মিথিলিন ব্লুৰ শোষণ বৰ্ণালী আৰু মোলাৰ শোষণক্ষমতা: চৰ্ত উল্লেখ কৰা এক তথ্যসূত্ৰ

মিথিলিন ব্লুৰ বৰ্ণালী দেখাত সহজ যেন লাগে, যেতিয়ালৈকে আপুনি তাৰ কোনো এটা সংখ্যা পুনৰ ব্যৱহাৰ কৰিবলৈ চেষ্টা নকৰে। এটা পৰীক্ষাগাৰে মোলাৰ বিলোপ সহগ প্ৰায় 82,000 বুলি প্ৰতিবেদন দিয়ে। আন এটাই 67,000 বুলি দিয়ে। তৃতীয় এটাই 100,000-তকৈ অধিক বুলি দিয়ে। তিনিওটা নিজৰ নিজৰ জোখৰ সঠিক বৰ্ণনা হ’ব পাৰে, কিন্তু ইয়াৰে এটাও এই ৰঞ্জকৰ সাৰ্বজনীন ধ্ৰুৱক নহয়।

দুটা পৃথক ধাৰণা একেলগে মিহলি কৰাৰ ফলতেই এই বিভ্ৰান্তি হয়। শোষণাংক হৈছে এটা নিৰ্দিষ্ট কোষত থকা এটা নিৰ্দিষ্ট দ্ৰৱৰ জোখ। মোলাৰ শোষণক্ষমতা, যাক প্ৰায়ে এপছিলন বুলি লিখা হয়, সেই দ্ৰৱৰ এটা মডেলৰ পৰামিতি। মিথিলিন ব্লুৰ সংঘবদ্ধতাৰ অৱস্থা সলনি হ’লে মডেলটো সলনি হয়, গতিকে পৰামিতিটোও সলনি হয়। প্ৰতিটো সহগক চৰ্ত উল্লেখ কৰা মান হিচাপে গণ্য কৰাটো উপযোগী অভ্যাস: সংখ্যাটোৰ সৈতে তৰংগদৈৰ্ঘ্য, দ্ৰাৱক, pH বা বাফাৰ, উষ্ণতা, ঘনত্বৰ পৰিসৰ আৰু পথৰ দৈৰ্ঘ্যও থাকিব লাগে।

পাতল জলীয় দ্ৰৱত মনোমাৰৰ বেণ্ড

পাতল জলীয় দ্ৰৱত মিথিলিন ব্লু কেটায়নৰ প্ৰধান বেণ্ডটো প্ৰায় 664 ৰ পৰা 665 nm-ত থাকে; যন্ত্ৰ আৰু কেলিব্ৰেচনৰ বাছনি অনুসৰি ইয়াক সাধাৰণতে 664 ৰ পৰা 668 nm-ৰ ভিতৰত বুলি উল্লেখ কৰা হয়। দ্ৰৱটো ইমান পাতল হ’লে যে ৰঞ্জকৰ অধিকাংশ মনোমাৰ ৰূপত থাকে, পৰিমাণ নিৰ্ণয়ৰ বাবে এই বেণ্ডটোৱেই উপযুক্ত।

প্ৰকাশিত গৱেষণাৰ তিনিটা মানে দেখুৱায় যে মূল সংখ্যাটোৰ তুলনাত চৰ্তবোৰ কিয় অধিক গুৰুত্বপূৰ্ণ। 1 cm কোষত জলীয় নমুনাৰ ঘনত্ব প্ৰায় 7 micromolar-ৰ তলত ৰখা মৃৎপদাৰ্থৰ গৱেষকসকলে 665 nm-ত এপছিলন প্ৰায় 82,000 M-1 cm-1 বুলি প্ৰতিবেদন দিছিল। অতি পাতল জলীয় নমুনাৰ পৰীক্ষাভিত্তিক কেলিব্ৰেচন ঢাল হিচাপে এই মানটো বিশেষভাৱে ভালদৰে নথিভুক্ত কৰা হৈছে। পিছৰ এটা বিয়নিত পানীত কৰা প্ৰাথমিক কেলিব্ৰেচনে, 2.34 ৰ পৰা 37.52 micromolar আৰু 1 cm পথ ব্যৱহাৰ কৰি, মুঠ ৰঞ্জকৰ বাবে 665 nm-ত প্ৰায় 67,100 M-1 cm-1 মান দিছিল। কম মানটো প্ৰত্যাশিত, বিৰোধী নহয়, কাৰণ সেই কেলিব্ৰেচন পৰিসৰৰ ওপৰৰ আধা অংশত ইতিমধ্যে উল্লেখযোগ্য পৰিমাণৰ ডাইমাৰ থাকে। তৃতীয় এটা মান, 664 nm-ত প্ৰায় 73,460 M-1 cm-1, pH 6.86 আৰু 293 K-ত কৰা গৱেষণাৰ পৰা আহিছে, য’ত পৰ্যবেক্ষিত বৰ্ণালীটো মনোমাৰ আৰু ডাইমাৰৰ অংশত পৃথক কৰা হৈছিল; ইয়াৰ সাৰাংশ মিথিলিন ব্লুৰ আলোক-পদাৰ্থবিজ্ঞানৰ এক শেহতীয়া সমালোচনামূলক পৰ্যালোচনাত দিয়া হৈছে। সেই সংখ্যাটো পৃথক কৰি উলিওৱা মনোমাৰ উপাংশৰ মান, মুঠ ৰঞ্জকৰ বিপৰীতে শোষণাংকৰ প্ৰত্যক্ষ ঢাল নহয়।

ব্যৱহাৰিক কথাটো হ’ল: যিটো সহগৰ চৰ্ত আপোনাৰ নমুনাৰ সৈতে মিলে, সেইটো বাছক, অথবা নিজে কেলিব্ৰেচন কৰক। 30 micromolar ফছফেট বাফাৰ পৰীক্ষাত 82,000 মানটো ব্যৱহাৰ কৰি ৰৈখিকতা এতিয়াও বজাই আছে বুলি ধৰি নল’ব।

চুটি তৰংগদৈৰ্ঘ্যৰ শ্বোল্ডাৰটো এক মিশ্ৰণ

ঘনত্ব বঢ়াৰ লগে লগে 664 nm শীৰ্ষৰ তুলনাত প্ৰায় 600 ৰ পৰা 615 nm-ত থকা শ্বোল্ডাৰটো বাঢ়ে। আধুনিক গৱেষণাত সাধাৰণতে H প্ৰকাৰৰ ডাইমাৰৰ অৱদান প্ৰায় 605 ৰ পৰা 610 nm-ত বুলি ধৰা হয়। পানীত মিথিলিন ব্লুৰ সামগ্ৰিক বৰ্ণালী বিশ্লেষণে 607 nm-ত ডাইমাৰৰ সৰ্বোচ্চ মান আৰু 600 nm-ত উচ্চতৰ সমষ্টিৰ সৰ্বোচ্চ মান পৃথক কৰি দেখুৱায়, লগতে 664 আৰু 650 nm-ত মনোমাৰৰ অনুনাদী উপাংশ দেখুৱায়। ইয়াৰ সম্পূৰ্ণ পাঠ PMID 33251415-ৰ মুক্ত প্ৰৱেশাধিকাৰযুক্ত নথিৰ জৰিয়তে উপলব্ধ।

সেই শ্বোল্ডাৰটোক বিশুদ্ধ ডাইমাৰৰ শোষণাংক বুলি চিহ্নিত কৰা উচিত নহয়। মনোমাৰৰ কম্পন-ইলেক্ট্ৰনিক গঠনেও একে অঞ্চলত অৱদান আগবঢ়ায়, গতিকে জোখা উচ্চতাটো একাধিক অৱদানৰ ওপৰা-উপৰি সংযোজন। এটা সামগ্ৰিক ফিটত দেখা গৈছিল যে মনোমাৰ আৰু ডাইমাৰৰ মডেলে সম্পূৰ্ণ 1.1 micromolar ৰ পৰা 3.4 millimolar পৰিসৰটো যথাযথভাৱে বৰ্ণনা কৰিব পৰা নাছিল, কিন্তু টেট্ৰামাৰ যোগ কৰিলে সৰ্বোত্তম ফিট পোৱা গৈছিল; 34 micromolar-ৰ তলতো টেট্ৰামাৰৰ সংকেত ইতিমধ্যে ধৰা পেলাব পৰা গৈছিল। ফিট কৰা উপাংশবোৰৰ শক্তি ডাঙৰ আছিল: 664 nm-ত মূল মনোমাৰ উপাংশৰ বাবে প্ৰায় 107,800 M-1 cm-1, 607 nm-ত ডাইমাৰৰ বাবে প্ৰায় 101,400, আৰু 600 nm-ত টেট্ৰামাৰৰ বাবে প্ৰায় 138,500; বাফাৰবিহীন বিয়নিত পানীত, 0 ৰ পৰা 0.15 M ছ’ডিয়াম ক্ল’ৰাইড আৰু 282 ৰ পৰা 333 K উষ্ণতাত এই মানবোৰ পোৱা গৈছিল। এইবোৰ মডেলৰ সহায়ত পৃথক কৰা অংশ, সেয়েহে পৰীক্ষাভিত্তিক বীয়েৰ–লেম্বাৰ্ট ঢালৰ সলনি এইবোৰ ব্যৱহাৰ কৰা উচিত নহয়।

ডাইমাৰ গঠনৰ প্ৰৱণতা প্ৰত্যক্ষভাৱে পৰিমাণগতভাৱে নিৰ্ণয় কৰা হৈছে। pH 6.86 আৰু 293 K-ত এটা অধ্যয়নে প্ৰায় 3,900 M-1 ডাইমাৰীকৰণ ধ্ৰুৱক পাইছিল। এই মানে বুজায় কিয় 5 micromolar কাৰ্যকৰী দ্ৰৱে প্ৰায় ৰৈখিক আচৰণ কৰে, কিন্তু 50 micromolar ষ্টক দ্ৰৱে নকৰে। পদ্ধতি বিকাশৰ সময়ত এটা উপযোগী পৰীক্ষা হ’ল প্ৰায় 610 nm-ৰ শোষণাংক আৰু প্ৰায় 665 nm-ৰ শোষণাংকৰ অনুপাত। ঘনত্বৰ সৈতে সেই অনুপাত বাঢ়িলে, 664 nm-ৰ এপছিলনে আৰু এটা অপৰিৱৰ্তিত প্ৰজাতিক বৰ্ণনা নকৰে।

পৰস্পৰলৈ ৰূপান্তৰিত হোৱা এটা যোৰে প্ৰাধান্য লাভ কৰা ঘনত্বৰ অন্তৰালত বৰ্ণালীবোৰে এটা উমৈহতীয়া আইছ’ছবেষ্টিক বিন্দু দেখুৱাব পাৰে; জলীয় শ্ৰেণীত পৰীক্ষামূলকভাৱে ই প্ৰায় 625 nm-ত পোৱা যায়। এটা স্পষ্ট স্থিৰ বিন্দু দুটা প্ৰধান প্ৰজাতিৰ উপস্থিতিৰ সৈতে সামঞ্জস্যপূৰ্ণ। ঘনত্ব বাঢ়িলে বিন্দুটো সৰি গ’লে বা নাইকিয়া হ’লে, তাক যন্ত্ৰৰ ত্ৰুটি বুলি নহয়, উচ্চতৰ সমষ্টি বা সলনি হোৱা সাম্যাৱস্থা জড়িত হোৱাৰ সতৰ্ক সংকেত বুলি গণ্য কৰক।

দ্ৰাৱক, pH আৰু উষ্ণতাই বৰ্ণালী সলনি কৰে

পানীয়ে সংঘবদ্ধতাত সহায় কৰে। পানী আৰু DMSO মিশ্ৰণত মিথিলিন ব্লুৰ দ্ৰাৱক-সম্পৰ্কীয় অধ্যয়ন অনুসৰি, ডাইমিথাইল ছালফ’ক্সাইড যোগ কৰিলে ডাইমাৰীকৰণ হ্ৰাস পায়, শোষণ আৰু ফ্লুয়ৰেছেন্সৰ সৰ্বোচ্চ মান দীঘল তৰংগদৈৰ্ঘ্যলৈ সৰে, আৰু ফ্লুয়ৰেছেন্সৰ কোৱাণ্টাম উৎপাদন প্ৰায় চাৰিগুণ বাঢ়ে; অধ্যয়নটো PMID 30933781 হিচাপে সূচীভুক্ত। সেই গৱেষণাত জলীয় বৰ্ণালীক মনোমাৰ–ডাইমাৰ সাম্যাৱস্থা হিচাপে বিবেচনা কৰা হৈছে, য’ত মনোমাৰৰ শোষণাংক প্ৰায় 650 ৰ পৰা 670 nm-ত আৰু ডাইমাৰৰ শোষণাংক প্ৰায় 580 ৰ পৰা 615 nm-ত থাকে; লগতে 293.15 K-ত বৰ্ণালীৰ পৰা ডাইমাৰীকৰণ ধ্ৰুৱক নিৰ্ণয় কৰা হৈছে।

এলকহলে অৱস্থান আৰু আপাত শক্তি দুয়োটাই সলনি কৰে, কিন্তু সমষ্টি গঠন সম্পূৰ্ণৰূপে বন্ধ নকৰে। মিথিলিন ব্লুৰ দ্ৰাৱক-সম্পৰ্কীয় এটা অধ্যয়নত প্ৰতিবেদিত, 31.3 micromolar আৰু কোঠাৰ উষ্ণতাত কৰা এটা প্ৰাথমিক তুলনাত দীঘল তৰংগদৈৰ্ঘ্যৰ সৰ্বোচ্চ মান পানীত 665 nm কিন্তু মিথানলত 655 nm আছিল; সম্পূৰ্ণ দ্ৰৱৰ আপাত মান পানীত প্ৰায় 37,100 আৰু মিথানলত 60,800 আছিল। 298 K-ত নিৰ্জল ইথানলত কৰা পৃথক বৈধতা যাচাইত 655 nm-ত সৰ্বোচ্চ মান আৰু প্ৰায় 68,000 এপছিলন পোৱা গৈছিল।

সাধাৰণ pH পৰিৱৰ্তনে বহু পৰীক্ষা-পদ্ধতিয়ে ধৰি লোৱাতকৈ কম পৰিমাণে বৰ্ণালী সলনি কৰে। ওপৰত উল্লেখ কৰা সমালোচনামূলক পৰ্যালোচনাৰ মতে, প্ৰায় pH 2 ৰ পৰা pH 12-লৈ সৰ্বোচ্চ মানটো প্ৰায় 665 nm-তেই আছিল, আৰু pH 11-লৈকে শক্তিৰ পৰিৱৰ্তন সামান্য আছিল। বাফাৰৰ পৰিচয় আৰু আয়নিক শক্তিয়ে নামমাত্ৰ pH-ৰ সমানেই ফলাফল সলনি কৰিব পাৰে, গতিকে কেৱল pH মিটাৰৰ পাঠ নহয়, প্ৰকৃত বাফাৰ আৰু লৱণো নথিভুক্ত কৰক। প্ৰবল অম্ল বা প্ৰবল ক্ষাৰৰ ক্ষেত্ৰটো পৃথক, কাৰণ ৰঞ্জকটো প্ৰত্যাৱৰ্তনযোগ্য সংঘবদ্ধতাৰ পৰিৱৰ্তে ৰাসায়নিক পৰিৱৰ্তনৰ মাজেৰে যাব পাৰে। উষ্ণতা আৰু লৱণেও সাম্যাৱস্থা সলনি কৰে; সেইবাবেই 2020 চনৰ পানী-সম্পৰ্কীয় অধ্যয়নত দুয়োটাকে ইচ্ছাকৃতভাৱে সলনি কৰা হৈছিল।

মানটোৰ বৈধতা বজাই ৰাখিবলৈ জোখ লোৱা

পৰিমাণগত কাম বীয়েৰ–লেম্বাৰ্ট সম্পৰ্কৰ ওপৰত নিৰ্ভৰ কৰে—শোষণাংক হৈছে এপছিলন, ঘনত্ব আৰু পথৰ দৈৰ্ঘ্যৰ গুণফল—আৰু আপোনাৰ চৰ্তত ৰৈখিক অন্তৰালটো প্ৰকৃততে বজাই থাকে বুলি প্ৰমাণৰো প্ৰয়োজন।

কম micromolar ঘনত্বৰ কামৰ বাবে 1 cm কোষ ব্যৱহাৰ কৰক। এপছিলন প্ৰায় 82,000 হ’লে, 5 micromolar-এ প্ৰায় 0.41 শোষণাংক দিয়ে আৰু 10 micromolar-এ প্ৰায় 0.82 দিয়ে। সাধাৰণ পানীত মনোমাৰ-কেন্দ্ৰিক জোখৰ বাবে, কেইবা দহ micromolar-লৈকে কেলিব্ৰেচন কৰাৰ তুলনাত প্ৰায় 5 ৰ পৰা 7 micromolar-ৰ ওচৰত বা তলত থকাটো অধিক নিৰাপদ। ঘনীভূত ষ্টক দ্ৰৱৰ বাবে, 1-তকৈ বহুত বেছি শোষণাংক গ্ৰহণ কৰাৰ পৰিৱৰ্তে পথৰ দৈৰ্ঘ্য কমাওক।

একে মেট্ৰিক্সেৰে ব্লেংক জোখ লওক: একে মানৰ পানী, সহদ্ৰাৱকৰ একে অংশ, একে বাফাৰ আৰু লৱণ, কেৱল ৰঞ্জকটো বাদ দি। একে উষ্ণতাত সেই একে মেট্ৰিক্সতে কেলিব্ৰেচন দ্ৰৱ প্ৰস্তুত কৰক। পদ্ধতি বিকাশৰ সময়ত এটা তৰংগদৈৰ্ঘ্যৰ পাঠ লোৱাৰ পৰিৱৰ্তে সম্পূৰ্ণ দৃশ্যমান পৰিসৰ স্কেন কৰক, আদৰ্শভাৱে প্ৰায় 550 ৰ পৰা 750 nm। কেৱল উচ্চতা নহয়, আকৃতিও লক্ষ্য কৰক। ক্ৰমাগত পাতলকৰণে স্বাভাৱিকীকৃত আকৃতি সলনি কৰিলে, ব্যৱস্থাটো ৰাসায়নিকভাৱে ঘনত্ব-নিৰ্ভৰ। কেৱল উচ্চ R squared মানতকৈ এটা স্থিৰ সৰ্বোচ্চ মান আৰু 610 ৰ পৰা 665 nm-ৰ এটা স্থিৰ অনুপাত গ্ৰহণযোগ্য পৰিসৰৰ অধিক শক্তিশালী প্ৰমাণ।

বিকাৰকৰ ৰূপ নথিভুক্ত কৰক। বাণিজ্যিক পদাৰ্থ নিৰ্জল মিথাইলথায়’নিনিয়াম ক্ল’ৰাইড অথবা ট্ৰাইহাইড্ৰেটৰ দৰে হাইড্ৰেট হ’ব পাৰে, গতিকে ষ্টক দ্ৰৱৰ গণনাত ব্যৱহৃত মোলাৰ ভৰ প্ৰকৃত বটলৰ পদাৰ্থৰ সৈতে মিলিব লাগিব। কেৱল এই পদক্ষেপটোৱেই পৰীক্ষাগাৰবোৰৰ নামমাত্ৰ মোলাৰ ঘনত্বৰ মাজৰ অমিলৰ এটা অংশ ব্যাখ্যা কৰে। ফলাফল পৰিমাণগত বিশ্লেষণৰ গণনাত ব্যৱহাৰ কৰিলে, বৰ্ণালীয়ে প্ৰস্তুতিৰ স্থিৰতা পৰীক্ষাত সহায় কৰিলে, আৰু অশুদ্ধিৰ প্ৰফাইলৰ বাবে বিশুদ্ধতা আৰু নিৰ্দিষ্ট মানদণ্ড পৰ্যালোচনা কৰিবলগীয়া হ’লেও একে শৃংখলা প্ৰযোজ্য।

চৰ্ত উল্লেখ কৰা সাৰাংশ

এই তালিকাখন পৰীক্ষাগাৰৰ নথিৰ প্ৰাৰম্ভিক আৰ্হি হিচাপে ব্যৱহাৰ কৰক, পৰস্পৰৰ সলনি ব্যৱহাৰ কৰিব পৰা ধ্ৰুৱকৰ উৎস হিচাপে নহয়।

সেয়েহে মিথিলিন ব্লুৰ শোষণাংকৰ তৰংগদৈৰ্ঘ্যৰ উত্তৰটো চুটি, কিন্তু তাৰ পাদটীকা দীঘল। আপুনি যি দ্ৰৱত, যি ঘনত্বত জোখ লৈছে, সেই দ্ৰৱ আৰু ঘনত্বৰ সৈতে জোখা শীৰ্ষটো প্ৰতিবেদন কৰক। এই অভ্যাসে প্ৰায় 664 nm-ৰ পাতল জলীয় দ্ৰৱৰ এটা মানক ভুল সাৰ্বজনীন ধ্ৰুৱকলৈ ৰূপান্তৰিত হোৱাৰ পৰা ৰক্ষা কৰে।