioner lan ngemot agregat sing katon.

Uji kasebut nggunakake SYBR Green I karo propidium iodide, sing dikalibrasi nganggo campuran sel urip lan sel sing dipateni nganggo isopropanol. Amarga biru metilen nduweni warna sing kuwat, asil sing nuduhake aktivitas dikonfirmasi nganggo mikroskopi, banjur nganggo cacah koloni ing agar getih, yaiku ukuran asil pungkasan sing luwih ketat.

Saka 1,581 obat sing wis disetujoni lan diuji ing 50 micromolar, biru metilen nyisakake viabilitas 16 persen miturut pamaca pelat lan 25 persen miturut mikroskopi. Daptomycin menehi asil 21 persen, sawetara azol 22 nganti 27 persen, gentamicin 32 persen, erythromycin 66 persen, lan ciprofloxacin 74 persen. Pyrvinium pamoate katon luwih kuwat ing pamaca pelat, nanging ora bisa diukur nganggo mikroskopi amarga fluoresensine dhewe.

Tumrap B. henselae sing tuwuh, MIC biru metilen yaiku 0.08 nganti 0.16 micrograms per mL. Tumrap sel stasioner umur limang dina ing 5 micrograms per mL, cacah koloni mudhun nganti ora ana koloni sing bisa dideteksi sawise kena paparan sedina, padha karo daptomycin lan pyrvinium pamoate ing konsentrasi sing diuji. Uji kapisah kanggo ngukur matine bakteri sajrone wektu nggunakake 10 micrograms per mL. Angka kasebut minangka tingkat paparan laboratorium, dudu dosis, lan makalah kasebut uga nyatakake mangkono. Nilai puncak plasma manungsa watara 3.9 micrograms per mL sing dikutip ing makalah mung diwenehake minangka konteks latar mburi. Ringkesan farmakokinetika biru metilen nerangake sebabe angka ing plasma ora bisa dianggep minangka angka ing jaringan.

Rong watesan kasebut diterangake kanthi cetha ing makalah. Ora ana model biofilm lan ora ana pengujian kombinasi biru metilen. Agregat umur limang dina kasebut minangka kumpulan sel ing kultur cair fase stasioner, dudu eksperimen biofilm sing wis divalidasi. Para panulis nyaranake panaliten kewan, kombinasi obat, biofilm, lan pengujian ing spesies Bartonella liyane.

Kombinasi lan sel saka biofilm: Zheng lan kanca-kancane, 2020

Panaliten tindak lanjut taun 2020 ing BMC Microbiology tetep nggunakake galur lan medium sing padha, nanging nggunakake kultur stasioner umur enem dina lan nambah rong perkara sing durung ana ing makalah kapisan: kombinasi rong obat lan model sel saka biofilm.

Kanggo obat tunggal ing konsentrasi seragam 5 micrograms per mL sajrone 24 jam, biru metilen nyisakake 3.2 kaping 10 pangkat 4 unit pembentuk koloni per mL, dibandhingake karo kontrol watara 2.8 kaping 10 pangkat 10. Ciprofloxacin, gentamicin, lan nitrofurantoin nyisakake koloni luwih sithik ing wektu sing padha. Iki beda karo asil taun 2019, nalika tingkat nominal sing padha ora nyisakake koloni sing bisa dideteksi sawise sedina. Umur, kapadhetan, lan cara nangani kultur beda, mula arah efek mateni bisa diasilake maneh, nanging gedhene efek ora padha. Owah-owahan antarane uji iki minangka salah siji alesan pamriksan keamanan lan interaksi standar mbedakake potensi laboratorium saka efek klinis.

Skrining kombinasi minangka bagean sing paling kerep dikutip. Saben komponen ditetepake ing 5 micrograms per mL. Azithromycin karo biru metilen lan rifampin karo biru metilen padha-padha ora nyisakake koloni fase stasioner sing bisa dideteksi ing 24 jam. Loro pasangan ciprofloxacin uga menehi asil sing padha, lan mung papat pasangan kasebut saka 25 pasangan sing diuji. Ora ana analisis sinergi formal sing ditindakake, mula istilah sing trep yaiku kombinasi aktif ing kahanan iki, dudu sinergi sing wis kabukten.

Eksperimen biofilm nguji sel sing dijupuk saka biofilm enom sing wis dirusak, dudu penetrasi menyang biofilm diwasa sing isih utuh. Kultur dituwuhake limang dina, diencerake menyang pelat sumur kanggo limang dina maneh, dikonfirmasi nganggo pewarnaan crystal violet, banjur dikerok sadurunge paparan obat. Ing 5 micrograms per mL, biru metilen tunggal nyuda cacah nganti 2.3 kaping 10 pangkat 2 ing dina 6, kalebu salah siji agen tunggal sing paling apik, nanging ora nganti nol. Loro kombinasi biru metilen tekan nol ing dina 6, kaya loro kombinasi ciprofloxacin.

Para panulis nyebutake watesan sing uga bakal ditemokake pamaca sing tliti: biofilm enom sing dikerok tinimbang biofilm lawas sing utuh, siji konsentrasi sing praktis kanggo kabeh obat tinimbang saben obat ing tingkat puncak realistise dhewe, mung pasangan pilihan sing adhedhasar azithromycin utawa rifampin, siji galur, tanpa kewan, lan tanpa pasien. Panaliten telung obat kanggo sabanjure diusulake, nanging durung dilaporake.

Perbandingan rancangan panaliten

Tabel kasebut ngringkes pokok artikel iki. Kabeh sing ana ing sisih kiwa kolom pungkasan minangka panaliten kultur. Ora ana asil saka loro makalah kasebut sing mlebu kolom pungkasan.

Bartonella dudu Borrelia

Loro makalah kasebut nyebutake Borrelia burgdorferi, spiroketa panyebab penyakit Lyme, amarga uji pewarna kasebut asalé saka panaliten fase stasioner Borrelia sadurunge ing laboratorium sing padha, nalika biru metilen lan daptomycin uga nuduhake aktivitas. Riwayat iki menehi konteks sing migunani lan kerep dadi sumber kekeliruan.

Ora ana eksperimen ing loro makalah Bartonella kasebut sing nguji Borrelia bebarengan karo Bartonella kanggo dibandhingake langsung. Organisme, medium, lan konsentrasine beda, lan dugaan efek biru metilen ing membran Bartonella diandharake minangka spekulasi sing mbutuhake panaliten luwih lanjut. Asil ora kena digeneralisasi menyang spesies liya, lan ora ana siji-sijia saka loro makalah kasebut sing ndhukung pratelan umum babagan parasit. Amarga alesan iki, perbandingan sel persister Borrelia lan Bartonella tetep mbedakake literatur loro kasebut.

Sebab asil kultur ora bisa langsung dadi protokol

Kapentingan kanggo nggoleki protokol biru metilen kanggo bartonella bisa dimangerteni. Makalah-makalah iki nuduhake sebabe frasa kasebut kudu dianggep minangka tandha kanggo ngati-ati, tinimbang dhaptar blanja.

Kapisan, 5 micrograms per mL ing sumur pelat dudu resep. Angka kasebut ora nyakup absorpsi, distribusi, ikatan protein, penetrasi menyang njero sel, utawa tolerabilitas. Para panulis milih angka kasebut minangka rata-rata kasar tingkat puncak antibiotik lan nyatakake yen panaliten sabanjure kudu nggunakake saben obat ing tingkat realistise dhewe.

Kapindho, nol koloni tegese ora ana koloni ing kahanan penanaman kasebut, dudu jaringan sing steril. Sel persister, bakteri ing njero sel, lan watesan pengambilan sampel kabeh ana ing njaba cakupan pelat agar.

Katelu, kombinasi sing bisa ngsterilake sumur pelat bisa gagal utawa nyebabake cilaka ing awak. Azithromycin karo biru metilen lan rifampin karo biru metilen minangka pasangan laboratorium ing paparan laboratorium. Tanpa farmakokinetika kewan lan data manungsa sing dikontrol, ora ana dosis, suwene panggunaan, utawa rasio manfaat marang risiko sing bisa ditetepake. Sapa wae sing lagi nimbang pilihan kudu ngrembug karo klinisi lan maca tinjauan babagan kapan panggunaan biru metilen mbutuhake pengawasan medis sadurunge narik kesimpulan saka data cawan.

Kesimpulan winates sing didhukung makalah-makalah iki yaiku: biru metilen nduweni aktivitas sing bisa diasilake maneh tumrap B. henselae JK53 sing ora tuwuh kanthi in vitro, kalebu ing kombinasi rong obat ing laboratorium, kanthi asil kombinasi lan sel saka biofilm sing paling kuwat asalé saka panaliten taun 2020. Kabeh perkara liyane, kalebu apa aktivitas kasebut nduweni teges kanggo bartonellosis ing manungsa, isih durung diuji.