EMB agar kont MacConkey agar: chwazi ak entèprete medya yo

Yon etidyan trase menm echantiyon dlo a sou de plak. Sou youn, koloni fonse ki gen yon briyans metalik vèt parèt. Sou lòt la, koloni woz klere ki gen yon halo twoub parèt. Toude plak yo te inokile soti nan menm tib la, enkibe kòtakòt, epi li nan menm lè a. Etidyan an mande ki plak ki kòrèk.

Toude plak yo kòrèk. Yo reponn kesyon diferan. Konfizyon an soti nan trete de medya yo tankou ekran ki ka ranplase youn lòt pou bakteri entesten. Yo pataje menm objektif la, ki se chwazi òganis enterik Gram negatif epi separe fèmantè laktoz ak sa ki pa fèmante yo, men yo reyalize objektif sa a ak chimi diferan ak lojik vizyèl diferan. Lè ou konprann de konsèp ki anba yo, seleksyon plak ak lekti koloni vin tounen yon pwosesis woutin.

Repons kout la

EMB agar sèvi ak de koloran, eosin Y ak methylene blue, ki fè de travay an menm tan: yo anpeche kwasans Gram pozitif epi yo presipite alantou gwo pwodiktè asid pou kreye koloni fonse, klasikman avèk yon briyans metalik vèt pou Escherichia coli. MacConkey agar separe travay yo: sèl bil ansanm ak crystal violet anpeche Gram pozitif, laktoz alimante fèmantasyon an, epi neutral red montre asid la kòm koloni woz oswa wouj. Si travay la se yon demonstrasyon prezonptif vizyèlman frapan pou E. coli, EMB gen plas li. Si travay la se fè yon separasyon klè ant fèmantè laktoz woz ak sa ki pa fèmante epi ki san koulè, sitou nan pwosedi pou poupou oswa pipi, MacConkey anjeneral pi fasil pou li. Okenn plak pa idantifye yon òganis sèlman dapre koulè.

EMB: koloran ki chwazi epi rapòte an menm tan

Konsèp EMB a mete seleksyon ak endikasyon nan menm molekil yo. Pwotokòl ASM pou eosin methylene blue agar dekri EMB kòm yon medya ki alafwa selektif ak diferansyèl, kote pè koloran an anpeche anpil òganis Gram pozitif pandan fèmantasyon laktoz la lakòz koloran yo antre epi presipite. Yon fòmilasyon Levine estanda gen peptone, lactose, phosphate, eosin Y, methylene blue, ak agar, jan sa endike nan metòd FDA BAM pou Levine EMB agar. Remake ke ansyen resèt EMB yo pafwa te ajoute sucrose ansanm ak lactose, tandiske Levine EMB gen lactose san sucrose, kidonk anrejistre ki fòmilasyon laboratwa ou a genyen an rezèv.

Li EMB vle di li konpòtman koloran yo. Fèmantasyon laktoz ki fò pwodui ase asid pou lakòz gwo presipitasyon koloran, sa ki bay E. coli sant ble nwa fonse li yo epi, nan ka klasik la, yon briyans metalik vèt nan limyè ki reflete. Fèmantè ki pi fèb tankou Enterobacter ak Klebsiella anjeneral grandi kòm koloni mikoyid woz rive vyolèt san briyans sa a. Òganis ki pa fèmante tankou Salmonella, Shigella, ak Proteus anjeneral grandi kòm koloni san koulè oswa translisid paske yo pa pwodui vag asid ki fè koloran yo presipite. Gram pozitif yo anjeneral anpeche, byenke nivo represyon an varye selon souch la ak pwodwi a. Chimi konplè preparasyon koloran, ladan l rezon ki fè methylene blue konpòte li kòm yon koloran katyonik depi nan kòmansman, fè pati yon diskisyon apa sou fòmilasyon koloran, epi kontèks jeneral mikwoskopi a disponib nan yon atlas metòd koloran. Atik sa a rete konsantre sou seleksyon ak lekti plak yo.

Figi ki anlè a se yon ilistrasyon. Li montre lojik vizyèl ou dwe atann lan: koloni fonse ki gen briyans ansanm ak kalite mikoyid woz ak kalite pal sou EMB, konpare ak kalite woz kont kalite pal sou MacConkey. Sèvi avè l pou aprann modèl la, apre sa konfime chak entèpretasyon avèk kontwòl ki pran an foto ak fich pwodwi a pou medya egzak ki sou ban travay ou a.

MacConkey: travay separe, règ vizyèl ki pi senp

Konsèp MacConkey a bay chak travay yon engredyan apa. Pwotokòl ASM pou MacConkey agar prezante menm kad selektif ak diferansyèl la, epi metòd FDA BAM pou MacConkey agar bay pati aktif yo: peptones, lactose, bile salts, salt, neutral red, crystal violet, ak agar. Sèl bil ansanm ak crystal violet seleksyone kont Gram pozitif. Lactose bay substrat pou fèmantasyon an. Neutral red aji kòm rapòtè pH la, li vin woz rive wouj kote asid fòme, pafwa avèk bil ki presipite alantou gwo fèmantè yo.

Règ lekti a fèt pou l senp: woz vle di fèmantè laktoz, san koulè oswa pal vle di li pa fèmante. E. coli parèt woz rive wouj, souvan avèk yon halo bil ki presipite. Klebsiella ak Enterobacter parèt woz epi souvan mikoyid akoz kapsil yo. Salmonella, Shigella, Proteus, ak anpil lòt baton Gram negatif parèt san koulè. Gen yon lòt avantaj ki itil nan laboratwa ansèyman: sèl bil yo anjeneral diminye mouvman an gwoup Proteus la, kidonk li pi fasil pou jwenn koloni izole sou MacConkey pase sou medya ki pa selektif, byenke represyon an pa absoli epi gen altènativ san sèl lè kontwòl mouvman an gwoup se priyorite a.

Rezon molekilè ki fè koloran yo konpòte yo konsa soti nan chaj ak estrikti. Methylene blue se yon koloran phenothiazine katyonik kote estrikti ak pwopriyete li yo eksplike afinite li pou sifas bakteri ki asid, menm afinite ki an aksyon lè li presipite nan zòn asid sou EMB.

Konparezon rapid

Li tablo a kòm yon pwosedi pou pran desizyon. Lè egzèsis la bezwen etidyan yo wè yon gradyan nan fòs fèmantasyon an avèk yon pwen final ki frapan, EMB montre sa. Lè egzèsis la bezwen yon separasyon binè rapid anvan konfimasyon byochimik, MacConkey montre sa.

Ki medya pou ki echantiyon

Pou egzèsis dlo ki vize rekonesans prezonptif kolifòm fekal oswa E. coli, EMB atiran paske briyans lan vizyèlman diferan. MacConkey kapab sèvi tou pou Gram negatif enterik epi li gen itilizasyon istorik nan analiz dlo, men okenn nan plak yo pa ranplase yon metòd regilasyon pou dlo, ki ka presize medya tankou modified mTEC oswa MI selon tès la. Verifye metòd laboratwa ou a oblije suiv la.

Pou separasyon nan estil analiz poupou ant fèmantè ak sa ki pa fèmante, MacConkey anjeneral pi itil nan de yo. Travay pratik sou poupou pou Salmonella oswa Shigella nòmalman ajoute medya enterik ki pi selektif tankou XLD oswa Hektoen enteric olye pou konte sou MacConkey sèlman.

Pou ansèyman nan estil analiz pipi ki imite pwosedi klinik, asosye MacConkey ak blood agar. MacConkey bay premye separasyon Gram negatif la pandan blood agar rekipere òganis MacConkey anpeche yo. Asosyasyon sa a estanda nan deskripsyon klinik preparasyon kilti pipi.

Pou ansèyman konsèp pi dirèk, sèvi ak toude. EMB montre ke fòs fèmantasyon an enpòtan epi yon sèl molekil ka sèvi de wòl. MacConkey montre konsepsyon modilè: selektè, substrat, ak rapòtè yo kenbe apa. Etidyan ki trase yon E. coli li konnen, yon Klebsiella aerogenes li konnen, ak yon Salmonella li konnen kòtakòt sou toude medya yo raman konfonn de lojik yo ankò.

Pyèj lekti ki repete chak tèm

Erè ki pi komen an se idantifikasyon sèlman dapre koulè. Woz sou MacConkey ka E. coli, Klebsiella, Enterobacter, oswa yon lòt fèmantè. San koulè ka Salmonella, Shigella, Proteus, Pseudomonas, oswa yon lòt òganis ki pa fèmante. Koulè se yon fenotip depistaj ki gide travay konfimasyon tankou Gram stain, oxidase, panèl byochimik, oswa idantifikasyon ak enstriman; li pa yon non espès.

Dezyèm erè a se bay absans briyans lan twòp enpòtans. Kèk koloni E. coli reyèl, sitou sa ki izole yo, pwodui ti briyans metalik oswa pa pwodui ditou sou EMB. Absans briyans pa eskli E. coli, epi prezans briyans pa pwouve li. Trete briyans lan kòm yon siy prezonptif.

Twazyèm erè a se konpare plak ki pa gen menm laj. Fèmantè laktoz ki anreta yo ka vin woz sou MacConkey apre enkibasyon pwolonje, sa ki fè separasyon klè ant fèmantè ak sa ki pa fèmante a mwens presi. Li plak yo nan lè laboratwa a presize a epi anrejistre tan enkibasyon an ansanm ak rezilta a.

Katriyèm erè a se li kwasans melanje tankou yon sèl òganis. Yon koloni woz bò kote yon koloni san koulè reprezante de fenotip, pa yon eta entèmedyè. Chwazi koloni ki byen izole epi travay chak morfotip apa. Teksti mikoyid ajoute yon pyèj menm jan an: Klebsiella ak Enterobacter toude ka sanble mikoyid, kidonk kapsil pou kont li pa janm etabli non an. Òganis yo te konn anseye kòm Enterobacter aerogenes la kounye a klase kòm Klebsiella aerogenes, sa ki eksplike poukisa ansyen tablo ak nouvo etikèt yo sanble pa dakò.

Kontwòl ak yon règ final

Sèvi ak kontwòl ki pran an foto oswa ki fre nan chak sesyon: E. coli pou reyaksyon fò fèmantè a, Klebsiella aerogenes pou fèmantasyon mikoyid san briyans klasik la, yon souch Salmonella pou reyaksyon san koulè òganis ki pa fèmante a, ak Staphylococcus aureus pou konfime represyon Gram pozitif sou pwodwi egzak ou a. Matche nimewo souch ak kritè akseptasyon yo ak fich manifakti a, paske selektivite chanje selon kantite bile, crystal violet, ak dye.

Sonje yon sèl fraz sou ban travay la. EMB sèvi ak koloran ki alafwa chwazi epi pale, sa ki bay yon siyal E. coli frapan men mande yon lekti ki pi sibtil. MacConkey separe seleksyon ak rapò, sa ki bay yon separasyon senp woz kont pal men mwens detay sou fèmantasyon. Chwazi medya ki gen konsèp ki koresponn ak kesyon an, konfime koulè avèk tès ki apwopriye, epi de plak yo sispann fè konpetisyon epi yo kòmanse travay ansanm.