Cealla leice a dhathú le gorm meitiléine: cad ba cheart a thabhairt faoi deara

Cuireann dalta braon d'fhionraí cealla leice ar shleamhnán, féachann sí tríd an micreascóp, agus ní fheiceann sí beagnach aon rud. Snámhann cúpla taibhse gheal trasna réimse geal. Géaraíonn sí an fócas, méadaíonn sí an solas, agus ansin tagann sí ar an tuairim go bhfuil an sleamhnán folamh. Níl an sleamhnán folamh. Tá na cealla ann. Tá siad beagnach trédhearcach, agus is í an trédhearcacht an fhadhb iomlán atá an dathú seo ceaptha a réiteach.

Is fiú an neamhréir sin idir an méid a bhfuiltear ag súil leis agus an íomhá a lua sula dtosaítear ar an bprótacal. Bíonn tosaitheoirí ag súil go nochtfaidh micreascóp mionsonraí mar a nochtann súmáil ceamara comhartha i bhfad i gcéin. Déanann micreascóp gealréimse rud níos teoranta: taispeánann sé difríochtaí in ionsú solais. Ní ionsúnn cill leice neamhdhaite beagnach aon solas, agus mar sin ní chruthaíonn sí beagnach aon difríocht. Cuireann gorm meitiléine an difríocht sin ar fáil. Ceanglaíonn sé laistigh den chill, go míchothrom, agus déanann sé codarsnacht den struchtúr. Nuair a thuigeann daltaí an coincheap sin, feiceann siad gach céim ina dhiaidh sin mar thoradh loighciúil seachas mar oideas.

Tá eolas cúlra ar an gcaoi a gcuireann dathuithe simplí codarsnacht ar fáil i saotharlann na scoile úsáideach anseo, agus seachnaíonn athbhreithniú ar mhicreascóp gealréimse a chur ar bun roimh dhathú leath na sleamhnán teipthe. Tá an cheimic atá taobh thiar den dath le fáil in réamhrá ar ghorm meitiléine sa mhicreascópacht, a mhíníonn cén fáth a bhfeictear an ruaim áirithe seo chomh minic sin ar bhinse na saotharlainne.

Prótacal an ranga

Is é an leagan gléasta fhliuch thíos an rogha réamhshocraithe is simplí do ranganna ginearálta. Ní theastaíonn lasair ná céim fosaithe uaidh. Cuireann an leagan smeartha fosaithe a úsáidtear i roinnt lámhleabhar coláiste triomú san aer agus fosú gairid le teas leis, mar atá i ngníomhaíocht smeartha leice North Central Texas College a foilsíodh trí Biology LibreTexts, ach is gnáthchleachtas sa mhicribhitheolaíocht é fosú le teas, ní riachtanas chun cealla eipitéiliacha a fheiceáil.

An trealamh atá ag teastáil: sleamhnáin agus gloiní cumhdaigh glana, maipíní steiriúla aonúsáide (an rogha is fearr) nó bioráin fiacla nua chothroma, buidéal braonaire de thuaslagán uiscí gorm meitiléine 0.5 go 1 faoin gcéad, uisce driogtha nó dí-ianaithe, páipéar súite, lámhainní, agus micreascóp comhshuite a bhfuil formhéadú iomlán 100x agus 400x aige.

1. Sruthlaigh an béal le gnáthuisce. Baineann sé seo cáithníní bia amach a d'ionsódh an ruaim go láidir níos déanaí agus a tharraingeodh aird ó na cealla.
2. Ní thógann gach dalta sampla ach óna leice féin. Cuimil taobh istigh na leice go réidh le maipín úr steiriúil. Brúigh, ná scríob. Stop i bhfad sula mbíonn aon mhíchompord nó fuiliú ann.
3. Rollaigh an maipín thar lár sleamhnáin ghlain chun scannán tanaí a fhágáil. Is é scannán tanaí an comhartha is láidre go mbeidh sleamhnán inléite ann. Déanfaidh an dathú mais ghorm nach féidir a léamh de thaisce thiubh bhán.
4. Cuir braon amháin de ghorm meitiléine ar an smearadh. Fág é ar feadh 1 go 3 nóiméad. Is leor nóiméad amháin i mórán prótacal coláiste; úsáideann lámhleabhar saotharlainne eolaíochta NCERT do Rang IX thart ar 3 nóiméad le haghaidh gléas sealadach. Ní fearr tréimhse níos faide, agus is é ródhathú an earráid ama is coitianta.
5. Sruthlaigh go réidh le huisce driogtha nó súigh an iomarca ruaime le páipéar súite, de réir an phrótacail áitiúil. Ba cheart go mbeadh dath gorm geal ar an gcúlra, ní dúghorm domhain.
6. Ísligh gloine chumhdaigh ar uillinn ionas go mbainfidh imeall amháin leis an sleamhnán ar dtús, agus ansin lig di titim go mall. Coinníonn sé seo boilgeoga aeir amach.
7. Tosaigh ag formhéadú íseal chun na cealla a aimsiú, dearbhaigh an fócas agus an lárú, ansin bog go 100x agus ar deireadh go 400x. Ag 400x, ná húsáid ach an mionfhócas.

Is fiú abairt bheacht amháin a thabhairt ar thiúchan na ruaime. Bíonn formhór na bprótacal scoile bunaithe ar thuaslagán uiscí gorm meitiléine 1 faoin gcéad. Dorchaíonn stoc-thuaslagán níos láidre nó nochtadh fada an cúlra níos tapúla ná an núicléas, rud a aisiompaíonn an chodarsnacht ar a bhfuil an cleachtadh ag brath.

Ábhar leice a láimhseáil go sábháilte

Tagann seile agus gnáth-mhiocrorgánaigh an bhéil leis na samplaí leice, mar sin caith le gach smearadh úr mar ábhar a d'fhéadfadh a bheith tógálach, cé gur comhdhaltaí sláintiúla iad na deontóirí. Leagann treoirlínte bithshábháilteachta American Society for Microbiology do shaotharlanna teagaisc amach na prionsabail ghinearálta: measúnaigh an riosca roimh an seisiún, caith lámhainní, cosain na súile nuair is féidir splancadh tarlú, nigh na lámha ina dhiaidh sin, díghalraigh na binsí, agus diúscair earraí aonúsáide éillithe tríd an gcóras ceadaithe do dhramhaíl bhitheolaíoch.

Clúdaíonn ceithre riail ranga an chuid is mó den riosca. Deontóir amháin in aghaidh an mhaipín agus an tsleamhnáin; ní roinntear iad riamh. Féinsampláil amháin; ní thógtar sampla ó dhuine in aice leat riamh. Téann maipíní agus bioráin fiacla aonúsáide díreach isteach sa choimeádán dramhaíola ainmnithe, agus ní chuirtear ar ais ar an mbinse iad riamh. Fágann gorm meitiléine féin smál ar an gcraiceann agus ar éadaí agus greannaíonn sé na súile, mar sin tá lámhainní agus gnáthchleachtais sláinteachais le haghaidh ruaimeanna riachtanach. Ná leathnaigh an cleachtadh seo chun aon rud ón smearadh a shaothrú, agus ná déan fosú le teas ar ábhar úr daonna ar bhealach seiftithe lasmuigh de nós imeachta sábháilteachta na scoile.

Cad ba cheart a thabhairt faoi deara, agus cén fáth a bhfuil an chuma sin air

Ag 100x, lorg cealla leathana cothroma, dath gorm geal orthu, agus imlínte ubhchruthacha nó polagánacha neamhrialta acu. Bíonn siad ina n-aonar nó ina sraitheanna scaoilte a fhorluíonn ar a chéile. De ghnáth bíonn spota amháin gorm níos dorcha i ngach cill. Is é an spota sin an núicléas. Tabhair faoi deara an leagan amach freisin: is tíleanna tanaí iad cealla eipitéiliacha squamacha, ní sféir, agus sin an fáth a bhfuil cuma glónra scoilte ar a n-imill seachas cuma balún cruinn.

Ag 400x, is féidir trí ghné a idirdhealú go soiléir. Feictear teorainn na cille mar líne thanaí níos dorcha timpeall na cille. Líonann an cíteaplasma an taobh istigh le dath gorm geal aonfhoirmeach. Tá an núicléas níos dorcha agus níos dlúithe, ubhchruthach go minic, agus é gar don lár de ghnáth, ach ní i gcónaí. Iarr ar na daltaí na trí ghné sin a thaifeadadh, mar aon leis an gcruth agus an formhéadú, mar is é sin go díreach a iarrann an bhileog oibre.

Tá pointe cruinnis amháin tábhachtach anseo, agus bíonn sé mícheart ar go leor bileog oibre. Freagraíonn an teorainn infheicthe do réigiún an scannáin phlasma, ach tá an scannán féin, déshraith lipidí atá thart ar 7 go 10 nanaiméadar ar tiús, i bhfad faoi bhun an méid is féidir le micreascóp scoile a idirdhealú. Is é imeall optúil na cille, agus ruaim carntha ansin, a fheiceann na daltaí. Tá an rabhadh céanna i bhfeidhm maidir le horgánaidí. Ní fheictear miteacoindrí, an reitine endaplasmach, coirp Golgi ná ribeasóim san ullmhúchán seo. Is féidir le gnáthmhicreascóp solais mionsonraí síos go dtí thart ar 0.2 micriméadar a idirdhealú faoi dhálaí maithe, mar a mhíníonn eolas cúlra NCBI ar uirlisí micreascópachta sa bhitheolaíocht cheallach, agus tá an chuid is mó den bhonneagar mín faoi bhun na teorann sin nó gar di. Méadaíonn formhéadú folamh níos airde an íomhá gan mionsonraí a chur léi.

Cén fáth a ndathaítear an núicléas níos dorcha ná aon chuid eile? Is ruaim chaitiainíoch é gorm meitiléine, a bhfuil lucht deimhneach air i dtuaslagán, agus nascann sé le hábhar a bhfuil lucht diúltach air sa chill, go háirithe aigéid núicléasacha. Tiúchanaíonn crómatin DNA sa núicléas, agus mar sin bailíonn an núicléas an méid is mó ruaime. Tá RNA agus móilíní eile a bhfuil lucht orthu sa chíteaplasma, mar sin dathaítear é freisin, ach ar bhealach níos idirleata agus níos éadroime. An cháilíocht thábhachtach: ní ruaim shainiúil do DNA é gorm meitiléine. Déanann taighde ar dháileadh gorm meitiléine in íomháú núicléach cur síos ar an gcaitiain ag nascadh le réigiúin atá saibhir in aigéid núicléasacha, agus fuarthas i dtaighde cainníochtúil níos sine ar cheangal gorm meitiléine in ullmhúcháin cheallacha go raibh an chuid is mó den ruaim cheangailte bainteach le haigéid núicléasacha. Dá bhrí sin, is patrún codarsnachta é núicléas dorcha agus cíteaplasma geal le chéile, ní measúnacht mhóilíneach.

Botúin a dhéanfaidh daltaí, agus conas iad a thuiscint

Baineann beagnach gach sleamhnán teipthe le ceann amháin de chúig phatrún. Múin do na daltaí an fhadhb leis an sleamhnán a aithint seachas an obair a athdhéanamh gan smaoineamh.

Déanann ródhathú na cealla agus an cúlra dorcha go haonfhoirmeach, ionas nach féidir an núicléas a idirdhealú ón réimse. Ceartaigh é le ham dathaithe níos giorra nó sruthlú níos críochnúla. Fágann tearcdhathú taibhsí a imíonn nuair a mhéadaítear an solas; méadaigh an t-am tríocha soicind ag an am. Cruthaíonn smearthaí tiubha maiseanna dlútha forluiteacha nach féidir aon imlíne a rianú iontu; is ceartúchán meicniúil atá ag teastáil: scaip níos tanaí an chéad uair eile, mar ní féidir le sruthlú carn cealla a shábháil. Feictear boilgeoga aeir mar chiorcail fhoirfe a bhfuil imill ghéara dhorcha orthu, agus tarraingíonn siad aird tosaitheoirí a shíleann gur struchtúir iad; leag an ghloine chumhdaigh arís go mall ar uillinn. De ghnáth is gnáthbhaictéir béil iad poncanna bídeacha dorcha atá scaipthe ar na cealla nó timpeall orthu, mar a thugann prótacail scoile ar nós nós imeachta Ingrid Science do chealla leice faoi deara. Deimhníonn siad go bhfuil orgánaigh ina gcónaí sa bhéal, rud a d'fhéadfadh fanacht i gcuimhne na ndaltaí, ach ní féidir a speiceas a aithint sa chleachtadh seo agus níor cheart iad a tharraingt mar chodanna den chill. Dathaítear smionagar bia agus snáitheanna múcasacha go neamhrialta agus go láidir; is chun iad a laghdú a dhéantar an réamhshruthlú.

Cad nach féidir leis an gcleachtadh seo a dhéanamh

Is breathnóireacht oideachasúil í seo, ní tástáil dhiagnóiseach. Ní féidir aon ghné de chuma na gceall i ndathú ranga a úsáid chun ionfhabhtú, ailse ná aon ghalar a dhiagnóisiú, agus níor cheart an t-alt a léamh mar rud a thugann a mhalairt le fios. Taispeánann an t-ullmhúchán cruth, teorainn, cíteaplasma agus núicléas ag dhá fhormhéadú. Ní thaispeánann sé bonneagar mín an scannáin, mionsonraí orgánaidí ná céannacht mhóilíneach. Cosnaíonn sé an eolaíocht agus na daltaí araon an teorainn a lua go soiléir: is toradh maith é líníocht atá lipéadaithe i gceart agus an formhéadú agus an ruaim taifeadta léi, ní conclúid faoin tsláinte.

Bileog oibre do dhaltaí agus micreagraif lipéadaithe

Is iad an micreagraf lipéadaithe thuas agus an bhileog oibre thíos an dá ábhar tionscadail don leathanach seo. Priontáil cóip den bhileog oibre do gach dalta nó teilg ar scáileán í agus iarr ar na daltaí na boscaí a chóipeáil isteach ina leabhair nótaí.

Conas í a úsáid i seisiún 45 nóiméad: deich nóiméad don mhíniú sábháilteachta agus don tsampláil, deich nóiméad don dathú agus don ghléasadh, cúig nóiméad déag don bhreathnóireacht agus don sceitseáil ag an dá fhormhéadú, agus deich nóiméad don seicliosta agus don chomparáid leis an micreagraf lipéadaithe. Tá míreanna an tseicliosta praiticiúil d'aon ghnó. Smearadh tanaí, am dathaithe ceart, núicléas níos dorcha ná an cíteaplasma, formhéadú taifeadta. Tuigeann dalta ar féidir leis na ceithre mhír ar fad a sheiceáil an coincheap atá an ceacht ceaptha a mhúineadh: taispeánann micreascóip difríochtaí, agus cruthaíonn ruaimeanna na difríochtaí ar fiú iad a thaispeáint.