EMB agar ምስ MacConkey agar፡ ሚድያ ምምራጽን ምትርጓምን

ሓደ ተማሃራይ ካብ ሓደ ናይ ማይ ናሙና ኣብ ክልተ ፕሌት ስትሪክ ይገብር። ኣብ ሓደኡ፣ ቀጠልያ ሜታሊካዊ ብርቂ ዘለዎም ጸለምቲ ኮሎኒታት ይርኣዩ። ኣብቲ ካልእ ድማ፣ ድሙቕ ሮዛ ኮሎኒታት ምስ ድብዝዝ ዝበለ ሃሎ ይርኣዩ። ክልቲኦም ፕሌታት ካብ ሓደ ቱቦ ተኸቲቦም፣ ጎድኒ ጎድኒ ተኢንኩቤት ተገይሮም፣ ኣብ ሓደ ሰዓት ተነቢቦም። እቲ ተማሃራይ ካብቶም ፕሌታት ኣየናይ ቅኑዕ ምዃኑ ይሓትት።

ክልቲኦም ፕሌታት ቅኑዓት እዮም። ዝተፈላለዩ ሕቶታት ይምልሱ። እቲ ምድንጋር፣ ነዞም ክልተ ሚድያ ንባክቴርያ መዓንጣ ከም ተተካእቲ ስክሪን ካብ ምሕሳብ ይመጽእ። ሓደ ዕላማ ይካፈሉ፤ ንGram negative ናይ መዓንጣ ኦርጋኒዝማት ምምራጽን lactose ፈርመንተርታት ካብ nonfermenters ምፍላይን። እንተኾነ፣ ነዚ ዕላማ ብዝተፈላለየ ኬሚስትሪን ብዝተፈላለየ ናይ ምርኣይ ሎጂክን ይትግብርዎ። እቶም ክልተ መሰረታዊ ሓሳባት ምስ ተረድኡ፣ ምርጫ ፕሌትን ንባብ ኮሎኒን ልሙድ ስራሕ ይኸውን።

ሓጺር መልሲ

EMB agar ክልተ ቀለማት፣ eosin Yን methylene blueን፣ ይጥቀም፤ እዞም ድርብ ስራሕ ይሰርሑ። Gram positive ዕብየት ይግትኡ፣ ከምኡውን ኣብ ዙርያ ብርቱዕ ኣሲድ ዘፍርዩ ኦርጋኒዝማት ይዝቅጡ እሞ ጸለምቲ ኮሎኒታት ይፈጥሩ፤ ብባህላዊ መልክዕ ኣብ Escherichia coli ሜታሊካዊ ቀጠልያ ብርቂ ይርአ። MacConkey agar ነቶም ስራሓት ይፈላልዮም፤ bile salts ምስ crystal violet ንGram positives ይግትኡ፣ lactose ንፈርመንቴሽን ይምግብ፣ neutral red ድማ ኣሲድ ከም ሮዛ ወይ ቀይሕ ኮሎኒታት ይገልጽ። እቲ ስራሕ ናይ E. coli ንጹር presumptive ምርኢት እንተደልዩ፣ EMB ጠቓሚ እዩ። እቲ ስራሕ ድማ lactose fermenters ካብ nonfermenters ብንጹር ሮዛ ምስ ቀለም ዘይብሉ ንምፍላይ እንተኾይኑ፣ ብፍላይ ኣብ ናይ stool ወይ urine ውሕደት ስራሕ፣ MacConkey መብዛሕትኡ ቀሊል ንንባብ እዩ። ካብቶም ፕሌታት ዋላ ሓደ ኦርጋኒዝም ብቀለም ጥራይ ኣይለልይን።

EMB፡ ብሓንሳብ ዝመርጹን ዝሕብሩን ቀለማት

ናይ EMB ሓሳብ ምርጫን ምልክትን ኣብ ተመሳሳሊ ሞለኪዩላት ይውህድ። ASM eosin methylene blue agar ፕሮቶኮል EMB መራጽን ፈላላይን ምዃኑ ይገልጽ፤ እቶም ጥምረት ቀለማት ብዙሓት Gram positive ኦርጋኒዝማት ክዓብዩ ይግትኡ፣ lactose fermentation ድማ ምውሳድን ምዝቃጥን ቀለም ይድርኽ። ከምቲ ኣብ FDA BAM method for Levine EMB agar ተዘርዚሩ ዘሎ፣ መደበኛ Levine ፎርሙሌሽን peptone፣ lactose፣ phosphate፣ eosin Y፣ methylene blueን agarን ይሕዝ። ኣረጊት EMB ሬሲፒታት ሓደ ሓደ ግዜ ምስ lactose sucrose እውን ይውስኹ ነይሮም፣ Levine EMB ግን lactose ኣለዎ እምበር sucrose የብሉን፤ ስለዚ ላቦራቶሪኹም ኣየናይ ፎርሙሌሽን ከም ዘቐምጥ መዝግቡ።

EMB ምንባብ ማለት ባህሪ ቀለም ምንባብ እዩ። ብርቱዕ lactose fermentation ከቢድ ዝቃጥ ቀለም ንምድራኽ እኹል ኣሲድ የፍሪ፣ እዚ ድማ E. coli ጸለምቲ ሰማያዊ-ጸለምቲ ማእከላት ክህልዎ ይገብር፣ ኣብቲ ባህላዊ ሁኔታ ድማ ኣብ ዝተንጸባረቐ ብርሃን ቀጠልያ ሜታሊካዊ ብርቂ ይርአ። ዝደኸሙ fermenters ከም Enterobacterን Klebsiellaን ብተለምዶ ሮዛ ክሳብ ሐምላይ ዝመስሉ mucoid ኮሎኒታት ብዘይ እቲ ብርቂ ይዓብዩ። Nonfermenters ከም Salmonella፣ Shigellaን Proteusን ነቶም ቀለማት ዘዝቅጥ ናይ ኣሲድ ፍጥነት ስለዘየፍርዩ፣ ብሓፈሻ ቀለም ዘይብሎም ወይ ግሉጻት ኮሎኒታት ይፈጥሩ። Gram positives መብዛሕትኡ ይግትኡ፣ ግን እቲ ምግታእ ብደረጃ ዝፈላለ ኮይኑ ብstrainን productን ይቀያየር። Methylene blue መጀመርታ ስለምንታይ cationic stain ከም ዝኸውን ሓዊሱ ሙሉእ ናይ ድሉውነት ቀለም ኬሚስትሪ፣ ኣብ ዝተፈልየ ዘተ ናይ dye formulations ዝካተት እዩ፣ ሓፈሻዊ ናይ microscopy ኩነታት ድማ ኣብ ኣትላስ ናይ ሜላታት ስቴይኒንግ ይርከብ። እዚ ጽሑፍ ኣብ ምርጫ ፕሌትን ንባብን ጥራይ ይተኵር።

እቲ ኣብ ላዕሊ ዘሎ ስእሊ ምሳሌያዊ እዩ። እቲ ክትጽበይዎ ዘለኩም ናይ ምርኣይ ሎጂክ የርኢ፤ ኣብ EMB ጸለምቲ ብርቂ ዘለዎም ኮሎኒታት፣ ሮዛ mucoid ዓይነታትን ፈኲስ ዓይነታትን፣ ኣንጻር ኣብ MacConkey ሮዛ ምስ ፈኲስ ዓይነታት። ነቲ ንድፊ ንምምሃር ተጠቐሙሉ፣ ድሕሪኡ ግን ነፍሲ ወከፍ ውሳነ ምስ ፎቶ ዘለዎም controlsን ኣብ መደብ ስራሕኩም ዘሎ ልክዕ medium ናይ product insertን ኣረጋግጹ።

MacConkey፡ ዝተፈላለዩ ስራሓት፣ ቀሊል ናይ ምርኣይ ሕጊ

ናይ MacConkey ሓሳብ ንነፍሲ ወከፍ ስራሕ ናብ ዝተፈልየ ንጥረ ነገር ይመድቦ። ASM MacConkey agar ፕሮቶኮል ተመሳሳሊ መራጽን ፈላላይን ኣቀራርባ የቕርብ፣ FDA BAM method for MacConkey agar ድማ እቶም ዝሰርሑ ክፍልታት ይዝርዝር፤ peptones፣ lactose፣ bile salts፣ salt፣ neutral red፣ crystal violetን agarን። Bile salts ምስ crystal violet ንGram positives ኣንጻር ይመርጹ። Lactose ናይ fermentation ሳብስትሬት ይህብ። Neutral red ከም pH ሪፖርተር ይሰርሕ፣ ኣሲድ ኣብ ዝፍጠረሉ ቦታ ሮዛ ክሳብ ቀይሕ ይቕየር፣ ሓደ ሓደ ግዜ ድማ ኣብ ዙርያ ብርቱዓት fermenters ዝወደቐ bile ይርአ።

እቲ ናይ ንባብ ሕጊ ብፍላጥ ቀሊል ተገይሩ እዩ፤ ሮዛ ማለት lactose fermenter፣ ቀለም ዘይብሉ ወይ ፈኲስ ማለት nonfermenter እዩ። E. coli ሮዛ ክሳብ ቀይሕ ይርአ፣ ብዙሕ ግዜ ምስ bile precipitate halo። Klebsiellaን Enterobacterን ሮዛ ይርኣዩ፣ ብሰንኪ capsules ድማ ብተደጋጋሚ mucoid ይኾኑ። Salmonella፣ Shigella፣ Proteusን ብዙሓት ካልኦት Gram negative rodsን ቀለም ዘይብሎም ይርኣዩ። ኣብ ላቦራቶሪ ትምህርቲ ጠቓሚ ተወሳኺ ጥቕሚ ኣሎ፤ bile salts ብሓፈሻ Proteus swarming ይንክዩ፣ ስለዚ ኣብ MacConkey ካብ nonselective media ዝተፈለዩ ኮሎኒታት ምርካብ ይቐልል። እንተኾነ፣ እቲ ምግታእ ፍጹም ኣይኮነን፣ ኣብ swarming control ቀዳምነት ዝወሃቦ ኩነታት ድማ salt free ኣማራጺታት ኣለዉ።

እቶም ቀለማት በዚ መንገዲ ዝጠብቁሉ ሞለኪዩላዊ ምኽንያት ናብ chargeን structureን ይምለስ። Methylene blue cationic phenothiazine dye እዩ፣ ናቱ መዋቕርን ባህርያትን ድማ ምስ acidic bacterial surfaces ዘለዎ affinity ይገልጹ፤ እዚ እቲ ኣብ EMB ኣብ ናይ ኣሲድ ዞባታት ክዝቅጥ ከሎ ዝሰርሕ ተመሳሳሊ affinity እዩ።

ብሓጺሩ ምንጽጻር

ነቲ ሰንጠረዥ ከም ናይ ውሳነ ሂደት ኣንብብዎ። እቲ ልምምድ ተማሃሮ ናይ fermentation ሓይሊ ደረጃታት ምስ ሓደ ድራማዊ መወዳእታ ክርእዩ እንተድልዩ፣ EMB የርእዮ። እቲ ልምምድ ቅድሚ biochemical confirmation ቅልጡፍ ክልተኣዊ ምፍላይ እንተድልዩ፣ MacConkey የርእዮ።

ንኣየናይ ናሙና ኣየናይ ሚድያ

ኣብ presumptive fecal coliform ወይ E. coli ምልላይ ዘተኮሩ ናይ ማይ ልምምዳት፣ EMB እቲ ብርቂ ብንጹር ስለዝፍለጥ ሰሓቢ እዩ። MacConkey እውን enteric Gram negatives ይሕዝ፣ ብታሪኽ ኣብ ማይ ፈተና ተጠቒሙ እዩ፣ ግን ካብቶም ፕሌታት ዋላ ሓደ ንregulatory water method ኣይትክእን። እቲ ሜላ ከከም ፈተና modified mTEC ወይ MI ዝኣመሰሉ media ክውስን ይኽእል። ላቦራቶሪኹም ክኽተሎ ዝግደድ ሜላ መርምሩ።

ኣብ ናይ stool ዓይነት ፈርመንተርታት ካብ nonfermenters ምፍላይ፣ MacConkey ብሓፈሻ ካብቶም ክልተ ዝያዳ ጠቓሚ እዩ። ግብራዊ ናይ stool ስራሕ ንSalmonella ወይ Shigella ኣብ MacConkey ጥራይ ካብ ምድጋፍ ይልቅ፣ ከም XLD ወይ Hektoen enteric ዝኣመሰሉ ዝያዳ መረጽቲ enteric media ይውስኽ።

ናይ clinical workflow ዝመስል ናይ urine ትምህርቲ፣ MacConkey ምስ blood agar ኣጣምሩ። MacConkey ናይ መጀመርታ Gram negative ምፍላይ ይህብ፣ blood agar ድማ MacConkey ዝግትኦም ኦርጋኒዝማት ይመልስ። እዚ ጥምረት ኣብ clinical descriptions ናይ urine culture setup መደበኛ እዩ።

ንጽሩይ ናይ ሓሳብ ትምህርቲ፣ ክልቲኦም ኣሂዱ። EMB ሓይሊ fermentation ከም ዝግድስን ሓደ molecule ክልተ ስራሓት ክፍጽም ከም ዝኽእልን ይምህር። MacConkey modular design ይምህር፤ selector፣ substrateን reporterን ተፈላልዮም ይቕመጡ። ተማሃሮ ዝተፈልጠ E. coli፣ ዝተፈልጠ Klebsiella aerogenesን ዝተፈልጠ Salmonellaን ኣብ ክልቲኦም media ጎድኒ ጎድኒ ምስ ዝስትሪኩ፣ ነቶም ክልተ ሎጂካት ደጊም ምድንጋር ኣዝዩ ይውሕድ።

ኣብ ነፍሲ ወከፍ ተርም ዝደጋገሙ ናይ ንባብ ጌጋታት

እቲ ዝበዝሐ ጌጋ ብቀለም ጥራይ ምልላይ እዩ። ኣብ MacConkey ሮዛ E. coli፣ Klebsiella፣ Enterobacter ወይ ካልእ fermenter ክኸውን ይኽእል። ቀለም ዘይብሉ ድማ Salmonella፣ Shigella፣ Proteus፣ Pseudomonas ወይ ካልእ nonfermenter ክኸውን ይኽእል። ቀለም ከም Gram stain፣ oxidase፣ biochemical panels ወይ instrument identification ዝኣመሰለ confirmatory ስራሕ ዝመርሕ screening phenotype እዩ እምበር ስም species ኣይኮነን።

እቲ ካልኣይ ጌጋ ዘይተረኽበ ብርቂ ካብ መጠን ንላዕሊ ምንባብ እዩ። ገለ ሓቀኛ E. coli ኮሎኒታት፣ ብፍላይ ዝተፈለዩ፣ ኣብ EMB ውሑድ ወይ ዋላ ሓደ ሜታሊካዊ ብርቂ ኣየፍርዩን። ብርቂ ዘይምህላዉ E. coli ኣየሰናብትን፣ ብርቂ ምህላዉ ድማ ኣየረጋግጾን። ነቲ ብርቂ ከም presumptive clue ጥራይ ውሰድዎ።

እቲ ሳልሳይ ጌጋ ዝተፈላለየ ዕድመ ዘለዎም ፕሌታት ምንጽጻር እዩ። Delayed lactose fermenters ድሕሪ ነዊሕ incubation ኣብ MacConkey ሮዛ ክኾኑ ይኽእሉ፣ እዚ ድማ ነቲ ንጹር fermenter ምስ nonfermenter ምፍላይ የደብዝዞ። ኣብቲ ላቦራቶሪ ዝወሰኖ ሰዓት ኣንብቡ፣ incubation time ድማ ምስ ውጽኢቱ መዝግቡ።

እቲ ራብዓይ ጌጋ mixed growth ከም ሓደ ኦርጋኒዝም ምንባብ እዩ። ኣብ ጎድኒ ቀለም ዘይብሉ ኮሎኒ ዘሎ ሮዛ ኮሎኒ ክልተ phenotypes ይምዝግብ እምበር ማእከላይ ዓይነት ኣይኮነን። ጽቡቕ ዝተፈለዩ ኮሎኒታት ምረጹ፣ ነፍሲ ወከፍ morphotype ድማ በበይኑ ስርሑሉ። Mucoid texture ተመሳሳሊ ወጥመድ ይውስኽ፤ Klebsiellaን Enterobacterን ክልቲኦም mucoid ክመስሉ ይኽእሉ፣ ስለዚ capsule ጥራይ ስሙ ኣይውስንን። ቀደም Enterobacter aerogenes ተባሂሉ ዝምሃር ዝነበረ ኦርጋኒዝም ሕጂ Klebsiella aerogenes ተባሂሉ ይመደብ፣ እዚ ድማ ኣረጊት chartsን ሓደስቲ labelsን ስለምንታይ ዝጋጩ ከም ዝመስሉ ይገልጽ።

Controlsን ናይ መወዳእታ ሕግን

ኣብ ነፍሲ ወከፍ session ፎቶ ዘለዎም ወይ ሓደስቲ controls ኣሂዱ፤ E. coli ንብርቱዕ fermenter reaction፣ Klebsiella aerogenes ንmucoid fermentation ብዘይ እቲ ባህላዊ ብርቂ፣ ሓደ Salmonella strain ንቀለም ዘይብሉ nonfermenter reaction፣ Staphylococcus aureus ድማ ኣብቲ ልክዕ productኩም Gram positive suppression ንምርግጋጽ። ምስ strain numbersን acceptance criteriaን ናይ manufacturer insert ኣመሳስሉ፣ ምኽንያቱ selectivity ከከም bile፣ crystal violetን dye contentን ይቀያየር።

ኣብ መደብ ስራሕ ሓንቲ ሓረግ ዘክሩ። EMB ብሓንሳብ ዝመርጹን ዝዛረቡን ቀለማት ይጥቀም፤ እዚ ብዝያዳ ደቂቕ ንባብ እናጠለበ ድራማዊ E. coli ምልክት ይህብ። MacConkey ምምራጽ ካብ ምዝራብ ይፈላልዮ፤ እዚ ተወሳኺ ዝርዝር fermentation እናነከየ ቀሊል ሮዛ ምስ ፈኲስ ምፍላይ ይህብ። ሓሳቡ ምስቲ ሕቶ ዝሰማማዕ medium ምረጹ፣ ቀለም ብግቡእ ፈተናታት ኣረጋግጹ፣ ድሕሪኡ እቶም ክልተ ፕሌታት ምውድዳር ገዲፎም ምትሕብባር ይጅምሩ።