Кабуди метилен дар таҳқиқоти инсулт ва гипоперфузияи мағзи сар: се модел дар асл чиро нишон медиҳанд

Шараёни баста, кишти ҳуҷайраҳои аз ғизо маҳрум ва калламуше бо шараёнҳои тангшудаи гардан гӯё се шакли як таҷриба бошанд. Аммо чунин нест. Ҳар кадом саволи дигареро матраҳ мекунад ва кабуди метилен дар ҳар кадом ҷавоби дигар медиҳад. Агар онҳоро бо ҳам омехта кунем, адабиёти илмӣ зиддиятнок менамояд. Агар ҷудо кунем, як қонунияти равшан пайдо мешавад, ки асосан аз вақти истифода вобаста аст.

Ҳадафи асосии ин баррасӣ маҳз ҳамин ҷудокунӣ аст. Се модел инсулти шадиди мавзеӣ, маҳрумият аз оксигену глюкоза бо барқарорсозии оксиген дар ҳуҷайраҳои парваришшуда ва гипоперфузияи музмини мағзи сар дар тӯли ҳафтаҳо мебошанд. Механизми пешниҳодшудае, ки онҳоро мепайвандад, ба митохондрияҳо вобаста аст, аммо натиҷаҳо фарқ мекунанд, зеро шароити мубодилаи моддаҳо гуногун аст.

Се модел ба саволҳои гуногун ҷавоб медиҳанд

Инсулти шадиди мавзеӣ дар калламушҳо одатан бо бастани шараёни миёнаи мағзи сар ба вуҷуд оварда мешавад, ки ихтисораш MCAO аст. Басташавии монанд ба лахтаи хун маркази ишемияро ба вуҷуд меорад, ки онро пенумбра иҳота мекунад: бофтае, ки дар хатар аст, вале дар сурати барқарор шудани ҷараёни хун эҳтимолан наҷот додан мумкин аст. Савол дар ин ҷо ин аст, ки оё дахолат афзоиши инфарктро суст мекунад ё фаъолияти бофтаро дар давраи реперфузия нигоҳ медорад.

Маҳрумият аз оксигену глюкоза, бо ихтисораи OGD, дар миқёси тамоман дигар амалӣ мешавад. Ҳуҷайраҳои парваришшудаи мағзи сарро дар муҳити бе глюкоза ва бо оксигени қариб сифр ҷойгир карда, сипас ба муҳити муқаррарӣ бармегардонанд. Дар ин ҷо на лахта ҳаст, на гардиши хуни коллатералӣ, на фишори хун ва на низоми масуният. Савол сирф ҳуҷайравӣ аст: вақте субстратҳо аз байн мераванд ва баъд бармегарданд, бо нафаскашии ҳуҷайра, ATP ва зиндамонӣ чӣ рӯй медиҳад.

Барои гипоперфузияи музмини мағзи сар дар калламушҳо бастани доимии дуҷонибаи шараёнҳои каротид истифода мешавад, ки онро модели 2VO меноманд. Ҷараёни хун ба қисми пеши мағзи сар коҳиш меёбад ва ҳафтаҳо паст мемонад. На инфаркти ногаҳонии мавзеӣ ҳаст ва на реперфузияи таъҷилӣ. Савол ин аст, ки оё дастгирии мубодилаи моддаҳо дар тӯли ҳафтаҳо ҳангоми ҷараёни тӯлонии пасти хун рагҳо, митохондрияҳо ва хотираро нигоҳ медорад.

Аз ин рӯ, беҳтар шудани хотира пас аз як моҳи табобат дар модели 2VO дар бораи наҷот додани мағзи сари инсон ҳангоми тромбэктомияи таъҷилӣ мустақиман чизе намегӯяд. Ин фарқият муҳим аст, зеро аксари хулосаҳои хушбинона онро нодида мегиранд.

Инсулти шадид: муҳофизат ҳангоми реперфузия, таъхир бидуни он

Равшантарин натиҷаи марбут ба ҳолати шадид аз MCAO-и муваққатӣ бо реперфузия ба даст омадааст. Дар калламушҳо шараён барои 60 дақиқа баста шуд, сипас аз оғози реперфузия кабуди метилен бо вояи паст ба таври дохиливаридӣ дода шуд ва вояҳои иловагӣ пас аз 3 соат ва дар рӯзи 2 дода шуданд. MRI нишон дод, ки то рӯзи 2 ҳаҷми осеб дар гурӯҳи танҳо маҳлули интиқолдиҳандагиранда тақрибан 19 фоиз афзуд, дар ҳоле ки дар гурӯҳи табобатшуда тақрибан 17 фоиз кам шуд; ҳаҷми ниҳоии инфарктҳо тақрибан 30 фоиз хурдтар ва холҳои неврологӣ дар рӯзҳои 2 ва 7 беҳтар буданд. Дар тасвирҳо зинда мондани ҳам бофтаи маркази ишемия ва ҳам бофтаи пенумбра беҳтар шуд. Адабиёти васеътари нейропротексия ин муҳофизати вобаста ба вақти реперфузияро дар баробари натиҷаҳои ишемияи умумӣ ва осеб баррасӣ мекунад.

Вақте шараён баста мемонад, манзара тағйир меёбад. Дар таҷрибаи MCAO-и доимӣ кабуди метилене, ки ҳангоми ишемияи идомадор дода шуд, васеъшавии минтақаи осебро дар тасвирҳои диффузионӣ суст кард ва номувофиқати перфузияву диффузияро барои муддати кӯтоҳ дароз намуд; ҷараёни маҳаллии хун низ каме беҳтар шуд. Аммо ҳаҷми ниҳоии инфаркт пас аз 24 соат фарқи аз ҷиҳати оморӣ муҳим надошт. Он табдили бофтаи дар хатар бударо ба инфаркт ба таъхир андохт, вале ҷойи боз кардани рагро нагирифт.

Таҳқиқоти сеюми ҳолати шадид ҷузъиёти механизм ва вояро илова мекунад. Як вояи дохилисифоқӣ фавран пас аз басташавӣ коҳиши калонтарини инфарктро, тақрибан 50 фоиз, дар вояи миёнаи 5 mg/kg нишон дод, на дар 1 ё 10 mg/kg; ҳамзамон холҳои сенсомоторӣ беҳтар шуданд. Муаллифон инро ба нигоҳ доштани сохтори митохондрияҳо ва афзоиши митофагия — бартарафсозии интихобии митохондрияҳои осебдида — пайваст карданд. Аз ин рӯ, воя, роҳи воридкунӣ ва ҷадвали истифода аҳамият доранд ва арзишҳои mg/kg барои калламушҳо вояҳои инсулт барои инсон нестанд.

Кишти ҳуҷайраҳо: як дору вобаста ба вақти ворид шуданаш ё кумак мекунад, ё зарар мерасонад

Таҷрибаи астроситҳо аз ҳама омӯзанда аст ва бештар аз ҳама нодуруст иқтибос мешавад. Астроситҳои ибтидоии қишри мағзи муш барои 6 соат ба маҳрумияти шадид дар муҳити дорои 0.1 фоиз оксиген ва бе глюкоза, пируват ё зардоби хун дучор шуданд; баъд аз он оксиген ва субстратҳо барои 24 соат барқарор карда шуданд. Тақрибан нисфи ҳуҷайраҳо мурданд, ки ин ба озмоиш имкон медиҳад таъсирро дар ҳар ду самт нишон диҳад.

Вақте кабуди метилен дар марҳилаи маҳрумият мавҷуд буд, зиндамонӣ бадтар шуд, на беҳтар. Аммо вақте онро ҳангоми барқарорсозии оксиген ворид карданд, консентратсияҳои пасти микромолярӣ қобилияти зинда монданро беҳтар намуда, истеъмоли оксиген, азхудкунии глюкоза ва истеҳсоли ATP-ро зиёд карданд. Дар шароити муқаррарӣ ҳамин консентратсияҳо азхудкунии глюкозаро дар 0.1 микромоляр тақрибан 89 фоиз ва дар 1 микромоляр тақрибан 200 фоиз зиёд карданд; пас аз осеб гликоген ва фаъолияти гексокиназа нигоҳ дошта шуданд ва афзоиши ченшавандаи супероксид мушоҳида нашуд.

Механизмро бо муқоиса ба генератори эҳтиётӣ осонтар фаҳмидан мумкин аст. Кабуди метилен ҳамчун интиқолдиҳандаи алтернативии электрон амал мекунад, ки эквивалентҳои барқароркунандаро қабул карда, онҳоро ба сӯи ситохроми c ва комплекси IV мегузаронад. Ин ҷараёни электронҳо ва синтези ATP-ро дастгирӣ мекунад ва ҳамзамон ихроҷи электронҳоро дар қисмҳои пешинаи занҷир кам мекунад. Ҳангоми маҳрумияти шадид ин ангезиш омили зараровар мешавад, зеро талаботи мубодилаи моддаҳоро дар шароите зиёд мекунад, ки оксигену глюкоза қариб вуҷуд надоранд; дар натиҷа захираҳои охирин метавонанд зудтар тамом шаванд. Пас аз бозгашти субстратҳо ҳамин хусусият бартарӣ мешавад, зеро ба митохондрияҳои осебдида барои самаранок истифода бурдани оксигену глюкозаи барқароршуда кумак мекунад. Аз ҳамин сабаб, натиҷаҳои шарҳҳои интиқоли электронии митохондрияҳо бояд бо назардошти шароити маҳрумият оварда шаванд.

Як нуктаи эҳтиётӣ: ин қоидаи вақт ба ҳамин омодасозии астроситҳо тааллуқ дорад. Таҳқиқоти ҳамроҳи ҳуҷайравӣ бо навъи дигари ҳуҷайра, маҳрумияти сабуктар ва консентратсияи пасттар ҳатто ҳангоми таъсиррасонӣ дар давраи маҳрумият муҳофизатро нишон дод. Навъи ҳуҷайра, оксигени боқимонда, консентратсия ва тартиби таҷриба муайян мекунанд, ки таъсир мусбат мешавад ё манфӣ.

Ҷараёни музмини пасти хун: хотира, ситохромоксидаза ва рагҳо дар тӯли ҳафтаҳо

Дар таҷрибаҳои музмин табобати ҳаррӯза бо вояи паст дар тӯли ҳафтаҳо истифода шуд, на як болюси таъҷилӣ. Дар таҳқиқоти аввал калламушҳои дорои басташавии доимии шараёнҳои каротид дар тӯли як моҳ ҳар рӯз 4 mg/kg гирифтанд. Воя пас аз ҳар машғулияти омӯзишии ҳаррӯза дода мешуд, то ба таҳкими хотира таъсир расонад, на ба иҷрои фаврии вазифа. Ҳайвоноти дорои басташавӣ вазифаҳои фарқгузории визуалиро сусттар меомӯхтанд ва дар санҷиши душвори хотира натиҷаи бадтар нишон медоданд, дар ҳоле ки қобилияти шиноварӣ, фаъолияти ҳаракатӣ ва шинохти бӯй таъсир надиданд. Табобати ҳаррӯза нуқсонҳои омӯзиш ва хотираро коҳиш дод, бе он ки рафтори умумии ҳаракатиро тағйир диҳад.

Таҳқиқоти минбаъда пас аз ҳамон реҷаи якмоҳа фаъолияти ситохромоксидазаро, ки комплекси IV-и митохондрия аст, дар 44 минтақаи мағзи сар харитабандӣ кард. Басташавӣ фаъолияти ферментро дар қишри визуалӣ, пешпешонӣ ва перириналӣ, инчунин дар гиппокамп ва амигдала паст кард ва фаъолияти ҳамоҳангшудаи байни қишри визуалӣ ва гиппокампро суст намуд. Табобат фаъолияти минтақавии ферментро нигоҳ дошт ва ин ҳамбастагиҳои мубодилаи моддаҳоро байни минтақаҳо тақвият дод; фаъолияти нигоҳдошташуда бо иҷрои беҳтари вазифаҳо ҳамбастагӣ дошт. Ин ҳамбастагиҳо фаъолияти ҳамоҳангшудаи ферментҳои мубодилаи моддаҳоро тавсиф мекунанд, на ченакҳои мустақими пайвастагии функсионалии мағзи инсонро. Баррасиҳои мубодилаи энергетикии мағзи сар барои равшан нигоҳ доштани ин фарқият кумак мекунанд.

Таҳқиқоти алоҳидаи якҳафтаина ҳар рӯз 2 mg/kg истифода бурд ва барои санҷидани механизм боздорандаи роҳи сигналиро илова кард. Бо табобат ҷараёни хуни мағзи сар аз тақрибан 60 ба тақрибан 100 mL барои ҳар 100 g дар як дақиқа афзуд ва зичии рагҳои гиппокамп аз тақрибан 15.1 ба 23 фоиз расид. Ҳар ду беҳбудӣ ҳангоми бастани роҳи зиндамонии PI3K/Akt қисман баргаштанд ва бо табобат сатҳи Akt-и фосфоронидашуда зиёд шуд. Натиҷаҳои ҷараёни хун, зичии рагҳо, монеа ва нейронҳо ба муҳофизати нейроваскулярии вобаста ба сигналдиҳии PI3K/Akt ишора мекунанд, на ба таъсири сирф мубодилавӣ.

Чаро ҳеҷ кадоми инҳо ба ёрии таъҷилӣ ҳангоми инсулт баробар нест

Шароити назоратшавандаи лабораторӣ сабаб аст, ки ин натиҷаҳо мустақиман татбиқ намешаванд. Ҳуҷайраҳои парваришшуда на тромб доранд ва на фармакокинетика. Модели 2VO ҷараёни тӯлонии умумии пасти хун аст, на эмболи ногаҳонии мавзеӣ бо пенумбрае, ки ҳамагӣ чанд дақиқа пеш пайдо шудааст. Ҳатто дар MCAO-и калламушҳо ҳайвоноти ҷавону солим, беҳушкунӣ, басташавиҳои якхела ва воридкунии вояҳо дар вақти дақиқ истифода мешаванд. Ин аз беморони калонсол бо лахтаҳои гуногун, атеросклероз, гипертония, диабет ва вақти номаълуми оғози инсулт фарқ мекунад.

Ҳеҷ озмоиши тасодуфисозишудаи нашршуда дар одамон кабуди метиленро ҳамчун табобати таъҷилии инсулти шадиди ишемикӣ тасдиқ накардааст. Таҳқиқоти тасвирбардорӣ дар одамон, ки баъзан иқтибос мешавад, 26 калонсоли солимро дар бар гирифт, на беморони инсултро; як вояи даҳонӣ сигналҳои мағзи вобаста ба вазифаро тағйир дод ва беҳбудии хурде дар ба ёд овардан ба вуҷуд овард. Ин фаъолияти марказиро нишон медиҳад, на самаранокӣ дар инсултро. Роҳнамоҳои кунунии ёрии таъҷилӣ баръакс ба реперфузияи зуд тавассути тромболизи дохиливаридӣ дар беморони мувофиқ ва тромбэктомия ҳангоми басташавии мувофиқи рагҳои калон такя мекунанд; тартибҳои стандартии ёрии таъҷилӣ ҳангоми инсулт ягона роҳи исботшуда боқӣ мемонанд. Ҳангоми гумони инсулт ёриро ҳеҷ гоҳ барои додани кабуди метилен ба таъхир андохтан мумкин нест. Маҳдудиятҳои амалии гузаронидани вояҳо аз таҳқиқоти пешклиникӣ низ шарҳ медиҳанд, ки чаро ҷадвалҳои калламушҳоро ҳамчун реҷаҳои клиникӣ қабул кардан мумкин нест.

Масъалаҳои бехатарӣ ин марзро боз ҳам таъкид мекунанд. Кабуди метилени дохиливаридӣ огоҳии махсуси дар чорчӯба ҷойгиршуда дорад: ҳангоми якҷоя истифода бурдан бо доруҳои серотонинергӣ, аз ҷумла SSRIs, SNRIs ва боздорандаҳои MAO, метавонад синдроми ҷиддӣ ё марговари серотонин ба вуҷуд ояд. Бисёр беморони синну соли маъмул барои инсулт чунин доруҳоро мегиранд. Он ҳангоми норасоии G6PD аз сабаби хатари гемолиз мамнуъ аст. Он инчунин сигналдиҳии оксиди нитрогенро бозмедорад, ки дар баъзе шароит муқовимати рагҳо ва фишорро баланд мекунад; бинобар ин, онро набояд танҳо ҳамчун доруе тавсиф кард, ки ҷараёни хуни мағзи сарро зиёд мекунад. Реҷаи дохиливаридии тасдиқшудаи 1 mg/kg барои метгемоглобинемияи бадастомада реҷаи табобати инсулт нест.

Хулосаи воқеъбинона маҳдуд, вале асоснок аст. Дар давраи реперфузия ҳангоми ишемияи муваққатии мавзеӣ кабуди метилен бо вояи паст пешрафти осебро дар калламушҳо кам кард. Ҳангоми басташавии доимӣ он инфарктро ба таъхир андохт, аммо пешгирӣ накард. Дар астроситҳо он ҳангоми маҳрумияти шадид зарар расонд ва ҳангоми барқарорсозии оксиген кумак кард. Дар гипоперфузияи музмин он ситохромоксидаза, рагҳо ва хотираро дар тӯли ҳафтаҳо нигоҳ дошт. Як интиқолдиҳанда, се шароит, се ҷавоб.