Grein
Metýlenblátt sum anaerobur indikator og súrevnisindikator: hvat litbroytingin prógvar
Ein starvsfólk á rannsóknarstovuni lokar eitt anaerobt ílat tætt, kannar indikatorstrimluna við metýlenbláum gjøgnum lokið og sær tað, hon vil síggja. Strimlan er farin frá bláari til hvíta. Hon skrásetir koyringina sum anaeroba og heldur fram. Tveir dagar seinni er eingin vøkstur á einari plátu, meðan eitt lokað royndarglas við flótandi føðslumiðli í sama ílati vísir tekin um ávirkan frá súrevni. Strimlan segði sannleikan. Hon setti henni skeiva spurningin.
Ógreiðan stavar frá einari hugtaksvilluligu fatan. Ein anaerobur indikator við metýlenbláum snýr seg um redoks, ikki um sterilitet og ikki um validering av allari skipanini. Tá ið tann munurin er greiður, verður strimlan eitt neyvt og álítandi amboð við einari avmarkaðari uppgávu.
Hugtakið: eitt vendibilt redokspar
Upployst metýlenblátt finst í tveimum støðum. Oxideraða formið er tann kendi blái katiónurin. Reduseraða formið, nevnt leukometýlenblátt, er litleyst. Nær neutralum pH er einfaldaða hálvreaktiónin ein bláur katiónur pluss ein protónur pluss tvær elektrónir, sum geva eitt litleyst leukomolekyl. Formella potentialið er nær pluss 11 millivoltum í mun til standardvetniselektroduna við pH 7. Tað liggur sostatt á einum øki, sum nógvar reduserandi skipanir kunnu røkka, og har súrevni kann venda reaktiónini við.
Reduktión krevur eitt lágt lokalt redokspotential. Tað er ikki altíð nóg mikið bert at taka súrevnið burtur. Fyrstu kanningarnar av anaerobum umstøðum vístu, at metýlenblátt í vanligum súrevnisfríum vatni varðveitti litin, uttan so at eitt reduserandi evni var til staðar. Tær vístu eisini, at blandingar av dekstrosuføðslumiðli við umleið 0.01 prosent litingarevni lættliga mistu litin við 37 C, meðan sama blanding, goymd við 4 C, var blá í eitt samdøgur, sum lýst í royndum við frískum vevnaði og anaerobum dyrkingarumstøðum. Hiti, pH, glukosa, askorbat, tioglykolat og reduserandi virksemi hjá mikroorganismum avgera øll, um elektrónir eru tøkar.
Enduroxidatión krevur bert súrevni. Tá ið luft kemur at leukoforminum, verður tað aftur blátt. Nútímans sergjørdir indikatorar nýta júst hesa ringrásina: litingarevni pluss reduserandi evni pluss eina stabiliserandi matriks, litleyst við lágum súrevnisinnihaldi og aftur blátt við ávirkan frá luft, sum víst í einum hybridum súrevnisindikatori við metýlenbláum, grundaðum á litingarevni, reduserandi evni, yvirflatuvirkið evni og leir. Tann prototypan brúkti 0.01 millimolar litingarevni við 2.0 millimolar askorbati ella glukosu við pH 11, gjørdist litleys við umleið 0.5 rúmmálsprosent súrevni og skildi millum undir 0.1 prosent og yvir 0.5 prosent súrevni í sínum royndarkamari.
Arbeiðsprinsippið er tí einfalt. Blátt merkir, at indikatorøkið er oxiderað. Litleyst merkir, at indikatorøkið hevur nátt reduserandi umstøður við lágum súrevnisinnihaldi. Broytingin er vendibil, lokal og kemisk. Hon sigur í sjálvum sær einki um mikroorganismur.
Hvussu ein indikatorstrimla við metýlenbláum í einum anaerobum ílati virkar
Ein indikatorstrimla við metýlenbláum til eitt anaerobt ílat er eitt lítið reaktiónsøki, sum verður sett í luftina í ílatinum, har tað sæst uttan at lata ílatið upp. Handilslig snið eru ymisk: pappírsstrimlur, tablettir, sum verða upploystar ella vættar við uppseting, og nýggjari hybridpappír. Summi krevja ein dropa av destilleraðum vatni fyri at virkja reaktiónsøkið. Onnur eru turr amboð, sum skulu haldast turr. Vegleiðingin fyri ítøkiligu vøruna er avgerandi, tí væting, staðseting og avlesingartíð eru partur av kemiini.
Í praksis er ætlaða avlesingin tvíbýtt. Blátt merkir, at súrevni ella ikki nóg reduserandi umstøður framvegis eru við strimluna. Hvítt ella litleyst merkir, at anaerobar redoksumstøður eru komnar við strimluna. Á nøkrum handilsligum indikatorpappírum er eitt reytt bakgrundspigment lagt afturat, so teirra reduseraða endastøða sæst sum ljósareyð heldur enn hvít. Vita, hvørja endastøðu vøran lovar, áðrenn tú metir um hana.
Tíðin er ymisk eftir skipanini. Í einari uppseting av GasPak-slagi fór liturin at fána innan umleið ein tíma og var heilt horvin innan fáar tímar, meðan ein stýrd samanbering við stovuhita kravdi meira enn seks tímar fyri metýlenblátt. Í tí arbeiðinum náddi redokspotentialið í føðslumiðlunum umleið minus 100 millivoltum innan 60 til 100 minuttir, væl áðrenn litingarevnið var liðugt at broyta lit, og lá væl undir minus 200 millivoltum, tá ið strimlan var heilt litleys. Indikatorurin reagerar seinni enn luftin í ílatinum broytist. Ein blá strimla eftir einum tíma prógvar ikki brek, og ein hvít strimla eftir seks tímum lýsir strimluna eftir seks tímum.
Staðsetingin hevur týdning av somu orsøk. Halt strimluna í luftøkinum oman fyri innihaldið, sjónliga gjøgnum lokið og burtur frá agaryvirflatum og dyrkingarmiðlum. Hon vísir sínar nærmastu umstøður. Leggur tú hana flata móti einum køldum veggi, fjalir hana undir plátum ella letur kondensvatn gjøgnumbloyta hana, vísir hon hetta lítla nærumhvørvið heldur enn umstøðurnar í ílatinum.
Hvat strimlan vísir, og hvat hon ikki vísir
Hugsa um indikatorin við metýlenbláum í anaeroba ílatinum sum ein skynjara á einum staði. Hann staðfestir lokalar redoks- og súrevnisumstøður í sínum egna reaktiónsøki. Tær eru í høvuðsheitum umboðandi fyri luftøkið oman fyri innihaldið, um blanding og javnvág eru nøktandi. Alt út um tað er ein niðurstøða, og slík niðurstøða krevur serstøk prógv.
Ein litleys strimla staðfestir ikki sterilitet. Sterilitet merkir, at eingar lívførar organismur eru til staðar, og verður prógvað við valideraðari sterilisering og kontrolroyndum, sum validera dyrkingina. Eitt ílat kann vera heilt anaerobt og kortini dálkað, ella heilt sterilt og kortini aerobt.
Hon validerar ikki hvønn part av dyrkingarskipanini. Upployst súrevni í einum lokaðum royndarglasi, súrevni innilokað djúpt í agar, gradientar í einum ovfullum ílati og ein leki, sum kemur eftir avlesingina, verða ikki øll fangað av einari strimlu. Royndir við rúmligum munum vístu blá og litleys øki lið um lið í sama ílati, har javnvágin millum súrevnisinntrongd og reduserandi virksemi var ymisk. Eitt punkt kann ikki vátta eitt heilt rúmmál.
Hon prógvar ikki óavbrotnar anaerobar umstøður. Ein strimla, sum verður lisin eina ferð við uppseting, sigur einki um tíma tjúgu. Nýggjari arbeiði við anaerobari góðsku ávarar um, at kemiskir indikatorar lýsa luftina í tí løtu, teir verða lisnir, og kunnu síggja nøktandi út, hóast eitt lítið nøgd av súrevni er eftir. Tað er støðug skráseting ella skráseting á eftirlitstíðum, sum knýtir strimluna at inkubatiónini, ikki eitt einstakt eygnabrá á endastøðuna.
Um kemisku tilgongdina aftan fyri litbroytingina, sí hvussu metýlenblátt skiftir millum oxideraðar og reduseraðar støður. Um hvussu súrevni ávirkar handfaring av sýnum í breiðari høpi, sí súrevniseftirlit í mikroskopi- og dyrkingararbeiði.
Ein mynd at hava við síðuna av ílatinum
Myndin niðanfyri savnar greinina í eitt uppslagsverk til arbeiðsborðið. Tríggjar støður hjá somu strimlu, báðar reaktiónskósirnar og markið millum prógv frá indikatorinum og validering av skipanini.
| Eygleiðing | Heimilað tulking | Neyðuga næsta stigið |
|---|---|---|
| Strimlan er blá eftir tíðina, sum er ásett fyri vøruna | Anaerobar umstøður eru ikki váttaðar við strimluna | Kanna tættleika, virking og kapasitet hjá posanum, katalysator har tað er viðkomandi, væting av strimluni og útgongudag; tulka ikki dyrkingarnar enn |
| Strimlan fánar í fleiri tímar og verður síðani verandi litleys | Reduserandi umstøður eru komnar við strimluna á tí tíðspunktinum | Skráset tíð og lit; halt fram við eftirliti á ásettum tíðum undir inkubatiónini |
| Strimlan er litleys áðrenn upplating og blá eftir upplating | Væntað enduroxidatión við ávirkan frá luft | Varðveit avlesingina áðrenn upplating sum endastøðuna; met ikki koyringina sum miseydnaða afturlítandi |
| Strimlan er litleys, men eitt royndarglas sær oxiderað út | Bert lokal avlesing | Met um royndarglasið út frá tess egnu prógvum; kanna gradientar, upployst súrevni og fylling |
| Strimlan hevur einhvønn lit, við vøkstri ella ongum vøkstri | Eingin niðurstøða um sterilitet ella lívføri | Nýt serstakar kontrolroyndir fyri sterilitet og lívføri |
Brek, sum halda strimluna bláa ella geva falskt tryggleika
Flestu brek falla í fimm bólkar. Hvør hevur síni eyðkenni.
Eitt ótætt ílat ella ein ótættur poki heldur fram við at veita súrevni til reaktiónsøkið. Strimlan verður verandi blá ella verður aftur blá, eftir at hon er fánað. Kanna lokið, pakningin, klemmurnar og tætningsflaturnar, áðrenn tú leggur skuldina á kemiina.
Ein uppbrúktur ella skeivt virkjaður gassframleiðari tekur ongantíð súrevnið burtur. Í eldri skipanum, sum verða virkjaðar við vatni, vóru vantandi kondensat eftir umleið 10 til 15 minuttir og eingin upphiting av lokinum eftir umleið 20 til 40 minuttir tíðlig ávaringartekin fyri ta skipanina. Ein ov lítil posi í einum ovfullum ílati svíkur á sama hátt.
Ein eitraður katalysator er bert viðkomandi fyri eldri skipanir við vetni og palladium, har palladium bindur vetni og súrevni saman til vatn. Væta og vetnissulfid niðurbróta hann. Nógvir núverandi posar brúka als einki palladium, so nýt ikki hesa loysnina, har hon ikki hoyrir heima.
Ein niðurbrotin ella skeivt handfarin strimla svíkur uttan týðilig tekin. Litingarevni og reduserandi evni missa vendibilitet við goymslu. Tað er ein orsøk til, at hybridblandingar vórðu mentar fyri at mótstanda fánan av ljósi og virksemismissi við goymslu. Vraka vørur, sum eru útgingnar, vørur við óvanligum byrjanarliti og strimlur, sum eru vættar, tá ið tær skulu vera turrar, ella latnar turrar, tá ið tær skulu vætast.
Ein gradientur ella seinkað reaktión villleiðir lesaran heldur enn kemiina. Illa blandað luft oman fyri innihaldið, lokað royndargløss við upploystum súrevni og hálvfastir føðslumiðlar varðveita hvør sínar umstøður longri, enn strimlan bendir á. Resazurinstrimlur fara gjøgnum ljósareytt til litleyst og verða ofta marknaðarførdar sum skjótari, men teirra markvirði hoyra til teirra egnu blanding og kunnu ikki flytast til metýlenblátt.
Kontrolroyndir og ein avlesingarprotokollur, sum er verdur at brúka
Tvær bíligar kontrolroyndir fanga flestu skeivu avlesingarnar. Hav eina nýggja kontrolstrimlu í vanligari stovuluft við síðuna av koyringini. Ein virkin strimla við metýlenbláum verður verandi blá har. Summir pakkaðir indikatorar eru ljósir frá byrjan og verða bláir við upplating, og tað er í sjálvum sær ein funktiónskanning. Set eisini við jøvnum millumbilum eina nýggja strimlu í eina áður valideraða anaeroba uppseting. Hon eigur at røkka valideraðu reduseraðu endastøðuni innan tíðina, sum er ásett fyri vøruna. Um onnur kontrolroyndin ikki virkar sum væntað, skift framleiðslulotið út, áðrenn tú lítur á avlesingar úr ílatinum.
Avlesingarprotokollurin fylgir av mekanismuni. Set strimluna, har luftøkið oman fyri innihaldið sæst uttan at lata ílatið upp, og fylg vøruvegleiðingini viðvíkjandi sambandi við veggin og væting. Skráset byrjanarlitin, tíðina tá ið ílatið varð lokað tætt og litin á eftirlitstíðini, sum er ásett fyri vøruna. Har ílatið loyvir tí, skráset, at indikatorurin varð verandi reduseraður á ásettum eftirlitstíðum undir inkubatiónini. Skráset endaliga litin beint áðrenn upplating. Tann liturin áðrenn upplating er endastøðan fyri ta koyringina. Vænta, at strimlan verður aftur blá eftir upplating, og lat ikki tað broyta skrásettu gongdina.
Um strimlan verður verandi blá eftir ásettu tíðina, met tá anaerobar umstøður sum óváttaðar. Kanna røðina í hesi raðfylgju: tættleika, posa, katalysator um hann er til staðar, væting av indikatorinum og útgongudag, síðani funktiónina hjá indikatorinum samanborið við kontrolstrimluna í luft. Bert tá ið luftumstøðurnar eru váttaðar, eigur vøkstur ella vantandi vøkstur at verða tulkaður, við einari anaerobari dyrkingaruppseting og organismukontrolroyndum, sum hóska til nýtsluna.
Strimlan eigur síðsta orðið á sínum egna øki. Blá ella litleys svarar hon einum spurningi um eitt stað á einum tíðspunkti. Set henni tann spurningin á ásettari tíð, við kontrolroyndum við síðuna av, og hon svarar álítandi. Spyrt tú hana um sterilitet, um hvørt royndarglas ella um alla inkubatiónina út frá einum einstøkum eygnabrái, kann eingin indikatorkemi bjarga tulkingini.