ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಹೀರಿಕೆ ವರ್ಣಪಟಲ ಮತ್ತು ಮೋಲಾರ್ ಹೀರಿಕೆ ಗುಣಾಂಕ: ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸಿದ ಉಲ್ಲೇಖ

ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ವರ್ಣಪಟಲದಿಂದ ಒಂದು ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಮರುಬಳಕೆ ಮಾಡಲು ಪ್ರಯತ್ನಿಸುವವರೆಗೆ ಅದು ಸರಳವಾಗಿ ಕಾಣುತ್ತದೆ. ಒಂದು ಪ್ರಯೋಗಾಲಯವು ಮೋಲಾರ್ ಕ್ಷೀಣನ ಗುಣಾಂಕವನ್ನು ಸುಮಾರು 82,000 ಎಂದು ವರದಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಮತ್ತೊಂದು 67,000 ಎಂದು ವರದಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಮೂರನೆಯದು 100,000 ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಎಂದು ವರದಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಈ ಮೂರೂ ತಮ್ಮದೇ ಅಳತೆಗಳ ಸರಿಯಾದ ವಿವರಣೆಗಳಾಗಿರಬಹುದು; ಆದರೆ ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಯಾವುದೂ ಆ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯಕ್ಕೆ ಸಾರ್ವತ್ರಿಕ ಸ್ಥಿರಾಂಕವಲ್ಲ.

ಎರಡು ವಿಭಿನ್ನ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಗಳನ್ನು ಬೆರೆಸುವುದರಿಂದ ಈ ಗೊಂದಲ ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ. ಹೀರಿಕೆ ಮೌಲ್ಯವು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಕೋಶದಲ್ಲಿರುವ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ದ್ರಾವಣದ ಮೇಲೆ ನಡೆಸಿದ ಅಳತೆಯಾಗಿದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಎಪ್ಸಿಲಾನ್ ಎಂದು ಬರೆಯಲಾಗುವ ಮೋಲಾರ್ ಹೀರಿಕೆ ಗುಣಾಂಕವು ಆ ದ್ರಾವಣದ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿನ ಒಂದು ನಿಯತಾಂಕವಾಗಿದೆ. ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ತನ್ನ ಅಣುಸಂಘಟನೆಯ ಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಬದಲಿಸಿದಾಗ ಮಾದರಿಯೂ ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ; ಹೀಗಾಗಿ ನಿಯತಾಂಕವೂ ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಗುಣಾಂಕವನ್ನೂ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸಿದ ಮೌಲ್ಯವಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸುವುದು ಉಪಯುಕ್ತ ಅಭ್ಯಾಸ: ತರಂಗಾಂತರ, ದ್ರಾವಕ, pH ಅಥವಾ ಬಫರ್, ತಾಪಮಾನ, ಸಾಂದ್ರತೆಯ ವ್ಯಾಪ್ತಿ ಮತ್ತು ಪಥದ ಉದ್ದವು ಆ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಜೊತೆಯಲ್ಲಿಯೇ ಇರಬೇಕು.

ದುರ್ಬಲ ಜಲೀಯ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿನ ಮೊನೊಮರ್ ಪಟ್ಟೆ

ದುರ್ಬಲ ಜಲೀಯ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಧನಾಯನದ ಪ್ರಮುಖ ಪಟ್ಟೆ ಸುಮಾರು 664 ರಿಂದ 665 nm ನಲ್ಲಿರುತ್ತದೆ. ಉಪಕರಣಗಳು ಮತ್ತು ಮಾಪನಾಂಕನದ ಆಯ್ಕೆಗಳ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ ಇದನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 664 ರಿಂದ 668 nm ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಉಲ್ಲೇಖಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯವು ಮೊನೊಮರ್ ರೂಪದಲ್ಲಿರುವಷ್ಟು ದ್ರಾವಣವು ದುರ್ಬಲವಾಗಿದ್ದರೆ, ಪ್ರಮಾಣ ನಿರ್ಧಾರಕ್ಕೆ ಈ ಪಟ್ಟೆಯೇ ಸೂಕ್ತ ಆಯ್ಕೆ.

ಪ್ರಕಟಿತ ಸಾಹಿತ್ಯದಲ್ಲಿನ ಮೂರು ಮೌಲ್ಯಗಳು ಮುಖ್ಯ ಸಂಖ್ಯೆಯಿಗಿಂತ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು ಏಕೆ ಹೆಚ್ಚು ಮುಖ್ಯವೆಂಬುದನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ. ಜಲೀಯ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು 1 cm ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 7 micromolar ಗಿಂತ ಕೆಳಗೆ ಇರಿಸಿದ ಜೇಡಿಮಣ್ಣಿನ ಸಂಶೋಧಕರು, 665 nm ನಲ್ಲಿ ಎಪ್ಸಿಲಾನ್ ಸುಮಾರು 82,000 M-1 cm-1 ಎಂದು ವರದಿ ಮಾಡಿದ್ದಾರೆ. ಅತ್ಯಂತ ದುರ್ಬಲ ಜಲೀಯ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಮಾಪನಾಂಕನದ ಇಳಿಜಾರಾಗಿ ಈ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ. ನಂತರದ ವಿಅಯಾನೀಕೃತ ನೀರಿನಲ್ಲಿನ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಮಾಪನಾಂಕನವು 2.34 ರಿಂದ 37.52 micromolar ಮತ್ತು 1 cm ಪಥವನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದು, ಒಟ್ಟು ವರ್ಣದ್ರವ್ಯಕ್ಕೆ 665 nm ನಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 67,100 M-1 cm-1 ಅನ್ನು ನೀಡಿತು. ಈ ಕಡಿಮೆ ಫಲಿತಾಂಶವು ನಿರೀಕ್ಷಿತವೇ ಹೊರತು ವಿರೋಧಾಭಾಸವಲ್ಲ; ಏಕೆಂದರೆ ಆ ಮಾಪನಾಂಕನ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯ ಮೇಲರ್ಧದಲ್ಲಿ ಈಗಾಗಲೇ ಗಮನಾರ್ಹ ಪ್ರಮಾಣದ ಡೈಮರ್ ಇರುತ್ತದೆ. ಮೂರನೆಯ ಮೌಲ್ಯವಾದ 664 nm ನಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 73,460 M-1 cm-1, pH 6.86 ಮತ್ತು 293 K ನಲ್ಲಿ ನಡೆಸಿದ ಅಧ್ಯಯನದಿಂದ ಬಂದಿದೆ. ಆ ಅಧ್ಯಯನವು ಗಮನಿಸಿದ ವರ್ಣಪಟಲವನ್ನು ಮೊನೊಮರ್ ಮತ್ತು ಡೈಮರ್ ಭಾಗಗಳಾಗಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸಿತು; ಇದನ್ನು ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ದ್ಯುತಿಭೌತಶಾಸ್ತ್ರದ ಇತ್ತೀಚಿನ ವಿಮರ್ಶಾತ್ಮಕ ಅವಲೋಕನದಲ್ಲಿ ಸಂಕ್ಷೇಪಿಸಲಾಗಿದೆ. ಈ ಸಂಖ್ಯೆಯು ಗಣಿತೀಯವಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಿದ ಮೊನೊಮರ್ ಘಟಕದ ಮೌಲ್ಯವೇ ಹೊರತು ಒಟ್ಟು ವರ್ಣದ್ರವ್ಯದ ವಿರುದ್ಧ ಹೀರಿಕೆ ಮೌಲ್ಯದ ನೇರ ಇಳಿಜಾರಲ್ಲ.

ಪ್ರಾಯೋಗಿಕವಾಗಿ ಮುಖ್ಯವಾದುದು: ನಿಮ್ಮ ಮಾದರಿಗಳ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಿಗೆ ಹೊಂದುವ ಗುಣಾಂಕವನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ, ಅಥವಾ ನಿಮ್ಮದೇ ಮಾಪನಾಂಕನವನ್ನು ನಡೆಸಿ. 30 micromolar ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಬಫರ್ ಪರೀಕ್ಷೆಗೆ 82,000 ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ರೇಖೀಯತೆ ಇನ್ನೂ ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಊಹಿಸಬೇಡಿ.

ಕಡಿಮೆ ತರಂಗಾಂತರದ ಭುಜಾಕಾರದ ಭಾಗವು ಒಂದು ಮಿಶ್ರಣ

ಸಾಂದ್ರತೆ ಹೆಚ್ಚಾದಂತೆ, 664 nm ಶಿಖರಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಸುಮಾರು 600 ರಿಂದ 615 nm ನಲ್ಲಿನ ಭುಜಾಕಾರದ ಭಾಗವು ಬೆಳೆಯುತ್ತದೆ. ಆಧುನಿಕ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ H ಪ್ರಕಾರದ ಡೈಮರ್‌ನ ಕೊಡುಗೆಯನ್ನು ಸುಮಾರು 605 ರಿಂದ 610 nm ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸುತ್ತವೆ. ನೀರಿನಲ್ಲಿನ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂನ ಸಮಗ್ರ ವರ್ಣಪಟಲ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಡೈಮರ್ ಗರಿಷ್ಠವನ್ನು 607 nm ನಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಉನ್ನತ ಅಣುಸಮೂಹದ ಗರಿಷ್ಠವನ್ನು 600 nm ನಲ್ಲಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಗುರುತಿಸುತ್ತದೆ; ಮೊನೊಮರ್ ಅನುರಣನ ಘಟಕಗಳು 664 ಮತ್ತು 650 nm ನಲ್ಲಿರುತ್ತವೆ. ಅದರ ಪೂರ್ಣ ಪಠ್ಯವು PMID 33251415 ರ ಮುಕ್ತ ಪ್ರವೇಶ ದಾಖಲೆಯ ಮೂಲಕ ಲಭ್ಯವಿದೆ.

ಆ ಭುಜಾಕಾರದ ಭಾಗವನ್ನು ಶುದ್ಧ ಡೈಮರ್ ಹೀರಿಕೆ ಮೌಲ್ಯ ಎಂದು ಗುರುತಿಸಬಾರದು. ಮೊನೊಮರ್‌ನ ಕಂಪನ-ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನಿಕ್ ರಚನೆಯೂ ಇದೇ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಕೊಡುಗೆ ನೀಡುತ್ತದೆ; ಆದ್ದರಿಂದ ಅಳೆಯಲಾದ ಎತ್ತರವು ಹಲವು ಕೊಡುಗೆಗಳ ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಕೆಯಾಗಿದೆ. ಒಂದು ಸಮಗ್ರ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ, ಮೊನೊಮರ್ ಮತ್ತು ಡೈಮರ್ ಒಳಗೊಂಡ ಮಾದರಿಯು ಸಂಪೂರ್ಣ 1.1 micromolar ರಿಂದ 3.4 millimolar ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ವಿಫಲವಾಯಿತು. ಟೆಟ್ರಾಮರ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿದಾಗ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ ದೊರೆಯಿತು; ಟೆಟ್ರಾಮರ್ ಸಂಕೇತವು 34 micromolar ಗಿಂತ ಕೆಳಗೆಯೇ ಪತ್ತೆಯಾಗುತ್ತಿತ್ತು. ಹೊಂದಿಸಲಾದ ಘಟಕಗಳ ತೀವ್ರತೆಗಳು ದೊಡ್ಡದಾಗಿದ್ದವು: ಮುಖ್ಯ ಮೊನೊಮರ್ ಘಟಕಕ್ಕೆ 664 nm ನಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 107,800 M-1 cm-1, ಡೈಮರ್‌ಗೆ 607 nm ನಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 101,400 ಮತ್ತು ಟೆಟ್ರಾಮರ್‌ಗೆ 600 nm ನಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 138,500. ಇವು ಬಫರ್ ಇಲ್ಲದ ವಿಅಯಾನೀಕೃತ ನೀರಿನಲ್ಲಿ, 0 ರಿಂದ 0.15 M ಸೋಡಿಯಂ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ಮತ್ತು 282 ರಿಂದ 333 K ತಾಪಮಾನಗಳಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬಂದವು. ಇವು ಮಾದರಿಯ ಮೂಲಕ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಿದ ಭಾಗಗಳಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಬೀರ್–ಲ್ಯಾಂಬರ್ಟ್ ಇಳಿಜಾರಿನ ಬದಲಿಗೆ ಅವನ್ನು ಬಳಸಬಾರದು.

ಡೈಮರೀಕರಣದ ಪ್ರಬಲತೆಯನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಪರಿಮಾಣಿಸಲಾಗಿದೆ. pH 6.86 ಮತ್ತು 293 K ನಲ್ಲಿ ಒಂದು ಅಧ್ಯಯನವು ಸುಮಾರು 3,900 M-1 ಡೈಮರೀಕರಣ ಸ್ಥಿರಾಂಕವನ್ನು ಪಡೆದಿದೆ. ಈ ಪ್ರಮಾಣವು 5 micromolar ಕಾರ್ಯದ್ರಾವಣವು ಬಹುತೇಕ ರೇಖೀಯವಾಗಿ ವರ್ತಿಸುವಾಗ 50 micromolar ಮೂಲದ್ರಾವಣವು ಏಕೆ ಹಾಗೆ ವರ್ತಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಎಂಬುದನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ವಿಧಾನ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಉಪಯುಕ್ತ ಪರಿಶೀಲನೆಯೆಂದರೆ ಸುಮಾರು 610 nm ನಲ್ಲಿನ ಹೀರಿಕೆ ಮೌಲ್ಯಕ್ಕೂ ಸುಮಾರು 665 nm ನಲ್ಲಿನ ಹೀರಿಕೆ ಮೌಲ್ಯಕ್ಕೂ ಇರುವ ಅನುಪಾತ. ಸಾಂದ್ರತೆಯೊಂದಿಗೆ ಈ ಅನುಪಾತ ಹೆಚ್ಚಾದಾಗ, 664 nm ನಲ್ಲಿನ ಎಪ್ಸಿಲಾನ್ ಇನ್ನು ಒಂದೇ ಬದಲಾಗದ ರಾಸಾಯನಿಕ ಪ್ರಭೇದವನ್ನು ವಿವರಿಸುವುದಿಲ್ಲ.

ಪರಸ್ಪರ ಪರಿವರ್ತನೆಯಾಗುವ ಒಂದು ಜೋಡಿ ಪ್ರಭೇದಗಳು ಪ್ರಧಾನವಾಗಿರುವ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಅಂತರದಲ್ಲಿ, ವರ್ಣಪಟಲಗಳು ಒಂದೇ ಐಸೋಸ್ಬೆಸ್ಟಿಕ್ ಬಿಂದುವನ್ನು ಹೊಂದಿರಬಹುದು. ಜಲೀಯ ಸರಣಿಗಳಲ್ಲಿ ಇದು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕವಾಗಿ ಸುಮಾರು 625 nm ನಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುತ್ತದೆ. ಸ್ಪಷ್ಟವಾದ ಸ್ಥಿರ ಬಿಂದುವು ಎರಡು ಪ್ರಭೇದಗಳು ಪ್ರಧಾನವಾಗಿರುವುದಕ್ಕೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುತ್ತದೆ. ಸಾಂದ್ರತೆ ಹೆಚ್ಚಾದಂತೆ ಆ ಬಿಂದು ಸರಿದರೆ ಅಥವಾ ಕಣ್ಮರೆಯಾದರೆ, ಅದನ್ನು ಉಪಕರಣದ ದೋಷವೆಂದು ಪರಿಗಣಿಸದೆ, ಉನ್ನತ ಅಣುಸಮೂಹಗಳು ಅಥವಾ ಬದಲಾಗುತ್ತಿರುವ ಸಮತೋಲನಗಳು ಕಾಣಿಸಿಕೊಂಡಿರುವ ಎಚ್ಚರಿಕೆಯಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸಿ.

ದ್ರಾವಕ, pH ಮತ್ತು ತಾಪಮಾನ ವರ್ಣಪಟಲವನ್ನು ಸ್ಥಳಾಂತರಿಸುತ್ತವೆ

ನೀರು ಅಣುಸಂಘಟನೆಗೆ ಅನುಕೂಲ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಡೈಮಿಥೈಲ್ ಸಲ್ಫಾಕ್ಸೈಡ್ ಸೇರಿಸುವುದು ಡೈಮರೀಕರಣವನ್ನು ತಗ್ಗಿಸುತ್ತದೆ, ಹೀರಿಕೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿಯ ಗರಿಷ್ಠಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿನ ತರಂಗಾಂತರಕ್ಕೆ ಸ್ಥಳಾಂತರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿಯ ಕ್ವಾಂಟಮ್ ಫಲಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಸುಮಾರು ನಾಲ್ಕು ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ. ಇದನ್ನು ನೀರು ಮತ್ತು DMSO ಮಿಶ್ರಣಗಳಲ್ಲಿ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂನ ದ್ರಾವಕ ಅಧ್ಯಯನವು ವರದಿ ಮಾಡಿದ್ದು, ಅದನ್ನು PMID 30933781 ಎಂದು ಸೂಚ್ಯಂಕಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ಆ ಅಧ್ಯಯನವು ಜಲೀಯ ವರ್ಣಪಟಲಗಳನ್ನು ಮೊನೊಮರ್–ಡೈಮರ್ ಸಮತೋಲನವಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸುತ್ತದೆ; ಮೊನೊಮರ್ ಹೀರಿಕೆ ಸುಮಾರು 650 ರಿಂದ 670 nm ನಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಡೈಮರ್ ಹೀರಿಕೆ ಸುಮಾರು 580 ರಿಂದ 615 nm ನಲ್ಲಿರುತ್ತದೆ. ಅದು 293.15 K ನಲ್ಲಿನ ವರ್ಣಪಟಲಗಳಿಂದ ಡೈಮರೀಕರಣ ಸ್ಥಿರಾಂಕಗಳನ್ನು ಪಡೆಯುತ್ತದೆ.

ಆಲ್ಕೊಹಾಲ್‌ಗಳು ಸ್ಥಾನ ಮತ್ತು ತೋರುವ ತೀವ್ರತೆ ಎರಡನ್ನೂ ಬದಲಿಸುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಅಣುಸಮೂಹ ರಚನೆಯನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ತಡೆಯುವುದಿಲ್ಲ. ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ದ್ರಾವಕ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ ವರದಿಯಾದ ಒಂದು ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೋಲಿಕೆಯನ್ನು 31.3 micromolar ಮತ್ತು ಕೊಠಡಿಯ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಅದರಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ತರಂಗಾಂತರದ ಗರಿಷ್ಠವು ನೀರಿನಲ್ಲಿ 665 nm ಆಗಿದ್ದರೆ, ಮೆಥನಾಲ್‌ನಲ್ಲಿ 655 nm ಆಗಿತ್ತು; ಒಟ್ಟು ದ್ರಾವಣದ ತೋರುವ ಮೌಲ್ಯಗಳು ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 37,100 ಮತ್ತು ಮೆಥನಾಲ್‌ನಲ್ಲಿ 60,800 ಆಗಿದ್ದವು. 298 K ನಲ್ಲಿ ನಿರ್ಜಲ ಎಥನಾಲ್‌ನಲ್ಲಿ ನಡೆಸಿದ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಮಾನ್ಯತಾ ಪರಿಶೀಲನೆಯಲ್ಲಿ ಗರಿಷ್ಠವು 655 nm ನಲ್ಲಿದ್ದು, ಎಪ್ಸಿಲಾನ್ ಸುಮಾರು 68,000 ಆಗಿತ್ತು.

ಸಾಮಾನ್ಯ pH ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಅನೇಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಊಹಿಸುವುದಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ವರ್ಣಪಟಲವನ್ನು ಸ್ಥಳಾಂತರಿಸುತ್ತವೆ. ಮೇಲೆ ಉಲ್ಲೇಖಿಸಿದ ವಿಮರ್ಶಾತ್ಮಕ ಅವಲೋಕನವು ಸುಮಾರು pH 2 ರಿಂದ pH 12 ವರೆಗೆ ಗರಿಷ್ಠವು ಸುಮಾರು 665 nm ನಲ್ಲಿಯೇ ಉಳಿದಿತೆಂದು ವರದಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ; pH 11 ವರೆಗೆ ತೀವ್ರತೆಯಲ್ಲಿ ಸಣ್ಣ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಮಾತ್ರ ಕಂಡುಬಂದವು. ಬಫರ್‌ನ ವಿಧ ಮತ್ತು ಆಯಾನಿಕ ಪ್ರಬಲತೆ, ಸೂಚಿಸಿದ pH ನಷ್ಟೇ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಬದಲಿಸಬಹುದು. ಆದ್ದರಿಂದ pH ಮೀಟರ್‌ನ ಓದನ್ನು ಮಾತ್ರವಲ್ಲದೆ, ಬಳಸಿದ ಬಫರ್ ಮತ್ತು ಉಪ್ಪನ್ನೂ ದಾಖಲಿಸಿ. ಪ್ರಬಲ ಆಮ್ಲ ಅಥವಾ ಪ್ರಬಲ ಕ್ಷಾರವು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಸಂದರ್ಭವಾಗಿದೆ; ಏಕೆಂದರೆ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯವು ಹಿಂತಿರುಗಿಸಬಹುದಾದ ಅಣುಸಂಘಟನೆಗೆ ಬದಲಾಗಿ ರಾಸಾಯನಿಕ ಬದಲಾವಣೆಗೆ ಒಳಗಾಗಬಹುದು. ತಾಪಮಾನ ಮತ್ತು ಉಪ್ಪು ಸಹ ಸಮತೋಲನವನ್ನು ಬದಲಿಸುತ್ತವೆ. ಅದಕ್ಕಾಗಿಯೇ 2020 ರ ನೀರಿನ ಅಧ್ಯಯನವು ಇವೆರಡನ್ನೂ ಉದ್ದೇಶಪೂರ್ವಕವಾಗಿ ಬದಲಿಸಿತು.

ಸಂಖ್ಯೆಯ ಮಾನ್ಯತೆ ಉಳಿಯುವಂತೆ ಅಳೆಯುವುದು

ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಕೆಲಸವು ಬೀರ್–ಲ್ಯಾಂಬರ್ಟ್ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ: ಹೀರಿಕೆ ಮೌಲ್ಯವು ಎಪ್ಸಿಲಾನ್, ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಪಥದ ಉದ್ದದ ಗುಣಲಬ್ಧಕ್ಕೆ ಸಮನಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಜೊತೆಗೆ, ನಿಮ್ಮ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ರೇಖೀಯ ವ್ಯಾಪ್ತಿ ನಿಜವಾಗಿಯೂ ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬ ಪುರಾವೆಯೂ ಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ.

ಕಡಿಮೆ micromolar ಮಟ್ಟದ ಕೆಲಸಕ್ಕೆ 1 cm ಕೋಶವನ್ನು ಬಳಸಿ. ಎಪ್ಸಿಲಾನ್ ಸುಮಾರು 82,000 ಆಗಿದ್ದರೆ, 5 micromolar ಸುಮಾರು 0.41 ಹೀರಿಕೆ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಮತ್ತು 10 micromolar ಸುಮಾರು 0.82 ಅನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. ಸರಳ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಮೊನೊಮರ್ ಅನ್ನು ಕೇಂದ್ರವಾಗಿಟ್ಟ ಅಳತೆಗೆ, ಹತ್ತಾರು micromolar ವರೆಗೆ ಮಾಪನಾಂಕನ ಮಾಡುವುದಕ್ಕಿಂತ ಸರಿಸುಮಾರು 5 ರಿಂದ 7 micromolar ಸಮೀಪದಲ್ಲಿ ಅಥವಾ ಅದಕ್ಕಿಂತ ಕೆಳಗೆ ಉಳಿಯುವುದು ಹೆಚ್ಚು ಸುರಕ್ಷಿತ. ಸಾಂದ್ರ ಮೂಲದ್ರಾವಣಗಳಿಗೆ, 1 ಕ್ಕಿಂತ ಬಹಳ ಹೆಚ್ಚಿನ ಹೀರಿಕೆ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಒಪ್ಪಿಕೊಳ್ಳುವುದಕ್ಕಿಂತ ಪಥವನ್ನು ಚಿಕ್ಕದಾಗಿಸಿ.

ಅದೇ ಮಾಧ್ಯಮದಿಂದ ಬ್ಲ್ಯಾಂಕ್ ಅಳತೆ ಮಾಡಿ: ಅದೇ ಗುಣಮಟ್ಟದ ನೀರು, ಅದೇ ಸಹದ್ರಾವಕದ ಅಂಶ, ಅದೇ ಬಫರ್ ಮತ್ತು ಉಪ್ಪುಗಳು, ಆದರೆ ವರ್ಣದ್ರವ್ಯವಿಲ್ಲದೆ. ಅದೇ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ, ಅದೇ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಮಾಪನಾಂಕನ ದ್ರಾವಣಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ. ವಿಧಾನ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಒಂದೇ ತರಂಗಾಂತರವನ್ನು ಓದುವ ಬದಲು, ಸಂಪೂರ್ಣ ಗೋಚರ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯನ್ನು ಸ್ಕ್ಯಾನ್ ಮಾಡಿ; ಆದರ್ಶವಾಗಿ ಸುಮಾರು 550 ರಿಂದ 750 nm. ಎತ್ತರವನ್ನು ಮಾತ್ರವಲ್ಲ, ಆಕಾರವನ್ನೂ ಗಮನಿಸಿ. ಕ್ರಮಬದ್ಧ ದುರ್ಬಲೀಕರಣವು ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಆಕಾರವನ್ನು ಬದಲಿಸಿದರೆ, ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ರಾಸಾಯನಿಕವಾಗಿ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿದೆ. ಸ್ಥಿರ ಗರಿಷ್ಠ ಮತ್ತು ಸ್ಥಿರ 610 ರಿಂದ 665 nm ಅನುಪಾತವು, ಹೆಚ್ಚಿನ R ವರ್ಗ ಮೌಲ್ಯವೊಂದಕ್ಕಿಂತ ಸ್ವೀಕಾರಾರ್ಹ ವ್ಯಾಪ್ತಿಗೆ ಬಲವಾದ ಪುರಾವೆಗಳಾಗಿವೆ.

ಕಾರಕದ ರೂಪವನ್ನು ದಾಖಲಿಸಿ. ವಾಣಿಜ್ಯ ವಸ್ತುವು ನಿರ್ಜಲ ಮೀಥೈಲ್‌ಥಯೋನಿನಿಯಮ್ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ಆಗಿರಬಹುದು ಅಥವಾ ಟ್ರೈಹೈಡ್ರೇಟ್‌ನಂತಹ ಹೈಡ್ರೇಟ್ ಆಗಿರಬಹುದು. ಆದ್ದರಿಂದ ಮೂಲದ್ರಾವಣದ ಲೆಕ್ಕಾಚಾರಗಳಿಗೆ ಬಳಸುವ ಮೋಲಾರ್ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿಯು ಬಾಟಲಿಯಲ್ಲಿರುವ ನಿಜವಾದ ವಸ್ತುವಿಗೆ ಹೊಂದಬೇಕು. ಈ ಒಂದು ಹಂತವೇ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳ ನಡುವೆ ಸೂಚಿಸಿದ ಮೋಲಾರ್ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಲ್ಲಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸದ ಒಂದು ಭಾಗವನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಪರೀಕ್ಷೆಯ ಲೆಕ್ಕಾಚಾರಗಳಿಗೆ ಬಳಸುವಾಗ, ವರ್ಣಪಟಲಗಳನ್ನು ಸೂತ್ರೀಕರಣದ ಸ್ಥಿರತೆ ಪರಿಶೀಲನೆಗಳಿಗೆ ಬಳಸುವಾಗ ಮತ್ತು ಅಶುದ್ಧತೆಯ ವಿವರಗಳಿಗೆ ಶುದ್ಧತೆ ಹಾಗೂ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಗಳ ಪರಿಶೀಲನೆ ಅಗತ್ಯವಾದಾಗಲೂ ಇದೇ ರೀತಿಯ ಶಿಸ್ತು ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ.

ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸಿದ ಸಾರಾಂಶ

ಈ ಕೋಷ್ಟಕವನ್ನು ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ದಾಖಲೆಗೆ ಆರಂಭಿಕ ಮಾದರಿಯಾಗಿ ಬಳಸಿ; ಪರಸ್ಪರ ಬದಲಿಸಿ ಬಳಸಬಹುದಾದ ಸ್ಥಿರಾಂಕಗಳ ಮೂಲವಾಗಿ ಅಲ್ಲ.

ಹೀಗಾಗಿ ಮಿಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಹೀರಿಕೆಯ ತರಂಗಾಂತರವು ದೀರ್ಘ ಅಡಿಟಿಪ್ಪಣಿ ಬೇಕಾಗುವ ಚಿಕ್ಕ ಉತ್ತರವಾಗಿದೆ. ನೀವು ಅಳೆದ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ, ನೀವು ಅಳೆದ ಸಾಂದ್ರತೆಯಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬಂದ ಶಿಖರವನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಿ. ಈ ಅಭ್ಯಾಸವು ದುರ್ಬಲ ಜಲೀಯ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 664 nm ನಲ್ಲಿರುವ ಒಂದು ಮೌಲ್ಯವು ತಪ್ಪಾದ ಸಾರ್ವತ್ರಿಕ ಸ್ಥಿರಾಂಕವಾಗಿ ಮಾರ್ಪಡುವುದನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ.