Ispeektiiramii xuuxinsa ifaa cuquliisa meetiliinii fi dandeettii xuuxinsa molaarawaa: wabii haalonni isaa ibsaman

Ispeektiiramiin cuquliisa meetiliinii hanga lakkoofsa isa keessaa tokko irra deebi'anii fayyadamuuf yaalanitti salphaa fakkaata. Laaboraatoriin tokko koofishantii dadhabina ifaa molaarawaa naannoo 82,000 gabaasa. Kan biraa 67,000 gabaasa. Inni sadaffaan immoo 100,000 ol gabaasa. Sadanuu safartuu mataa isaanii sirriitti ibsuu danda'u; garuu keessaa tokko illee dhaabbataa halluu kanaaf bakka hundatti hojjatu miti.

Burjaajii kana kan uumu yaad-rimeewwan adda ta'an lama walitti makuudha. Xuuxinsi ifaa safartuu furmaata murtaa'e irratti, seelii safartuu murtaa'e keessatti taasifamuudha. Dandeettiin xuuxinsa ifaa molaarawaa, yeroo baay'ee epsilon jedhamee barreeffamu, paaraameetira moodeela furmaata sanaati. Cuquliisni meetiliinii haala itti molakiyuulonni isaa walitti qabaman yeroo jijjiiru, moodeelichis ni jijjiirama; kanaaf paaraameetirichis ni jijjiirama. Amalli faayidaa qabu koofishantii hunda akka gatii haalonni isaa ibsamanitti ilaaluudha: dheerinni dambalii, bulleessaan, pH ykn baafariin, ho'i, daangaan cunqabinaa fi dheerinni karaa ifaa lakkoofsa sana wajjin kennamuu qabu.

Baandii monomeerii bishaan cunqabina gadi aanaa qabu keessatti

Furmaata bishaanii cunqabina gadi aanaa qabu keessatti, baandiin olaantummaa qabu kan kaatiyoonii cuquliisa meetiliinii naannoo 664 hanga 665 nm jira; meeshaalee fi filannoowwan kalibreeshinii adda addaa keessatti yeroo baay'ee 664 hanga 668 nm gidduutti gabaafama. Furmaatichi baay'inni halluu isaa monomeerii ta'ee akka turuuf cunqabina gahaa gadi aanaa yoo qabaate, baandiin sun hamma halluu safaruuf filannoo sirrii dha.

Gatiiwwan barreeffamoota qorannoo keessaa sadii haaloonni lakkoofsa guddaa mul'atu caalaa maaliif barbaachisoo akka ta'an agarsiisu. Qorattoonni suphee saamuda bishaanii cunqabina gara 7 micromolar gadiitti seeliiwwan 1 cm keessatti eegan, 665 nm irratti epsilon gara 82,000 M-1 cm-1 gabaasan. Gatiin sun akka qaxxaamura kalibreeshinii yaaliin argameetti, saamuda bishaanii cunqabina baay'ee gadi aanaa qabuuf haala addatti gaariin galmeeffameera. Booda kalibreeshiniin jalqabaa bishaan ayoononni keessaa baafaman keessatti taasifame, 2.34 hanga 37.52 micromolar fi karaa ifaa 1 cm fayyadamuun, halluu waliigalaaf 665 nm irratti gara 67,100 M-1 cm-1 kenne. Bu'aan gadi aanaan kun kan eegamu malee kan isa duraa faallessu miti; sababiin isaas walakkaan ol'aanaan daangaa kalibreeshinii sanaa daayimeerii hamma hubatamaa ta'een qaba. Gatiin sadaffaan, 664 nm irratti gara 73,460 M-1 cm-1, hojii pH 6.86 fi 293 K irratti ispeektiiramii mul'ate gara kutaa monomeerii fi daayimeeriitti addaan baase irraa argame; kunis gamaaggama xiinxalaa dhiheenya kana waa'ee fiiziksii ifaa cuquliisa meetiliinii irratti ba'e keessatti cuunfameera. Lakkoofsi sun gatii kutaa monomeerii walirra bu'iinsa keessaa addaan baafameeti malee, qaxxaamura kallattiin xuuxinsa ifaa fi halluu waliigalaa walbira qabu miti.

Qabxiin hojii irra oolu kana: koofishantii haaloonni isaa saamuda keessan wajjin walsiman filadhaa, ykn kan keessan kalibreessaa. Qorannoo baafarii foosfeetii 30 micromolar keessatti 82,000 fudhattanii walitti dhufeenyi sarara qajeelaa ammallee ni hojjata jettanii hin yaadinaa.

Garbi dheerina dambalii gabaabaa makaa dha

Cunqabinni yeroo dabalu, garbi naannoo 600 hanga 615 nm jiru fiixee 664 nm wajjin walbira qabamee ni guddata. Qorannoon ammayyaa yeroo baay'ee gumaacha daayimeerii gosa H naannoo 605 hanga 610 nm kaa'a. Xiinxalli ispeektiiramii waliigalaa cuquliisa meetiliinii bishaan keessatti taasifame fiixee daayimeerii 607 nm irratti fi fiixee tuuta sadarkaa ol'aanaa 600 nm irratti addaan baasa; kutaaleen rezoonaansii monomeerii immoo 664 fi 650 nm irratti jiru. Barruun isaa guutuun galmee banaa PMID 33251415 irraa argama.

Garbi sun akka xuuxinsa ifaa daayimeerii qulqulluutti moggaafamuu hin qabu. Caasaan monomeerii sochii raafamaa fi elektiroonii walitti hidhuunis naannoo sana keessatti gumaacha qaba; kanaaf olka'iinsi safarame gumaachota walirra bu'an irraa uumama. Madaqsi moodeela waliigalaa tokko moodeelli monomeerii fi daayimeerii qofa qabu daangaa guutuu 1.1 micromolar hanga 3.4 millimolar keessatti akka hin milkoofne argate; teetiraameerii itti dabaluun garuu walsimannaa gaarii kenne, mallattoon teetiraameeriis 34 micromolar gaditti iyyuu adda baafamuu danda'e. Jabinni kutaalee moodeelatti madaqfaman guddaa ture: kutaa monomeerii isa ijoo uchun 664 nm irratti gara 107,800 M-1 cm-1, daayimeerii uchun 607 nm irratti gara 101,400, teetiraameerii uchun 600 nm irratti gara 138,500; kunis bishaan ayoononni keessaa baafaman, baafarii hin qabne keessatti, soodiyem kiloorayidii 0 hanga 0.15 M fi ho'a 282 hanga 333 K jalatti argame. Isaan kun kutaalee moodeelaan addaan baafamaniidha; kanaaf bakka qaxxaamura Beer Lambert yaaliin argamee buufamuu hin qaban.

Ciminni uumama daayimeerii kallattiin safarameera. pH 6.86 fi 293 K irratti qorannoon tokko dhaabbataa uumama daayimeerii naannoo 3,900 M-1 argate. Hammi sun furmaatni hojii 5 micromolar maaliif walitti dhufeenya sarara qajeelaatti dhihaatu hordofu, furmaatni kuufamaa 50 micromolar garuu maaliif akkas hin taane ibsa. Yeroo mala qopheessanitti sakatta'iinsi faayidaa qabu reeshiyoo xuuxinsa ifaa naannoo 610 nm kan naannoo 665 nm irratti safarameen hiruudha. Reeshiyoon sun cunqabina wajjin yeroo dabalu, epsilon 664 nm irratti argamu kana booda gosa keemikaalaa tokko kan hin jijjiiramne hin ibsu.

Daangaa cunqabinaa cimdii tokko kan walitti jijjiiramuun olaantummaa qabame keessatti, ispeektiiramoonni qabxii isosbeestikii tokko qooddachuu danda'u; tartiiba saamuda bishaanii keessatti qabxiin kun yaaliin naannoo 625 nm irratti argameera. Qabxiin ifaa bakka isaa hin jijjiirre gosoota keemikaalaa olaantummaa qaban lama jiraachuu wajjin walsima. Cunqabinni yeroo dabalu qabxiin sun yoo socho'e ykn bade, akka akeekkachiisa tuutni sadarkaa ol'aanaa ykn madaalli jijjiiramaa jiru keessa seeneetti ilaalaa malee, akka dogoggora meeshaatti hin fudhatinaa.

Bulleessaan, pH fi ho'i ispeektiiramii ni jijjiiru

Bishaan walitti qabama molakiyuulotaa ni jajjabeessa. Akka qorannoon bulleessaa cuquliisa meetiliinii bishaanii fi makaa DMSO keessatti taasifame, kan akka PMID 30933781tti galmaa'e ibsutti, daayimeetil sulfo'oksaayidii dabaluun uumama daayimeerii ni hir'isa, fiixeewwan xuuxinsa ifaa fi filooresensii gara dheerina dambalii dheeraatti ni siqsa, bu'aa kuwaantamii filooresensiis gara dachaa afuriitti ni dabala. Hojichi ispeektiiramii bishaanii akka madaala monomeerii fi daayimeeriitti ilaala; xuuxinsi ifaa monomeerii naannoo 650 hanga 670 nm, kan daayimeerii immoo naannoo 580 hanga 615 nm jira. Dhaabbataawwan uumama daayimeerii ispeektiiramoota 293.15 K irratti argaman irraa shallaga.

Alkoolonni bakka fiixeen jiru fi jabina mul'atu lamaan ni jijjiiru; garuu walitti qabama molakiyuulotaa guutumaan guutuutti hin dhabamsiisan. Walbira qabuu jalqabaa tokko keessatti, 31.3 micromolar fi ho'a kutaa irratti, kan qorannoo bulleessaa cuquliisa meetiliinii keessatti gabaafame, fiixeen dheerina dambalii dheeraa bishaan keessatti 665 nm, meetaanoolii keessatti garuu 655 nm ture; gatiiwwan mul'atan kan furmaata waliigalaa bishaan keessatti naannoo 37,100, meetaanoolii keessatti immoo 60,800 turan. Mirkaneessi adda ta'e etaanoolii bishaan hin qabne keessatti 298 K irratti taasifame fiixee 655 nm, epsilon naannoo 68,000 kenne.

Jijjiiramni pH baramaa ispeektiiramii hamma pirootokoolonni hedduun yaadan caalaa xiqqoo jijjiira. Gamaaggamni xiinxalaa armaan olitti caqasame, gara pH 2 irraa hanga pH 12tti fiixeen naannoo 665 nm akka ture, hanga pH 11tti immoo jijjiiramni jabinaa xiqqoo qofa akka ture gabaasa. Gosti baafarii fi ciminni ayoonotaa bu'aa hamma pH maqaan ibsameetti jijjiiruu danda'u; kanaaf dubbisa meetira pH qofa osoo hin taane, baafarii fi soogidda dhugumaan fayyadamtan galmeessaa. Asiidii cimaa ykn alkaalii cimaa dhimma addaati; sababiin isaas halluun walitti qabama deebi'uu danda'u irra, jijjiirama keemikaalaa keessa darbuu danda'a. Ho'ii fi soogiddis madaala ni jijjiiru; qorannoon bishaanii 2020 lamaan isaanii yaadaan jijjiiraa kan tureefis kanaafi.

Lakkoofsi akka sirrii ta'ee turuuf safaruu

Hojiin hamma murteessuu hariiroo Beer Lambert irratti hundaa'a: xuuxinsi ifaa epsilon baay'isuu cunqabina baay'isuu dheerina karaa ifaa wajjin walqixa. Kana malees, daangaan sarara qajeelaa haalota keessan keessatti dhugumaan akka hojjatu ragaan barbaachisa.

Hojii cunqabina micromolar gadi aanaa irratti seelii 1 cm fayyadamaa. Epsilon naannoo 82,000 yoo ta'e, 5 micromolar xuuxinsa ifaa naannoo 0.41 kenna; 10 micromolar immoo gara 0.82 kenna. Safartuu monomeerii irratti xiyyeeffatu bishaan qofa keessatti gochuuf, naannoo ykn gara 5 hanga 7 micromolar gadi turuun, cunqabina micromolar kurnoota hedduutti ol siqanii kalibreessuu caalaa of-eeggannoo qaba. Furmaatota kuufamaa cunqabina ol'aanaa qabaniif, xuuxinsa ifaa 1 baay'ee caalu fudhachuu irra karaa ifaa gabaabisaa.

Saamuda duwwaa halluu hin qabne, garuu qabiyyee naannoo furmaataa wal-fakkaataa qabu fayyadamaa: bishaan sadarkaa qulqullinaa tokko qabu, qooda bulleessaa dabalataa tokko, baafarii fi soogidda wal-fakkaataa, halluu qofa malee. Furmaatota kalibreeshinii qabiyyee naannoo furmaataa sana keessatti, ho'a wal-fakkaataatti qopheessaa. Yeroo mala qopheessanitti dheerina dambalii tokko qofa dubbisuu irra, daangaa ifa mul'atu guutuu sakatta'aa; yoo danda'ame gara 550 hanga 750 nm. Olka'iinsa qofa osoo hin taane, bocas hordofaa. Furmaata tartiibaan laaffisuun boca sadarkeeffame yoo jijjiire, sirnichi keemikaalaan cunqabina irratti hundaa'a. Fiixeen tasgabbaa'aan fi reeshiyoon 610 hanga 665 nm tasgabbaa'aan, gatii R iskuweerii ol'aanaa qofa caalaa daangaa fudhatama qabuuf ragaa cimaa dha.

Bifa riyaajentichaa galmeessaa. Meeshaan daldalaan argamu meetiltaayooniniyem kiloorayidii bishaan hin qabne ykn haayidireetii akka tiraayhaayidireetii ta'uu danda'a; kanaaf hangi molaarawaan shallaggii furmaata kuufamaatiif fayyadamtan qabiyyee qaruuraa dhugaa wajjin walsimuu qaba. Tarkaanfiin kun qofti garaagarummaa cunqabina molaarawaa maqaan ibsame laaboraatoriiwwan gidduutti mul'atu keessaa muraasa ibsa. Of-eeggannoon walfakkaataan yeroo bu'aawwan shallaggii qorannoo hammaa keessatti galan, yeroo ispeektiiramoonni sakatta'iinsa tasgabbii qophii deeggaran, fi yeroo odeeffannoon wantoota qulqullina hir'isanii gamaaggama qulqullinaa fi ulaagaalee barbaadu illee ni barbaachisa.

Cuunfaa haalonni isaa ibsaman

Gabatee kana akka unka jalqabaa galmee laaboraatoriitti fayyadamaa malee, akka madda dhaabbataawwan walbakka buufamuu danda'aniitti hin ilaalinaa.

Kanaaf dheerinni dambalii xuuxinsa ifaa cuquliisa meetiliinii deebii gabaabaa ibsa dabalataa dheeraa qabuudha. Fiixee safartan, furmaata keessatti safartan, cunqabina irratti safartan wajjin gabaasaa. Amalli sun gatii tokko bishaan cunqabina gadi aanaa qabu keessatti naannoo 664 nm irratti argame gara dhaabbataa sobaa bakka hundatti hojjatutti akka hin jijjiiramne eega.