Ruaimniú simplí le gorm meitiléine i gcomparáid le ruaimniú Gram: cad is féidir le gach modh a chruthú

Ullmhaíonn mac léinn smearadh ó shaothrán ar a bhfuil an lipéad E. coli, clúdaíonn sé le gorm meitiléine é ar feadh nóiméid amháin, sruthlaíonn sé é, agus féachann sé tríd an lionsa tumtha in ola. Clúdaíonn slata gorma an réimse radhairc. Deir an tuairisc saotharlainne: "Slata Gram-diúltacha sainaitheanta mar E. coli." Tá an bhreathnóireacht ceart. Ní thugann an sleamhnán sin bonn don chonclúid.

Is earráid choincheapúil í, ní earráid theicniúil. Chaith an mac léinn le ruaimniú simplí amhail is dá mba thástáil dhifreálach é. Freagraíonn ruaimniú simplí agus ruaimniú Gram ceisteanna éagsúla toisc go bhfuil siad bunaithe ar choincheapa éagsúla ruaimnithe. Fiafraíonn ceann amháin: cén cruth atá i láthair. Fiafraíonn an ceann eile: conas a iompraíonn an cillbhalla nuair a chuirtear faoi thástáil é. Má mheasctar an dá cheann, eascraíonn tuairisc gan bhunús as sleamhnán atá ruaimnithe i gceart.

Coinníonn an chomparáid seo an dá mhodh ar leith, léiríonn sí cad a thugann gach toradh cead duit a mhaíomh, agus freagraíonn sí an dá cheist is minice a chuireann mic léinn: an féidir gorm meitiléine a úsáid i ruaimniú Gram, agus cad a léiríonn ruaimniú E. coli le gorm meitiléine i ndáiríre.

An freagra gairid

Cuireann ruaimniú simplí le gorm meitiléine an dath gorm céanna ar gach cill is féidir a ruaimniú, mar sin léiríonn sé moirfeolaíocht (slata, sféir, bíseanna) agus leagan amach (cealla aonair, péirí, slabhraí), ach ní léiríonn sé aon rud faoin gcatagóir Gram. Cuireann ruaimniú Gram iaidín, céim dídhathaithe, agus frithruaim leis, mar sin scarann sé baictéir ina mbaictéir Gram-deimhneacha (corcra) agus Gram-diúltacha (bándearg nó dearg) de réir mar a choinníonn a gcumhdaigh an ruaim. Ciallaíonn slata gorma tar éis gorm meitiléine "tá cealla slatchruthacha i láthair." Ciallaíonn slata bándearga tar éis seicheamh iomlán Gram "tá slata Gram-diúltacha i láthair." Tá an dara ráiteas níos láidre toisc go ndearna an nós imeachta tástáil bhreise.

Chun eolas a fháil ar an ngrúpa níos leithne de mhodhanna aon-ruaime do bhaictéir lena mbaineann an t-alt seo, féach an t-atlas ruaimnithe don mhicreascópacht.

Ruaimniú simplí: ruaim amháin, ceist amháin

Is ruaim bhunata (caitiúnach) é gorm meitiléine. Tá lucht deimhneach ar a ian daite agus ceanglaíonn sé le struchtúir a bhfuil lucht diúltach orthu sa chill, lena n-áirítear aigéid núicléasacha agus grúpaí aigéadacha ar an dromchla, mar sin feictear na cealla gorm ar chúlra éadrom. Déanann OpenStax cur síos ar an bprionsabal seo de ruaimniú deimhneach ina chaibidil ar ruaimniú. Is é caitiún na ruaime féin an t-ian beag cothrom feinitiaisín a ndéantar cur síos mionsonraithe air i dtagairt cheimice gorm meitiléine; ní dhéanann an frithian clóiríde an dathú.

Tá prótacal caighdeánach teagaisc simplí d'aon ghnó: déan smearadh tanaí, lig dó triomú san aer, fosaithe é le teas, clúdaigh le tuaslagán uiscí de thart ar 1% gorm meitiléine é ar feadh tuairim is nóiméad amháin, sruthlaigh go réidh le huisce é, triomaigh trí thapáil é, agus scrúdaigh le tumadh in ola é. Tugann prótacal teagaisc LibreTexts an leagan 1% ar feadh nóiméid amháin seo go díreach, agus luaitear ann go síneann roinnt saotharlann an t-am. Gan fosaitheoir ruaime, gan dídhathaitheoir, gan dara ruaim. Sin é an pointe: níl na céimeanna sin ann. Le ruaim amháin agus gan aon bhaint roghnach, bíonn an dath céanna ar gach cill a cheanglaíonn an ruaim.

I gcás E. coli, is é an réimse a mbeifí ag súil leis ná slata gorma (bacail), ina gcealla aonair nó ina bpéirí nó ina ngrúpaí beaga. Tagann an gorm ón ruaim. Tagann cruth na slaite ón orgánach. Ach ní shainaithníonn an teaglaim sin an t-orgánach, toisc gur slata iad go leor speiceas agus go ruaimnítear go leor slata gorm i ruaimniú simplí. Déanann ATCC soiléir ina threoir do shaothrú miocróibhitheolaíoch nach léirítear ach moirfeolaíocht. Deir tuairisc cheart: "bacail ghorma feicthe." Teastaíonn níos mó fianaise le haghaidh aon rud thar chruth agus leagan amach.

Ruaimniú Gram: ceithre imoibrí, tástáil iompair amháin

Is ruaimniú difreálach é ruaimniú Gram. Cuirtear gach cill tríd an seicheamh céanna agus breathnaítear cé na cealla a choinníonn an chéad ruaim agus cé na cealla a chailleann í. Sainmhíníonn prótacail ruaimnithe Gram an American Society for Microbiology an t-ord caighdeánach ceithre chéim: corcairghorm criostail (príomhruaim), iaidín Gram (fosaitheoir ruaime), alcól nó alcól aicéatóin (dídhathaitheoir), agus ansin safrainín (frithruaim).

Míníonn an tsamhail chaighdeánach teagaisc an deighilt trí struchtúr an chumhdaigh. Tá balla tiubh peiptideaglacán ag cealla Gram-deimhneacha a dhíhiodráitíonn agus a choinníonn an coimpléasc corcairghorm criostail agus iaidín le linn an níocháin alcóil. Tá sraith thanaí peiptideaglacán ag cealla Gram-diúltacha, chomh maith le scannán seachtrach atá saibhir i lipidí agus a gcuireann an dídhathaitheoir isteach air, mar sin nitear an coimpléasc amach agus ansin ionsúnn na cealla safrainín. Tugann athbhreithniú NCBI Bookshelf ar ruaimniú Gram an míniú seo bunaithe ar an gcillbhalla. Deir speisialtóirí go bhfuil an fhisic-cheimic iomlán níos casta ná tiús an bhalla amháin, ach don léirmhíniú ag binse na saotharlainne tá an riail iompair bailí: ciallaíonn corcra gur coinníodh an ruaim, agus ciallaíonn bándearg gur cailleadh í agus gur cuireadh frithruaim i bhfeidhm ansin.

Painéil léiritheacha. Líníochtaí stílithe chun modhanna a chur i gcomparáid, ní micreagraif cheamara. Tá na dathanna simplithe chun an loighic a mhúineadh: dath amháin i ruaimniú simplí, dhá dhath tar éis dídhathú Gram.

An féidir gorm meitiléine a úsáid i ruaimniú Gram

Tá dhá léamh ar an gceist seo, agus teastaíonn freagraí éagsúla orthu.

An chéad léamh: an féidir le clúdach aonair de ghorm meitiléine teacht in áit an tseichimh iomláin Gram. Ní féidir. Gan iaidín, dídhathaitheoir, agus frithruaim níl aon chéim dhifreálach ann, mar sin ní dhéantar tástáil ar aon chatagóir Gram. Is toradh ruaimnithe shimplí é réimse gorm tar éis gorm meitiléine amháin, fiú má tá an buidéal suite in aice leis na himoibrithe Gram. Ná taifead é mar thoradh Gram.

An dara léamh: an féidir gorm meitiléine a chur in áit safrainín mar fhrithruaim ag céim 4. Ó thaobh feidhme de, is féidir leis na cealla dídhathaithe a dhathú, agus tuartar i gcleachtadh téacsleabhair go mbeadh cealla Gram-deimhneacha corcra agus cealla Gram-diúltacha gorma tar éis malartú den sórt sin. Tá an loighic fónta toisc go bhfuil cealla Gram-diúltacha a dídhathaíodh i gceart beagnach gan dath agus go n-ionsóidh siad ruaim chaitiúnach eile. Ach ní hé sin an prótacal caighdeánach. Sonraíonn prótacail ASM safrainín, agus roghanna malartacha aitheanta amhail fúicsin bhunata i roinnt leaganacha, seachas gorm meitiléine. Tá míbhuntáiste praiticiúil ann freisin: is deacra gorm a idirdhealú ó chorcra ná bándearg a idirdhealú ó chorcra, go háirithe do thosaitheoirí agus go háirithe faoi lampaí micreascóip atá ag dul i laige. Le haghaidh obair chúrsa agus aon toradh atá tábhachtach, bain úsáid as an bhfrithruaim atá ainmnithe i do phrótacal, safrainín de ghnáth, agus caith le frithruaim gorm meitiléine mar leagan taispeána seachas mar chaighdeán coibhéiseach.

Pléitear an cheist ghaolmhar faoi conas a chuirtear gorm meitiléine i gcomparáid le roghanna aon-ruaime eile i gcomparáid idir ruaimnithe simplí baictéaracha.

Cad a chruthaíonn ruaimniú E. coli le gorm meitiléine, agus cad nach gcruthaíonn sé

Is slat Gram-diúltach é E. coli, ach comhcheanglaíonn an abairt sin fíricí ó roinnt modhanna: moirfeolaíocht ón micreascópacht, imoibriú Gram ó ruaimniú Gram, agus céannacht ó shaothrú chomh maith le tástáil bhithcheimiceach nó mhóilíneach. Ní chuireann smearadh le gorm meitiléine ach an chéad chuid ar fáil. Bunaíonn sé go bhfuil cealla slatchruthacha sa sampla ruaimnithe agus conas atá siad leagtha amach. Ní bhunaíonn sé an t-imoibriú Gram, toisc nach ndearnadh tástáil dídhathaithe. Ní shainaithníonn sé an speiceas, toisc go mbíonn slata ó go leor speiceas cosúil lena chéile ag an taifeach seo.

Seo an áit a dtéann tuairiscí amú ar bhealach intuartha. Cuireann an scríbhneoir eolas cúlra ("tá an saothrán seo ceaptha a bheith ina E. coli, agus tá E. coli Gram-diúltach") isteach i líne na breathnóireachta, mar sin is cosúil go ndeimhníonn an sleamhnán rud a glacadh leis i ndáiríre. Scarann tuairisc níos soiléire na sraitheanna: "Ruaimniú simplí le gorm meitiléine: bacail ghorma feicthe; moirfeolaíocht amháin, níor tástáladh aon chatagóir Gram." Ansin, má rinneadh ruaimniú Gram i gceart le rialuithe: "Ruaimniú Gram: slata bándearga, ag teacht le Gram-diúltach." Tagann céannacht an speicis níos déanaí, ón sreabhadh oibre sainaitheanta, ní ón dath amháin.

Treoir phraiticiúil léirmhínithe

Úsáid an riail chinnteoireachta seo ag binse na saotharlainne. Má tá gach cill ar aon dath agus má úsáideadh ruaim amháin sa phrótacal gan dídhathaitheoir, rinne tú ruaimniú simplí. Tuairiscigh cruth, meastachán ar mhéid, agus leagan amach. Stop ansin. Má úsáideadh corcairghorm criostail, iaidín, dídhathaitheoir, agus frithruaim sa phrótacal, le rialuithe deimhneacha agus diúltacha aitheanta, rinne tú ruaimniú Gram. Tuairiscigh dath agus moirfeolaíocht: coicigh chorcra i slabhraí, slata bándearga, agus mar sin de.

Trí bhotún is cúis leis an gcuid is mó den mhearbhall. Ar an gcéad dul síos, an iomarca a bhaint as slata gorma agus iad a mheas mar dheimhniú ar E. coli. Ar an dara dul síos, sleamhnán gorm meitiléine a thaifeadadh faoin gceannteideal "Ruaimniú Gram" i leabhar nótaí, rud a bhainfidh léitheoirí níos déanaí míbhrí as. Ar an tríú dul síos, frithruaimeanna a mhalartú gan mórán machnaimh agus ansin dathanna ó shaotharlanna éagsúla a chur i gcomparáid amhail is dá mbeadh na pailéid dathanna mar an gcéanna. Tá an réiteach céanna ar gach botún: ainmnigh an modh a rinneadh i ndáiríre, agus ná maígh ach an méid a thástálann an modh sin.

Tá áit tuillte ag ruaimniú simplí go díreach toisc nach maíonn sé mórán. Tá sé tapa, ní bhíonn tionchar mór ag mionearráidí air, agus is leor é nuair is ceist mhoirfeolaíochta atá ann: an bhfuil aon rud ann, agus cén cruth atá air. Nuair is ceist aicmithe atá ann, déan an tástáil dhifreálach. Insíonn an sleamhnán gorm duit cén chuma atá ar na cealla. Insíonn an sleamhnán corcra nó bándearg duit conas a iompraíonn a mballaí. Ní insíonn ceachtar sleamhnán, leis féin, duit cén speiceas atá ann.