میتیلین بلو او بارټونېلا: لابراتواري موندنې او د کلینیکي شواهدو محدودیتونه

د کلتور لوښی او ناروغ د «انتان» کلمه شریکوي، خو مفهوم یې یو شان نه دی. په لوښي کې انتان پر اګر د کالونیو شمېر دی. په ناروغ کې بیا دا د حجرو او رګونو دننه باکتریاوې، په وینه او نسجونو کې خوځېدونکي درمل، او د کار یوه برخه ترسره کوونکی معافیتي سیستم دی. که دا دواړه سره ګډ شي، یوه د پام وړ لابراتواري شمېره د درملنې په څېر ښکاري. که جلا وساتل شي، هماغه شمېره خپل اصلي ارزښت لري: د بلې تجربې د ترسره کولو دلیل.

د میتیلین بلو او بارټونېلا په اړه د دې بیاکتنې ټوله موخه همدا توپیر روښانه کول دي. د یوې څېړنیزې ډلې دوو لابراتواري څېړنو میتیلین بلو د نه ودې په حالتونو کې د Bartonella henselae پر وړاندې وازمایه. دواړو په ښیښه‌یي او پلاستیکي لوښو کې د پیاوړي فعالیت راپور ورکړ. هېڅ یوې پر انسان ازموینه نه ده کړې.

ولې څېړونکي ساکن پړاو ازمويي

د انټي‌بیوټیکونو ډېری ازموینې د ودې په حال کې حجرې کاروي. دا ماډل یو ستونزمن حالت له پامه غورځوي: هغه حجرې چې وېش یې درولی وي او هغه درمل زغمي چې د دوی د ودې په حال کې هم‌ډوله حجرې وژني.

بارټونېلا په بدن کې پاتې کېدای شي، په ګډون د سرو وینې حجرو او د رګونو د داخلي پوښ د حجرو دننه. نو دې ډلې وپوښتل چې کوم منظور شوي درمل B. henselae وروسته له دې وژلی شي چې ساکن پړاو ته داخل شي. د ودې په حال کې حجرو پر وړاندې ټیټ MIC د ساکن پړاو د حجرو د وژلو وړاندوینه نه کوله. ریفامپین ډېر ټیټ MIC درلود، خو ساکنې حجرې یې په کمزوري ډول وژلې؛ په مقابل کې، د لوړو MIC ارزښتونو لرونکو مرکباتو دا حجرې په ښه ډول وژلې. هغه لوستونکي چې د دې ډول مقالې د لوستلو عمومي میتود غواړي، هغه به د میتیلین بلو د څېړنو د لوستلو په لارښود کې ومومي.

لومړنۍ غربالګري: Li او همکاران، 2019

په Antibiotics کې د 2019 د ساکن پړاو غربالګرۍ یوه واحده سویه، B. henselae JK53، وکاروله چې د Schneider په غذایي محیط کې له 10 percent جنیني غوايي سیروم سره، په 37 C او 5 percent CO2 کې وده ورکړل شوې وه. یوه ورځني کلتورونه تر ډېره له خپرو شوو، د وېش په حال کې حجرو جوړ وو. پنځه ورځني کلتورونه، چې په هر mL کې یې شاوخوا 10 د 8م توان کالونۍ جوړوونکي واحدونه لرل، ساکن پړاو وګڼل شول او د لیدلو وړ راټولې شوې ډلې یې لرلې.

ازموینه د SYBR Green I او پروپیډیم آیوډایډ په وسیله ترسره شوه او د ژوندیو او په ایزوپروپانول وژل شوو حجرو د مخلوطونو پر بنسټ تنظیم شوه. ځکه چې میتیلین بلو غلیظ رنګ لري، اغېز ښودونکي مرکبات لومړی په مایکروسکوپي کتنه او بیا پر وینې اګر د کالونیو په شمېرلو تایید شول؛ وروستۍ طریقه د ارزونې سخت معیار و.

له 1,581 منظور شوو درملو څخه، چې په 50 micromolar کې وازمویل شول، میتیلین بلو د پلېټ لوستونکي له مخې 16 percent او د مایکروسکوپي کتنې له مخې 25 percent ژوندي پاتې کېدل پرېښودل. د ډاپټومایسین پایله 21 percent وه، د څو ازولونو پایلې له 22 تر 27 percent، د جینټامایسین 32 percent، د اریترومایسین 66 percent، او د سیپروفلوکساسین 74 percent وې. پیروینیم پامویټ په لوستونکي کې پیاوړی ښکارېده، خو د خپل فلورېسنس له امله یې په مایکروسکوپي کتنه کې ارزونه نه کېده.

د ودې په حال کې B. henselae پر وړاندې د میتیلین بلو MIC له 0.08 تر 0.16 micrograms per mL و. د پنځه ورځنیو ساکنو حجرو پر وړاندې، په 5 micrograms per mL کې، له یوې ورځې تماس وروسته د کالونیو شمېر داسې کچې ته راښکته شو چې هېڅ کالونۍ نه کشف کېده؛ دا پایله د ډاپټومایسین او پیروینیم پامویټ له پایلو سره د هغوی په ازمویل شوو غلظتونو کې برابره وه. د وخت په تېرېدو د وژنې یوې جلا ازموینې 10 micrograms per mL وکارول. دا د لابراتواري تماس کچې دي، نه د درملو دوزونه، او مقاله یې هم په همدې ډول بیانوي. د انسان په پلازما کې د اعظمي غلظت یو حواله شوی ارزښت، چې نږدې 3.9 micrograms per mL دی، په مقاله کې یوازې د شالید د معلوماتو په توګه راغلی. د میتیلین بلو د فارماکوکینټیک عمومي کتنه تشریح کوي چې ولې د پلازما یوه شمېره د نسج د شمېرې په توګه نه شي لوستل کېدای.

په مقاله کې دوه محدودیتونه په څرګند ډول بیان شوي. نه د بایوفیلم ماډل موجود و او نه د میتیلین بلو د ترکیبونو ازموینه شوې وه. پنځه ورځنۍ راټولې شوې ډلې په ساکن مایع کلتور کې د حجرو کلسترونه وو، نه د بایوفیلم یوه تایید شوې تجربه. لیکوالانو پر حیواناتو د څېړنو، د ترکیبونو د څېړنو، د بایوفیلم د څېړنو او د بارټونېلا په نورو نوعو کې د ازموینو غوښتنه وکړه.

ترکیبونه او له بایوفیلم څخه ترلاسه شوې حجرې: Zheng او همکاران، 2020

په BMC Microbiology کې د 2020 تعقیبي څېړنې هماغه سویه او غذایي محیط وساتل، خو شپږ ورځنیو ساکنو کلتورونو ته یې مخه کړه او دوه هغه موارد یې ورزیات کړل چې لومړۍ مقاله ترې بې‌برخې وه: د دوو درملو ترکیبونه او له بایوفیلم څخه د ترلاسه شوو حجرو ماډل.

د منفردو درملو لپاره، د 24 ساعتونو په موده کې په یو شان 5 micrograms per mL کې، میتیلین بلو په هر mL کې 3.2 ځله 10 د 4م توان کالونۍ جوړوونکي واحدونه پرېښودل، په داسې حال کې چې د کنټرول شمېر نږدې 2.8 ځله 10 د 10م توان و. سیپروفلوکساسین، جینټامایسین او نایټروفورانټوین په هماغه وخت کې لږې کالونۍ پرېښودې. دا د 2019 له پایلې سره توپیر لري، چې هماغې نومول شوې کچې له یوې ورځې وروسته هېڅ د کشف وړ کالونۍ نه وې پرېښې. د کلتور عمر، کثافت او د کار کولو طریقه توپیر لرل؛ نو د وژنې اغېز د لوري له پلوه تکرارېدونکی و، خو د اندازې له پلوه یو شان نه و. له یوې ازموینې تر بلې دا بدلون یو دلیل دی چې د خوندیتوب او د درملو د متقابلو اغېزو معیاري ارزونې لابراتواري ځواک له کلینیکي اغېز څخه جلا ګڼي.

د ترکیبونو غربالګري تر ټولو ډېر نقل شوې برخه ده. د هرې برخې غلظت په 5 micrograms per mL ثابت ساتل شوی و. هم ازیترومایسین له میتیلین بلو سره او هم ریفامپین له میتیلین بلو سره په 24 ساعتونو کې هېڅ د کشف وړ ساکن پړاو کالونۍ پرې نه ښودې؛ د سیپروفلوکساسین دواړو جوړو هم همدا پایله لرله. له 25 ازمویل شوو جوړو څخه یوازې دغو څلورو دا پایله ورکړه. د هم‌افزایۍ رسمي تحلیل نه و شوی؛ نو سمه اصطلاح «په دې شرایطو کې فعال ترکیب» ده، نه «ثابته شوې هم‌افزایي».

د بایوفیلم تجربې له یوه ځوان، ګډوډ شوي بایوفیلم څخه ترلاسه شوې حجرې وازمویلې، نه یوه بشپړ او بالغ بایوفیلم ته د درملو ننوتل. کلتورونو ته پنځه ورځې وده ورکړل شوه، بیا رقیق او د څاه‌لرونکو پلېټونو په څاه‌ګانو کې د پنځو نورو ورځو لپاره واچول شول، د کریسټال وایلېټ په رنګولو تایید شول، او بیا د درملو له تماس مخکې وتوږل شول. په 5 micrograms per mL کې، یوازې میتیلین بلو د 6مې ورځې تر رسېدو شمېر 2.3 ځله 10 د 2م توان ته راټیټ کړ؛ دا د منفردو درملو له غوره پایلو څخه و، خو صفر نه و. د میتیلین بلو دواړه ترکیبونه د 6مې ورځې تر رسېدو صفر ته ورسېدل، او د سیپروفلوکساسین دواړو ترکیبونو هم همدا پایله لرله.

لیکوالانو هماغه محدودیتونه په ګوته کړل چې یو دقیق لوستونکی به یې هم وویني: ځوان توږل شوی بایوفیلم، نه زوړ او بشپړ بایوفیلم؛ د ټولو درملو لپاره یو اسانه غلظت، نه د هر درمل خپل واقعي اعظمي غلظت؛ یوازې ټاکل شوې جوړې چې پر ازیترومایسین یا ریفامپین راڅرخېدې؛ یوه سویه؛ نه حیوانات او نه ناروغان. د درې درملو د ترکیبونو راتلونکې څېړنه وړاندیز شوې وه، خو پایلې یې نه وې راپور شوې.

د څېړنو د طرحې پرتله

جدول د دې مقالې اصلي ټکی په لنډه بڼه وړاندې کوي. د وروستي ستون کیڼ لوري ته ټول معلومات د کلتور څېړنې دي. په هېڅ یوه مقاله کې داسې څه نشته چې په وروستي ستون کې ځای ولري.

بارټونېلا بورېلیا نه ده

دواړه مقالې د لایم ناروغۍ سپایروکیټ، Borrelia burgdorferi، یادوي، ځکه چې د رنګ ازموینه په هماغه لابراتوار کې د بورېلیا د ساکن پړاو له پخوانیو څېړنو څخه اخیستل شوې وه؛ هلته میتیلین بلو او ډاپټومایسین هم اغېز ښودونکي مرکبات بلل شوي وو. دا مخینه ګټور شالید دی او د تېروتنې یوه عامه سرچینه هم ده.

د بارټونېلا په هېڅ یوه مقاله کې داسې تجربه نشته چې بورېلیا او بارټونېلا څنګ په څنګ وازمويي. میکروبونه توپیر لري، غذایي محیطونه توپیر لري، غلظتونه توپیر لري، او په بارټونېلا کې پر غشا د میتیلین بلو اټکل شوی اغېز د داسې اټکل په توګه بیان شوی و چې نورو څېړنو ته اړتیا لري. پایلې باید له یوې نوعې څخه بلې ته ونه غځول شي، او هېڅ یوه مقاله د پرازیتونو په اړه د پراخو ادعاوو ملاتړ نه کوي. د بورېلیا او بارټونېلا د پایښت کوونکو حجرو پرتله د همدې دلیل له مخې د دواړو د څېړنو مجموعې جلا ساتي.

ولې کلتورونه د درملنې پر پروتوکول نه بدلېږي

د بارټونېلا لپاره د میتیلین بلو د پروتوکول په لټون کې لېوالتیا د پوهېدو وړ ده. همدا مقالې ښيي چې ولې دا عبارت باید د پېرلو د لېست پر ځای د خبرداري نښه وګڼل شي.

لومړی، د پلېټ په یوه څاه کې 5 micrograms per mL نسخه نه ده. له دې کچې سره د جذب، وېش، پروټینونو سره د تړلو، د حجرو دننه د ننوتلو یا د زغملو وړتیا معلومات نه دي تړلي. لیکوالانو دا کچه د انټي‌بیوټیکونو د اعظمي غلظتونو د یوه نږدې منځني ارزښت په توګه ټاکلې وه او ویلي یې وو چې راتلونکې څېړنې باید هر درمل په خپل واقعي غلظت کې وکاروي.

دویم، صفر کالونۍ یعنې د کالونیو د کرلو په هغو شرایطو کې هېڅ کالونۍ نه وه، نه دا چې نسج له میکروبونو پاک دی. پایښت کوونکې حجرې، د حجرو دننه باکتریاوې او د نمونې اخیستلو محدودیتونه ټول د اګر د پلېټ له ارزونې بهر پاتې کېږي.

درېیم، هغه ترکیبونه چې د یوې څاه کلتور له میکروبونو پاکوي، په بدن کې ناکامېدای شي یا زیان رسولی شي. ازیترومایسین له میتیلین بلو سره او ریفامپین له میتیلین بلو سره لابراتواري جوړې دي چې په لابراتواري تماس کچو ازمویل شوې دي. د حیواناتو د فارماکوکینټیک او کنټرول شوو انساني معلوماتو له نشتوالي سره نه دوز ټاکل شوی، نه موده، او نه د ګټې او خطر نسبت. هر څوک چې انتخابونه ارزوي، باید له کلینیکي ډاکټر سره پرې خبرې وکړي او، مخکې له دې چې د لوښي له معلوماتو کومه پایله واخلي، دا موضوع وڅېړي چې د میتیلین بلو کارول کله طبي څارنې ته اړتیا لري.

هغه محدوده پایله چې دا مقالې یې ملاتړ کوي، دا ده: میتیلین بلو په لابراتوار کې د نه ودې په حال کې B. henselae JK53 پر وړاندې تکرارېدونکی فعالیت لري، په ګډون د دوو درملو په لابراتواري ترکیبونو کې؛ د ترکیبونو او له بایوفیلم څخه ترلاسه شوو حجرو تر ټولو پیاوړې پایلې د 2020 له څېړنې څخه دي. نور هر څه، په ګډون د دې پوښتنې چې ایا دا فعالیت د انسان د بارټونېلوز لپاره اهمیت لري، لا نه دي ازمویل شوي.