Ble metilèn ak Bartonella: rezilta laboratwa ak limit prèv klinik yo

Yon plat kilti ak yon pasyan gen yon mo an komen, enfeksyon, men mo a pa reprezante menm konsèp la nan toude ka yo. Nan plat la, enfeksyon se yon kantite koloni sou aga. Nan pasyan an, se bakteri ki anndan selil ak veso sangen, medikaman k ap sikile nan san ak tisi, ak yon sistèm iminitè k ap fè yon pati nan travay la. Si nou konfonn de bagay sa yo, yon chif enpresyonan nan laboratwa kòmanse sanble ak yon tretman. Si nou kenbe yo separe, menm chif la vin sa li ye a: yon rezon pou fè pwochen eksperyans lan.

Se egzakteman separasyon sa a revizyon sou ble metilèn ak Bartonella sa a vize fè. De etid laboratwa ki soti nan yon sèl gwoup rechèch te teste ble metilèn kont Bartonella henselae nan eta kote li pa t ap grandi. Toude te rapòte yon aktivite fò nan resipyan an vè ak an plastik. Okenn pa t teste yon moun.

Poukisa chèchè yo teste faz estasyonè a

Pifò tès antibyotik sèvi ak selil k ap grandi. Modèl sa a pa kouvri yon ka ki pi difisil: selil ki sispann divize epi ki tolere medikaman ki touye lòt selil menm kalite a k ap grandi.

Bartonella ka pèsiste nan kò a, tankou anndan globil wouj ak selil andotelyal yo. Se poutèt sa gwoup la te chèche konnen ki medikaman ki apwouve ki ka touye B. henselae apre li antre nan faz estasyonè. Yon MIC ki ba kont selil k ap grandi pa t pèmèt predi kapasite pou touye selil nan faz estasyonè. Rifampin te gen yon MIC ki ba anpil, men li te touye selil estasyonè yo mal, alòske konpoze ki te gen valè MIC pi wo te touye yo byen. Lektè ki vle yon metòd jeneral pou analize kalite atik sa a ap jwenn li nan gid pou li rechèch sou ble metilèn.

Premye depistaj la: Li ak kolèg li yo, 2019

Depistaj faz estasyonè 2019 la nan Antibiotics te sèvi ak yon sèl souch, B. henselae JK53, ki te grandi nan milye Schneider ak 10 pousan sewòm fetis bovin nan 37 C ak 5 pousan CO2. Kilti yon jou yo te sitou gen selil dispèse ki t ap divize. Kilti senk jou yo, ki te gen anviwon 10 pisans 8 inite ki fòme koloni pa mL, te konsidere kòm kilti nan faz estasyonè epi yo te gen gwoup selil kole ansanm ki te vizib.

Tès la te sèvi ak SYBR Green I ansanm ak yodid propidyòm, epi yo te kalibre li avèk melanj selil vivan ak selil izopwopanòl te touye. Paske ble metilèn gen yon koulè fò, yo te konfime rezilta pozitif yo avèk mikwoskopi, epi apre sa avèk konte koloni sou aga ki gen san, ki se yon mezi final ki pi sevè.

Pami 1,581 medikaman apwouve yo te teste nan 50 micromolar, ble metilèn te kite 16 pousan selil vivan dapre lektè plak la ak 25 pousan dapre mikwoskopi. Daptomycin te bay 21 pousan, plizyè azòl te bay 22 a 27 pousan, gentamicin 32 pousan, erythromycin 66 pousan, ciprofloxacin 74 pousan. Pyrvinium pamoate te sanble pi fò sou lektè a, men yo pa t kapab evalye li avèk mikwoskopi akoz pwòp fliyoresans li.

Kont B. henselae k ap grandi, MIC ble metilèn lan te 0.08 a 0.16 micrograms per mL. Kont selil estasyonè ki te gen senk jou, nan 5 micrograms per mL, kantite koloni yo te desann jiskaske pa t gen okenn koloni detektab apre yon jou ekspozisyon, menm jan ak daptomycin ak pyrvinium pamoate nan konsantrasyon yo te teste yo. Yon lòt tès sou kapasite pou touye selil sou tan te sèvi ak 10 micrograms per mL. Sa yo se nivo ekspozisyon nan laboratwa, pa dòz, epi atik la prezante yo konsa. Yon valè maksimòm nan plasma imen ki toupre 3.9 micrograms per mL, yo site nan atik la, parèt sèlman kòm enfòmasyon kontèks. Apèsi sou famakokinetik ble metilèn lan esplike poukisa yon chif pou plasma pa ka entèprete kòm yon chif pou tisi.

Atik la bay de limit klèman. Pa t gen okenn modèl biyofilm ni okenn tès konbinezon ak ble metilèn. Gwoup selil senk jou yo se te selil ki te rasanble nan kilti likid nan faz estasyonè, se pa t yon eksperyans biyofilm valide. Otè yo te mande pou gen rechèch sou bèt, sou konbinezon, sou biyofilm, ak tès sou lòt espès Bartonella.

Konbinezon ak selil ki soti nan biyofilm: Zheng ak kolèg li yo, 2020

Etid swivi 2020 la nan BMC Microbiology te kenbe menm souch la ak menm milye a, men li te pase nan kilti estasyonè sis jou epi li te ajoute de bagay premye atik la pa t genyen: konbinezon de medikaman ak yon modèl selil ki soti nan biyofilm.

Pou medikaman yo teste poukont yo nan yon konsantrasyon inifòm 5 micrograms per mL pandan 24 èdtan, ble metilèn te kite 3.2 fwa 10 pisans 4 inite ki fòme koloni pa mL, konpare ak yon kontwòl ki te toupre 2.8 fwa 10 pisans 10. Ciprofloxacin, gentamicin ak nitrofurantoin te kite mwens koloni nan menm moman an. Sa diferan ak rezilta 2019 la, kote menm nivo nominal la pa t kite okenn koloni detektab apre yon jou. Laj kilti yo, dansite yo ak fason yo te manipile yo te diferan; donk efè sou destriksyon selil yo te repwodui nan menm sans lan, men li pa t gen menm anplitid la. Varyasyon sa a ant yon tès ak yon lòt se youn nan rezon ki fè verifikasyon nòmal sou sekirite ak entèraksyon yo trete puisans nan laboratwa kòm yon bagay apa de efè klinik.

Depistaj konbinezon yo se pati moun site pi souvan an. Yo te fikse chak eleman nan 5 micrograms per mL. Ni azithromycin ansanm ak ble metilèn ni rifampin ansanm ak ble metilèn pa t bay okenn koloni detektab nan faz estasyonè nan 24 èdtan, menm jan ak toude pè ki te gen ciprofloxacin yo; se sèlman kat konbinezon sa yo pami 25 pè yo te teste ki te bay rezilta sa a. Yo pa t fè okenn analiz fòmèl sou sinèji, kidonk tèm ki kòrèk la se konbinezon aktif nan kondisyon sa yo, pa sinèji pwouve.

Eksperyans biyofilm lan te teste selil yo te rekipere nan yon jèn biyofilm yo te kraze, pa kapasite pou penetre yon biyofilm matirite ki entak. Yo te fè kilti yo grandi pandan senk jou, yo te dilye yo nan plak ki gen ti pwi pou senk lòt jou, yo te konfime biyofilm yo avèk koloran vyolèt kristal, epi yo te grate yo anvan ekspozisyon ak medikaman. Nan 5 micrograms per mL, ble metilèn poukont li te fè kantite a desann nan 2.3 fwa 10 pisans 2 nan jou 6 la, sa ki te mete li pami pi bon ajan yo teste poukont yo, men kantite a pa t zewo. Toude konbinezon ble metilèn yo te rive nan zewo nan jou 6 la, menm jan ak toude konbinezon ciprofloxacin yo.

Otè yo te souliye menm limit yon lektè ki pridan ta remake yo: yon jèn biyofilm yo te grate olye yon ansyen biyofilm entak, yon sèl konsantrasyon pratik pou tout medikaman yo olye chak medikaman nan pwòp nivo maksimòm reyalis li, sèlman kèk pè chwazi ki te santre sou azithromycin oswa rifampin, yon sèl souch, pa gen bèt, pa gen pasyan. Yo te pwopoze rechèch pita sou twa medikaman ansanm, men yo pa t rapòte rezilta pou sa.

Konparezon konsepsyon etid yo

Tablo a bay lide prensipal atik sa a nan yon fòm kout. Tout sa ki agoch dènye kolòn nan se travay sou kilti. Pa gen anyen nan youn oubyen lòt atik la ki antre nan dènye kolòn nan.

Bartonella pa Borrelia

Toude atik yo mansyone Borrelia burgdorferi, spirokèt ki lakòz maladi Lyme lan, paske tès ak koloran an soti nan rechèch anvan sou Borrelia nan faz estasyonè nan menm laboratwa a, kote ble metilèn ak daptomycin te bay rezilta pozitif tou. Istwa sa a se yon kontèks itil epi yon sous erè ki komen.

Pa gen okenn eksperyans nan youn oubyen lòt atik sou Bartonella yo ki teste Borrelia ansanm ak Bartonella pou konpare yo dirèkteman. Òganis yo diferan, milye yo diferan, konsantrasyon yo diferan, epi yo te prezante ipotèz sou efè ble metilèn sou manbràn Bartonella kòm yon sipozisyon ki bezwen plis etid. Yo pa dwe transfere rezilta yo soti nan yon espès ale nan yon lòt, epi okenn nan atik yo pa soutni reklamasyon jeneral sou parazit. Se pou rezon sa a konparezon selil pèsistan Borrelia ak Bartonella yo kenbe de seri piblikasyon yo separe.

Poukisa kilti yo pa tounen yon pwotokòl

Li konprann poukisa moun enterese chèche yon pwotokòl ble metilèn pou Bartonella. Atik sa yo montre poukisa yo ta dwe trete fraz sa a kòm yon siy avètisman olye yon lis acha.

Premyèman, 5 micrograms per mL nan yon ti pwi pa yon preskripsyon. Li pa vini ak enfòmasyon sou absòpsyon, distribisyon, lyezon ak pwoteyin, pénétration anndan selil, oswa tolerabilite. Otè yo te chwazi li kòm yon mwayèn apwoksimatif nivo maksimòm antibyotik yo epi yo te di rechèch alavni ta dwe sèvi ak chak medikaman nan pwòp nivo reyalis li.

Dezyèmman, zewo koloni vle di pa gen koloni nan kondisyon sa yo pou kilti sou plak, se pa tisi esteril. Selil pèsistan, bakteri anndan selil, ak limit echantiyonaj yo tout depase sa plak aga a ka montre.

Twazyèmman, konbinezon ki esterilize yon ti pwi ka pa mache oswa ka fè mal nan yon kò. Azithromycin ansanm ak ble metilèn ak rifampin ansanm ak ble metilèn se pè laboratwa nan nivo ekspozisyon laboratwa. San done famakokinetik sou bèt ak done etid kontwole sou moun, pa gen dòz, pa gen dire, epi pa gen rapò benefis ak risk. Nenpòt moun k ap peze opsyon yo ta dwe diskite yo ak yon pwofesyonèl swen klinik epi revize ki lè itilizasyon ble metilèn mande sipèvizyon medikal anvan li tire nenpòt konklizyon nan done plat kilti.

Konklizyon limite atik sa yo soutni an se sa: ble metilèn gen yon aktivite ki repwodiktib kont B. henselae JK53 ki pa ap grandi in vitro, tankou nan konbinezon de medikaman nan laboratwa, epi rezilta ki pi fò pou konbinezon ak selil ki soti nan biyofilm yo soti nan etid 2020 la. Tout lòt bagay, tankou konnen si aktivite sa a gen enpòtans pou batoneloz lakay moun, poko teste.