ዓንቀጽ
ሜቲሊን ብሉን ቪታሚን Cን፦ እቲ ማሕሉል ስለምንታይ ቀለም ዘይብሉ ክኸውን ይኽእል

ኣብ ሰማያዊ ማሕሉል ሜቲሊን ብሉ ዝሓዘ ብርጭቆ ሓንቲ ከኒና ቪታሚን C ትውስኽ፣ ትሓዋውሶ፣ እቲ ሰማያዊ ቀለም ክሃስስ ድማ ትዕዘብ። ድሕሪ ሓደ ደቒቕ እቲ ፈሳሲ ከም ተራ ማይ ይመስል። እቲ ቪታሚን C ነቲ መሕበሪ ኣጥፊእዎ ወይ ኣግሊልዎ እዩ ኢልካ ክትድምድም ይፍትን።
እዚ ኣተሓሳስባ ጌጋ እዩ፣ እቲ ጌጋ ድማ ኣገዳሲ እዩ። እቲ ትዕዘቦ ዘለኻ ክምለስ ዝኽእል ለውጢ ኩነታት ኦክሲዴሽን እዩ፣ ምጥፋእ ኣይኮነን። እቲ መሕበሪ ገና ኣብኡ ኣሎ። ኣብ ዝግባእ ኩነታት እቲ ቀለም ይምለስ።
ክልተ ኩነታት እቲ መሕበሪ
ሜቲሊን ብሉ ብጽቡቕ ዝተገልጹ ክልተ ኩነታት ኣለዉዎ። እቲ ኦክሲዴሽን ዝገበረ ቅርጺ፣ ብልሙድ MB+ ተባሂሉ ዝጽሓፍ፣ ዝተዘርግሐ ስርዓት ኮንጁጌትድ ቀለቤታት ኣለዎ፣ እዚ ድማ ኣብ ከባቢ 664 nm ብርሃን ብብርቱዕ ይምጥጥ። እዚ ምምጣጥ እዩ ነቲ ሰማያዊ ቀለም ዝፈጥሮ። እቲ ሪዳክሽን ዝገበረ ቅርጺ፣ ሉኮሜቲሊን ብሉ (LMB)፣ ነቲ ብርቱዕ ናይ ዝርአ ብርሃን መምጠጢ ባንድ ስለ ዘጥፍኦ፣ ቀጢን ማሕሉሉ ቀለም ዘይብሉ ይመስል።
ነቲ መሕበሪ ከም ንእሽቶ፣ ዳግማይ ክመልእ ዝኽእል መኽዘን ኤሌክትሮናት ጌርካ ሕሰቦ። ብኤሌክትሮናትን ሓደ ፕሮቶንን ምምላኡ ቀለሙ የጥፍእ። እቶም ኤሌክትሮናት ካብኡ ምውጻእ ነቲ ቀለም ይመልሶ፦
MB+ + H+ + 2e- to LMB (colorless)
ቪታሚን C ነቲ ኤሌክትሮናዊ ምምላእ የቕርቦ። ኣስኮርቤት ናብ ዲሃይድሮኣስኮርቤት እናተቐየረ ኦክሲዴሽን ይገብር፣ ክልተ ናይ ሪዳክሽን ኤኩቫለንት ድማ ይህብ። ስለዚ፣ ብሃሳባዊ ስቶይኪዮሜትሪያዊ ሕሳብ፣ ሓደ ሞል ኣስኮርቤት ንኣስታት ሓደ ሞል MB+ ሪዳክሽን ይገብረሉ። ኣብ ተግባራዊ ናይ ላቦራቶሪ ማሕሉላት ግን፣ እቲ ሕሳብ ዝተሓላለኸ እዩ፣ ምኽንያቱ ዝሓቐቐ ኦክስጅን ነቶም ተመሳሳሊ ኤሌክትሮናት ይወዳደረሎም። ስለዚ እቲ ማሕሉል ቀለም ዘይብሉ ኮይኑ ንኽጸንሕ ብልሙድ ተወሳኺ ኣስኮርቤት የድሊ።
እቲ መስርሕ ሓደ ጽሩይ ናይ ክልተ ኤሌክትሮናት ስጉምቲ ጥራይ ክኸውን ኣየድልን። ራዲካላትን ከፊላዊ ሪዳክሽን ዝገበሩ ማእከላይ ውሁዳትን ይሳተፉ፣ እቲ ትኽክለኛ መንገዲ ድማ ብመሟሟ፣ ብኣሲዳዊነትን ብክምችትን ይለዋወጥ። እቲ መወዳእታ ግን ሓደ እዩ። ሰማያዊ MB+ ቀለም ዘይብሉ LMB ይኸውን፣ ቪታሚን C ድማ ኣብቲ መስርሕ ይሃልኽ።
ምንቅናቕ ነቲ ሰማያዊ ቀለም ስለምንታይ ይመልሶ
እቲ ልሙድ ናይ ክፍሊ ትምህርቲ ኣቀራርባ ናይዚ ፈተነ ካልኣይ ክፋል ኣለዎ። ነቲ ቀለም ዘይብሉ ማሕሉል ዝሓዘ ንእሽቶ ብልቃጥ ከይተንከፍካዮ ግደፎ፣ ቀለም ዘይብሉ ኮይኑ ይጸንሕ። ኣንቀጥቅጦ፣ እቲ ሰማያዊ ቀለም ይምለስ። ተጸበ፣ እንደገና ይሃስስ።
ነቲ ቀለም ዝመልሶ ኦክስጅን እዩ። ዝሓቐቐ O2 ንLMB ብኦክሲዴሽን ናብ MB+ ይመልሶ፣ ስለዚ ምንቅናቕ ነቲ መሕበሪ ዘንቀሳቕሶ ኣይኮነን። ኣብ ልዕሊ እቲ ፈሳሲ ዘሎ ኣየር ምስቲ ፈሳሲ ብምሕዋስ፣ ነቲ ዝሓቐቐ ኦክስጅን ይምልኦ፣ እዚ ድማ ነቲ ተመላሲ ምላሽ የቀላጥፎ። ተወሳኺ ኣስኮርቤት ክሳብ ዘሎ፣ እቲ ዳግማይ ዝተፈጥረ MB+ እንደገና ሪዳክሽን ይገብር። እዚ ነቲ ዝፍለጥ ዑደት ይፈጥሮ፦ ከይተነቓነቐ ምጽናሕ ቀለም ዘይብሉ ይገብሮ፣ ምንቅናቕ ሰማያዊ ይገብሮ፣ ምጽባይ እንደገና ቀለም ዘይብሉ ይገብሮ። እቲ ኣስኮርቤት ምስ ተወድአ፣ ኦክስጅን ብቐዋሚ ይዕወት፣ እቲ ማሕሉል ድማ ሰማያዊ ኮይኑ ይጸንሕ።
እዚ እዩ እቲ ናይ ሜቲሊን ብሉን ቪታሚን Cን ሰልፊ ብቕርጺ እቲ መትሓዚ ዝጽሎ ምኽንያት። ኣብ ልዕሊ ፈሳሲ ውሑድ ክፍተት ዘለዎ፣ ብመኽደን ዝተዓጽወ ኩቬት፣ ካብ ሰፊሕ ቢከር ንዝነውሐ ግዜ ቀለም ዘይብሉ ኮይኑ ይጸንሕ። ብብርቱዕ ኣየር ምእታው ነቲ ቀለም ዘይብሉ ዝኾነሉ እዋን የሕጽሮ። ስለዚ ነዚ ፈተነ ዝጽብጽብ ሰብ መጠን ሬኣጀንታት ጥራይ ዘይኮነ፣ ኩነታት ኦክስጅን እውን ክገልጽ ኣለዎ።

ቁጽጽር ዝተገብረሉ ሰልፍን ኩነታቱን
መሸፈኒ ስእሊ ናይዚ ጽሑፍ ነቲ ዝተደልየ ንጽጽር የርኢ፦ ኣብ ተመሳሳሊ ብርሃን፣ ሰማያዊ መቆጻጸሪ ናሙና MB+ ኣብ ጎኒ ብኣስኮርቤት ሪዳክሽን ዝተገብረሉ ናሙና LMB። እቲ ውጽኢት እንደገና ክረክብ ንኽከኣል፣ ንፍጥነት እቲ ምላሽ ዝቕይር ነፍሲ ወከፍ ተለዋዋጢ ኣብ ዝተወሰነ ኩነታት ኣጽንሖ፦
| ተለዋዋጢ | ዝምከር ኩነታት | ስለምንታይ ኣገዳሲ እዩ |
|---|---|---|
| ሜቲሊን ብሉ | 10 ክሳብ 90 micromolar ኣብ ፎስፌት ባፈር፣ pH 7 | ምስ ኣብ ዝተሓትሙ መጽናዕታት ሬዶክስ ዝተጠቕሙሎም ክምችታት ይሰማማዕ፣ ነቲ ምምጣጥ ብርሃን ድማ ኣብ ውሽጢ መለክዒ ክልል ይሕዞ |
| ኣስኮርቤት | 1 mM ሶድየም ኣስኮርቤት፣ ሓድሽ ዝተዳለወ | ምጥፋእ ቀለም ንኽውዳእ ተወሳኺ ናይ ሪዳክሽን ኤኩቫለንት የቕርብ |
| ባፈርን pHን | 50 mM ፎስፌት፣ pH 7.0፣ ናይ ክፍሊ ሙቐት | ነቶም ኣስኮርቤት ዝርከበሎም ኬሚካላዊ ቅርጽታትን ንርግኣት LMBን ይውስን |
| ብርሃን | ድኹም ናይ ከባቢ ብርሃን፣ ግዜ ምቅላዕ መዝግብ | ብሩህ ብርሃን ናይ ፎቶሬዶክስን ፐሮክሳይድን መንገድታት ይውስኽ |
| ኦክስጅን | ሓደ ብልቃጥ ብኣየር ዝጸገበ፣ ሓደ ድማ ብናይትሮጅን ኣየሩ ዝተወገደ | ነቲ ጽሩይ ዑደት ሬዶክስ ካብ ዳግመ-ኦክሲዴሽን ይፈልዮ |
| ብረታት | ናይ ትንተና ደረጃ ዘለዎም ሬኣጀንታት፣ ብተወሳኺ ኬሌተር ዘለዎ ሓደ መቆጻጸሪ ናሙና | ኣዝዩ ውሑድ ሓጺን ንኬሚስትሪ ፈንተን መንገዲ ይኸፍት (ኣብ ታሕቲ ርአ) |
ንኽልቲኦም ብልቃጣት ኣብ ዝተወሰኑ ግዜያት፣ ንኣብነት ኣብ 0፣ 1፣ 5ን 15ን ደቓይቕ፣ ስእሊ ኣልዕል፣ ድሕሪኡ ኣንቀጥቂጥካ እንደገና ስእሊ ኣልዕል። እቲ ብናይትሮጅን ኣየሩ ዝተወገደ ብልቃጥ ንዝነውሐ ግዜ ቀለም ዘይብሉ ኮይኑ ክጸንሕ ይግባእ። እቲ ኣየር ዝኣተዎ ብልቃጥ ድሕሪ ምንቅናቕ ብዝቐልጠፈ ዳግማይ ሰማያዊ ክኸውን ይግባእ። ሓደ ናሙና ብምንቅናቕን ኣየር ብምእታውን እኳ ፈጺሙ ዳግማይ ሰማያዊ እንተ ዘይኮይኑ፣ ቀሊል ሪዳክሽን ዘይኮነ፣ ዘይምለስ ምብልሻው ከይከውን ጠርጥር።
ኣዳለውቲ ፎርሙላታት ነዚ ተመሳሳሊ ኣመክንዮ ኣብ ዝዓበየ መጠን ይጥቀሙሉ። ሜቲሊን ብሉ ኣብ ሓደ ሕዋስ ዘርእዮ ባህሪ ኣብ ምሉእ ኩነታት ሬዶክስን ፎርሙላን ይምርኮስ። ፈተነ ርግኣት ድማ፣ ምስ ምዕዛብ ቀለም፣ pH፣ ዝሓቐቐ ኦክስጅን፣ መጠን ምቅላዕ ብርሃንን ኣዝዮም ውሑዳት ብረታትን ክምዝግብ ኣለዎ።
pH፣ ብርሃንን ክምችትን ናብ ዝተፈላለዩ ኣንፈታት ይጸልዉ
ጀመርቲ ብዙሕ ግዜ ኣሲድ ወይ ቤዝ ነቲ ምላሽ የቀላጥፎ ድዩ ኢሎም ይሓቱ። እቲ ትኽክለኛ መልሲ፣ pH ኣብ ክልተ ዝተፈላለዩ ክፋላት እቲ ዑደት ይሰርሕ ዝብል እዩ። ኣብ ኣሲዳዊ ማያዊ ኩነታት፣ ምርካብ ፕሮቶናት ነቲ ኣስኮርቤት ንMB+ ሪዳክሽን ዝገብረሉ ስጉምቲ ከቀላጥፎ ይኽእል። ግን LMB ባዕሉ ኣብ ኣሲድ ብኣየር ንዝግበር ኦክሲዴሽን ኣዝዩ ይጻወር፣ pH እናወሰኸ ምስ ከደ ድማ ኣዝዩ ብዝቐልጠፈ ዳግማይ ኦክሲዴሽን ይገብር። ስለዚ ኣሲዳዊ ናሙና ብቕልጡፍ ቀለሙ ኣጥፊኡ ቀለም ዘይብሉ ኮይኑ ክጸንሕ ይኽእል፣ ኣልካላይን ናሙና ግን ቀለሙ የጥፍእን ብቕልጡፍ ዳግማይ ሰማያዊ ይኸውንን። ክልቲኡ ትዕዝብቲ ኣብ ነናቱ ኩነታት ትኽክል እዩ።
ብርሃን ካልእ ዝተፈልየ መንገዲ ይውስኽ። ብብርሃን ዝተነቓቐሐ ሜቲሊን ብሉ ናብ ንነዊሕ ግዜ ዝጸንሕ ትሪፕለት ኩነታት ይበጽሕ፣ ኣብኡ ድማ ምስ ኣስኮርቤትን ኦክስጅንን ምትሕልላፍ ኤሌክትሮናት ይገብር። እዚ ፎቶኬሚስትሪ፣ ኣብ ንውሓት ማዕበል፣ ደረጃ ኦክስጅንን ክምችትን ተመርኲሱ፣ ምጥፋእ ቀለም ከቀላጥፍ፣ ቀለም ዳግማይ ክመልስ፣ ወይ ተባዕልቲ ዓይነታት ኦክስጅን ክፈጥር ይኽእል። ንምብራህ ከም ናይ ፈተነ ተለዋዋጢ ተመልከቶ፣ መዝግቦ ድማ።
ክምችት ኣየናይ ኣንፈት ከም ዝዕወት ይውስን። ዝያዳ ኣስኮርቤት ማለት ዝቐልጠፈ ምጥፋእ ቀለምን ዝበዝሑ ዑደታት ምንቅናቕን ምህሳስን ማለት እዩ። ዝያዳ መሕበሪ ብተመጣጣኒ ዝያዳ ናይ ሪዳክሽን ኤኩቫለንት ይሓትት። ዝያዳ ዝሓቐቐ ኦክስጅን ነቲ ሰማያዊ ኩነታት ይድግፍ። ኣብ ልዑል ክምችት መሕበሪ ካልእ ተወሳኺ ውስብስብነት ይርአ፣ ምኽንያቱ ሜቲሊን ብሉ ንባዕሉ ተጣሚሩ፣ ስፐክትራኦም ዝተቐየረ ዳይመራትን እኩባትን ይፈጥር። ስለዚ ነቲ መሕበሪ ዕጽፊ ምግባር ድሕሪ ደጊም ነቲ ተመሳሳሊ ባህሪ ዕጽፊ ኣይገብሮን።
ቪታሚን C ንሜቲሊን ብሉ የግልሎ ድዩ፧
እዚ እዩ ድሕሪ መብዛሕትኦም ብዛዕባ ሜቲሊን ብሉን ቪታሚን Cን ዝግበሩ ናይ ሓበሬታ ምድላያት ዘሎ ሕቶ፣ ልክዕ መልሲ ድማ የድልዮ። ኣይፋል፣ ምጥፋእ ቀለም ምግላል ኣይኮነን። እቲ ክሮሞፎር ኩነታቱ ቀይሩ እዩ፣ ግን እቲ ናይ ፌኖትያዚን ቀንዲ መዋቕርን ንጥፈቱ ሬዶክስን ኣብቲ ማሕሉል ይተርፉ። እቲ ምላሽ ብኣየር ክምለስ ይኽእል፣ እቲ ሪዳክሽን ዝገበረ ቅርጺ ድማ ባዕሉ ተባዓሊ እዩ፦ LMB ኤሌክትሪካዊ ቻርጅ የብሉን፣ ምስ MB+ ክነጻጸር ከሎ ድማ ንስብሒ ዝቐርብ እዩ። ኣብ ናይ ዋህዮታት ስራሕ፣ ኣብ ውሽጢ ዳግማይ ኦክሲዴሽን ቅድሚ ምግባሩ፣ ንሽፋናት ይሰግር።
ናይ ዋህዮታት ጽንዓታዊ ጽሑፋት ነዚ ነጥቢ ብጭቡጥ የርእዩ። ኣብ ዝተዓብዩ ኤንዶተልያል ዋህዮታት፣ ትሑት micromolar ክምችት ሜቲሊን ብሉ፣ NADPHን NADHን ኦክሲዴሽን እናገበረ፣ ንጥፈት ፐንቶዝ ፎስፌት የነቓቕሕ። ደገፍ ግሉኮዝ ኣብ ዘይብሉ ኩነታት፣ ልዕሊ ኣስታት 5 micromolar ክኸውን ከሎ ድማ፣ ኣብ ውሽጢ ዋህዮ ዘለዉ መመልከቲታት ኦክሲዳንት የዕብይ። ብኣስኮርቤት ዝተመልኡ ዋህዮታት ነቲ መሕበሪ ምስ ተቓልዑ፣ ነቲ ኣስኮርቤት ቀስ ብቐስ ኦክሲዴሽን ይገብሩሉ። እቲ ዝተጻዕነ ኣስኮርቤት ድማ ነቲ ምልክት ኦክሲዳንት ብኸፊል ጥራይ ይዓግቶ፣ ከምቲ ኣብ ናይቲ መሕበሪ ኤንዶተልያል ሬዶክስ መጽናዕቲ ዝተገልጸ። ብኻልእ ኣዘራርባ፣ ኣስኮርቤት ኣብቲ ናይ ሬዶክስ ምትሕልላፍ ይሳተፍ። ነቲ መሕበሪ ካብ ንጥፈት ኣየቋርጾን።
ብርሃን ነቲ ጉዳይ ዝያዳ ንጹር ይገብሮ። ኣብ ብርሃን፣ ሕዋሳት ሜቲሊን ብሉ፣ ኣስኮርቤትን ኦክስጅንን ኦክስጅን ይሃልኩ፣ ሃይድሮጅን ፐሮክሳይድ የከማችዉ፣ ካታሊቲክ ሓጺን ኣብ ዘለወሉ ድማ ብኬሚስትሪ ፈንተን ሃይድሮክሲል ራዲካል ይፈጥሩ። እዚ ብናይ ስፒን ትራፒንግን ምውሳድ ኦክስጅንን ፈተነታት ተረጋጊጹ እዩ። ሃይድሮክሲል ራዲካላት ንባዮሞለኪውላት ዘይምለስ ጉድኣት ከውርዱን ነቲ መሕበሪ ባዕሉ ከበላሽዉን ይኽእሉ። ስለዚ፣ ኣብ ብርሃንን ብሓጺን ምብካልን ቀለሙ ብቐዋሚ ዝሃሰሰ ናሙና፣ ጽሩይ ሪዳክሽን ኣየርእን። ብጎናዊ ኬሚካላዊ ምላሻት ዝመጸ ምጥፋእ የርኢ ክኸውን ይኽእል።
እቲ ቀለም ዘይብሉ ማሕሉል ዘየረጋግጾ
ሰለስተ ልሙዳት ድምዳመታት ካብቲ መርትዖ ንላዕሊ ይኸዱ፣ ኣብ ናይ ላቦራቶሪ መዘኻኸሪታት፣ መለለዪ ጽሑፋትን ናይ ትምህርቲ ስላይዳትን ድማ ክውገዱ ኣለዎም።
ቀዳማይ፣ ቀለም ዘይብሉ ማለት ጉድኣት ዘይብሉ ማለት ኣይኮነን። LMB ምስ ኦክስጅንን ኣዝዮም ውሑዳት ብረታትን፣ ብፍላይ ኣብ ብርሃን፣ ንመንገድታት ፐሮክሳይድን ራዲካላትን ክድግፍ ይኽእል። ጉድኣት ዘይብሉ ምዃን ብቶክሲኮሎጂ ክረጋገጽ ኣለዎ፣ ብመለክዒ ቀለም ኣይኮነን።
ካልኣይ፣ ቀለም ዘይብሉ ማለት ካብ ብከላ ዝጸረየ ማለት ኣይኮነን። እቲ መሕበርን መሻርኽቱ ሬዶክስን ገና ኣለዉ። ዝፈሰሱ ፈሳሲታት፣ ፈሳሲ ተረፋትን ብቀለም ዝተጸየቑ ንዋትን ኣስኮርቤት ብምውሳኽ ኣይጸርዩን። ብትንተና ምርግጋጽ የድሊ፣ እዚ ድማ ኣብ ናይ ተረፍን ምጽራይ ብከላን ፈተነ ልምዲ ዝሽፈን ጉዳይ እዩ።
ሳልሳይ፣ ቀለም ዘይብሉ ምዃን ጠቓሚ ዝተወሃሃደ ኣጠቓቕማ ኣይውስንን። እቲ ኣብ ቱቦ ፈተነ ዝግበር ምላሽ፣ ብዛዕባ ኣብ ሰባት ምምጣጥ፣ ምዝርጋሕ ኣብ ሕብረ ህዋሳት፣ መጠን ኣጠቓቕማ ወይ ድሕነት ምትእስሳር ዋላ ሓንቲ ኣይብልን። ንጥዕናዊ ዕላማ ክብል ነቶም ክልተ ንጥረ ነገራት ክሓዋውስ ዝሓስብ ሰብ፣ ካብ ናይ ብልቃጥ ውጽኢት ናብ ሰባት ድምዳመ ኣብ ክንዲ ዝሰግር፣ መጀመርታ ብዛዕባ ምትእስሳርን ድሕነትን ዝምልከቱ ጽንዓታዊ ጽሑፋት ከንብብን ብቑዓት ምንጭታት ክውከስን ኣለዎ።
እቲ ትኽክለኛ ትርጉም ዝተወሰነ እዩ፣ ግን ዝያዳ ጠቓሚ እዩ። ሜቲሊን ብሉ ምስ ኣስኮርቤት ሓጺር መርኣያ ዑደት ሬዶክስ እዩ፦ ቪታሚን C ኤሌክትሮናት ይህብ፣ እቲ መሕበሪ ቀለም ዘይብሉ ይኸውን፣ ኦክስጅን ነቶም ኤሌክትሮናት መሊሱ ይወስዶም፣ ቀለም ይምለስ፣ ብርሃን፣ pH፣ ክምችትን ሓጺንን ድማ ነቲ ፍጥነትን ጎናዊ ፍርያትን ይውስኑ። እዚ ሓሳብ ምስ በርሀ፣ እቲ ሰልፊ ማታ ካብ ምዃን ወጺኡ ናይ ምርመራ መሳርሒ ይኸውን። ናሙናኻ ዝተፈልየ ባህሪ እንተ ኣርእዩ፣ ነቲ መሕበሪ ቅድሚ ምጥርጣርካ፣ ኦክስጅን ዝኣትወሉ መንገዲ፣ መጠን ምቅላዕ ብርሃን፣ pHን ብብረታት ምብካልን መርምር።