مقاله
EMB agar او MacConkey agar: د میډیا ټاکنه او تفسیر
یو زدهکوونکی د اوبو هماغه نمونه پر دوو پلېټونو streak کوي. پر یوه پلېټ تیاره کالونۍ له شنې فلزي ځلا سره ښکاري. پر بل پلېټ روښانه ګلابي کالونۍ له ورېځمنې هالې سره ښکاري. دواړه پلېټونه له هماغه ټیوب څخه inoculate شوي، څنګ په څنګ incubate شوي، او په هماغه ساعت لوستل شوي دي. زدهکوونکی پوښتي چې کوم پلېټ سم دی.
دواړه پلېټونه سم دي. دوی بېلابېلو پوښتنو ته ځواب وایي. ګډوډي هغه وخت رامنځته کېږي چې دا دوه میډیا د کولمو د باکتریاوو لپاره د یو بل بدیل سکرینونه وګڼل شي. دواړه یوه موخه لري: د ګرام منفي enteric موجوداتو انتخاب او د lactose تخمیرکوونکو له غیرتخمیرکوونکو څخه جلا کول، خو دا موخه د بېلابېلې کیمیا او بېلابېل بصري منطق له لارې پلي کوي. کله چې د دواړو بنسټیز مفاهیم درک کړئ، د پلېټ ټاکنه او د کالونیو لوستل عادي کار ګرځي.
لنډ ځواب
EMB agar دوه رنګونه، eosin Y او methylene blue، کاروي چې دوه دندې په یو وخت ترسره کوي: د ګرام مثبت وده کموي او د قوي اسید تولیدوونکو شاوخوا رسوب کوي، چې تیاره کالونۍ جوړوي؛ په کلاسیک ډول Escherichia coli ته فلزي شنه ځلا ورکوي. MacConkey agar دندې جلا کوي: bile salts او crystal violet د ګرام مثبتو وده کموي، lactose د تخمیر لپاره مواد برابروي، او neutral red اسید د ګلابي یا سرو کالونیو په بڼه ښيي. که موخه د E. coli روښانه احتمالي ښودنه وي، EMB مناسب ځای لري. که موخه د lactose تخمیرکوونکو او غیرتخمیرکوونکو پاکه ګلابي-پر-وړاندې-بېرنګ وېش وي، په ځانګړي ډول د غایطه موادو یا ادرار په کاري بهیرونو کې، MacConkey عموماً لوستل یې اسانه دي. هېڅ پلېټ یوازې د رنګ له مخې یو موجود نه پېژني.
EMB: رنګونه چې په یو وخت انتخاب او راپور ورکوي
د EMB مفهوم انتخاب او نښهکوونه په هماغو مالیکولونو کې یوځای کوي. د ASM eosin methylene blue agar protocol EMB هم انتخابي او هم تفریقي بولي؛ د رنګونو جوړه د ډېرو ګرام مثبتو موجوداتو مخه نیسي، په داسې حال کې چې د lactose تخمیر د رنګ جذب او رسوب رامنځته کوي. د Levine معیاري formulation کې peptone، lactose، phosphate، eosin Y، methylene blue، او agar شامل دي، لکه څنګه چې د FDA BAM method for Levine EMB agar کې لېست شوي. پام وکړئ چې د EMB ځینو پخوانیو ترکیبونو له lactose سره sucrose هم زیاتوله، خو Levine EMB lactose لري او sucrose نه لري؛ نو ثبت کړئ چې ستاسو لابراتوار کوم formulation کاروي.
د EMB لوستل د رنګ د چلند لوستل دي. پیاوړی lactose تخمیر دومره اسید تولیدوي چې د رنګ دروند رسوب رامنځته کړي، E. coli ته تیاره شین-تور مرکزونه ورکوي او، په کلاسیک حالت کې، په منعکسې رڼا کې فلزي شنه ځلا. کمزوري تخمیرکوونکي لکه Enterobacter او Klebsiella عموماً ګلابي تر ارغواني، مخاطي کالونۍ جوړوي، خو دا ځلا نه لري. غیرتخمیرکوونکي لکه Salmonella، Shigella، او Proteus عموماً بېرنګه یا نیمهشفافې کالونۍ جوړوي، ځکه هغه ناڅاپي اسید نه تولیدوي چې رنګونه رسوب کړي. ګرام مثبت موجودات عموماً مهار کېږي، خو د مهار کچه مطلقه نه ده او د strain او محصول له مخې بدلېږي. د رنګ د چمتو کولو بشپړه کیمیا، په دې کې دا هم چې methylene blue ولې اساساً د cationic stain په توګه چلند کوي، د رنګونو د formulation جلا بحث پورې اړه لري، او د microscopy عمومي زمینه په د staining methods atlas کې ده. دا مقاله د پلېټ پر ټاکنه او لوستلو تمرکز کوي.
پورته شکل تشریحي دی. دا هغه بصري منطق ښيي چې تمه یې کېدای شي: پر EMB تیاره ځلیدونکې کالونۍ، ګلابي مخاطي ډولونه، او روښانه ډولونه؛ او پر MacConkey ګلابي د روښانه ډولونو پر وړاندې. د pattern د زدهکړې لپاره یې وکاروئ، بیا هره پایله د عکس اخیستل شویو controls او ستاسو پر مېز د هماغه دقیقې میډیا د product insert په مقابل کې تایید کړئ.
MacConkey: جلا دندې، ساده بصري قاعده
د MacConkey مفهوم هره دنده جلا ingredient ته سپاري. د ASM MacConkey agar protocol همدا انتخابي او تفریقي چوکاټ وړاندې کوي، او د FDA BAM method for MacConkey agar کاري اجزا لېست کوي: peptones، lactose، bile salts، salt، neutral red، crystal violet، او agar. Bile salts له crystal violet سره یوځای د ګرام مثبتو پر وړاندې انتخاب کوي. Lactose د تخمیر substrate برابروي. Neutral red د pH د راپور ورکوونکي په توګه عمل کوي، او هلته چې اسید جوړېږي ګلابي تر سور رنګ اخلي؛ ځینې وخت د قوي تخمیرکوونکو شاوخوا رسوب شوی bile هم لیدل کېږي.
د لوستلو قاعده په قصدي ډول ساده ده: ګلابي د lactose تخمیرکوونکي مانا لري، او بېرنګ یا روښانه د غیرتخمیرکوونکي. E. coli ګلابي تر سور ښکاري، ډېری وخت د bile precipitate هاله لري. Klebsiella او Enterobacter ګلابي ښکاري او د خپلو capsules له امله ډېری وخت مخاطي وي. Salmonella، Shigella، Proteus، او ډېر نور ګرام منفي rods بېرنګه ښکاري. په تدریسي لابراتوارونو کې یو اضافي ګټه هم مهمه ده: bile salts عموماً د Proteus swarming کموي، نو پر MacConkey د جلا کالونیو ترلاسه کول د nonselective میډیا په پرتله اسانه وي، که څه هم مهار مطلق نه دی او salt free بدیلونه شته چې هلته د swarming کنټرول لومړیتوب وي.
د دې رنګونو د داسې چلند مالیکولي دلیل charge او structure ته رسېږي. Methylene blue یو cationic phenothiazine dye دی چې structure and properties یې د اسیدي باکتریايي سطحونو سره میلان تشریح کوي؛ همدا میلان هغه وخت هم عمل کوي چې په EMB کې د اسید په سیمو کې رسوب کوي.
په یوه نظر پرتله
| ځانګړنه | EMB agar | MacConkey agar |
|---|---|---|
| انتخابي سیستم | Eosin Y plus methylene blue | Bile salts plus crystal violet |
| تفریقي substrate | Lactose (Levine has no sucrose) | Lactose |
| Indicator | Dye precipitation itself (dark colonies, green sheen) | Neutral red (pink to red acid colonies) |
| Strong E. coli signal | Dark blue black colony, often metallic green sheen | Pink to red colony, often bile precipitate |
| Klebsiella and Enterobacter | Pink to purple, mucoid, usually no sheen | Pink to red, often mucoid |
| Salmonella, Shigella, Proteus | Usually colorless or translucent | Usually colorless or pale |
| Gram positives | Usually suppressed | Usually suppressed on crystal violet formulas |
| Best teaching payoff | Strong versus weak fermentation made visible | Simplest fermenter versus nonfermenter sort |
جدول د پرېکړې د کړنلارې په توګه ولولئ. کله چې تمرین غواړي زدهکوونکي د تخمیر د ځواک تدریجي توپیر له یوې روښانه پایلې سره وویني، EMB دا ښيي. کله چې تمرین د biochemical تایید تر مخه چټک دوهګونی وېش غواړي، MacConkey دا ښيي.
د کومې نمونې لپاره کومه میډیا
د اوبو په تمرینونو کې چې موخه یې د احتمالي fecal coliform یا E. coli پېژندنه وي، EMB جذاب دی ځکه ځلا یې په سترګو واضح توپیر لري. MacConkey هم enteric ګرام منفي موجودات اداره کوي او د اوبو په ازموینو کې تاریخي استعمال لري، خو هېڅ پلېټ د regulatory water method بدیل نه دی؛ داسې method کې ښايي د ازموینې له مخې modified mTEC یا MI په څېر میډیا مشخصه شوې وي. هغه method وګورئ چې ستاسو لابراتوار یې تعقیبولو ته اړ دی.
د غایطه موادو په ډول جلا کولو کې، چې تخمیرکوونکي له غیرتخمیرکوونکو څخه بېلوي، MacConkey عموماً له دې دواړو څخه ډېر ګټور دی. د Salmonella یا Shigella لپاره عملي stool work معمولاً د MacConkey تر څنګ نورې انتخابي enteric میډیا لکه XLD یا Hektoen enteric هم زیاتوي، پر MacConkey یوازې تکیه نه کوي.
د ادرار په ډول تدریس کې چې clinical workflow تقلیدوي، MacConkey له blood agar سره جوړه کړئ. MacConkey د ګرام منفي موجوداتو لومړنی وېش برابروي، په داسې حال کې چې blood agar هغه موجودات هم وده کوي چې MacConkey یې مهاروي. دا جوړه د urine culture setup په کلینیکي تشریحاتو کې معیاري ده.
د خالص مفهومي تدریس لپاره دواړه وکاروئ. EMB ښيي چې د تخمیر ځواک مهم دی او یو مالیکول دوه رولونه ترسره کولی شي. MacConkey modular design ښيي: selector، substrate، او reporter جلا ساتل کېږي. هغه زدهکوونکي چې معلوم E. coli، معلوم Klebsiella aerogenes، او معلوم Salmonella څنګ په څنګ پر دواړو میډیا streak کړي، معمولاً بیا د دغو دوو منطقونو ترمنځ ګډوډي نه کوي.
د لوستلو تېروتنې چې هر term تکرارېږي
تر ټولو عامه تېروتنه یوازې د رنګ له مخې پېژندنه ده. پر MacConkey ګلابي کالوني کېدای شي E. coli، Klebsiella، Enterobacter، یا بل تخمیرکوونکی وي. بېرنګ کالوني کېدای شي Salmonella، Shigella، Proteus، Pseudomonas، یا بل غیرتخمیرکوونکی وي. رنګ یو screening phenotype دی چې تاییدوونکي کارونه لکه Gram stain، oxidase، biochemical panels، یا instrument identification ته لارښوونه کوي؛ د species نوم نه دی.
دوهمه تېروتنه د نهموجودې ځلا ډېر تفسیرول دي. د E. coli ځینې واقعي کالونۍ، په ځانګړي ډول جلا کالونۍ، پر EMB لږه یا هېڅ فلزي ځلا نه تولیدوي. د ځلا نشتوالی E. coli نه ردوي، او د ځلا شتون یې نه ثابتوي. ځلا د احتمالي نښې په توګه وکاروئ.
درېیمه تېروتنه د بېلابېلو عمرونو پلېټونه پرتله کول دي. ځنډني lactose تخمیرکوونکي د اوږدې incubation وروسته پر MacConkey ګلابي کېدای شي، چې د تخمیرکوونکي او غیرتخمیرکوونکي پاک وېش ګډوډوي. پلېټ د لابراتوار په ټاکلي ساعت ولولئ او د incubation وخت له پایلې سره ثبت کړئ.
څلورمه تېروتنه mixed growth د یوه موجود په توګه لوستل دي. د بېرنګې کالونۍ څنګ ته یوه ګلابي کالوني دوه phenotypes ثبتوي، نه یو منځنی حالت. ښه جلا شوې کالونۍ واخلئ او هر morphotype جلا وڅېړئ. مخاطي texture هم ورته دام لري: Klebsiella او Enterobacter دواړه مخاطي ښکاره کېدای شي، نو capsule یوازې هېڅکله نوم نه ټاکي. هغه موجود چې پخوا د Enterobacter aerogenes په نوم تدریسېده اوس د Klebsiella aerogenes په توګه طبقهبندي کېږي، او همدا تشریح کوي چې ولې زاړه charts او نوي labels ظاهراً اختلاف لري.
Controls او وروستۍ قاعده
په هر session کې عکس اخیستل شوي یا تازه controls وچلوئ: E. coli د قوي تخمیرکوونکي reaction لپاره، Klebsiella aerogenes د کلاسیکې ځلا پرته د مخاطي تخمیر لپاره، د Salmonella یو strain د بېرنګ غیرتخمیرکوونکي reaction لپاره، او Staphylococcus aureus د دې لپاره چې ستاسو په دقیق محصول کې د ګرام مثبت مهار تایید شي. د strain شمېرې او acceptance criteria د manufacturer insert سره برابر کړئ، ځکه selectivity د bile، crystal violet، او dye content له بدلون سره بدلېږي.
پر bench یوه جمله په یاد وساتئ. EMB داسې رنګونه کاروي چې هم انتخاب کوي او هم راپور ورکوي، چې د E. coli روښانه signal برابروي خو لوستل یې لږ ظریف وي. MacConkey انتخابول له راپور ورکولو جلا کوي، چې ساده ګلابي-پر-وړاندې-روښانه وېش برابروي، خو د تخمیر جزئیات یې لږ وي. هغه میډیا وټاکئ چې مفهوم یې له پوښتنې سره برابر وي، رنګ په مناسبو ازموینو تایید کړئ، او دا دوه پلېټونه نور د یو بل سیالان نه پاتې کېږي بلکې یوځای کار کوي.