মিথিলিন ব্লু আৰু Bartonella: গৱেষণাগাৰৰ ফলাফল আৰু ক্লিনিকেল প্ৰমাণৰ সীমা

কালচাৰ পাত্ৰ আৰু ৰোগীৰ ক্ষেত্ৰত একেটা শব্দ ব্যৱহাৰ হয়—সংক্ৰমণ—কিন্তু ধাৰণাটো একে নহয়। পাত্ৰত সংক্ৰমণ মানে আগাৰত থকা কলনিৰ সংখ্যা। ৰোগীৰ ক্ষেত্ৰত ইয়াৰ অৰ্থ হ'ল কোষ আৰু ৰক্তনলীৰ ভিতৰত থকা বেক্টেৰিয়া, তেজ আৰু কলাৰ মাজেৰে চলাচল কৰা ঔষধ, আৰু কামৰ এটা অংশ সম্পন্ন কৰা ৰোগ-প্ৰতিৰোধ ব্যৱস্থা। দুয়োটাক একে বুলি ভাবিলে গৱেষণাগাৰৰ এটা আকৰ্ষণীয় সংখ্যাগত ফলাফলক চিকিৎসা যেন লাগিবলৈ আৰম্ভ কৰে। পৃথক কৰি চালে সেই একেটা সংখ্যা প্ৰকৃততে যি, সেয়াই হৈ থাকে: পৰৱৰ্তী পৰীক্ষাটো কৰাৰ এটা কাৰণ।

মিথিলিন ব্লু আৰু Bartonella-ৰ এই পৰ্যালোচনাৰ সমগ্ৰ উদ্দেশ্যই হ'ল এই পাৰ্থক্য বজাই ৰখা। এটা গৱেষণা গোটৰ দুটা গৱেষণাগাৰভিত্তিক অধ্যয়নে বৃদ্ধি নোহোৱা অৱস্থাৰ Bartonella henselae-ৰ বিৰুদ্ধে মিথিলিন ব্লু পৰীক্ষা কৰিছিল। দুয়োটাই কাচ আৰু প্লাষ্টিকৰ পাত্ৰত শক্তিশালী কাৰ্যকলাপৰ কথা জনাইছিল। কোনোটোৱেই কোনো মানুহৰ ওপৰত পৰীক্ষা কৰা নাছিল।

গৱেষকসকলে স্থিৰ পৰ্যায় কিয় পৰীক্ষা কৰে

বেছিভাগ এণ্টিবায়'টিক পৰীক্ষাত বৃদ্ধি হৈ থকা কোষ ব্যৱহাৰ কৰা হয়। সেই আৰ্হিয়ে এটা অধিক কঠিন অৱস্থা বাদ দিয়ে: বিভাজন বন্ধ কৰা কোষ, যিবোৰে নিজৰ বৃদ্ধি হৈ থকা সমগোত্ৰীয় কোষক নিধন কৰা ঔষধ সহ্য কৰিব পাৰে।

Bartonella শৰীৰত টিকি থাকিব পাৰে, লোহিত ৰক্তকণিকা আৰু এণ্ডোথেলিয়েল কোষৰ ভিতৰতো। সেয়ে গৱেষণা গোটটোৱে প্ৰশ্ন কৰিছিল, স্থিৰ পৰ্যায়ত প্ৰৱেশ কৰাৰ পাছত B. henselae-ক কোনবোৰ অনুমোদিত ঔষধে নিধন কৰিব পাৰে। বৃদ্ধি হৈ থকা কোষৰ বিৰুদ্ধে কম MIC থাকিলেও তাৰ পৰা স্থিৰ পৰ্যায়ৰ কোষ নিধন হ'ব বুলি অনুমান কৰিব পৰা নগ'ল। ৰিফেম্পিনৰ MIC অতি কম আছিল, তথাপি ই স্থিৰ পৰ্যায়ৰ কোষ নিধনত দুৰ্বল আছিল; আনহাতে, অধিক MIC মান থকা যৌগবোৰে সেই কোষবোৰ ভালদৰে নিধন কৰিছিল। এনে ধৰণৰ গৱেষণা-পত্ৰ পঢ়াৰ এটা সাধাৰণ পদ্ধতি বিচৰা পাঠকে মিথিলিন ব্লুৰ গৱেষণা পঢ়াৰ নিৰ্দেশিকাত সেয়া পাব।

প্ৰথম বাছনি-পৰীক্ষা: Li আৰু সহকৰ্মীসকল, 2019

Antibiotics-ত প্ৰকাশিত 2019 চনৰ স্থিৰ-পৰ্যায়ৰ বাছনি-পৰীক্ষাত এটা মাত্ৰ ষ্ট্ৰেইন, B. henselae JK53, ব্যৱহাৰ কৰা হৈছিল। ইয়াক 10 percent ভ্ৰূণীয় গৰুৰ ছিৰামযুক্ত Schneider মাধ্যমত 37 C উষ্ণতা আৰু 5 percent CO2-ৰ পৰিৱেশত বৃদ্ধি কৰা হৈছিল। এদিনীয়া কালচাৰত মূলতঃ সিঁচৰতি হৈ থকা, বিভাজিত কোষ আছিল। পাঁচদিনীয়া কালচাৰক স্থিৰ পৰ্যায় হিচাপে ধৰা হৈছিল; ইয়াত প্ৰায় 10 to the 8th colony forming units per mL আছিল আৰু দৃশ্যমান কোষগুচ্ছ আছিল।

পৰীক্ষাত propidium iodide-ৰ সৈতে SYBR Green I ব্যৱহাৰ কৰা হৈছিল, আৰু জীৱিত কোষ তথা আইছ'প্ৰপানলেৰে নিধন কৰা কোষৰ মিশ্ৰণৰ সহায়ত ইয়াক মানাংকিত কৰা হৈছিল। মিথিলিন ব্লুৰ ৰং অতি গাঢ় হোৱা বাবে কাৰ্যকৰী বুলি ধৰা পৰা যৌগবোৰ অণুবীক্ষণৰ সহায়ত নিশ্চিত কৰা হৈছিল আৰু তাৰ পাছত অধিক কঠোৰ মূল্যায়ন-সূচক হিচাপে ৰক্ত-আগাৰত কলনি গণনা কৰা হৈছিল।

50 micromolar ঘনত্বত পৰীক্ষা কৰা 1,581 টা অনুমোদিত ঔষধৰ ভিতৰত, মিথিলিন ব্লুৰ পাছত প্লেট ৰিডাৰৰ জোখত 16 percent আৰু অণুবীক্ষণৰ জোখত 25 percent কোষ জীৱিত থাকিছিল। ডেপ্ট'মাইচিনৰ ক্ষেত্ৰত এই মান আছিল 21 percent, কেইবাটাও এজ'লৰ ক্ষেত্ৰত 22 ৰ পৰা 27 percent, জেণ্টামাইচিনৰ ক্ষেত্ৰত 32 percent, এৰিথ্ৰ'মাইচিনৰ ক্ষেত্ৰত 66 percent আৰু চিপ্ৰ'ফ্লক্সাচিনৰ ক্ষেত্ৰত 74 percent। ৰিডাৰৰ জোখত পাইৰভিনিয়াম পেম'ৱেট অধিক শক্তিশালী যেন দেখা গৈছিল, কিন্তু ইয়াৰ নিজা ফ্লুৰেছেন্সৰ বাবে অণুবীক্ষণৰ সহায়ত ইয়াৰ মান নিৰ্ধাৰণ কৰিব পৰা নগ'ল।

বৃদ্ধি হৈ থকা B. henselae-ৰ বিৰুদ্ধে মিথিলিন ব্লুৰ MIC আছিল 0.08 ৰ পৰা 0.16 micrograms per mL। পাঁচদিনীয়া স্থিৰ পৰ্যায়ৰ কোষক 5 micrograms per mL ঘনত্বত এদিন সংস্পৰ্শত ৰখাৰ পাছত কোনো কলনি ধৰা নপৰা স্তৰলৈ কলনিৰ সংখ্যা নামিছিল। পৰীক্ষিত ঘনত্বত ডেপ্ট'মাইচিন আৰু পাইৰভিনিয়াম পেম'ৱেটৰ ফলাফলো একে আছিল। পৃথক সময়-নিৰ্ভৰ নিধন পৰীক্ষাত 10 micrograms per mL ব্যৱহাৰ কৰা হৈছিল। এইবোৰ গৱেষণাগাৰত সংস্পৰ্শৰ মাত্ৰা, ঔষধৰ ড'জ নহয়; গৱেষণা-পত্ৰখনতো সেইদৰেই উল্লেখ কৰা হৈছে। মানুহৰ প্লাজমাত প্ৰায় 3.9 micrograms per mL শীৰ্ষ মানৰ এটা উদ্ধৃতি পত্ৰখনত কেৱল পটভূমিৰ তথ্য হিচাপেহে আছে। মিথিলিন ব্লুৰ ফাৰ্মাকোকাইনেটিক্সৰ সাৰাংশত প্লাজমাৰ সংখ্যাগত মানক কিয় কলাৰ মান হিচাপে ধৰিব নোৱাৰি, সেয়া ব্যাখ্যা কৰা হৈছে।

পত্ৰখনত দুটা সীমাবদ্ধতা স্পষ্টকৈ উল্লেখ কৰা হৈছে। কোনো বায়'ফিল্ম আৰ্হি নাছিল আৰু মিথিলিন ব্লুৰ কোনো সংমিশ্ৰণ পৰীক্ষা কৰা হোৱা নাছিল। পাঁচদিনীয়া কোষগুচ্ছবোৰ স্থিৰ পৰ্যায়ৰ তৰল কালচাৰৰ গুচ্ছ আছিল, বৈধতা নিশ্চিত কৰা বায়'ফিল্ম পৰীক্ষা নহয়। লেখকসকলে প্ৰাণীৰ ওপৰত পৰীক্ষা, সংমিশ্ৰণৰ পৰীক্ষা, বায়'ফিল্মৰ পৰীক্ষা আৰু আন Bartonella প্ৰজাতিৰ ওপৰত পৰীক্ষাৰ আহ্বান জনাইছিল।

সংমিশ্ৰণ আৰু বায়'ফিল্মৰ পৰা সংগৃহীত কোষ: Zheng আৰু সহকৰ্মীসকল, 2020

BMC Microbiology-ত প্ৰকাশিত 2020 চনৰ পৰৱৰ্তী অধ্যয়নত একেটা ষ্ট্ৰেইন আৰু মাধ্যম ব্যৱহাৰ কৰা হৈছিল, কিন্তু ছয়দিনীয়া স্থিৰ-পৰ্যায়ৰ কালচাৰ লোৱা হৈছিল আৰু প্ৰথম পত্ৰখনত নথকা দুটা বিষয় যোগ কৰা হৈছিল: দুটা ঔষধৰ সংমিশ্ৰণ আৰু বায়'ফিল্মৰ পৰা সংগৃহীত কোষৰ এটা আৰ্হি।

প্ৰতিটো একক ঔষধ একে 5 micrograms per mL ঘনত্বত 24 ঘণ্টা ব্যৱহাৰ কৰা হৈছিল। নিয়ন্ত্ৰণ গোটত প্ৰায় 2.8 times 10 to the 10th colony forming units per mL থকাৰ বিপৰীতে মিথিলিন ব্লুৰ পাছত 3.2 times 10 to the 4th colony forming units per mL বাকী আছিল। একে সময়বিন্দুত চিপ্ৰ'ফ্লক্সাচিন, জেণ্টামাইচিন আৰু নাইট্ৰ'ফিউৰাণ্ট'ইনৰ পাছত কম কলনি বাকী আছিল। এই ফলাফল 2019 চনৰ ফলাফলৰ পৰা পৃথক, য'ত একে ঘোষিত ঘনত্বত এদিনৰ পাছত কোনো কলনি ধৰা পৰা নাছিল। কালচাৰৰ বয়স, ঘনত্ব আৰু পৰিচালনা-পদ্ধতি পৃথক আছিল; সেয়ে নিধনৰ প্ৰৱণতা পুনৰ পোৱা গৈছিল যদিও তাৰ পৰিমাণ একে নাছিল। পৰীক্ষাভেদে হোৱা এই পৰিৱৰ্তনেই এটা কাৰণ, যাৰ বাবে মানক সুৰক্ষা আৰু পাৰস্পৰিক ক্ৰিয়াৰ পৰীক্ষাত গৱেষণাগাৰৰ নিধনক্ষমতাক ক্লিনিকেল প্ৰভাৱৰ পৰা পৃথককৈ ধৰা হয়।

সংমিশ্ৰণৰ বাছনি-পৰীক্ষাটোৱেই আটাইতকৈ বেছি উদ্ধৃত অংশ। প্ৰতিটো উপাদানৰ ঘনত্ব 5 micrograms per mL-ত স্থিৰ কৰা হৈছিল। এজিথ্ৰ'মাইচিনৰ সৈতে মিথিলিন ব্লু আৰু ৰিফেম্পিনৰ সৈতে মিথিলিন ব্লু—দুয়োটা সংমিশ্ৰণত 24 ঘণ্টাৰ পাছত স্থিৰ-পৰ্যায়ৰ কোনো কলনি ধৰা পৰা নাছিল। চিপ্ৰ'ফ্লক্সাচিনযুক্ত দুয়োটা ঔষধ-যুগলৰ ক্ষেত্ৰতো একেই হৈছিল। পৰীক্ষা কৰা 25 টা যুগলৰ ভিতৰত কেৱল এই চাৰিটাৰ ক্ষেত্ৰতহে এনে ফল পোৱা গৈছিল। কোনো আনুষ্ঠানিক ছিনাৰ্জি বিশ্লেষণ কৰা হোৱা নাছিল; সেয়ে সঠিক শব্দ হ'ল এই পৰিস্থিতিত সক্ৰিয় সংমিশ্ৰণ, প্ৰমাণিত ছিনাৰ্জি নহয়।

বায়'ফিল্ম পৰীক্ষাত ভাঙি পেলোৱা অপৰিণত বায়'ফিল্মৰ পৰা সংগ্ৰহ কৰা কোষ পৰীক্ষা কৰা হৈছিল, অক্ষত পৰিণত বায়'ফিল্মৰ ভিতৰলৈ ঔষধৰ প্ৰৱেশ পৰীক্ষা কৰা হোৱা নাছিল। কালচাৰ পাঁচদিন বৃদ্ধি কৰা হৈছিল, পাতল কৰি ৱেল-প্লেটত আৰু পাঁচদিন ৰখা হৈছিল, ক্ৰিষ্টেল ভায়'লেট ৰঞ্জনৰ সহায়ত নিশ্চিত কৰা হৈছিল, তাৰ পাছত ঔষধৰ সংস্পৰ্শলৈ অনাৰ আগতে চুঁচি সংগ্ৰহ কৰা হৈছিল। 5 micrograms per mL ঘনত্বত কেৱল মিথিলিন ব্লু ব্যৱহাৰ কৰিলে 6 নম্বৰ দিনত সংখ্যা 2.3 times 10 to the 2nd-লৈ নামিছিল। ই সৰ্বোত্তম একক ঔষধবোৰৰ অন্যতম আছিল, কিন্তু সংখ্যা শূন্য হোৱা নাছিল। মিথিলিন ব্লুযুক্ত দুয়োটা সংমিশ্ৰণত 6 নম্বৰ দিনৰ ভিতৰত সংখ্যা শূন্য হৈছিল; চিপ্ৰ'ফ্লক্সাচিনযুক্ত দুয়োটা সংমিশ্ৰণতো একেই হৈছিল।

এজন সতৰ্ক পাঠকে লক্ষ্য কৰিব পৰা সীমাবদ্ধতাবোৰ লেখকসকলেও উল্লেখ কৰিছিল: পুৰণি অক্ষত বায়'ফিল্মৰ সলনি চুঁচি সংগ্ৰহ কৰা অপৰিণত বায়'ফিল্ম; প্ৰতিটো ঔষধৰ নিজস্ব বাস্তৱসন্মত শীৰ্ষ ঘনত্বৰ সলনি সকলো ঔষধৰ বাবে এটা সুবিধাজনক ঘনত্ব; কেৱল এজিথ্ৰ'মাইচিন বা ৰিফেম্পিনক কেন্দ্ৰ কৰি বাছনি কৰা কেইটামান যুগল; এটা মাত্ৰ ষ্ট্ৰেইন; কোনো প্ৰাণী নাই; কোনো ৰোগী নাই। পাছত তিনিটা ঔষধৰ সংমিশ্ৰণৰ কাম প্ৰস্তাৱ কৰা হৈছিল, ফলাফল প্ৰকাশ কৰা হোৱা নাছিল।

অধ্যয়নৰ নক্সাৰ তুলনা

তালিকাখনেই এই প্ৰবন্ধৰ মূল কথাটো সংক্ষিপ্ত ৰূপত দেখুৱাইছে। শেষৰ স্তম্ভটোৰ বাওঁফালে থকা সকলোবোৰ কালচাৰভিত্তিক কাম। দুয়োখন পত্ৰৰ কোনো তথ্যই শেষৰ স্তম্ভটোত স্থান নাপায়।

Bartonella আৰু Borrelia একে নহয়

দুয়োখন পত্ৰতে লাইম ৰোগৰ স্পাইৰোকিট Borrelia burgdorferi-ৰ উল্লেখ আছে, কাৰণ ৰঞ্জকভিত্তিক পৰীক্ষাটো একেটা গৱেষণাগাৰত আগতে কৰা Borrelia-ৰ স্থিৰ-পৰ্যায়ৰ কামৰ পৰা আহিছিল। সেই কামতো মিথিলিন ব্লু আৰু ডেপ্ট'মাইচিন কাৰ্যকৰী বুলি ধৰা পৰিছিল। এই ইতিহাস উপযোগী পটভূমি, আৰু ভুলৰো এক সাধাৰণ উৎস।

Bartonella-ৰ কোনোখন পত্ৰৰ কোনো পৰীক্ষাতেই Borrelia-ক Bartonella-ৰ সৈতে একেলগে তুলনামূলকভাৱে পৰীক্ষা কৰা হোৱা নাই। জীৱ পৃথক, মাধ্যম পৃথক, ঘনত্ব পৃথক। তদুপৰি, Bartonella-ত মিথিলিন ব্লুৰ অনুমান কৰা কোষাৱৰণীয় প্ৰভাৱক অধিক অধ্যয়নৰ প্ৰয়োজন থকা এটা অনুমান বুলিয়েই উল্লেখ কৰা হৈছিল। এটা প্ৰজাতিৰ ফলাফল আন এটা প্ৰজাতিৰ ক্ষেত্ৰত প্ৰয়োগ কৰা উচিত নহয়, আৰু কোনোখন পত্ৰই পৰজীৱী সম্পৰ্কীয় ব্যাপক দাবী সমৰ্থন নকৰে। এই কাৰণেই Borrelia আৰু Bartonella-ৰ পাৰ্চিষ্টাৰ কোষৰ তুলনাত দুয়োটা গৱেষণা-সাহিত্য পৃথককৈ ৰখা হৈছে।

কালচাৰৰ ফলাফল কিয় চিকিৎসা-পদ্ধতিলৈ ৰূপান্তৰিত নহয়

মিথিলিন ব্লু আৰু bartonella-ৰ চিকিৎসা-পদ্ধতি বিচাৰি অনুসন্ধান কৰাৰ আগ্ৰহ বুজিব পাৰি। এই পত্ৰবোৰেই দেখুৱায় যে সেই শব্দগুচ্ছক কিনিবলগীয়া সামগ্ৰীৰ তালিকা হিচাপে নহয়, সতৰ্কতাৰ সংকেত হিচাপে কিয় ধৰা উচিত।

প্ৰথমতে, এটা ৱেলত 5 micrograms per mL মানে প্ৰেছক্ৰিপচন নহয়। ইয়াৰ সৈতে শোষণ, বিতৰণ, প্ৰ'টিনৰ সৈতে বন্ধন, কোষৰ ভিতৰলৈ প্ৰৱেশ বা সহনীয়তাৰ কোনো তথ্য জড়িত নাই। লেখকসকলে এণ্টিবায়'টিকৰ শীৰ্ষ ঘনত্ববোৰৰ এটা আনুমানিক গড় হিচাপে এই ঘনত্ব বাছিছিল আৰু কৈছিল যে ভৱিষ্যতৰ কামত প্ৰতিটো ঔষধ নিজৰ বাস্তৱসন্মত ঘনত্বত ব্যৱহাৰ কৰা উচিত।

দ্বিতীয়তে, শূন্য কলনি মানে সেই প্লেটিং পৰিস্থিতিত কোনো কলনি নাই, কলা জীৱাণুমুক্ত নহয়। পাৰ্চিষ্টাৰ কোষ, কোষৰ ভিতৰৰ বেক্টেৰিয়া আৰু নমুনা সংগ্ৰহৰ সীমাবদ্ধতা—এই সকলোবোৰ আগাৰ প্লেটৰ পৰিসৰৰ বাহিৰত থাকে।

তৃতীয়তে, এটা ৱেল জীৱাণুমুক্ত কৰা সংমিশ্ৰণ শৰীৰত বিফল হ'ব পাৰে বা ক্ষতি কৰিব পাৰে। এজিথ্ৰ'মাইচিনৰ সৈতে মিথিলিন ব্লু আৰু ৰিফেম্পিনৰ সৈতে মিথিলিন ব্লু হ'ল গৱেষণাগাৰৰ সংস্পৰ্শ-মাত্ৰাত পৰীক্ষা কৰা গৱেষণাগাৰৰ ঔষধ-যুগল। প্ৰাণীৰ ফাৰ্মাকোকাইনেটিক্স আৰু মানুহৰ নিয়ন্ত্ৰিত অধ্যয়নৰ তথ্য অবিহনে কোনো ড'জ, কোনো সময়সীমা আৰু কোনো লাভ-বিপদৰ অনুপাত নিৰ্ধাৰিত নাই। বিকল্প বিবেচনা কৰা যিকোনো ব্যক্তিয়ে চিকিৎসকৰ সৈতে সেইবোৰ আলোচনা কৰা উচিত আৰু পাত্ৰৰ তথ্যৰ পৰা কোনো সিদ্ধান্ত লোৱাৰ আগতে মিথিলিন ব্লুৰ ব্যৱহাৰত কেতিয়া চিকিৎসকৰ তত্ত্বাৱধানৰ প্ৰয়োজন হয়, সেয়া পৰ্যালোচনা কৰা উচিত।

এই পত্ৰবোৰে সমৰ্থন কৰা সীমিত সিদ্ধান্তটো হ'ল: মিথিলিন ব্লুৰ বৃদ্ধি নোহোৱা B. henselae JK53-ৰ বিৰুদ্ধে পৰীক্ষাগাৰত পুনৰুৎপাদনযোগ্য কাৰ্যকলাপ আছে, দুটা ঔষধৰ গৱেষণাগাৰভিত্তিক সংমিশ্ৰণতো আছে; সংমিশ্ৰণ আৰু বায়'ফিল্মৰ পৰা সংগৃহীত কোষৰ আটাইতকৈ শক্তিশালী ফলাফল 2020 চনৰ অধ্যয়নৰ পৰা আহিছে। মানুহৰ বাৰ্টনেল'ছিছৰ ক্ষেত্ৰত সেই কাৰ্যকলাপৰ কোনো তাৎপৰ্য আছে নে নাইকে ধৰি বাকী সকলো এতিয়াও অপৰীক্ষিত।