Ihe mere e ji methylene blue eme agba nkwado n'ịcha agba acid-fast

Onye ọrụ ụlọ nyocha na-enyocha mmiri ụkwara e tere n'efere iko nlele mgbe usoro ịcha agba niile gwụchara. Nje ndị yiri mkpanaka na-acha uhie uhie na-apụta ìhè n'elu ndabere anụnụ, a na-edekwa na akụkọ nsonaazụ na a hụrụ basili acid-fast. N'echi ya, efere iko nlele ọzọ na-egosi ndabere anụnụ nke otu agba n'enweghị mkpanaka uhie ọ bụla, a na-akọkwa na ọ nweghị ụkwara nta. Otu n'ime akụkọ ndị a na-ekwu ihe karịrị ihe efere iko ahụ gosiri, ọ bụghịkwa nke mbụ.

Mgbagwoju anya ahụ dị n'ịghọta echiche ahụ. Onye ọrụ ahụ weere agba anụnụ dị ka akụkụ nke usoro kemịkal e ji achọpụta nje, dị ka à ga-asị na methylene blue nyere aka ịchọta mycobacteria. Ọ naghị eme otú ahụ. Tupu methylene blue emetụ efere iko nlele ahụ, ule ahụ agwụlarị. Agba ahụ na-acha naanị ndabere ka e wee nwee ike ịgụ nsonaazụ. Edemede a na-akọwa ebumnuche methylene blue n'ịcha agba acid-fast, ihe mere agba ya ji bụrụ anụnụ kama agba ọzọ, na nkwubi okwu ị nwere ike ime site n'ịhụ uhie n'elu anụnụ.

Azịza dị mkpirikpi

Ịcha agba acid-fast bụ ule e ji amata ọdịiche, nke dabere n'echiche atọ. A na-amanye carbol fuchsin, bụ agba mbụ, ka ọ banye n'ime mkpụrụ ndụ niile, gụnyere mycobacteria ndị nwere mgbidi yiri wax. Acid-alcohol, bụ ihe na-ewepụ agba, na-ewepụ agba uhie n'ime mkpụrụ ndụ nkịtị, ma ọ naghị ewepụ ya n'ime ndị acid-fast. Methylene blue, bụ agba nkwado, na-achazi ihe niile ihe na-ewepụ agba wepụrụ agba ha, nke mere na mkpụrụ ndụ ndị na-abụghị acid-fast, mkpụrụ ndụ onye nnabata, na iberibe ihe na-apụta anụnụ, ebe basili acid-fast na-anọgide uhie. Agba nkwado na-eme ka ọdịiche agba pụta ìhè. Ọ naghị etinye aka n'usoro kemịkal nke na-eme ka mkpụrụ ndụ bụrụ acid-fast.

Ihe nzọụkwụ ọ bụla na-eme

Eserese dị n'okpuru na-egosi otú e si kewaa ọrụ ahụ. Gụọ ya site n'aka ekpe gaa n'aka nri dị ka usoro ọrụ, gụọkwa ahịrị dị n'okpuru dị ka ihe ncheta na ụdị usoro ịcha agba ọ bụla na-aza ajụjụ dị iche.

Ịbanye agba na-abịa mbụ. Mycobacteria na-eguzogide agba ndị nkịtị a gwakọtara na mmiri n'ihi na mkpuchi ha na-ajụ mmiri nke ukwuu, ya mere usoro ahụ na-amanye agba ka ọ banye. N'usoro Ziehl-Neelsen, ikpo ọkụ ruo mgbe uzuoku na-apụta na-eme ka carbol fuchsin nke nwere phenol banye site na mgbidi yiri wax. N'usoro Kinyoun nke na-ejighị ọkụ, a na-eji ngwakọta agba mbụ nke siri nnọọ ike dochie ọkụ, ụfọdụ ụdị usoro a gbanwere nke na-ejighị ọkụ na-agbakwụnyekwa ihe na-ebelata esemokwu elu. Usoro ịcha agba acid-fast nke American Society for Microbiology na-edekọ ngwakọta abụọ ahụ n'akụkụ ibe ha, ọdịiche n'oke agba dị n'ime ha pụtakwara ìhè: ihe dị ka 0.3 g nke basic fuchsin n'ime 100 mL maka usoro eji ọkụ, ma ihe dị ka 4 g maka usoro na-ejighị ọkụ.

Ịmata ọdịiche na-abịa nke abụọ. Acid-alcohol, nke na-abụkarị 3 mL nke hydrochloric acid siri ike n'ime 97 mL nke ethanol pasent 95, na-asachapụ agba uhie n'ime mkpụrụ ndụ ọ bụla mgbidi ya na-enweghị ikike pụrụ iche iguzogide iwepụ agba. Mkpụrụ ndụ ndị mkpuchi lipid mycobacteria ha ka zuru oke na-ejigide agba ahụ. Nke a bụ nzọụkwụ usoro ahụ niile dabere na ya, ọ bụkwa nzọụkwụ obere mgbanwe n'otú e si arụ ọrụ na-emetụta nke ukwuu, dịka a kọwara n'okpuru.

Ọdịiche agba na-abịa n'ikpeazụ. Efere iko nlele ahụ nwerezi mkpụrụ ndụ acid-fast uhie n'elu ndabere mkpụrụ ndụ ndị e wepụrụ agba ha, nke fọrọ nke nta ka ọ ghara inwe agba. Methylene blue dị pasent 0.3 w/v na-eme ka a hụ ndabere ahụ ọzọ, site n'agba nke dị nnọọ iche na uhie. Ịcha agba nkwado anaghị ewe ogologo oge; ọ na-abụkarị sekọnd 20 ruo 30 n'usoro eji ọkụ, ruo nkeji ole na ole n'ụfọdụ ụdị usoro na-ejighị ọkụ. Ogologo oge ahụ dabere n'usoro a na-agbaso, ọ bụghị n'àgwà agba ahụ n'onwe ya.

Ihe mere e ji họrọ agba a, na ihe mere o ji bụrụ anụnụ

Methylene blue bụ agba bụ isi nke nwere ion nwere chaji eletrik dị mma; nke a pụtara na ion ya nke nwere agba na-ebu chaji dị mma ma jikọta n'elu nje bacteria ndị e wepụrụ agba ha, mkpụrụ ndụ onye nnabata, na iberibe ihe ndị nwere chaji na-adịghị mma. OpenStax Microbiology na-akọwa echiche chaji a dị ka ụkpụrụ izugbe nke agba bụ isi na-agbaso. Ma methylene blue abụghị naanị agba nwere àgwà kemịkal a. Crystal violet na safranin bụkwa agba bụ isi. Nhọrọ a metụtara otú anya si ahụ agba, ọ bụghị kemịkal.

Mkpanaka uhie chọrọ ndabere nke agba ya dị iche, anụnụ na-enyekwa ọdịiche megide uhie nke kacha baa uru n'iji mikroskopu nwere ebe nlele na-enwu gbaa. Safranin agaghị abụ ezigbo agba nkwado n'ihi na agba pink-uhie ọ na-enye na-adị nso nke ukwuu na carbol fuchsin e jigidere, na-emebi ọdịiche usoro ahụ mepụtara. Crystal violet ga-enye ndabere violet gbara ọchịchịrị nke na-adọpụ uche n'ebe basili uhie ndị dị gịrịgịrị nọ. Ihe akaebe kacha sie ike na ọrụ ahụ bụ ịmepụta ọdịiche agba kama usoro kemịkal bụ na e nwere ike iji agba ọzọ dochie ya: a na-eji agba nkwado akwụkwọ ndụ, dịka malachite green na brilliant green, n'ụfọdụ usoro ọgwụgwọ anụmanụ na usoro ndị a gbanwere, ule ahụ ka na-arụkwa ọrụ, n'ihi na agba ọ bụla dị iche nke ọma na-arụ otu ọrụ ahụ.

Ihe abụọ metụtara ọrụ a na-esite na nke a. Nke mbụ, ntụziaka ngwakọta ọkọlọtọ anaghị akọwa ka a gbanwee pH; agwakọtala ngwọta mmiri nkịtị a nke dị pasent 0.3 na ngwakọta alkaline dịka methylene blue nke Loeffler, nke so n'echiche ịcha agba dị iche. Nke abụọ, iji agba gabiga ókè na-emebi nsonaazụ. Akwụkwọ ọmụmụ anụ ahụ na-adọ aka ná ntị kpọmkwem na ndabere anụnụ nke juru agba nke ukwuu nwere ike ikpuchi basili ndị dị ole na ole, ya mere ịhapụ agba n'elu efere iko nlele karịa oge usoro ahụ kwadoro na-ebelata ịdị mfe ịgụ ya n'enweghị uru ọ bụla.

Usoro kemịkal nke mgbidi na-eme ka ule ahụ kwe omume

Ihe mere acid-alcohol ji amata ọdịiche dị na mkpuchi mycobacteria. Isi ntọala usoro ya bụ ngwakọta mycolyl-arabinogalactan-peptidoglycan: peptidoglycan jikọtara na arabinogalactan, nke nsọtụ ya ndị dị n'èzí na-ebu mycolic acid nwere yinye dị ogologo nke ukwuu. Nke a na-emepụta mkpuchi mycomembrane dị n'èzí nke jupụtara na lipid, nke ihe anaghị agafe ngwa ngwa. Ntụle gbasara mkpuchi dị n'èzí nke mycobacteria na-akọwa nhazi a nke ọma. Ihe mgbochi ahụ na-arụ ọrụ n'akụkụ abụọ. Ọ na-egbochi agba ịbanye, nke mere e ji chọọ ọkụ ma ọ bụ agba mbụ e mere ka ọ sie ike iji mee ka agba banye; ọ na-egbochikwa iwepụ agba, nke mere acid-alcohol enweghị ike iwepụ carbol fuchsin mgbe ọ banyere n'ime. Nje bacteria ndị nkịtị enweghị mkpuchi a, ha na-atụfukwa agba ahụ. Ya mere, ụzọ kacha mma isi ghọta acid-fastness bụ dị ka mmetụta nke ihe mgbochi lipid, ọ bụghị dị ka njikọ kemịkal nke fuchsin na mycolic acid.

Usoro kemịkal a na-akọwakwa otu ihe na-agbagwoju anya ugboro ugboro: usoro Gram anaghị acha mycobacteria agba nke ọma, nsonaazụ ya anaghịkwa adị mfe ịtụ anya. Mgbe ụfọdụ ha na-apụta dị ka ụdị ndị agba ha dị ntakịrị ma yie eriri mkpụrụ, ma ọ bụ dị ka ihe fọrọ nke nta ka a ghara ịhụ nke na-enweghị agba. Mgbidi ha nke na-ajụ mmiri na-egbochi crystal violet ịbanye. Ịcha agba acid-fast abụghị ịcha agba Gram a gbanwere. Ọ bụ ụkpụrụ dị iche e ji amata ọdịiche, nke dabere n'àgwà mgbidi ọzọ, dịka ntụnyere ịcha agba dị mfe na ịcha agba Gram na-egosi maka usoro abụọ ndị ọzọ.

Usoro atọ, ajụjụ atọ

Maka ụdị usoro bacteria ndị ọzọ nke na-eji naanị otu agba, lee akwụkwọ eserese ịcha agba maka mikroskopu.

Ihe uhie n'elu anụnụ enweghị ike igosi

Mkpanaka uhie pụtara na ihe ndị ahụ dị ndụ jigidere carbol fuchsin mgbe e jiri acid-alcohol sachaa ha. Ihe a kwekọrọ na Mycobacterium tuberculosis, ma ntuziaka CDC maka ịchọpụta ụkwara nta na-ekwu n'ụzọ doro anya na mycobacteria ndị ọzọ bụkwa acid-fast. Ya mere, iji mata ụdị nje kpọmkwem chọrọ ịzụ nje n'ụlọ nyocha na ule nucleic acid, ọ bụghị agba.

Mmejọ n'otú e si arụ ọrụ na-akpọkọta n'akụkụ ịsacha abụọ ahụ. Mgbe a na-ewepụghị agba nke ọma, ihe ndị dị na ndabere na-anọgide uhie, nke nwere ike ime ka a gụọ nsonaazụ dị ka nke dị mma n'ụzọ na-ezighị ezi. Iwepụ agba gabiga ókè na-ewepụ agba mbụ nke mkpụrụ ndụ na-ejigideghị ike, na-enye aka ime ka nsonaazụ bụrụ nke na-adịghị mma n'ụzọ na-ezighị ezi. Agba nkwado e tinyere nke ukwuu na-ekpuchi basili ndị dị ole na ole n'ime anụnụ. Ihe nlele e tere nke buru ibu, ihe eji eme ule ndị ghọrọ sedimenti, na mmiri ịsacha nke metọrọ emetọ na-agbakwụnye ihe ndị ọzọ nwere ike iduhie anya.

Ikike ule ịchọpụta nje nwere ókè dabere n'ọnụ ọgụgụ nje dị, n'agbanyeghị otú e si arụ ọrụ nke ọma. Nnyocha ihe nlele e tere n'efere iko site na mikroskopu nkịtị chọrọ ihe dị ka basili 5,000 ruo 10,000 n'otu mililita mmiri ụkwara. Ntụle ihe akaebe CDC ndị ochie kwuru na ikike ule a ịchọpụta nje dị ihe dị ka pasent 45 ruo 80 n'etiti ndị a kwadoro ụkwara nta ngụgụ ha site n'ịzụ nje n'ụlọ nyocha. Ya mere, nsonaazụ na-adịghị mma n'ihe nlele e tere n'efere iko anaghị egosi mgbe ọ bụla na ụkwara nta adịghị. Ntuziaka CDC dị ugbu a na-achọ ka e mee ịzụ nje n'ụlọ nyocha tinyere ihe nlele ọ bụla e tere n'efere iko. Ọ na-atụkwa aro ka e mee ule ịmụba nucleic acid n'ọ dịkarịa ala otu ihe nlele sitere n'usoro iku ume mgbe a na-enyo enyo ụkwara nta ngụgụ, ma ọ bụrụ na nsonaazụ ahụ ga-agbanwe otu a ga-esi lekọta onye ọrịa.

Ọrụ n'ezie ga-agbaso usoro ndị e nyere ikike

Nkọwa e ji akụzi ihe, gụnyere edemede a, anaghị enye ikike ịrụ ọrụ nlekọta ọrịa. Maka ọrụ n'ụlọ nyocha, gbasoo usoro ọrụ ọkọlọtọ ụlọ nyocha ahụ nwalere ma kwado, nke kwekọrọ na akwụkwọ CDC, APHL, ma ọ bụ CLSI dị ugbu a; akwụkwọ ntụaka CDC maka ịcha agba acid-fast nke dị n'ebe nchekwa Stacks ya na-egosi otú usoro ndị dị otú ahụ si akọwa ihe eji eme ule na otú e si agụ nsonaazụ. Ọrụ na ihe nlele ụkwara nta chọrọ ka e gbochie mgbasa: a na-akwadebe ihe nlele e tere n'efere iko n'ime kabinet nchekwa ihe ndị dị ndụ n'ihi na nkwadebe ahụ na-emepụta ụmụ irighiri ihe na-efe n'ikuku na mmiri na-awụsa. Ntuziaka nchekwa ụlọ nyocha CDC na-ekwukwa na ọbụna ihe nlele e ji ọkụ mee ka ọ rapara n'efere iko nwere ike ịnwe basili ụkwara nta ndị ka dị ndụ, a ka ga-ejikwa ya dị ka ihe metọrọ emetọ. Ihe ndekọ Ọbá Akwụkwọ Ihe Oyiyi Ahụike Ọha CDC maka ihe nlele e tere n'efere iko, nke e ji carbol-fuchsin na methylene blue chaa agba wee nyochaa maka M. leprae bụ ihe ncheta bara uru na usoro ahụ anaghị ejedebe naanị n'ụkwara nta: otu ọdịiche uhie n'elu anụnụ ahụ na-arụ ọrụ ebe ọ bụla a na-achọ ihe ndị dị ndụ acid-fast, ịgụ nsonaazụ nke na-adịghị mma n'akpachapụ anya bụkwa nsonaazụ kwesịrị idekọ.

Ịgụ efere iko nlele emechara

Agba nkwado na-egosi uru ya n'oge nyocha mbụ. Onye na-eji mikroskopu na-enyocha na mmụba dị ala na-ebu ụzọ jiri ndabere anụnụ tụọ ogo ihe nlele e tere: mkpụrụ ndụ gbasasịrị nke ọma, mkpụrụ ndụ onye nnabata ka zuru oke iji mee ka onyonyo doo anya, na enweghị sedimenti dị ukwuu. Ihe ndị uhie a na-enyo enyo na-adọta anya kpọmkwem n'ihi na ọ dịghị ihe ọzọ n'elu efere iko ahụ na-acha uhie. A na-eme nkwenye site n'iji mmanụ n'etiti lens na efere iko nlele, ebe ezigbo basili na-egosi ụdị mkpanaka dị gịrịgịrị a tụrụ anya ya, nke mgbe ụfọdụ na-adị ntakịrị gbagọrọ agbagọ ma ọ bụ yie eriri mkpụrụ, kama iberibe agba ndị yiri ibe ha.

Ịcha ndabere agba na-ekpebikwa okwu ndị a ga-eji dee akụkọ nsonaazụ. A na-akọ efere iko nlele nwere basili uhie dị ka nke a hụrụ basili acid-fast na ya, ọtụtụ mgbe a na-enye ya ọkwa na-egosi ihe dị ka ọnụọgụ ha dịka usoro ọkwa ụlọ nyocha ahụ si dị. A na-akọ efere iko nlele nke na-enweghị ihe dị ndụ uhie dị ka nke a na-ahụghị basili acid-fast na ya, ọ bụghị mgbe ọ bụla dị ka nke na-enweghị ụkwara nta. Ọdịiche a dị mkpa n'ihi na ndabere anụnụ na-egosi na ịcha agba rụrụ ọrụ, na mkpụrụ ndụ natara agba nkwado, na usoro ịhụ ihe nke mikroskopu zuru ezu, ma ọ naghị ekwu ihe ọ bụla banyere nje ndị ọnụọgụ ha dị n'okpuru ókè nchọpụta. Ndabere anụnụ na-enweghị nje a hụrụ bụ nsonaazụ ziri ezi gbasara efere iko nlele ahụ, ọ bụghị ikpe gbasara onye ọrịa.

Cheta otú e si kewaa ọrụ ahụ, ọ ga-adịkwa mfe ide akụkọ nsonaazụ. Carbol fuchsin na-eme ka a hụ ihe ndị a ga-enyocha. Acid-alcohol na-eme ule ahụ. Methylene blue na-eme naanị ka azịza ahụ doo anya: uhie jigidere agba megide asịd, anụnụ tụfuru ya. Ihe ndị ọzọ niile, ụdị nje, ọnụọgụ ha, na ihe ha pụtara maka nlekọta ọrịa, na-esite n'ọrụ a na-eme karịrị nyocha efere iko nlele ahụ.