Barruu qorannoo

Agar EMB fi agar MacConkey: miidiyaa filachuu fi hiikuu

Agar EMB fi agar MacConkey: miidiyaa filachuu fi hiikuu

Barataan saamuda bishaanii tokko gabatee lama irratti streak godha. Tokko irratti koloneewwan dukkanaa’oo calaqqee magariisa sibiilaa qaban mul’atu. Isa biraa irratti koloneewwan pinkii ifaa halo dukkanaa’aa fakkaatu qaban mul’atu. Gabateewwan lamaan tuubii tokko irraa inoculate godhaman, cina cinaan incubate godhaman, sa’aatii tokkotti dubbifaman. Barataan gabateen sirrii kam akka ta’e gaafata.

Gabateewwan lamaan sirrii dha. Gaaffii adda addaa deebisu. Burjaajii kan uumu miidiyaa lamaan akka qorannoo wal jijjiiranii tajaajilanitti ilaaluudha, jechuunis bakteeriyoota mar’imaanii sakatta’uuf tokko isa kaanii bakka bu’a jedhanii fudhachuudha. Kaayyoo waloo qabu: organismoota enteric Gram negative filachuu fi lactose fermenteroota nonfermenteroota irraa adda baasuu. Garuu kaayyoo kana keemistirii adda addaa fi sirna mul’ataa adda addaatiin raawwatu. Yaad-rimeewwan bu’uuraa lamaan erga hubattee booda, filannoon gabatee fi dubbisni kolonee hojii idilee ta’a.

Deebii gabaabaa

Agar EMB halluulee lama, eosin Y fi methylene blue, hojii lama yeroo tokkotti hojjetan fayyadama: guddina Gram positive ni ukkaamsu, akkasumas naannoo oomishtoota asiidii cimaa keessatti ni kuufamu; kanaan koloneewwan dukkanaa’oo uumu, Escherichia coli irratti immoo akka beekamutti calaqqee magariisa sibiilaa mul’isu. Agar MacConkey hojiiwwan kana adda baasa: bile salts fi crystal violet Gram positive ni ukkaamsu, lactose fermentation’f substrate kenna, neutral red immoo asiidii kolonee pinkii ykn diimaa taasisuun agarsiisa. Yoo hojiin agarsiisa presumptive E. coli ifa ta’e barbaadu, EMB bakka isaa qaba. Yoo hojiin lactose fermenteroota nonfermenteroota irraa pinkii fi halluu-dhabaa jechuun ifatti adda baasuu ta’e, keessumaa hojii stool ykn urine keessatti, MacConkey yeroo baay’ee dubbisuuf salphaa dha. Gabateen kamiyyuu halluu qofa irratti hundaa’uun organismii adda hin baasu.

EMB: halluulee yeroo tokkotti filatanii fi gabaasan

Yaad-rimeen EMB filannoo fi agarsiisa molekiyuulota waluma sana keessatti walitti qaba. Prootokooliin agar eosin methylene blue kan ASM EMB filataa fi adda-baasaa ta’uu ibsa; halluuleen lama kun organismoota Gram positive hedduu ni dhorku, lactose fermentation immoo fudhatama halluu fi kuufama isaa kakaasa. Formulation Levine idilee keessatti peptone, lactose, phosphate, eosin Y, methylene blue, fi agar jiru, akkuma mala FDA BAM kan agar Levine EMB keessatti tarreeffame. Hubadhu, recipe EMB durii tokko tokko lactose waliin sucrose dabaluu turan; Levine EMB garuu lactose qaba, sucrose hin qabu. Kanaaf formulation laaboraatoorii keessan keessatti kuufame isa kam akka ta’e galmeessi.

EMB dubbisuun amala halluu dubbisuudha. Lactose fermentation cimaa asiidii gahaa uumuun kuufama halluu cimaa fida; kunis E. coli giddugaleessa isaa blue-black dukkanaa’aa taasisuun, haala beekamaa keessatti, ifa irraa deebi’u keessatti calaqqee magariisa sibiilaa kenna. Fermenteroonni dadhaboon akka Enterobacter fi Klebsiella yeroo baay’ee koloneewwan pinkii hanga purple, mucoid ta’an, garuu calaqqee kana hin qabne uumu. Nonfermenteroonni akka Salmonella, Shigella, fi Proteus asiidii saffisaa halluulee kuusuuf barbaachisu waan hin oomishneef, yeroo baay’ee koloneewwan halluu-dhabaa ykn ifa keessa darbu fakkaatan uumu. Gram positive yeroo baay’ee ni ukkaamfamu, garuu ciminni ukkaamsuu sadarkaa garaagaraa qaba; strain fi product irratti hundaa’a. Keemistiriin qophii halluu guutuun, methylene blue jalqabumatti maaliif cationic stain akka ta’e dabalatee, marii formulation halluu addaa keessatti ilaallama; haalli microscopy waliigalaa immoo atlas mala staining keessatti argama. Barreeffamni kun filannoo gabatee fi dubbisuu irratti xiyyeeffata.

Gabateewwan EMB fi MacConkey fakkeenyaaf cina cinaan agarsiifaman, halluu kolonee idilee waliin. Gabateewwan lamaan fakkeenyota irra deebi’anii ijaaraman malee suuraawwan culture dhugaa miti.

Fakkii armaan olii fakkeenyaaf qofa. Inni loojikii mul’ataa eegamu agarsiisa: EMB irratti koloneewwan dukkanaa’oo calaqqee qaban, gosa mucoid pinkii, fi gosa halluun isaanii laafaa ta’e; MacConkey irratti immoo gosa pinkii fi gosa halluun isaanii laafaa ta’e wal bira qaba. Pattern kana barachuuf itti fayyadami; sana booda murtii hunda photographed controls fi product insert miidiyaa sirrii bench kee irra jiruun mirkaneessi.

MacConkey: hojiiwwan adda baafaman, seera mul’ataa salphaa

Yaad-rimeen MacConkey hojii tokkoon tokkoon isaa ingredient adda addaatti ramada. Prootokooliin agar MacConkey kan ASM ilaalcha filataa fi adda-baasaa wal fakkaatu dhiheessa; mala FDA BAM kan agar MacConkey immoo qaamolee hojii tarreessa: peptones, lactose, bile salts, salt, neutral red, crystal violet, fi agar. Bile salts fi crystal violet walitti makamuun Gram positive irratti filannoo uumu. Lactose substrate fermentation kenna. Neutral red akka agarsiisaa pH hojjetee, bakka asiidiin uumamutti pinkii hanga diimaatti jijjiirama; yeroo tokko tokko fermenteroota cimaa naannoo isaanii keessatti bile precipitate waliin mul’ata.

Seerri dubbisuu itti yaadamee salphaa dha: pinkii jechuun lactose fermenter, halluu-dhabaa ykn halluun laafaa jechuun nonfermenter. E. coli pinkii hanga diimaatti mul’ata, yeroo baay’ee halo bile precipitate waliin. Klebsiella fi Enterobacter pinkii ta’anii, capsule isaanii irraa kan ka’e yeroo baay’ee mucoid ta’u. Salmonella, Shigella, Proteus, fi rodota Gram negative biroo hedduun halluu-dhabaa ta’anii mul’atu. Faayidaan dabalataa tokko laaboraatoorii barsiisuu keessatti barbaachisaa dha: bile salts yeroo baay’ee swarming Proteus ni hir’isu; kanaaf koloneewwan adda baafaman MacConkey irratti miidiyaa nonselective caalaa salphaatti argamu. Haa ta’u malee, ukkaamsuun guutuu miti; bakka to’annoon swarming kaayyoo ijoo ta’etti filannoowwan salt free ni jiru.

Sababni molekiyuulaarawaa halluuleen akkana amala agarsiisaniif charge fi structure irraa maddu. Methylene blue halluu cationic phenothiazine dha; structure fi properties isaa bakteeriyoota fuula asiidawaa qabanitti maaliif affinity akka qabu ibsa. Affinity waluma kun yeroo inni naannoo asiidii EMB irratti kuufamutti hojii irra jira.

Wal bira qabuu gabaabinaan

FeatureEMB agarMacConkey agar
Sirna filataaEosin Y plus methylene blueBile salts plus crystal violet
Substrate adda-baasaaLactose (Levine has no sucrose)Lactose
AgarsiisaaKuufama halluu mataa isaa (koloneewwan dukkanaa’oo, calaqqee magariisaa)Neutral red (koloneewwan asiidii pinkii hanga diimaatti)
Mallattoo E. coli cimaaKolonee blue-black dukkanaa’aa, yeroo baay’ee calaqqee magariisa sibiilaaKolonee pinkii hanga diimaatti, yeroo baay’ee bile precipitate
Klebsiella fi EnterobacterPinkii hanga purple, mucoid, yeroo baay’ee calaqqee hin qabuPinkii hanga diimaatti, yeroo baay’ee mucoid
Salmonella, Shigella, ProteusYeroo baay’ee halluu-dhabaa ykn translucentYeroo baay’ee halluu-dhabaa ykn halluun laafaa
Gram positivesYeroo baay’ee ni ukkaamfamuFormulas crystal violet irratti yeroo baay’ee ni ukkaamfamu
Faayidaa barsiisuu isa guddaaFermentation cimaa fi dadhabaa mul’isuFermenter fi nonfermenter adda baasuu isa salphaa

Gabatee kana akka adeemsa murtee kennuutti dubbisi. Yeroo shaakalli barattoonni sadarkaa cimina fermentation endpoint tokko baay’ee ifa ta’een akka argan barbaadu, EMB kana mul’isa. Yeroo shaakalli mirkaneessa biochemical dura adda-baasa binary saffisaa barbaadu, MacConkey kana mul’isa.

Saamuda kamif miidiyaa kam

Shaakala bishaanii presumptive fecal coliform ykn E. coli adda beekuuf kaayyeffame keessatti, EMB calaqqeen isaa mul’ataan adda waan ta’eef hawwataa dha. MacConkey illee enteric Gram negatives ni tajaajila; seenaa keessatti bishaan qorachuufis fayyadama qaba. Garuu gabateen kamiyyuu mala bishaanii regulatory bakka hin bu’u; qorannoo irratti hundaa’uun malichi miidiyaa akka modified mTEC ykn MI murteessuu danda’a. Mala laaboraatooriin kee hordofuuf dirqama qabu ilaali.

Stool style keessatti fermenteroota nonfermenteroota irraa adda baasuu irratti, MacConkey yeroo baay’ee lamaan keessaa caalaatti faayidaa qaba. Hojii stool qabatamaa keessatti Salmonella ykn Shigella barbaaduuf, MacConkey qofa irratti hirkachuu mannaa yeroo baay’ee miidiyaa enteric filatamaa dabalataa akka XLD ykn Hektoen enteric itti dabalama.

Barsiisa urine style kan clinical workflow fakkeessuuf, MacConkey blood agar waliin fayyadami. MacConkey adda-baasa Gram negative jalqabaa kenna; blood agar immoo organismoota MacConkey ukkaamsu deebisee guddisa. Walitti makamuun kun ibsa clinical kan urine culture setup keessatti idilee dha.

Yaad-rimee qofa barsiisuuf, lamaan isaanii fayyadami. EMB ciminni fermentation barbaachisaa ta’uu fi molekiyuuliin tokko gahee lama tajaajiluu akka danda’u barsiisa. MacConkey modular design barsiisa: selector, substrate, fi reporter adda addaa qabuu. Barattoonni E. coli beekamaa, Klebsiella aerogenes beekamaa, fi Salmonella beekamaa miidiyaa lamaan irratti cina cinaan streak godhan, loojikii lamaan kana irra deebi’anii burjaajessuun isaanii baay’ee xiqqaata.

Rakkoolee dubbisuu term hunda keessatti irra deebi’an

Kufaatiin baay’ee mul’atu halluu qofa irratti hundaa’uun adda baasuu dha. MacConkey irratti pinkii jechuun E. coli, Klebsiella, Enterobacter, ykn fermenter biraa ta’uu danda’a. Halluu-dhabaa jechuun Salmonella, Shigella, Proteus, Pseudomonas, ykn nonfermenter biraa ta’uu danda’a. Halluun phenotype screening dha; hojii mirkaneessaa akka Gram stain, oxidase, biochemical panels, ykn instrument identificationtti nama qajeelcha malee maqaa species miti.

Kufaatiin lammaffaan calaqqeen yoo hin jirre hiika garmalee kennuudha. Koloneewwan E. coli dhugaa tokko tokko, keessumaa kanneen adda baafaman, EMB irratti calaqqee sibiilaa xiqqoo ykn homaa hin qaban. Calaqqeen dhabamuun E. coli hin ta’u jechuu miti; calaqqeen jiraachuunis isa ta’uu hin mirkaneessu. Calaqqee kana akka mallattoo presumptive tti fudhadhu.

Kufaatiin sadaffaan gabateewwan umurii adda addaa qaban wal bira qabuudha. Lactose fermenteroonni turanii deebii kennan incubation dheeraa booda MacConkey irratti pinkii ta’uu danda’u; kunis adda-baasa qulqulluu fermenter fi nonfermenter gidduu jiru ni dadhabsiisa. Sa’aatii laaboraatooriin murteesse irratti dubbisi; yeroo incubation bu’aa waliin galmeessi.

Kufaatiin afraffaan guddina makaa akka organismii tokkootti dubbisuudha. Koloneen pinkii tokko kolonee halluu-dhabaa bira jiru phenotype lama galmeessa malee giddu-galeessa tokko miti. Koloneewwan sirriitti adda baafaman filadhu; morphotype tokkoon tokkoon isaa addaatti irratti hojjedhu. Texture mucoid illee kiyyoo wal fakkaatu qaba: Klebsiella fi Enterobacter lachuu mucoid fakkaachuu danda’u; kanaaf capsule qofti maqaa hin murteessu. Organismiin duraan Enterobacter aerogenes jedhamee barsiifamaa ture amma Klebsiella aerogenes jedhamee ramadameera; kunis maaliif chaartiiwwan durii fi labeloonni haaraan wal hin simne fakkaatan ibsa.

Controls fi seera xumuraa

Session hunda keessatti controls suuraan isaanii jiru ykn haaraa fayyadami: reaction fermenter cimaaf E. coli, fermentation mucoid calaqqee beekamaa hin qabneef Klebsiella aerogenes, reaction nonfermenter halluu-dhabaaf strain Salmonella, fi product kee isa sirrii irratti ukkaamsa Gram positive mirkaneessuuf Staphylococcus aureus. Selectivity bile, crystal violet, fi dye content waliin waan jijjiiramuuf, strain numbers fi acceptance criteria manufacturer insert waliin wal simsiisi.

Bench irratti hima tokko yaadadhu. EMB halluulee filatanii fi yeroo tokkotti odeeffannoo kennan fayyadama; kun mallattoo E. coli cimaa kenna, garuu dubbisni isaa xiqqoo caalaatti bal’inaan hubannoo barbaada. MacConkey filachuu fi odeeffannoo kennuu adda baasa; kun adda-baasa pinkii fi halluu laafaa ifaa kenna, garuu bal’ina fermentation xiqqeessa. Miidiyaa yaad-rimeen isaa gaaffii kee waliin wal simu fili, halluu qorannoowwan sirriin mirkaneessi; achiis gabateewwan lamaan wal dorgomuu dhiisanii wal tumsuu jalqabu.