Búlú mẹtilínì àti Bartonella: àwọn àwárí yàrá ìdánwò àti ààlà ẹ̀rí ìwádìí lórí aláìsàn

Abọ́ ìgbìn bakitéríà àti aláìsàn ní ọ̀rọ̀ kan tí a ń lò fún àwọn méjèèjì, àkóràn, ṣùgbọ́n ohun tí ọ̀rọ̀ náà túmọ̀ sí kò jẹ́ ọ̀kan náà. Nínú abọ́ náà, àkóràn jẹ́ iye àwọn kólónì lórí agar. Nínú aláìsàn, ó jẹ́ bakitéríà nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì àti iṣan ẹ̀jẹ̀, àwọn oògùn tí ń rìn nínú ẹ̀jẹ̀ àti àsopọ̀ ara, àti ètò ààbò ara tí ń ṣe apá kan lára iṣẹ́ náà. Bí a bá da àwọn méjèèjì pọ̀, iye kan tó yanilẹ́nu nínú yàrá ìdánwò yóò bẹ̀rẹ̀ sí dà bí ìtọ́jú. Bí a bá yà wọ́n sọ́tọ̀, iye kan náà yóò jẹ́ ohun tí ó jẹ́ gan-an: ìdí láti ṣe ìdánwò tó kàn.

Ìyàsọ́tọ̀ yẹn ni gbogbo iṣẹ́ àtúnyẹ̀wò yìí nípa búlú mẹtilínì àti Bartonella. Ìwádìí yàrá ìdánwò méjì láti ọ̀dọ̀ ẹgbẹ́ ìwádìí kan dán búlú mẹtilínì wò lòdì sí Bartonella henselae ní àwọn ipò tí kò ti ń dàgbà. Àwọn méjèèjì ròyìn ìṣe tó lágbára nínú gíláàsì àti pilásítíkì. Kò sí èyíkéyìí tí ó dán an wò lórí ènìyàn.

Ìdí tí àwọn olùwádìí fi ń dán ìpele tí ìdàgbàsókè ti dúró wò

Ọ̀pọ̀ ìdánwò oògùn apakòkòrò máa ń lo àwọn sẹ́ẹ̀lì tí ń dàgbà. Àwòṣe yẹn kò kárí ipò tó nira jù: àwọn sẹ́ẹ̀lì tí ó ti dáwọ́ pípín dúró, tí wọ́n sì lè fara da àwọn oògùn tí ń pa àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹlẹgbẹ́ wọn tí ń dàgbà.

Bartonella lè dúró pẹ́ nínú ara, títí kan inú àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹ̀jẹ̀ pupa àti àwọn sẹ́ẹ̀lì endothelium. Nítorí náà, ẹgbẹ́ náà béèrè pé èwo nínú àwọn oògùn tí a ti fọwọ́ sí lè pa B. henselae lẹ́yìn tí ó bá ti wọ ìpele tí ìdàgbàsókè ti dúró. MIC kékeré lòdì sí àwọn sẹ́ẹ̀lì tí ń dàgbà kò sọ tẹ́lẹ̀ bí pípa àwọn sẹ́ẹ̀lì tí ìdàgbàsókè wọn ti dúró yóò ṣe rí. Rifampin ní MIC tó kéré gan-an, síbẹ̀ kò pa àwọn sẹ́ẹ̀lì tí ìdàgbàsókè wọn ti dúró dáadáa, nígbà tí àwọn agbo tó ní iye MIC tó ga jù pa wọ́n dáadáa. Àwọn òǹkàwé tí wọ́n fẹ́ ọ̀nà gbogbogbò fún irú àpilẹ̀kọ ìwádìí yìí yóò rí i nínú ìtọ́sọ́nà fún kíkà ìwádìí búlú mẹtilínì.

Àyẹ̀wò àkọ́kọ́: Li àti àwọn ẹlẹgbẹ́ rẹ̀, 2019

Àyẹ̀wò ìpele tí ìdàgbàsókè ti dúró ti 2019 nínú Antibiotics lo ẹ̀yà kan ṣoṣo, B. henselae JK53, tí a gbin nínú ohun èlò ìgbìn Schneider pẹ̀lú 10 percent omi ara ọmọ màlúù inú oyún ní 37 C pẹ̀lú 5 percent CO2. Àwọn ìgbìn ọlọ́jọ́ kan jẹ́, ní ọ̀pọ̀ jù lọ, àwọn sẹ́ẹ̀lì tí ó tú ká tí wọ́n sì ń pín. Àwọn ìgbìn ọlọ́jọ́ márùn-ún, tí iye wọn fẹ́rẹ̀ẹ́ jẹ́ 10 sí agbára 8 ẹyọ tí ń dá kólónì sílẹ̀ fún mL, ni a kà sí ìpele tí ìdàgbàsókè ti dúró, wọ́n sì ní àwọn àkójọpọ̀ tí ojú lè rí.

Ìdánwò náà lo SYBR Green I pẹ̀lú propidium iodide, a sì ṣàtúnṣe ìwọ̀n rẹ̀ nípa fífi wé àpapọ̀ àwọn sẹ́ẹ̀lì alààyè àti àwọn sẹ́ẹ̀lì tí isopropanol ti pa. Nítorí pé búlú mẹtilínì ní àwọ̀ tó lágbára, a fi maikirosikopu jẹ́rìí sí àwọn èsì tó fi ìṣe hàn, lẹ́yìn náà a sì lo kíkà àwọn kólónì lórí agar ẹ̀jẹ̀, tó jẹ́ àbájáde ìwọ̀n tó muna jù.

Lára àwọn oògùn 1,581 tí a ti fọwọ́ sí tí a dán wò ní 50 micromolar, búlú mẹtilínì fi 16 percent sílẹ̀ láàyè nípasẹ̀ ẹ̀rọ kíkà àwo àti 25 percent nípasẹ̀ maikirosikopu. Daptomycin ní 21 percent, àwọn azole mélòó kan ní 22 sí 27 percent, gentamicin ní 32 percent, erythromycin ní 66 percent, ciprofloxacin sì ní 74 percent. Pyrvinium pamoate dà bí èyí tó lágbára jù lórí ẹ̀rọ kíkà, ṣùgbọ́n a kò lè fi maikirosikopu díwọ̀n rẹ̀ nítorí ìtànṣán ìmọ́lẹ̀ tirẹ̀.

Lòdì sí B. henselae tí ń dàgbà, MIC búlú mẹtilínì jẹ́ 0.08 sí 0.16 micrograms per mL. Lòdì sí àwọn sẹ́ẹ̀lì ọlọ́jọ́ márùn-ún tí ìdàgbàsókè wọn ti dúró ní 5 micrograms per mL, iye kólónì dín kù débi pé kò sí kólónì tí a lè ṣàwárí lẹ́yìn ọjọ́ kan tí wọ́n fi fara kan oògùn náà, gẹ́gẹ́ bí daptomycin àti pyrvinium pamoate ṣe rí ní àwọn ìfojúsùn tí a fi dán wọn wò. Ìdánwò pípa bakitéríà bí àkókò ṣe ń lọ tí a ṣe lọ́tọ̀ lo 10 micrograms per mL. Àwọn wọ̀nyẹn jẹ́ ìpele ìfarakanra ní yàrá ìdánwò, kì í ṣe ìwọ̀n oògùn tí a ó lò, àpilẹ̀kọ náà sì sọ wọ́n bẹ́ẹ̀. Iye ìfojúsùn tó ga jù nínú pilasima ènìyàn tí ó sún mọ́ 3.9 micrograms per mL, tí a tọ́ka sí, farahàn nínú àpilẹ̀kọ náà gẹ́gẹ́ bí àlàyé abẹ́lẹ̀ nìkan. Àkótán nípa bí ara ṣe ń gba búlú mẹtilínì, ṣe pín in, ṣe yí i padà, àti ṣe yọ ọ́ jáde ṣàlàyé ìdí tí a kò fi lè ka iye kan nínú pilasima sí iye kan nínú àsopọ̀ ara.

Ààlà méjì hàn kedere nínú àpilẹ̀kọ náà. Kò sí àwòṣe biofilm, kò sì sí ìdánwò àpapọ̀ búlú mẹtilínì. Àwọn àkójọpọ̀ ọlọ́jọ́ márùn-ún jẹ́ ìdìpọ̀ nínú omi ìgbìn tí ìdàgbàsókè ti dúró, kì í ṣe ìdánwò biofilm tí a ti fìdí rẹ̀ múlẹ̀. Àwọn òǹkọ̀wé béèrè fún ìwádìí lórí ẹranko, ìwádìí àpapọ̀ oògùn, ìwádìí biofilm, àti ìdánwò lórí àwọn irú Bartonella mìíràn.

Àwọn àpapọ̀ àti àwọn sẹ́ẹ̀lì tí a mú láti biofilm: Zheng àti àwọn ẹlẹgbẹ́ rẹ̀, 2020

Ìwádìí ìtẹ̀lé ti 2020 nínú BMC Microbiology lo ẹ̀yà àti ohun èlò ìgbìn kan náà, ṣùgbọ́n ó yí padà sí àwọn ìgbìn ọlọ́jọ́ mẹ́fà tí ìdàgbàsókè ti dúró, ó sì fi ohun méjì tí àpilẹ̀kọ àkọ́kọ́ kò ní kún un: àpapọ̀ oògùn méjì àti àwòṣe àwọn sẹ́ẹ̀lì tí a mú láti biofilm.

Fún àwọn oògùn kọ̀ọ̀kan ní ìfojúsùn kan náà ti 5 micrograms per mL fún wákàtí 24, búlú mẹtilínì fi 3.2 ìgbà 10 sí agbára 4 ẹyọ tí ń dá kólónì sílẹ̀ fún mL sílẹ̀, ní ìfiwéra pẹ̀lú ẹgbẹ́ àfiwé tí iye rẹ̀ fẹ́rẹ̀ẹ́ jẹ́ 2.8 ìgbà 10 sí agbára 10. Ciprofloxacin, gentamicin, àti nitrofurantoin fi àwọn kólónì díẹ̀ sí i sílẹ̀ ní àkókò kan náà. Èyí yàtọ̀ sí èsì 2019, níbi tí ìpele kan náà tí a dárúkọ kò ti fi kólónì kankan tí a lè ṣàwárí sílẹ̀ lẹ́yìn ọjọ́ kan. Ọjọ́ orí ìgbìn, bí àwọn sẹ́ẹ̀lì ṣe pọ̀ tó, àti bí a ṣe mú wọn yàtọ̀, nítorí náà a lè tún rí pípa náà ní ọ̀nà kan náà, ṣùgbọ́n kì í ṣe ní ìwọ̀n kan náà. Ìyípadà yìí láti ìdánwò kan sí òmíràn jẹ́ ọ̀kan lára àwọn ìdí tí àwọn àyẹ̀wò ààbò àti ìbáṣepọ̀ oògùn tí a máa ń ṣe fi ka agbára oògùn ní yàrá ìdánwò sí ohun tí ó yàtọ̀ sí ipa rẹ̀ lórí aláìsàn.

Àyẹ̀wò àpapọ̀ oògùn ni apá tí a sábà máa ń tọ́ka sí jù. A ṣètò gbogbo èròjà sí 5 micrograms per mL. Àpapọ̀ azithromycin àti búlú mẹtilínì, àti àpapọ̀ rifampin àti búlú mẹtilínì, kò fi kólónì kankan tí a lè ṣàwárí ní ìpele tí ìdàgbàsókè ti dúró sílẹ̀ ní wákàtí 24; bẹ́ẹ̀ náà ni àwọn àpapọ̀ ciprofloxacin méjèèjì. Àwọn mẹ́rin wọ̀nyẹn nìkan ló ṣe bẹ́ẹ̀ lára àwọn àpapọ̀ 25 tí a dán wò. A kò ṣe ìtúpalẹ̀ ìfọwọ́sowọ́pọ̀ tó ń mú agbára pọ̀ sí i ní ọ̀nà ìlànà, nítorí náà ọ̀rọ̀ tó tọ́ ni àpapọ̀ tó ní ìṣe lábẹ́ àwọn ipò wọ̀nyí, kì í ṣe ìfọwọ́sowọ́pọ̀ tó ń mú agbára pọ̀ sí i tí a ti fìdí rẹ̀ múlẹ̀.

Ìdánwò biofilm dán àwọn sẹ́ẹ̀lì tí a mú láti biofilm tuntun tí a ti tú ká wò, kì í ṣe bí oògùn ṣe wọ inú biofilm tí ó ti dàgbà tí kò sì bàjẹ́. A gbin àwọn bakitéríà fún ọjọ́ márùn-ún, a fi omi kún wọn láti dín ìfojúsùn wọn kù sínú àwọn àwo tí ó ní ihò kéékèèké fún ọjọ́ márùn-ún míì, a fi fífi crystal violet kun wọn jẹ́rìí sí wọn, lẹ́yìn náà a fọ́ wọn kúrò lórí àwo kí a tó jẹ́ kí wọ́n fara kan oògùn. Ní 5 micrograms per mL, búlú mẹtilínì nìkan dín iye náà kù sí 2.3 ìgbà 10 sí agbára 2 nígbà tó di ọjọ́ 6, ó sì wà lára àwọn oògùn kọ̀ọ̀kan tó ṣe dáadáa jù, ṣùgbọ́n iye náà kò jẹ́ òdo. Àwọn àpapọ̀ búlú mẹtilínì méjèèjì dé òdo nígbà tó di ọjọ́ 6, bẹ́ẹ̀ náà ni àwọn àpapọ̀ ciprofloxacin méjèèjì.

Àwọn òǹkọ̀wé tọ́ka sí àwọn ààlà kan náà tí òǹkàwé tó fara balẹ̀ yóò rí: biofilm tuntun tí a fọ́ kúrò dípò biofilm àtijọ́ tí kò bàjẹ́, ìfojúsùn kan tó rọrùn fún gbogbo oògùn dípò ìfojúsùn tó ga jù tí oògùn kọ̀ọ̀kan lè ní ní ipò gidi, àwọn àpapọ̀ tí a yàn nìkan tí azithromycin tàbí rifampin jẹ́ àárín wọn, ẹ̀yà kan ṣoṣo, kò sí ẹranko, kò sí aláìsàn. A dábàá ìwádìí àpapọ̀ oògùn mẹ́ta fún ọjọ́ iwájú; a kò ròyìn pé a ti ṣe é.

Ìfiwéra ètò ìwádìí

Tábìlì náà ṣàkótán kókó àpilẹ̀kọ yìí. Gbogbo ohun tí ó wà ní òsì òpó ìkẹyìn jẹ́ iṣẹ́ ìgbìn bakitéríà. Kò sí ohun kan nínú àpilẹ̀kọ méjèèjì tí ó wà nínú òpó ìkẹyìn náà.

Bartonella kì í ṣe Borrelia

Àwọn àpilẹ̀kọ méjèèjì mẹ́nuba Borrelia burgdorferi, bakitéríà oníyípo tí ó ń fa àrùn Lyme, nítorí pé ìdánwò àwọ̀ náà wá láti iṣẹ́ ìṣáájú lórí Borrelia ní ìpele tí ìdàgbàsókè ti dúró ní yàrá ìdánwò kan náà, níbi tí búlú mẹtilínì àti daptomycin ti tún fi ìṣe hàn. Ìtàn yẹn jẹ́ àlàyé abẹ́lẹ̀ tó wúlò, ó sì tún jẹ́ orísun àṣìṣe tí ó wọ́pọ̀.

Kò sí ìdánwò kan nínú èyíkéyìí lára àwọn àpilẹ̀kọ Bartonella tí ó dán Borrelia àti Bartonella wò lẹ́gbẹ̀ẹ́ ara wọn. Àwọn ẹ̀dá náà yàtọ̀, àwọn ohun èlò ìgbìn yàtọ̀, àwọn ìfojúsùn yàtọ̀, a sì sọ pé ipa tí a rò pé búlú mẹtilínì ní lórí awọ sẹ́ẹ̀lì Bartonella jẹ́ àròjinlẹ̀ tí ó nílò ìwádìí sí i. A kò gbọ́dọ̀ gbé àwọn èsì láti irú ẹ̀dá kan sí òmíràn, kò sì sí èyíkéyìí lára àwọn àpilẹ̀kọ náà tí ó ṣe àtìlẹ́yìn fún àwọn ìsọ̀rọ̀ gbogbogbò nípa àwọn ẹ̀dá afàsẹ́yìn. Ìfiwéra àwọn sẹ́ẹ̀lì Borrelia àti Bartonella tó lè dúró pẹ́ láìka oògùn sí ya àwọn àkójọpọ̀ ìwádìí méjèèjì sọ́tọ̀ nítorí ìdí yìí.

Ìdí tí ìgbìn bakitéríà kò fi lè di ìlànà ìtọ́jú

Ó ṣeé lóye ìfẹ́ àwọn ènìyàn láti wá ìlànà ìtọ́jú Bartonella pẹ̀lú búlú mẹtilínì. Àwọn àpilẹ̀kọ wọ̀nyí fi hàn ìdí tí a fi yẹ kí a ka gbólóhùn yẹn sí àmì ìkìlọ̀ dípò àtòjọ ohun tí a ó rà.

Àkọ́kọ́, 5 micrograms per mL nínú ihò àwo ìdánwò kì í ṣe ìwé àṣẹ oògùn. Kò ní ìsọfúnni tó so mọ́ ọn nípa bí ara ṣe ń gba á, bí ó ṣe ń pín káàkiri ara, bí ó ṣe ń so mọ́ prótínì, bí ó ṣe ń wọ inú sẹ́ẹ̀lì, tàbí bí ara ṣe lè fara dà á. Àwọn òǹkọ̀wé yàn án gẹ́gẹ́ bí àárín ìfojúsùn gíga jù ti àwọn oògùn apakòkòrò ní àfojúsùn, wọ́n sì sọ pé iṣẹ́ ọjọ́ iwájú yẹ kí ó lo oògùn kọ̀ọ̀kan ní ìpele tirẹ̀ tó bá ipò gidi mu.

Ẹlẹ́ẹ̀kejì, kólónì òdo túmọ̀ sí pé kò sí kólónì lábẹ́ àwọn ipò fífi sẹ́ẹ̀lì sórí àwo wọ̀nyẹn, kì í ṣe pé àsopọ̀ ara kò ní bakitéríà mọ́. Àwọn sẹ́ẹ̀lì tó lè dúró pẹ́ láìka oògùn sí, àwọn bakitéríà inú sẹ́ẹ̀lì, àti àwọn ààlà gbígba àpẹẹrẹ, gbogbo wọn kọjá ohun tí àwo agar lè fihàn.

Ẹlẹ́ẹ̀kẹta, àwọn àpapọ̀ tí ó pa gbogbo bakitéríà nínú ihò àwo lè kùnà tàbí ṣe ìpalára nínú ara. Àpapọ̀ azithromycin àti búlú mẹtilínì, àti àpapọ̀ rifampin àti búlú mẹtilínì, jẹ́ àwọn àpapọ̀ yàrá ìdánwò ní àwọn ìpele ìfarakanra yàrá ìdánwò. Láìsí ìwádìí lórí bí ara ẹranko ṣe ń gba, pín, yí àwọn oògùn náà padà àti yọ wọ́n jáde, àti dátà láti ìwádìí ènìyàn tí a ṣe pẹ̀lú ìṣàkóso, kò sí ìwọ̀n oògùn, kò sí iye àkókò lílò, kò sì sí ìpín àǹfààní sí ewu. Ẹnikẹ́ni tí ó ń gbé àwọn àṣàyàn yẹ̀ wò yẹ kí ó jíròrò wọn pẹ̀lú oníṣègùn, kí ó sì ṣe àtúnyẹ̀wò ìgbà tí lílo búlú mẹtilínì nílò àbójútó ìṣègùn kí ó tó ṣe ìpinnu kankan láti inú dátà abọ́ ìdánwò.

Ìparí tó ní ààlà tí àwọn àpilẹ̀kọ wọ̀nyí ṣe àtìlẹ́yìn fún ni èyí: búlú mẹtilínì ní ìṣe tí a lè tún rí lòdì sí B. henselae JK53 tí kò ń dàgbà níta ara nínú yàrá ìdánwò, títí kan nínú àwọn àpapọ̀ oògùn méjì ní yàrá ìdánwò, àwọn èsì tó lágbára jù fún àpapọ̀ àti àwọn sẹ́ẹ̀lì tí a mú láti biofilm sì wá láti ìwádìí 2020. Gbogbo ohun yòókù, títí kan bóyá ìṣe yẹn ṣe pàtàkì fún bartonellosis nínú ènìyàn, kò tíì jẹ́ ohun tí a dán wò.