EMB agar àti MacConkey agar: yíyan àti ìtumọ̀ media

Akẹ́kọ̀ọ́ kan fi sample omi kan náà ṣe streak lórí plate méjì. Lórí ọ̀kan, àwọn colony dúdú tí ó ní ìmọ́lẹ̀ metallic aláwọ̀ ewé farahàn. Lórí èkejì, àwọn colony pupa didán tí halo tí kò mọ́ kedere yí ká farahàn. Láti tube kan náà ni wọ́n ti inoculate plate méjèèjì, wọ́n incubate wọn lẹ́gbẹ̀ẹ́ ara wọn, wọ́n sì kà wọ́n ní wákàtí kan náà. Akẹ́kọ̀ọ́ náà béèrè plate wo ni ó tọ́.

Plate méjèèjì tọ́. Wọ́n ń dáhùn ìbéèrè tó yàtọ̀. Ìdàrúdàpọ̀ máa ń wá láti inú fífi media méjèèjì ṣe bí ẹni pé wọ́n lè rọ́pò ara wọn gẹ́gẹ́ bí screen fún bacteria inú ìfun. Wọ́n ní ète kan náà, èyí ni láti yan àwọn organism enteric Gram negative àti láti yà lactose fermenter sọ́tọ̀ kúrò lọ́dọ̀ nonfermenter, ṣùgbọ́n wọ́n ń ṣe ète yẹn pẹ̀lú kemistri tó yàtọ̀ àti ọ̀nà ìtumọ̀ ojú tó yàtọ̀. Nígbà tí o bá lóye àwọn ìlànà méjèèjì tó wà ní abẹ́ rẹ̀, yíyan plate àti kíkà colony máa di ohun àṣà.

Ìdáhùn kúkúrú

EMB agar ń lo dye méjì, eosin Y àti methylene blue, tí wọ́n ń ṣe iṣẹ́ méjì lẹ́ẹ̀kan náà: wọ́n dín ìdagbasoke Gram positive kù, wọ́n sì precipitate yí àwọn producer acid tó lágbára ká láti dá colony dúdú sílẹ̀, pẹ̀lú metallic green sheen tó jẹ́ àpẹẹrẹ ìbílẹ̀ fún Escherichia coli. MacConkey agar yà àwọn iṣẹ́ náà sọ́tọ̀: bile salts pẹ̀lú crystal violet ń dín Gram positive kù, lactose ń pèsè ohun tí fermentation máa lò, neutral red sì ń fi acid hàn gẹ́gẹ́ bí colony pupa tàbí pupa-fẹẹrẹ̀. Bí iṣẹ́ náà bá jẹ́ ìfihàn presumptive E. coli tó hàn gbangba, EMB ní àǹfààní tirẹ̀. Bí iṣẹ́ náà bá jẹ́ yíyan fermenter lactose ní kedere sí pupa tàbí aláwọ̀-kankan láti ọ̀dọ̀ nonfermenter, pàápàá nínú workflow stool tàbí urine, MacConkey sábà máa rọrùn láti kà. Kò sí plate kankan nínú méjèèjì tó lè dá organism mọ̀ nípasẹ̀ àwọ̀ nìkan.

EMB: dye tí ń yan tí ó sì ń jabo lẹ́ẹ̀kan náà

Èrò EMB kó selection àti indication sínú molecule kan náà. ASM eosin methylene blue agar protocol ṣàpèjúwe EMB gẹ́gẹ́ bí media àṣàyàn àti ìyàtọ̀, níbi tí dye méjèèjì ti ń dènà ọ̀pọ̀ organism Gram positive, nígbà tí fermentation lactose ń mú kí dye wọ inú colony kí ó sì precipitate. Formulation Levine àtẹ̀jáde kan ní peptone, lactose, phosphate, eosin Y, methylene blue, àti agar, gẹ́gẹ́ bí a ṣe ṣe àkọsílẹ̀ rẹ̀ nínú FDA BAM method for Levine EMB agar. Ṣàkíyèsí pé àwọn recipe EMB àtijọ́ kan máa ń fi sucrose kún lactose, nígbà tí Levine EMB ní lactose láìsí sucrose, nítorí náà ṣe àkọsílẹ̀ formulation tí laboratory rẹ ń tọ́jú.

Kíkà EMB túmọ̀ sí kíkà bí dye ṣe ń huwa. Fermentation lactose tó lágbára máa ń ṣẹ̀dá acid tó pọ̀ tó láti fa precipitation dye tó pọ̀, tó ń fún E. coli ní àárín colony dúdú-búlú, àti ní àpẹẹrẹ ìbílẹ̀, metallic green sheen ní ìmọ́lẹ̀ tó reflected. Àwọn fermenter tó rọrùn sí i bí Enterobacter àti Klebsiella sábà máa ń dàgbà gẹ́gẹ́ bí colony mucoid pupa sí purple láìsí sheen yẹn. Àwọn nonfermenter bí Salmonella, Shigella, àti Proteus sábà máa ń dàgbà gẹ́gẹ́ bí colony aláwọ̀-kankan tàbí translucent nítorí wọn kò ṣe acid tó pọ̀ tó láti precipitate dye náà. Gram positive sábà máa ń dín kù, bó tilẹ̀ jẹ́ pé ìdènà yìí kì í pé, ó sì lè yàtọ̀ gẹ́gẹ́ bí strain àti product. Kemistri pípèsè dye ní kíkún, pẹ̀lú ìdí tí methylene blue fi ń huwa gẹ́gẹ́ bí cationic stain láti ìbẹ̀rẹ̀, yẹ kí a jíròrò lọ́tọ̀ nípa formulation dye, àti àyíká microscopy gbogbogbòò wà nínú atlas àwọn ọ̀nà staining. Àpilẹ̀kọ yìí dúró lórí yíyan plate àti kíkà rẹ̀.

Àwòrán tó wà lókè jẹ́ àpẹẹrẹ. Ó fi ọ̀nà ìtumọ̀ ojú tí o yẹ kí o retí hàn: colony dúdú tó ní sheen, pẹ̀lú irú mucoid pupa àti irú tó fẹ́rẹ̀ẹ́ funfun lórí EMB, ní ìfiwéra pẹ̀lú irú pupa àti irú tó fẹ́rẹ̀ẹ́ funfun lórí MacConkey. Lo ó láti kọ́ pattern náà, lẹ́yìn náà jẹ́rìí sí gbogbo ìtumọ̀ nípasẹ̀ photographed controls àti product insert fún medium gangan tó wà lórí bench rẹ.

MacConkey: àwọn iṣẹ́ tí a yà sọ́tọ̀, òfin ìtumọ̀ ojú tó rọrùn

Èrò MacConkey fi iṣẹ́ kọ̀ọ̀kan sí ingredient tó yàtọ̀. ASM MacConkey agar protocol fi framing àṣàyàn àti ìyàtọ̀ kan náà hàn, àti FDA BAM method for MacConkey agar ṣe àtòjọ àwọn apá tó ń ṣiṣẹ́: peptones, lactose, bile salts, salt, neutral red, crystal violet, àti agar. Bile salts pẹ̀lú crystal violet ń yan lòdì sí Gram positive. Lactose ń pèsè substrate fún fermentation. Neutral red ń ṣiṣẹ́ gẹ́gẹ́ bí reporter pH, ó ń yí sí pupa níbi tí acid bá ti ṣẹ̀dá, nígbà míì pẹ̀lú bile precipitate yí àwọn fermenter tó lágbára ká.

Òfin kíkà rẹ̀ mọ́ọ̀mọ́ rọrùn: pupa túmọ̀ sí lactose fermenter, aláwọ̀-kankan tàbí pale túmọ̀ sí nonfermenter. E. coli máa ń hàn pupa sí red, ó sì sábà ní halo bile precipitate. Klebsiella àti Enterobacter máa ń hàn pupa, wọ́n sì sábà jẹ́ mucoid nítorí capsule wọn. Salmonella, Shigella, Proteus, àti ọ̀pọ̀ rod Gram negative mìíràn máa ń hàn aláwọ̀-kankan. Àǹfààní míì ṣe pàtàkì nínú teaching labs: bile salts sábà máa ń dín Proteus swarming kù, nítorí náà ó rọrùn sí i láti gba colony tí a yà sọ́tọ̀ lórí MacConkey ju lórí media tí kì í ṣe selective, bó tilẹ̀ jẹ́ pé ìdènà náà kì í pé, àwọn alternative tí kò ní salt sì wà níbi tí iṣakoso swarming bá jẹ́ ohun pàtàkì jù.

Ìdí molecular tí àwọn dye fi ń huwa báyìí dá lórí charge àti structure. Methylene blue jẹ́ cationic phenothiazine dye tí structure àti properties rẹ̀ ṣàlàyé affinity rẹ̀ fún bacterial surface acidic, èyí sì ni affinity kan náà tó ń ṣiṣẹ́ nígbà tí ó precipitate ní acid zones lórí EMB.

Àfiwé ní ìwò kan

Ka table náà gẹ́gẹ́ bí ìlànà ìpinnu. Nígbà tí exercise bá fẹ́ kí àwọn akẹ́kọ̀ọ́ rí gradient ti agbára fermentation pẹ̀lú endpoint kan tó hàn gbangba, EMB máa fi í hàn. Nígbà tí exercise bá fẹ́ yíyan binary tó yara ṣáájú biochemical confirmation, MacConkey máa fi í hàn.

Medium wo fún sample wo

Fún exercise omi tí ète rẹ̀ jẹ́ presumptive fecal coliform tàbí ìdámọ̀ E. coli, EMB wúlò nítorí sheen rẹ̀ yàtọ̀ ní ojú. MacConkey tún ń ṣiṣẹ́ fún enteric Gram negative, ó sì ní ìtàn lílò nínú idanwo omi, ṣùgbọ́n kò sí plate kankan nínú méjèèjì tó rọ́pò regulatory water method, èyí tí ó lè pàṣẹ media bí modified mTEC tàbí MI gẹ́gẹ́ bí test náà. Ṣàyẹ̀wò method tí laboratory rẹ gbọ́dọ̀ tẹ̀lé.

Fún separation irú stool ti fermenter kúrò lọ́dọ̀ nonfermenter, MacConkey ni gbogbogbòò wúlò jù láàárín méjèèjì. Iṣẹ́ stool tó wúlò fún Salmonella tàbí Shigella sábà máa ń fi enteric media tó selective sí i kún un bí XLD tàbí Hektoen enteric dípò fífi gbogbo ìgbẹ́kẹ̀lé sí MacConkey nìkan.

Fún teaching irú urine tó ń fara wé clinical workflow, darapọ̀ MacConkey mọ́ blood agar. MacConkey ń pèsè yíyan Gram negative ní kutukutu nígbà tí blood agar ń gba àwọn organism tí MacConkey dín kù. Pairing yìí jẹ́ ohun tó wọ́pọ̀ nínú clinical description ti urine culture setup.

Fún teaching concept péré, lo méjèèjì. EMB ń kọ́ pé agbára fermentation ṣe pàtàkì àti pé molecule kan lè ṣe iṣẹ́ méjì. MacConkey ń kọ́ modular design: selector, substrate, àti reporter tí a yà sọ́tọ̀. Àwọn akẹ́kọ̀ọ́ tí wọ́n streak E. coli tí a mọ̀, Klebsiella aerogenes tí a mọ̀, àti Salmonella tí a mọ̀ lẹ́gbẹ̀ẹ́ ara wọn lórí media méjèèjì kì í sábà dárúkọ ọ̀nà méjèèjì pọ̀ mọ́ lẹ́yìn náà.

Àwọn àṣìṣe kíkà tí ń tún ara wọn ṣe ní gbogbo term

Àṣìṣe tó wọ́pọ̀ jù ni dídá organism mọ̀ nípasẹ̀ àwọ̀ nìkan. Pupa lórí MacConkey lè jẹ́ E. coli, Klebsiella, Enterobacter, tàbí fermenter mìíràn. Aláwọ̀-kankan lè jẹ́ Salmonella, Shigella, Proteus, Pseudomonas, tàbí nonfermenter mìíràn. Àwọ̀ jẹ́ screening phenotype tó ń tọ́ka sí confirmatory work bí Gram stain, oxidase, biochemical panels, tàbí instrument identification; kì í ṣe orúkọ species.

Àṣìṣe kejì ni fífi ìtumọ̀ tó pọ̀ sí sheen tí kò sí. Àwọn colony E. coli gidi kan, pàápàá àwọn tí a yà sọ́tọ̀, lè ṣe metallic sheen díẹ̀ tàbí kó má ṣe é rárá lórí EMB. Àìsí sheen kò túmọ̀ sí pé E. coli kò sí, bẹ́ẹ̀ sì ni wíwà sheen kò fi hàn pé ó dájú pé E. coli ni. Ka sheen gẹ́gẹ́ bí presumptive clue.

Àṣìṣe kẹta ni fífi plate tí ọjọ́ wọn yàtọ̀ wé ara wọn. Àwọn delayed lactose fermenter lè yí sí pupa lórí MacConkey lẹ́yìn incubation tó pé, èyí sì ń jẹ́ kí ìyàtọ̀ kedere láàárín fermenter àti nonfermenter má ṣe mọ́. Ka ní wákàtí tí laboratory pàṣẹ, kí o sì ṣe àkọsílẹ̀ incubation time pẹ̀lú result.

Àṣìṣe kẹrin ni kíkà mixed growth gẹ́gẹ́ bí organism kan. Colony pupa lẹ́gbẹ̀ẹ́ colony aláwọ̀-kankan ń ṣàkọsílẹ̀ phenotype méjì, kì í ṣe intermediate. Yan colony tí a yà sọ́tọ̀ dáadáa, kí o sì ṣiṣẹ́ pẹ̀lú morphotype kọ̀ọ̀kan lọ́tọ̀. Texture mucoid tún ní ìdẹkùn kan náà: Klebsiella àti Enterobacter méjèèjì lè dà bí mucoid, nítorí náà capsule nìkan kì í pinnu orúkọ. Organism tí a máa ń kọ́ tẹ́lẹ̀ gẹ́gẹ́ bí Enterobacter aerogenes ni a ti classify báyìí gẹ́gẹ́ bí Klebsiella aerogenes, èyí ló ṣàlàyé ìdí tí chart àtijọ́ àti label tuntun fi dà bí ẹni pé wọ́n ń tako ara wọn.

Controls àti òfin ìparí

Ṣe photographed tàbí fresh controls ní gbogbo session: E. coli fún reaction fermenter tó lágbára, Klebsiella aerogenes fún mucoid fermentation láìsí classic sheen, strain Salmonella fún reaction nonfermenter aláwọ̀-kankan, àti Staphylococcus aureus láti jẹ́rìí sí Gram positive suppression lórí product gangan tí o ń lò. Bá strain numbers àti acceptance criteria mu pẹ̀lú manufacturer insert, nítorí selectivity máa ń yí padà pẹ̀lú iye bile, crystal violet, àti dye.

Rántí gbólóhùn kan ní bench. EMB ń lo dye tí ó ń yan tí ó sì ń sọ ohun tó ṣẹlẹ̀ lẹ́ẹ̀kan náà, èyí tó ń fúnni ní àmì E. coli tó hàn gbangba ṣùgbọ́n kíkà rẹ̀ rọrùn díẹ̀ láti túmọ̀. MacConkey yà selection kúrò lọ́dọ̀ reporting, èyí tó ń fúnni ní yíyan pupa sí pale tó mọ́ kedere ṣùgbọ́n pẹ̀lú àlàyé fermentation tó kéré sí i. Yan medium tí concept rẹ̀ bá ìbéèrè mu, jẹ́rìí sí àwọ̀ pẹ̀lú test tó yẹ, àwọn plate méjèèjì yóò sì dáwọ́ ìdíje dúró, wọ́n á bẹ̀rẹ̀ sí í ṣiṣẹ́ pọ̀.