ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮತ್ತು Bartonella: ಪ್ರಯೋಗಶಾಲೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಮತ್ತು ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಸಾಕ್ಷ್ಯದ ಮಿತಿಗಳು

ಕಲ್ಚರ್ ಪಾತ್ರೆ ಮತ್ತು ರೋಗಿಗೆ ಸೋಂಕು ಎಂಬ ಪದ ಸಾಮಾನ್ಯವಾದರೂ, ಅದರ ಅರ್ಥ ಒಂದೇ ಅಲ್ಲ. ಪಾತ್ರೆಯಲ್ಲಿ ಸೋಂಕು ಎಂದರೆ ಅಗರ್ ಮೇಲಿನ ಕಾಲೊನಿಗಳ ಎಣಿಕೆ. ರೋಗಿಯಲ್ಲಿ ಅದು ಜೀವಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ರಕ್ತನಾಳಗಳ ಒಳಗಿನ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ, ರಕ್ತ ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಮೂಲಕ ಚಲಿಸುವ ಔಷಧಿಗಳು ಹಾಗೂ ಕೆಲಸದ ಒಂದು ಭಾಗವನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುವ ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ. ಇವೆರಡನ್ನು ಒಂದೇ ಎಂದು ಭಾವಿಸಿದರೆ, ಗಮನ ಸೆಳೆಯುವ ಪ್ರಯೋಗಶಾಲೆಯ ಸಂಖ್ಯೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯಂತೆ ಕಾಣತೊಡಗುತ್ತದೆ. ಅವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ನೋಡಿದರೆ, ಅದೇ ಸಂಖ್ಯೆ ನಿಜವಾಗಿ ಏನೋ ಅದಾಗಿ ಉಳಿಯುತ್ತದೆ: ಮುಂದಿನ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ನಡೆಸಲು ಒಂದು ಕಾರಣ.

ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮತ್ತು Bartonella ಕುರಿತ ಈ ವಿಮರ್ಶೆಯ ಮುಖ್ಯ ಉದ್ದೇಶವೇ ಆ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ಸ್ಪಷ್ಟಪಡಿಸುವುದು. ಒಂದೇ ಸಂಶೋಧನಾ ತಂಡದ ಎರಡು ಪ್ರಯೋಗಶಾಲಾ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಬೆಳವಣಿಗೆಯಾಗದ ಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿರುವ Bartonella henselae ವಿರುದ್ಧ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಅನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದವು. ಎರಡೂ ಗಾಜು ಮತ್ತು ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಕ್ ಪಾತ್ರೆಗಳಲ್ಲಿ ಬಲವಾದ ಕ್ರಿಯಾಶೀಲತೆಯನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಿದವು. ಯಾವುದೂ ಒಬ್ಬ ವ್ಯಕ್ತಿಯಲ್ಲೂ ಪರೀಕ್ಷೆ ನಡೆಸಲಿಲ್ಲ.

ಸಂಶೋಧಕರು ಸ್ಥಿರ ಹಂತವನ್ನು ಏಕೆ ಪರೀಕ್ಷಿಸುತ್ತಾರೆ

ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರತಿಜೀವಕ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಲ್ಲಿ ಬೆಳೆಯುತ್ತಿರುವ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಆ ಮಾದರಿಯು ಹೆಚ್ಚು ಕಷ್ಟಕರವಾದ ಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಒಳಗೊಳ್ಳುವುದಿಲ್ಲ: ವಿಭಜನೆಯಾಗುವುದನ್ನು ನಿಲ್ಲಿಸಿರುವ ಮತ್ತು ತಮ್ಮ ಬೆಳೆಯುತ್ತಿರುವ ಸಹವರ್ತಿ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಕೊಲ್ಲುವ ಔಷಧಿಗಳನ್ನು ಸಹಿಸಿಕೊಳ್ಳುವ ಜೀವಕೋಶಗಳು.

Bartonella ದೇಹದಲ್ಲಿ, ಕೆಂಪು ರಕ್ತಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಎಂಡೋಥೀಲಿಯಲ್ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಒಳಗೆ ಸೇರಿದಂತೆ, ಉಳಿದುಕೊಳ್ಳಬಹುದು. ಆದ್ದರಿಂದ B. henselae ಸ್ಥಿರ ಹಂತಕ್ಕೆ ಪ್ರವೇಶಿಸಿದ ನಂತರ ಅದನ್ನು ಯಾವ ಅನುಮೋದಿತ ಔಷಧಿಗಳು ಕೊಲ್ಲಬಲ್ಲವು ಎಂದು ತಂಡ ಪರಿಶೀಲಿಸಿತು. ಬೆಳೆಯುತ್ತಿರುವ ಜೀವಕೋಶಗಳ ವಿರುದ್ಧ ಕಡಿಮೆ MIC ಇದ್ದುದರಿಂದ ಸ್ಥಿರ ಹಂತದ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಕೊಲ್ಲುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಊಹಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗಲಿಲ್ಲ. ರಿಫಾಂಪಿನ್‌ಗೆ ಅತ್ಯಂತ ಕಡಿಮೆ MIC ಇದ್ದರೂ, ಅದು ಸ್ಥಿರ ಹಂತದ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಸಮರ್ಪಕವಾಗಿ ಕೊಲ್ಲಲಿಲ್ಲ; ಹೆಚ್ಚಿನ MIC ಮೌಲ್ಯಗಳಿದ್ದ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು ಅವನ್ನು ಚೆನ್ನಾಗಿ ಕೊಂದವು. ಈ ಬಗೆಯ ಸಂಶೋಧನಾ ಲೇಖನಗಳನ್ನು ಓದಲು ಸಾಮಾನ್ಯ ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಯಸುವ ಓದುಗರು ಅದನ್ನು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಸಂಶೋಧನೆಯನ್ನು ಓದುವ ಮಾರ್ಗದರ್ಶಿಯಲ್ಲಿ ಕಾಣಬಹುದು.

ಮೊದಲ ತಪಾಸಣೆ: Li ಮತ್ತು ಸಹೋದ್ಯೋಗಿಗಳು, 2019

Antibiotics ನಲ್ಲಿ ಪ್ರಕಟವಾದ 2019ರ ಸ್ಥಿರ ಹಂತದ ತಪಾಸಣೆ ಒಂದೇ ತಳಿಯಾದ B. henselae JK53 ಅನ್ನು ಬಳಸಿತು. ಅದನ್ನು 10 percent ಭ್ರೂಣದ ಗೋವಿನ ಸೀರಮ್ ಹೊಂದಿರುವ Schneider ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ, 37 C ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಮತ್ತು 5 percent CO2 ಇರುವ ಪರಿಸರದಲ್ಲಿ ಬೆಳೆಸಲಾಯಿತು. ಒಂದು ದಿನದ ಕಲ್ಚರ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಬಹುತೇಕ ಚದುರಿದ, ವಿಭಜನೆಯಾಗುತ್ತಿರುವ ಜೀವಕೋಶಗಳಿದ್ದವು. ಪ್ರತಿ mLಗೆ ಸುಮಾರು 10ರ 8ನೇ ಘಾತದಷ್ಟು ಕಾಲೊನಿ ರೂಪಿಸುವ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದ ಐದು ದಿನದ ಕಲ್ಚರ್‌ಗಳನ್ನು ಸ್ಥಿರ ಹಂತವೆಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಯಿತು; ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಗೋಚರಿಸುವ ಗುಚ್ಛಗಳಿದ್ದವು.

ಪರೀಕ್ಷೆಗೆ ಪ್ರೊಪಿಡಿಯಮ್ ಐಯೋಡೈಡ್ ಜೊತೆಗೆ SYBR Green I ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಜೀವಂತ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ಐಸೋಪ್ರೊಪನಾಲ್‌ನಿಂದ ಕೊಲ್ಲಲಾದ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಮಿಶ್ರಣಗಳನ್ನು ಆಧರಿಸಿ ಅದನ್ನು ಮಾಪನಾಂಕನ ಮಾಡಲಾಗಿತ್ತು. ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಗಾಢ ಬಣ್ಣದ್ದಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಕ್ರಿಯಾಶೀಲವೆಂದು ಗುರುತಿಸಲಾದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದಿಂದ ದೃಢಪಡಿಸಲಾಯಿತು; ನಂತರ ಹೆಚ್ಚು ಕಟ್ಟುನಿಟ್ಟಾದ ಅಂತಿಮ ಮಾನದಂಡವಾದ ರಕ್ತ ಅಗರ್ ಮೇಲಿನ ಕಾಲೊನಿಗಳ ಎಣಿಕೆಯಿಂದ ದೃಢಪಡಿಸಲಾಯಿತು.

50 micromolar ಸಾಂದ್ರತೆಯಲ್ಲಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾದ 1,581 ಅನುಮೋದಿತ ಔಷಧಿಗಳ ಪೈಕಿ, ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಳಕೆಯ ನಂತರ ಪ್ಲೇಟ್ ರೀಡರ್ ಪ್ರಕಾರ 16 percent ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಪ್ರಕಾರ 25 percent ಜೀವಂತಿಕೆ ಉಳಿಯಿತು. ಡ್ಯಾಪ್ಟೊಮೈಸಿನ್‌ಗೆ 21 percent, ಹಲವಾರು ಅಜೋಲ್‌ಗಳಿಗೆ 22 ರಿಂದ 27 percent, ಜೆಂಟಾಮೈಸಿನ್‌ಗೆ 32 percent, ಎರಿಥ್ರೊಮೈಸಿನ್‌ಗೆ 66 percent ಮತ್ತು ಸಿಪ್ರೊಫ್ಲಾಕ್ಸಾಸಿನ್‌ಗೆ 74 percent ಎಂಬ ಮೌಲ್ಯಗಳು ದೊರೆತವು. ಪಿರ್ವಿನಿಯಮ್ ಪಮೋಯೇಟ್ ಪ್ಲೇಟ್ ರೀಡರ್‌ನಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚು ಬಲವಾಗಿ ಕಂಡರೂ, ಅದರದೇ ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿಯ ಕಾರಣದಿಂದ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಮೂಲಕ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗಲಿಲ್ಲ.

ಬೆಳೆಯುತ್ತಿರುವ B. henselae ವಿರುದ್ಧ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂನ MIC 0.08 ರಿಂದ 0.16 micrograms per mL ಆಗಿತ್ತು. ಐದು ದಿನದ ಸ್ಥಿರ ಹಂತದ ಜೀವಕೋಶಗಳ ವಿರುದ್ಧ 5 micrograms per mL ಸಾಂದ್ರತೆಯಲ್ಲಿ, ಒಂದು ದಿನದ ಒಡ್ಡುವಿಕೆಯ ನಂತರ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದಾದ ಯಾವುದೇ ಕಾಲೊನಿಗಳು ಉಳಿಯಲಿಲ್ಲ. ಇದು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾದ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಲ್ಲಿ ಡ್ಯಾಪ್ಟೊಮೈಸಿನ್ ಮತ್ತು ಪಿರ್ವಿನಿಯಮ್ ಪಮೋಯೇಟ್‌ನ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗಿತ್ತು. ಕಾಲಕ್ರಮದಲ್ಲಿ ಕೊಲ್ಲುವಿಕೆಯನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ 10 micrograms per mL ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಇವು ಪ್ರಯೋಗಶಾಲೆಯ ಒಡ್ಡುವಿಕೆ ಮಟ್ಟಗಳು, ಔಷಧದ ಪ್ರಮಾಣಗಳಲ್ಲ; ಲೇಖನವೂ ಅವನ್ನು ಹಾಗೆಯೇ ಹೇಳುತ್ತದೆ. ಉಲ್ಲೇಖಿಸಲಾದ, ಮಾನವರಲ್ಲಿ ಗರಿಷ್ಠ ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ ಮಟ್ಟವು ಸುಮಾರು 3.9 micrograms per mL ಎಂಬ ಮೌಲ್ಯ ಲೇಖನದಲ್ಲಿ ಹಿನ್ನೆಲೆ ಮಾಹಿತಿಯಾಗಿ ಮಾತ್ರ ಕಾಣಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ಲಾಸ್ಮಾದ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಅಂಗಾಂಶದ ಸಂಖ್ಯೆಯೆಂದು ಏಕೆ ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ ಎಂಬುದನ್ನು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂನ ಫಾರ್ಮಕೋಕೈನೆಟಿಕ್ಸ್ ಕುರಿತ ಅವಲೋಕನ ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ.

ಲೇಖನದಲ್ಲಿ ಎರಡು ಮಿತಿಗಳನ್ನು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಹೇಳಲಾಗಿದೆ. ಜೈವಪದರದ ಮಾದರಿಯೂ ಇರಲಿಲ್ಲ, ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಸಂಯೋಜನೆಗಳ ಪರೀಕ್ಷೆಯೂ ಇರಲಿಲ್ಲ. ಐದು ದಿನದ ಗುಚ್ಛಗಳು ಸ್ಥಿರ ಹಂತದ ದ್ರವ ಕಲ್ಚರ್‌ನಲ್ಲಿನ ಸಮೂಹಗಳಾಗಿದ್ದವು; ಅವು ಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಜೈವಪದರ ಪ್ರಯೋಗವಾಗಿರಲಿಲ್ಲ. ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿ ಅಧ್ಯಯನಗಳು, ಸಂಯೋಜನೆಗಳ ಅಧ್ಯಯನಗಳು, ಜೈವಪದರ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ Bartonella ಪ್ರಭೇದಗಳಲ್ಲಿ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳನ್ನು ನಡೆಸಬೇಕೆಂದು ಲೇಖಕರು ಕರೆ ನೀಡಿದರು.

ಸಂಯೋಜನೆಗಳು ಮತ್ತು ಜೈವಪದರದಿಂದ ಪಡೆದ ಜೀವಕೋಶಗಳು: Zheng ಮತ್ತು ಸಹೋದ್ಯೋಗಿಗಳು, 2020

BMC Microbiology ಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಕಟವಾದ 2020ರ ಮುಂದುವರಿದ ಅಧ್ಯಯನ ಅದೇ ತಳಿ ಮತ್ತು ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಉಳಿಸಿಕೊಂಡಿತು. ಆದರೆ ಆರು ದಿನದ ಸ್ಥಿರ ಹಂತದ ಕಲ್ಚರ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿತು ಮತ್ತು ಮೊದಲ ಲೇಖನದಲ್ಲಿ ಇಲ್ಲದಿದ್ದ ಎರಡು ಅಂಶಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಿತು: ಎರಡು ಔಷಧಿಗಳ ಸಂಯೋಜನೆಗಳು ಮತ್ತು ಜೈವಪದರದಿಂದ ಪಡೆದ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಮಾದರಿ.

ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಔಷಧಿಗಳನ್ನು ಏಕರೂಪವಾಗಿ 5 micrograms per mL ಸಾಂದ್ರತೆಯಲ್ಲಿ 24 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದಾಗ, ನಿಯಂತ್ರಣ ಕಲ್ಚರ್‌ನಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿ mLಗೆ ಸುಮಾರು 2.8 ಗುಣಿಸು 10ರ 10ನೇ ಘಾತದಷ್ಟು ಕಾಲೊನಿ ರೂಪಿಸುವ ಘಟಕಗಳಿದ್ದರೆ, ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಳಕೆಯ ನಂತರ ಪ್ರತಿ mLಗೆ 3.2 ಗುಣಿಸು 10ರ 4ನೇ ಘಾತದಷ್ಟು ಉಳಿದವು. ಅದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಸಿಪ್ರೊಫ್ಲಾಕ್ಸಾಸಿನ್, ಜೆಂಟಾಮೈಸಿನ್ ಮತ್ತು ನೈಟ್ರೊಫ್ಯುರಾಂಟೊಯಿನ್ ಬಳಕೆಯ ನಂತರ ಕಡಿಮೆ ಕಾಲೊನಿಗಳು ಉಳಿದವು. ಇದು 2019ರ ಫಲಿತಾಂಶಕ್ಕಿಂತ ಭಿನ್ನವಾಗಿದೆ; ಅಲ್ಲಿ ಅದೇ ನಾಮಮಾತ್ರದ ಮಟ್ಟದಲ್ಲಿ ಒಂದು ದಿನದ ನಂತರ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದಾದ ಕಾಲೊನಿಗಳು ಇರಲಿಲ್ಲ. ಕಲ್ಚರ್‌ನ ವಯಸ್ಸು, ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ನಿರ್ವಹಣೆ ಬೇರೆಬೇರೆಯಾಗಿದ್ದವು. ಆದ್ದರಿಂದ ಕೊಲ್ಲುವಿಕೆ ಒಂದೇ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಪುನರಾವರ್ತಿತವಾದರೂ, ಅದರ ಪ್ರಮಾಣ ಒಂದೇ ಆಗಿರಲಿಲ್ಲ. ಪ್ರಯೋಗದಿಂದ ಪ್ರಯೋಗಕ್ಕೆ ಕಂಡ ಈ ಬದಲಾವಣೆಯು, ಪ್ರಮಾಣಿತ ಸುರಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಔಷಧಿ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ಪರಿಶೀಲನೆಗಳು ಪ್ರಯೋಗಶಾಲೆಯ ಕ್ರಿಯಾಶಕ್ತಿಯನ್ನು ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಪರಿಣಾಮದಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸಲು ಒಂದು ಕಾರಣವಾಗಿದೆ.

ಸಂಯೋಜನೆಗಳ ತಪಾಸಣೆಯು ಅತಿ ಹೆಚ್ಚು ಉಲ್ಲೇಖಿಸಲ್ಪಡುವ ಭಾಗವಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಘಟಕವನ್ನು 5 micrograms per mL ಸಾಂದ್ರತೆಯಲ್ಲಿ ನಿಗದಿಪಡಿಸಲಾಗಿತ್ತು. ಅಜಿಥ್ರೊಮೈಸಿನ್ ಜೊತೆಗೆ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮತ್ತು ರಿಫಾಂಪಿನ್ ಜೊತೆಗೆ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ — ಈ ಎರಡೂ ಸಂಯೋಜನೆಗಳಲ್ಲಿ 24 ಗಂಟೆಗಳ ನಂತರ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದಾದ ಸ್ಥಿರ ಹಂತದ ಕಾಲೊನಿಗಳು ಇರಲಿಲ್ಲ. ಸಿಪ್ರೊಫ್ಲಾಕ್ಸಾಸಿನ್ ಒಳಗೊಂಡ ಎರಡೂ ಜೋಡಿಗಳಲ್ಲಿಯೂ ಇದೇ ಫಲಿತಾಂಶ ಕಂಡುಬಂತು. ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದ 25 ಜೋಡಿಗಳಲ್ಲಿ ಈ ನಾಲ್ಕು ಮಾತ್ರ ಅಂತಹ ಫಲಿತಾಂಶ ನೀಡಿದವು. ಯಾವುದೇ ಔಪಚಾರಿಕ ಸಹಕ್ರಿಯೆಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಗಲಿಲ್ಲ. ಆದ್ದರಿಂದ ಸರಿಯಾದ ಪದಪ್ರಯೋಗವು ಈ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಕ್ರಿಯಾಶೀಲವಾದ ಸಂಯೋಜನೆ ಎಂಬುದೇ ಹೊರತು ಸಾಬೀತಾದ ಸಹಕ್ರಿಯೆ ಎಂಬುದಲ್ಲ.

ಜೈವಪದರ ಪ್ರಯೋಗವು ಹೊಸದಾಗಿ ರೂಪಗೊಂಡು ಅಸ್ತವ್ಯಸ್ತಗೊಳಿಸಲಾದ ಜೈವಪದರದಿಂದ ಪಡೆದ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿತು; ಅಖಂಡವಾದ ಪರಿಪಕ್ವ ಜೈವಪದರದೊಳಗೆ ಔಷಧಿ ಪ್ರವೇಶಿಸುವುದನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಿಲ್ಲ. ಕಲ್ಚರ್‌ಗಳನ್ನು ಐದು ದಿನಗಳ ಕಾಲ ಬೆಳೆಸಿ, ತೆಳುಗೊಳಿಸಿ ವೆಲ್ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಇನ್ನೂ ಐದು ದಿನಗಳ ಕಾಲ ಬೆಳೆಸಲಾಯಿತು. ಕ್ರಿಸ್ಟಲ್ ವೈಲೆಟ್ ವರ್ಣೀಕರಣದಿಂದ ದೃಢಪಡಿಸಿದ ಬಳಿಕ, ಔಷಧಿಗಳಿಗೆ ಒಡ್ಡುವ ಮೊದಲು ಅವನ್ನು ಕೆರೆದು ತೆಗೆಯಲಾಯಿತು. 5 micrograms per mL ಸಾಂದ್ರತೆಯಲ್ಲಿ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಒಂದನ್ನೇ ಬಳಸಿದಾಗ, 6ನೇ ದಿನಕ್ಕೆ ಎಣಿಕೆ 2.3 ಗುಣಿಸು 10ರ 2ನೇ ಘಾತಕ್ಕೆ ಇಳಿಯಿತು. ಇದು ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಔಷಧಿಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದ್ದರೂ, ಎಣಿಕೆ ಶೂನ್ಯವಾಗಲಿಲ್ಲ. ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಒಳಗೊಂಡ ಎರಡೂ ಸಂಯೋಜನೆಗಳಲ್ಲಿ 6ನೇ ದಿನಕ್ಕೆ ಎಣಿಕೆ ಶೂನ್ಯವಾಯಿತು; ಸಿಪ್ರೊಫ್ಲಾಕ್ಸಾಸಿನ್ ಒಳಗೊಂಡ ಎರಡೂ ಸಂಯೋಜನೆಗಳಲ್ಲಿಯೂ ಹಾಗೆಯೇ ಆಯಿತು.

ಜಾಗರೂಕ ಓದುಗರು ಗಮನಿಸುವ ಮಿತಿಗಳನ್ನೇ ಲೇಖಕರೂ ಗುರುತಿಸಿದರು: ಹಳೆಯ ಅಖಂಡ ಜೈವಪದರದ ಬದಲು ಹೊಸದಾಗಿ ರೂಪಗೊಂಡು ಕೆರೆದು ತೆಗೆದ ಜೈವಪದರ; ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಔಷಧಿಯ ವಾಸ್ತವಿಕ ಗರಿಷ್ಠ ಮಟ್ಟದ ಬದಲು ಎಲ್ಲ ಔಷಧಿಗಳಿಗೂ ಒಂದೇ ಅನುಕೂಲಕರ ಸಾಂದ್ರತೆ; ಅಜಿಥ್ರೊಮೈಸಿನ್ ಅಥವಾ ರಿಫಾಂಪಿನ್ ಆಧಾರಿತ ಆಯ್ದ ಜೋಡಿಗಳು ಮಾತ್ರ; ಒಂದೇ ತಳಿ; ಪ್ರಾಣಿಗಳಿಲ್ಲ; ರೋಗಿಗಳಿಲ್ಲ. ನಂತರದ ಮೂರು ಔಷಧಿಗಳ ಅಧ್ಯಯನವನ್ನು ಪ್ರಸ್ತಾಪಿಸಲಾಯಿತು, ಆದರೆ ಅದರ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಲಿಲ್ಲ.

ಅಧ್ಯಯನ ವಿನ್ಯಾಸಗಳ ಹೋಲಿಕೆ

ಈ ಲೇಖನದ ಮುಖ್ಯ ಅಂಶವನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕ ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಕೊನೆಯ ಕಾಲಮ್‌ನ ಎಡಭಾಗದಲ್ಲಿರುವ ಎಲ್ಲವೂ ಕಲ್ಚರ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳೇ. ಎರಡೂ ಲೇಖನಗಳಲ್ಲಿ ಯಾವುದೂ ಕೊನೆಯ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ಸೇರಿಲ್ಲ.

Bartonella ಎಂದರೆ Borrelia ಅಲ್ಲ

ಎರಡೂ ಲೇಖನಗಳು ಲೈಮ್ ರೋಗಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಸ್ಪೈರೋಕೀಟ್ ಆದ Borrelia burgdorferi ಅನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖಿಸುತ್ತವೆ. ಏಕೆಂದರೆ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯ ಆಧಾರಿತ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಅದೇ ಪ್ರಯೋಗಶಾಲೆಯಲ್ಲಿ ಹಿಂದೆ ನಡೆದ Borrelia ಸ್ಥಿರ ಹಂತದ ಅಧ್ಯಯನದಿಂದ ಬಂದಿತ್ತು; ಅಲ್ಲಿ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮತ್ತು ಡ್ಯಾಪ್ಟೊಮೈಸಿನ್ ಕೂಡ ಕ್ರಿಯಾಶೀಲವೆಂದು ಗುರುತಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದ್ದವು. ಆ ಇತಿಹಾಸವು ಉಪಯುಕ್ತ ಹಿನ್ನೆಲೆಯಾಗಿದ್ದರೂ, ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ತಪ್ಪು ಅರ್ಥೈಸುವಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.

ಈ ಎರಡು Bartonella ಲೇಖನಗಳಲ್ಲಿನ ಯಾವುದೇ ಪ್ರಯೋಗವು Borrelia ಮತ್ತು Bartonella ಅನ್ನು ಪಕ್ಕಪಕ್ಕದಲ್ಲಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಿಲ್ಲ. ಜೀವಿಗಳು ಬೇರೆ, ಮಾಧ್ಯಮಗಳು ಬೇರೆ, ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು ಬೇರೆ. ಅಲ್ಲದೆ Bartonella ದಲ್ಲಿ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂಗೆ ಇರಬಹುದೆಂದು ಊಹಿಸಲಾದ ಜೀವಕೋಶದ ಪೊರೆಯ ಮೇಲಿನ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು, ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಧ್ಯಯನ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಊಹೆಯೆಂದೇ ಹೇಳಲಾಗಿದೆ. ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಒಂದು ಪ್ರಭೇದದಿಂದ ಮತ್ತೊಂದಕ್ಕೆ ಅನ್ವಯಿಸಬಾರದು; ಎರಡೂ ಲೇಖನಗಳು ಪರಾವಲಂಬಿಗಳ ಕುರಿತ ವ್ಯಾಪಕ ಹೇಳಿಕೆಗಳನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಈ ಕಾರಣದಿಂದಲೇ Borrelia ಮತ್ತು Bartonella ದ ಪರ್ಸಿಸ್ಟರ್ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಹೋಲಿಕೆಯು ಇವೆರಡರ ಸಂಶೋಧನಾ ಸಾಹಿತ್ಯವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸುತ್ತದೆ.

ಕಲ್ಚರ್ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಚಿಕಿತ್ಸಾ ವಿಧಾನವಾಗಿ ಏಕೆ ಬದಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ

ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ Bartonella ಚಿಕಿತ್ಸಾ ವಿಧಾನಕ್ಕಾಗಿ ಹುಡುಕಾಟದ ಆಸಕ್ತಿ ಅರ್ಥವಾಗುವಂಥದ್ದೇ. ಆದರೆ ಆ ಪದಗುಚ್ಛವನ್ನು ಖರೀದಿಯ ಪಟ್ಟಿಯಂತೆ ಅಲ್ಲ, ಎಚ್ಚರಿಕೆಯ ಸೂಚನೆಯಂತೆ ಪರಿಗಣಿಸಬೇಕೆಂಬುದಕ್ಕೆ ಈ ಲೇಖನಗಳೇ ಕಾರಣ.

ಮೊದಲನೆಯದಾಗಿ, ವೆಲ್‌ನಲ್ಲಿ 5 micrograms per mL ಇರುವುದು ಔಷಧದ ಸೂಚನೆಯಲ್ಲ. ಅದರಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ, ವಿತರಣೆ, ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗೆ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆ, ಜೀವಕೋಶಗಳ ಒಳಗೆ ಪ್ರವೇಶಿಸುವಿಕೆ ಅಥವಾ ಸಹಿಸಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯ ಮಾಹಿತಿ ಇಲ್ಲ. ಲೇಖಕರು ಅದನ್ನು ಪ್ರತಿಜೀವಕಗಳ ಗರಿಷ್ಠ ಮಟ್ಟಗಳ ಸರಿಸುಮಾರು ಸರಾಸರಿಯಾಗಿ ಆರಿಸಿಕೊಂಡರು; ಮುಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಔಷಧಿಯನ್ನು ಅದರದೇ ವಾಸ್ತವಿಕ ಮಟ್ಟದಲ್ಲಿ ಬಳಸಬೇಕೆಂದು ಹೇಳಿದರು.

ಎರಡನೆಯದಾಗಿ, ಶೂನ್ಯ ಕಾಲೊನಿಗಳು ಎಂದರೆ ಆ ಪ್ಲೇಟಿಂಗ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಾಲೊನಿಗಳು ಇಲ್ಲವೆಂದರ್ಥ; ಅಂಗಾಂಶವು ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳಿಂದ ಮುಕ್ತವಾಗಿದೆ ಎಂದಲ್ಲ. ಪರ್ಸಿಸ್ಟರ್ ಜೀವಕೋಶಗಳು, ಜೀವಕೋಶಗಳ ಒಳಗಿನ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ಸಂಗ್ರಹಣೆಯ ಮಿತಿಗಳು ಎಲ್ಲವೂ ಅಗರ್ ಪ್ಲೇಟ್‌ನ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಿಂದ ಹೊರಗಿವೆ.

ಮೂರನೆಯದಾಗಿ, ವೆಲ್ ಅನ್ನು ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳಿಂದ ಮುಕ್ತಗೊಳಿಸುವ ಸಂಯೋಜನೆಗಳು ದೇಹದಲ್ಲಿ ವಿಫಲವಾಗಬಹುದು ಅಥವಾ ಹಾನಿ ಉಂಟುಮಾಡಬಹುದು. ಅಜಿಥ್ರೊಮೈಸಿನ್ ಜೊತೆಗೆ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮತ್ತು ರಿಫಾಂಪಿನ್ ಜೊತೆಗೆ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ — ಇವು ಪ್ರಯೋಗಶಾಲೆಯ ಒಡ್ಡುವಿಕೆ ಮಟ್ಟಗಳಲ್ಲಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾದ ಪ್ರಯೋಗಶಾಲಾ ಜೋಡಿಗಳು. ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿನ ಫಾರ್ಮಕೋಕೈನೆಟಿಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ನಿಯಂತ್ರಿತ ಮಾನವ ದತ್ತಾಂಶವಿಲ್ಲದೆ, ನಿರ್ಧರಿಸಿದ ಔಷಧದ ಪ್ರಮಾಣವಿಲ್ಲ, ಅವಧಿಯಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಪ್ರಯೋಜನ-ಅಪಾಯದ ಅನುಪಾತವಿಲ್ಲ. ಆಯ್ಕೆಗಳನ್ನು ಪರಿಗಣಿಸುವ ಯಾರೇ ಆಗಲಿ, ಪಾತ್ರೆಯ ದತ್ತಾಂಶದಿಂದ ಯಾವುದೇ ತೀರ್ಮಾನಕ್ಕೆ ಬರುವ ಮೊದಲು ವೈದ್ಯರೊಂದಿಗೆ ಚರ್ಚಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಳಕೆಗೆ ಯಾವಾಗ ವೈದ್ಯಕೀಯ ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಅಗತ್ಯ ಎಂಬುದನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಬೇಕು.

ಈ ಲೇಖನಗಳು ಬೆಂಬಲಿಸುವ ಸೀಮಿತ ತೀರ್ಮಾನ ಇದು: ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಪ್ರಯೋಗಶಾಲೆಯ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಬೆಳವಣಿಗೆಯಾಗದ B. henselae JK53 ವಿರುದ್ಧ ಪುನರಾವರ್ತಿಸಬಹುದಾದ ಕ್ರಿಯಾಶೀಲತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ; ಎರಡು ಔಷಧಿಗಳ ಪ್ರಯೋಗಶಾಲಾ ಸಂಯೋಜನೆಗಳಲ್ಲಿಯೂ ಇದು ಕಂಡುಬಂದಿದೆ. ಸಂಯೋಜನೆಗಳು ಮತ್ತು ಜೈವಪದರದಿಂದ ಪಡೆದ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಕುರಿತ ಅತ್ಯಂತ ಬಲವಾದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು 2020ರ ಅಧ್ಯಯನದಿಂದ ಬಂದಿವೆ. ಈ ಕ್ರಿಯಾಶೀಲತೆ ಮಾನವರ ಬಾರ್ಟೊನೆಲ್ಲೋಸಿಸ್‌ಗೆ ಮಹತ್ವ ಹೊಂದಿದೆಯೇ ಎಂಬುದೂ ಸೇರಿದಂತೆ ಉಳಿದ ಎಲ್ಲವೂ ಇನ್ನೂ ಪರೀಕ್ಷಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿಲ್ಲ.