ಲೇಖನ
EMB agar ವಿರುದ್ಧ MacConkey agar: ಮಾಧ್ಯಮದ ಆಯ್ಕೆ ಮತ್ತು ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ
ಒಬ್ಬ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿ ಅದೇ ನೀರಿನ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಎರಡು ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳ ಮೇಲೆ ಸ್ಟ್ರೀಕ್ ಮಾಡುತ್ತಾನೆ. ಒಂದರಲ್ಲಿ ಹಸಿರು ಲೋಹೀಯ ಹೊಳಪಿರುವ ಗಾಢ ಕಾಲನಿಗಳು ಕಾಣಿಸುತ್ತವೆ. ಮತ್ತೊಂದರಲ್ಲಿ ಮಸುಕಾದ ಹ್ಯಾಲೊ ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ರಕಾಶಮಾನ ಗುಲಾಬಿ ಕಾಲನಿಗಳು ಕಾಣಿಸುತ್ತವೆ. ಎರಡೂ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳಿಗೆ ಅದೇ ಟ್ಯೂಬ್‌ನಿಂದ ಇನಾಕ್ಯುಲೇಟ್ ಮಾಡಲಾಗಿತ್ತು, ಪಕ್ಕಪಕ್ಕದಲ್ಲೇ ಇಂಕ್ಯುಬೇಟ್ ಮಾಡಲಾಗಿತ್ತು ಮತ್ತು ಅದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಓದಲಾಗಿತ್ತು. ಯಾವ ಪ್ಲೇಟ್ ಸರಿಯಾಗಿದೆ ಎಂದು ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿ ಕೇಳುತ್ತಾನೆ.
ಎರಡೂ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು ಸರಿಯೇ. ಅವು ವಿಭಿನ್ನ ಪ್ರಶ್ನೆಗಳಿಗೆ ಉತ್ತರಿಸುತ್ತವೆ. ಈ ಎರಡು ಮಾಧ್ಯಮಗಳನ್ನು ಅಂತರಾಯವಿಲ್ಲದೆ ಪರಸ್ಪರ ಬದಲಾಯಿಸಬಹುದಾದ ಆಂತರಿಕ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಸ್ಕ್ರೀನ್‌ಗಳೆಂದು ಪರಿಗಣಿಸುವುದರಿಂದ ಗೊಂದಲ ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ. Gram-ಋಣಾತ್ಮಕ ಎಂಟೆರಿಕ್ ಜೀವಿಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವುದು ಮತ್ತು ಲ್ಯಾಕ್ಟೋಸ್ ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳನ್ನು ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳಿಂದ ಬೇರ್ಪಡಿಸುವುದು ಎಂಬ ಉದ್ದೇಶವನ್ನು ಅವು ಹಂಚಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಆ ಉದ್ದೇಶವನ್ನು ವಿಭಿನ್ನ ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರ ಮತ್ತು ವಿಭಿನ್ನ ದೃಶ್ಯತರ್ಕದ ಮೂಲಕ ಜಾರಿಗೆ ತರುತ್ತವೆ. ಈ ಎರಡು ಮೂಲಭೂತ ತತ್ವಗಳನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಂಡ ನಂತರ, ಪ್ಲೇಟ್ ಆಯ್ಕೆ ಮತ್ತು ಕಾಲನಿ ಓದುವುದು ಸಾಮಾನ್ಯ ಕ್ರಮವಾಗುತ್ತದೆ.
ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತ ಉತ್ತರ
EMB agar ಎರಡು ಡೈಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ—eosin Y ಮತ್ತು methylene blue—ಅವು ಎರಡು ಕೆಲಸಗಳನ್ನು ಮಾಡುತ್ತವೆ: Gram-ಧನಾತ್ಮಕ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಆಮ್ಲ ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಜೀವಿಗಳ ಸುತ್ತ ಅವಕ್ಷೇಪಗೊಂಡು ಗಾಢ ಕಾಲನಿಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತವೆ; ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕವಾಗಿ Escherichia coli ಯಲ್ಲಿ ಲೋಹೀಯ ಹಸಿರು ಹೊಳಪು ಕಾಣಿಸುತ್ತದೆ. MacConkey agar ಈ ಕೆಲಸಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುತ್ತದೆ: bile salts ಜೊತೆಗೆ crystal violet Gram-ಧನಾತ್ಮಕ ಜೀವಿಗಳನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತವೆ, lactose ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್‌ಗೆ ಸಬ್‌ಸ್ಟ್ರೇಟ್ ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು neutral red ಆಮ್ಲದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಗುಲಾಬಿ ಅಥವಾ ಕೆಂಪು ಕಾಲನಿಗಳಾಗಿ ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಕಾರ್ಯವು E. coli ಯ ಸ್ಪಷ್ಟ ಪೂರ್ವಾನುಮಾನಾತ್ಮಕ ಪ್ರದರ್ಶನವಾಗಿದ್ದರೆ, EMB ಸೂಕ್ತ ಸ್ಥಾನ ಹೊಂದಿದೆ. ಕಾರ್ಯವು ಲ್ಯಾಕ್ಟೋಸ್ ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳನ್ನು ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳಿಂದ ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಗುಲಾಬಿ ಮತ್ತು ಬಣ್ಣರಹಿತವಾಗಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸುವುದಾಗಿದ್ದರೆ, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಮಲ ಅಥವಾ ಮೂತ್ರದ ಕಾರ್ಯಪ್ರವಾಹಗಳಲ್ಲಿ, MacConkey ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಓದಲು ಸರಳವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಯಾವ ಪ್ಲೇಟ್ ಕೂಡ ಕೇವಲ ಬಣ್ಣದ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಜೀವಿಯನ್ನು ಗುರುತಿಸುವುದಿಲ್ಲ.
EMB: ಒಂದೇ ವೇಳೆ ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ಮತ್ತು ಸೂಚಿಸುವ ಡೈಗಳು
EMB ತತ್ವವು ಆಯ್ಕೆ ಮತ್ತು ಸೂಚನೆ ಎರಡನ್ನೂ ಅದೇ ಅಣುಗಳಲ್ಲಿ ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸುತ್ತದೆ. ASM eosin methylene blue agar ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ EMB ಅನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ಮತ್ತು ವಿಭೇದಕ ಮಾಧ್ಯಮ ಎರಡೂ ಆಗಿ ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ; ಡೈ ಜೋಡಿ ಅನೇಕ Gram-ಧನಾತ್ಮಕ ಜೀವಿಗಳನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ, ಜೊತೆಗೆ lactose ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ಡೈ ಸ್ವೀಕಾರ ಮತ್ತು ಅವಕ್ಷೇಪಣೆಯನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ. Levine EMB agar ಗಾಗಿ FDA BAM ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ ಪಟ್ಟಿ ಮಾಡಿರುವಂತೆ, ಮಾನಕ Levine ಸಂಯೋಜನೆಯಲ್ಲಿ peptone, lactose, phosphate, eosin Y, methylene blue ಮತ್ತು agar ಇರುತ್ತವೆ. ಹಳೆಯ EMB ಸಂಯೋಜನೆಗಳಲ್ಲಿ ಕೆಲವೊಮ್ಮೆ lactose ಜೊತೆಗೆ sucrose ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು, ಆದರೆ Levine EMB ಯಲ್ಲಿ sucrose ಇಲ್ಲದೆ lactose ಇರುತ್ತದೆ; ಆದ್ದರಿಂದ ನಿಮ್ಮ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದಲ್ಲಿ ಯಾವ ಸಂಯೋಜನೆಯನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ದಾಖಲಿಸಿ.
EMB ಓದುವುದು ಎಂದರೆ ಡೈಗಳ ವರ್ತನೆಯನ್ನು ಓದುವುದು. ತೀವ್ರ lactose ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ಸಾಕಷ್ಟು ಆಮ್ಲವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಡೈ ಅವಕ್ಷೇಪಣೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ; ಇದರಿಂದ E. coli ಗೆ ಗಾಢ ನೀಲಿ-ಕಪ್ಪು ಕೇಂದ್ರಗಳು ಮತ್ತು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಫಲಿತ ಬೆಳಕಿನಲ್ಲಿ ಹಸಿರು ಲೋಹೀಯ ಹೊಳಪು ಕಾಣಿಸುತ್ತದೆ. Enterobacter ಮತ್ತು Klebsiella ಹೀಗೆ ದುರ್ಬಲ ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಆ ಹೊಳಪಿಲ್ಲದೆ ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ನೇರಳೆ ಬಣ್ಣದ ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ ಕಾಲನಿಗಳಾಗಿ ಬೆಳೆಯುತ್ತವೆ. Salmonella, Shigella ಮತ್ತು Proteus ಹೀಗೆ ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಣ್ಣರಹಿತ ಅಥವಾ ಪಾರದರ್ಶಕ ಕಾಲನಿಗಳಾಗಿ ಬೆಳೆಯುತ್ತವೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಡೈಗಳನ್ನು ಅವಕ್ಷೇಪಿಸುವಷ್ಟು ತೀವ್ರ ಆಮ್ಲ ಉತ್ಪಾದನೆ ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಭವಿಸುವುದಿಲ್ಲ. Gram-ಧನಾತ್ಮಕ ಜೀವಿಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ತಡೆಯಲ್ಪಡುತ್ತದೆ, ಆದರೂ ತಡೆಗಟ್ಟುವಿಕೆಯ ಪ್ರಮಾಣವು strain ಮತ್ತು ಉತ್ಪನ್ನದ ಪ್ರಕಾರ ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ. methylene blue ಮೊದಲಿನಿಂದಲೇ ಏಕೆ ಕ್ಯಾಟಯಾನಿಕ್ stain ಆಗಿ ವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬುದೂ ಸೇರಿದಂತೆ ಸಂಪೂರ್ಣ ಡೈ ತಯಾರಿ ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರವು ಡೈ ಸಂಯೋಜನೆಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಚರ್ಚೆಗೆ ಸೇರಿದೆ; ಸಾಮಾನ್ಯ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಹಿನ್ನೆಲೆ staining ವಿಧಾನಗಳ atlasನಲ್ಲಿ ಇದೆ. ಈ ಲೇಖನವು ಪ್ಲೇಟ್ ಆಯ್ಕೆ ಮತ್ತು ಓದುವಿಕೆಗೆ ಮಾತ್ರ ಸೀಮಿತವಾಗಿದೆ.
ಮೇಲಿನ ಚಿತ್ರವು ವಿವರಣಾತ್ಮಕವಾಗಿದೆ. ನಿರೀಕ್ಷಿಸಬೇಕಾದ ದೃಶ್ಯತರ್ಕವನ್ನು ಅದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ: EMB ಯಲ್ಲಿ ಗಾಢ ಹೊಳಪಿನ ಕಾಲನಿಗಳು, ಗುಲಾಬಿ ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ ಪ್ರಕಾರಗಳು ಮತ್ತು ತೆಳು ಪ್ರಕಾರಗಳು; MacConkey ಯಲ್ಲಿ ಗುಲಾಬಿ ಮತ್ತು ತೆಳು ಪ್ರಕಾರಗಳು. ಮಾದರಿಯನ್ನು ಕಲಿಯಲು ಇದನ್ನು ಬಳಸಿ; ನಂತರ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ನಿರ್ಧಾರವನ್ನೂ ಛಾಯಾಚಿತ್ರಿತ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಮತ್ತು ನಿಮ್ಮ ಬೆಂಚ್‌ನಲ್ಲಿರುವ ನಿಖರ ಮಾಧ್ಯಮದ ಉತ್ಪನ್ನ ಸೂಚನಾ ಪತ್ರಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ದೃಢೀಕರಿಸಿ.
MacConkey: ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಕೆಲಸಗಳು, ಸರಳವಾದ ದೃಶ್ಯ ನಿಯಮ
MacConkey ತತ್ವವು ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಕೆಲಸವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಘಟಕಕ್ಕೆ ನಿಯೋಜಿಸುತ್ತದೆ. ASM MacConkey agar ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ ಅದೇ ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ಮತ್ತು ವಿಭೇದಕ ಚೌಕಟ್ಟನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು MacConkey agar ಗಾಗಿ FDA BAM ವಿಧಾನ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುವ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಪಟ್ಟಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ: peptones, lactose, bile salts, salt, neutral red, crystal violet ಮತ್ತು agar. Bile salts ಜೊತೆಗೆ crystal violet Gram-ಧನಾತ್ಮಕ ಜೀವಿಗಳ ವಿರುದ್ಧ ಆಯ್ಕೆಮಾಡುತ್ತವೆ. Lactose ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ಸಬ್‌ಸ್ಟ್ರೇಟ್ ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. Neutral red pH ಸೂಚಕವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಿ, ಆಮ್ಲ ರೂಪುಗೊಳ್ಳುವ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣಕ್ಕೆ ತಿರುಗುತ್ತದೆ; ತೀವ್ರ ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳ ಸುತ್ತ ಕೆಲವೊಮ್ಮೆ ಅವಕ್ಷೇಪಿತ bile ಕಾಣಿಸಬಹುದು.
ಓದುವ ನಿಯಮವನ್ನು ಉದ್ದೇಶಪೂರ್ವಕವಾಗಿ ಸರಳವಾಗಿರಿಸಲಾಗಿದೆ: ಗುಲಾಬಿ ಎಂದರೆ lactose ಫರ್ಮೆಂಟರ್, ಬಣ್ಣರಹಿತ ಅಥವಾ ತೆಳು ಎಂದರೆ ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್. E. coli ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ಕೆಂಪಾಗಿ ಕಾಣಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಆಗಾಗ bile ಅವಕ್ಷೇಪದ ಹ್ಯಾಲೊ ಇರುತ್ತದೆ. Klebsiella ಮತ್ತು Enterobacter ಗುಲಾಬಿಯಾಗಿ ಕಾಣುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಅವುಗಳ capsules ಕಾರಣದಿಂದ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ ಆಗಿರುತ್ತವೆ. Salmonella, Shigella, Proteus ಮತ್ತು ಅನೇಕ ಇತರ Gram-ಋಣಾತ್ಮಕ rods ಬಣ್ಣರಹಿತವಾಗಿ ಕಾಣುತ್ತವೆ. ಬೋಧನಾ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತೊಂದು ಪ್ರಯೋಜನವೂ ಇದೆ: bile salts ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ Proteus swarming ಅನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತವೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಆಯ್ಕೆಮಾಡದ ಮಾಧ್ಯಮಗಳಿಗಿಂತ MacConkey ಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಕಾಲನಿಗಳನ್ನು ಪಡೆಯುವುದು ಸುಲಭ. ಆದರೆ ಈ ತಡೆ ಸಂಪೂರ್ಣವಲ್ಲ, ಮತ್ತು swarming ನಿಯಂತ್ರಣವೇ ಮುಖ್ಯ ಆದ್ಯತೆಯಾಗಿರುವ ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ಉಪ್ಪಿಲ್ಲದ ಪರ್ಯಾಯಗಳೂ ಇವೆ.
ಡೈಗಳು ಈ ರೀತಿಯಾಗಿ ವರ್ತಿಸುವ ಅಣುಮಟ್ಟದ ಕಾರಣ charge ಮತ್ತು structure ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ. Methylene blue ಒಂದು ಕ್ಯಾಟಯಾನಿಕ್ phenothiazine dye ಆಗಿದ್ದು, ಅದರ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು ಆಮ್ಲೀಯ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಮೇಲ್ಮೈಗಳತ್ತ ಅದರ ಆಕರ್ಷಣೆಯನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತವೆ; ಇದೇ ಆಕರ್ಷಣೆ EMB ಯ ಆಮ್ಲೀಯ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಅದು ಅವಕ್ಷೇಪಗೊಳ್ಳುವಾಗಲೂ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ.
ಒಂದು ನೋಟದಲ್ಲಿ ಹೋಲಿಕೆ
| ಲಕ್ಷಣ | EMB agar | MacConkey agar |
|---|---|---|
| ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ವ್ಯವಸ್ಥೆ | Eosin Y ಜೊತೆಗೆ methylene blue | Bile salts ಜೊತೆಗೆ crystal violet |
| ವಿಭೇದಕ ಸಬ್‌ಸ್ಟ್ರೇಟ್ | Lactose (Levine ನಲ್ಲಿ sucrose ಇಲ್ಲ) | Lactose |
| ಸೂಚಕ | ಡೈ ಅವಕ್ಷೇಪಣೆಯೇ ಸೂಚಕ (ಗಾಢ ಕಾಲನಿಗಳು, ಹಸಿರು ಹೊಳಪು) | Neutral red (ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ಕೆಂಪು ಆಮ್ಲೀಯ ಕಾಲನಿಗಳು) |
| ತೀವ್ರ E. coli ಸಂಕೇತ | ಗಾಢ ನೀಲಿ-ಕಪ್ಪು ಕಾಲನಿ, ಆಗಾಗ ಲೋಹೀಯ ಹಸಿರು ಹೊಳಪು | ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ಕೆಂಪು ಕಾಲನಿ, ಆಗಾಗ bile ಅವಕ್ಷೇಪ |
| Klebsiella ಮತ್ತು Enterobacter | ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ನೇರಳೆ, ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್, ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಹೊಳಪು ಇಲ್ಲ | ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ಕೆಂಪು, ಆಗಾಗ ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ |
| Salmonella, Shigella, Proteus | ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಣ್ಣರಹಿತ ಅಥವಾ ಪಾರದರ್ಶಕ | ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಣ್ಣರಹಿತ ಅಥವಾ ತೆಳು |
| Gram-ಧನಾತ್ಮಕ ಜೀವಿಗಳು | ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ತಡೆಯಲ್ಪಡುತ್ತವೆ | crystal violet ಸಂಯೋಜನೆಗಳಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ತಡೆಯಲ್ಪಡುತ್ತವೆ |
| ಬೋಧನೆಯಲ್ಲಿ ಮುಖ್ಯ ಪ್ರಯೋಜನ | ತೀವ್ರ ಮತ್ತು ದುರ್ಬಲ ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸ ಗೋಚರವಾಗುತ್ತದೆ | ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ಮತ್ತು ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ನಡುವಿನ ಅತ್ಯಂತ ಸರಳ ವಿಂಗಡಣೆ |
ಪಟ್ಟಿಯನ್ನು ನಿರ್ಧಾರ ಕ್ರಮವಾಗಿ ಓದಿ. ಅಭ್ಯಾಸದಲ್ಲಿ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳು ಒಂದು ಸ್ಪಷ್ಟ ಅಂತಿಮ ಸ್ಥಿತಿಯೊಂದಿಗೆ ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ತೀವ್ರತೆಯ ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ನೋಡಬೇಕಿದ್ದರೆ, EMB ಅದನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಜೈವ ರಾಸಾಯನಿಕ ದೃಢೀಕರಣಕ್ಕೂ ಮೊದಲು ತ್ವರಿತ ದ್ವಿಮುಖ ವಿಂಗಡಣೆ ಬೇಕಿದ್ದರೆ, MacConkey ಅದನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ.
ಯಾವ ಮಾದರಿಗೆ ಯಾವ ಮಾಧ್ಯಮ
ಪೂರ್ವಾನುಮಾನಾತ್ಮಕ fecal coliform ಅಥವಾ E. coli ಗುರುತಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಉದ್ದೇಶಿಸಿದ ನೀರಿನ ಅಭ್ಯಾಸಗಳಲ್ಲಿ, EMB ಆಕರ್ಷಕವಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಅದರ ಹೊಳಪು ದೃಶ್ಯವಾಗಿ ವಿಶಿಷ್ಟವಾಗಿರುತ್ತದೆ. MacConkey ಕೂಡ ಎಂಟೆರಿಕ್ Gram-ಋಣಾತ್ಮಕ ಜೀವಿಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನೀರಿನ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಐತಿಹಾಸಿಕ ಬಳಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಆದರೆ ಯಾವುದೇ ಪ್ಲೇಟ್ ನಿಯಂತ್ರಣಾತ್ಮಕ ನೀರಿನ ವಿಧಾನಕ್ಕೆ ಪರ್ಯಾಯವಲ್ಲ; ಪರೀಕ್ಷೆಯ ಪ್ರಕಾರ modified mTEC ಅಥವಾ MI ಹೀಗೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮಾಧ್ಯಮಗಳನ್ನು ವಿಧಾನವು ಸೂಚಿಸಬಹುದು. ನಿಮ್ಮ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ಅನುಸರಿಸಬೇಕಾದ ವಿಧಾನವನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಿ.
ಮಲದ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳನ್ನು ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳಿಂದ ಬೇರ್ಪಡಿಸುವ ರೀತಿಯ ಅಭ್ಯಾಸಗಳಿಗೆ, ಈ ಎರಡರಲ್ಲಿ MacConkey ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚು ಉಪಯುಕ್ತವಾಗಿದೆ. Salmonella ಅಥವಾ Shigella ಗಾಗಿ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಮಲ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ MacConkey ಒಂದರ ಮೇಲೆಯೇ ಅವಲಂಬಿಸದೆ XLD ಅಥವಾ Hektoen enteric ಹೀಗೆ ಇನ್ನಷ್ಟು ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ಎಂಟೆರಿಕ್ ಮಾಧ್ಯಮಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಕಾರ್ಯಪ್ರವಾಹವನ್ನು ಅನುಕರಿಸುವ ಮೂತ್ರ-ಶೈಲಿಯ ಬೋಧನೆಗಾಗಿ MacConkey ಅನ್ನು blood agar ಜೊತೆಗೆ ಬಳಸಿ. MacConkey ಆರಂಭಿಕ Gram-ಋಣಾತ್ಮಕ ವಿಂಗಡಣೆಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ blood agar MacConkey ತಡೆಯುವ ಜೀವಿಗಳನ್ನು ಮರುಪಡೆಯುತ್ತದೆ. ಮೂತ್ರ ಕಲ್ಚರ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ವಿವರಣೆಗಳಲ್ಲಿ ಈ ಜೋಡಣೆ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿದೆ.
ಶುದ್ಧ ತತ್ವಬೋಧನೆಗಾಗಿ ಎರಡನ್ನೂ ಬಳಸಿ. ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ತೀವ್ರತೆ ಮುಖ್ಯವೆಂದು ಮತ್ತು ಒಂದು ಅಣುವೇ ಎರಡು ಪಾತ್ರಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಬಹುದೆಂದು EMB ಕಲಿಸುತ್ತದೆ. MacConkey ಮೋಡ್ಯೂಲರ್ ವಿನ್ಯಾಸವನ್ನು ಕಲಿಸುತ್ತದೆ: ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ಘಟಕ, ಸಬ್‌ಸ್ಟ್ರೇಟ್ ಮತ್ತು ಸೂಚಕವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿಡುವುದು. ತಿಳಿದಿರುವ E. coli, ತಿಳಿದಿರುವ Klebsiella aerogenes ಮತ್ತು ತಿಳಿದಿರುವ Salmonella ಅನ್ನು ಎರಡೂ ಮಾಧ್ಯಮಗಳಲ್ಲಿ ಪಕ್ಕಪಕ್ಕವಾಗಿ ಸ್ಟ್ರೀಕ್ ಮಾಡುವ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳು ಈ ಎರಡು ತರ್ಕಗಳನ್ನು ಮತ್ತೆ ಗೊಂದಲಪಡಿಸುವುದು ಅಪರೂಪ.
ಪ್ರತೀ ಅವಧಿಯಲ್ಲೂ ಮರುಕಳಿಸುವ ಓದುವ ತಪ್ಪುಗಳು
ಅತ್ಯಂತ ಸಾಮಾನ್ಯ ತಪ್ಪು ಎಂದರೆ ಕೇವಲ ಬಣ್ಣದ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಗುರುತಿಸುವುದು. MacConkey ಯಲ್ಲಿನ ಗುಲಾಬಿ ಬಣ್ಣವು E. coli, Klebsiella, Enterobacter ಅಥವಾ ಮತ್ತೊಂದು ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ಆಗಿರಬಹುದು. ಬಣ್ಣರಹಿತವು Salmonella, Shigella, Proteus, Pseudomonas ಅಥವಾ ಮತ್ತೊಂದು ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ಆಗಿರಬಹುದು. ಬಣ್ಣವು Gram stain, oxidase, ಜೈವ ರಾಸಾಯನಿಕ panels ಅಥವಾ ಉಪಕರಣ ಆಧಾರಿತ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಹೀಗೆ ದೃಢೀಕರಣ ಕಾರ್ಯಗಳಿಗೆ ದಾರಿ ತೋರಿಸುವ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ phenotype ಮಾತ್ರ; ಅದು species ಹೆಸರು ಅಲ್ಲ.
ಎರಡನೇ ತಪ್ಪು ಎಂದರೆ ಹೊಳಪು ಕಾಣಿಸದಿರುವುದನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ಅರ್ಥೈಸುವುದು. ಕೆಲವು ನಿಜವಾದ E. coli ಕಾಲನಿಗಳು, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಕಾಲನಿಗಳು, EMB ಯಲ್ಲಿ ಬಹಳ ಕಡಿಮೆ ಅಥವಾ ಯಾವುದೇ ಲೋಹೀಯ ಹೊಳಪು ತೋರಿಸದಿರಬಹುದು. ಹೊಳಪು ಇಲ್ಲದಿರುವುದು E. coli ಅನ್ನು ಹೊರತುಪಡಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಹೊಳಪು ಇರುವುದೂ ಅದನ್ನು ಸಾಬೀತುಪಡಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಹೊಳಪನ್ನು ಪೂರ್ವಾನುಮಾನಾತ್ಮಕ ಸುಳಿವಾಗಿ ಮಾತ್ರ ಪರಿಗಣಿಸಿ.
ಮೂರನೇ ತಪ್ಪು ಎಂದರೆ ವಿಭಿನ್ನ ವಯಸ್ಸಿನ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ಹೋಲಿಸುವುದು. ವಿಳಂಬಿತ lactose ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳು ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಇಂಕ್ಯುಬೇಶನ್ ನಂತರ MacConkey ಯಲ್ಲಿ ಗುಲಾಬಿಯಾಗಬಹುದು; ಇದರಿಂದ ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ಮತ್ತು ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ನಡುವಿನ ಸ್ಪಷ್ಟ ವಿಭಜನೆ ಮಸುಕಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ನಿಗದಿಪಡಿಸಿದ ಸಮಯದಲ್ಲೇ ಓದಿ ಮತ್ತು ಫಲಿತಾಂಶದೊಂದಿಗೆ ಇಂಕ್ಯುಬೇಶನ್ ಸಮಯವನ್ನು ದಾಖಲಿಸಿ.
ನಾಲ್ಕನೇ ತಪ್ಪು ಎಂದರೆ ಮಿಶ್ರ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಒಂದೇ ಜೀವಿಯಾಗಿ ಓದುವುದು. ಬಣ್ಣರಹಿತ ಕಾಲನಿಯ ಪಕ್ಕದಲ್ಲಿರುವ ಗುಲಾಬಿ ಕಾಲನಿ ಎರಡು phenotype ಗಳನ್ನು ದಾಖಲಿಸುತ್ತದೆ, ಮಧ್ಯಂತರ ಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಅಲ್ಲ. ಚೆನ್ನಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕಗೊಂಡ ಕಾಲನಿಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಯೊಂದು morphotype ಅನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಕಾರ್ಯಗತಗೊಳಿಸಿ. ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ texture ಇದೇ ರೀತಿಯ ಮತ್ತೊಂದು ಬಲೆಯಾಗಿದೆ: Klebsiella ಮತ್ತು Enterobacter ಎರಡೂ ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ ಆಗಿ ಕಾಣಬಹುದು, ಆದ್ದರಿಂದ capsule ಒಂದರ ಆಧಾರದಲ್ಲಿ ಹೆಸರು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಹಿಂದೆ Enterobacter aerogenes ಎಂದು ಬೋಧಿಸಲಾಗುತ್ತಿದ್ದ ಜೀವಿಯನ್ನು ಈಗ Klebsiella aerogenes ಎಂದು ವರ್ಗೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆ; ಹಳೆಯ ಚಾರ್ಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಹೊಸ ಲೇಬಲ್‌ಗಳು ಏಕೆ ಭಿನ್ನವಾಗಿ ಕಾಣುತ್ತವೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಇದು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ.
ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಮತ್ತು ಅಂತಿಮ ನಿಯಮ
ಪ್ರತಿ ಅವಧಿಯಲ್ಲೂ ಛಾಯಾಚಿತ್ರಿತ ಅಥವಾ ತಾಜಾ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳನ್ನು ನಡೆಸಿ: ತೀವ್ರ ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಾಗಿ E. coli, ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಹೊಳಪಿಲ್ಲದ ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್‌ಗಾಗಿ Klebsiella aerogenes, ಬಣ್ಣರಹಿತ ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಾಗಿ Salmonella strain ಮತ್ತು ನಿಮ್ಮ ನಿಖರ ಉತ್ಪನ್ನದಲ್ಲಿ Gram-ಧನಾತ್ಮಕ ತಡೆಗಟ್ಟುವಿಕೆಯನ್ನು ದೃಢೀಕರಿಸಲು Staphylococcus aureus. strain ಸಂಖ್ಯೆಗಳು ಮತ್ತು ಅಂಗೀಕಾರ ಮಾನದಂಡಗಳನ್ನು ತಯಾರಕರ ಸೂಚನಾ ಪತ್ರಿಕೆಗೆ ಹೊಂದಿಸಿ, ಏಕೆಂದರೆ bile, crystal violet ಮತ್ತು ಡೈ ಪ್ರಮಾಣದೊಂದಿಗೆ selectivity ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಬೆಂಚ್‌ನಲ್ಲಿ ಒಂದು ವಾಕ್ಯವನ್ನು ನೆನಪಿಡಿ. EMB ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ಮತ್ತು ಸೂಚಿಸುವ ಎರಡೂ ಕೆಲಸ ಮಾಡುವ ಡೈಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ; ಇದರಿಂದ E. coli ಗೆ ಸ್ಪಷ್ಟವಾದ ಸಂಕೇತ ಸಿಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಓದುವಿಕೆ ಸ್ವಲ್ಪ ಸೂಕ್ಷ್ಮವಾಗುತ್ತದೆ. MacConkey ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ಕೆಲಸವನ್ನು ಸೂಚಿಸುವ ಕೆಲಸದಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುತ್ತದೆ; ಇದರಿಂದ ಸರಳ ಗುಲಾಬಿ ಮತ್ತು ತೆಳು ವಿಂಗಡಣೆ ಸಿಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ವಿವರ ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರಶ್ನೆಯ ತತ್ವಕ್ಕೆ ಹೊಂದುವ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ, ಸೂಕ್ತ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಿಂದ ಬಣ್ಣವನ್ನು ದೃಢೀಕರಿಸಿ; ಆಗ ಎರಡು ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು ಪರಸ್ಪರ ಸ್ಪರ್ಧಿಸುವುದನ್ನು ನಿಲ್ಲಿಸಿ ಪರಸ್ಪರ ಪೂರಕವಾಗುತ್ತವೆ.
ಮೇಲಿನ ಚಿತ್ರವು ವಿವರಣಾತ್ಮಕವಾಗಿದೆ. ನಿರೀಕ್ಷಿಸಬೇಕಾದ ದೃಶ್ಯತರ್ಕವನ್ನು ಅದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ: EMB ಯಲ್ಲಿ ಗಾಢ ಹೊಳಪಿನ ಕಾಲನಿಗಳು, ಗುಲಾಬಿ ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ ಪ್ರಕಾರಗಳು ಮತ್ತು ತೆಳು ಪ್ರಕಾರಗಳು; MacConkey ಯಲ್ಲಿ ಗುಲಾಬಿ ಮತ್ತು ತೆಳು ಪ್ರಕಾರಗಳು. ಮಾದರಿಯನ್ನು ಕಲಿಯಲು ಇದನ್ನು ಬಳಸಿ; ನಂತರ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ನಿರ್ಧಾರವನ್ನೂ ಛಾಯಾಚಿತ್ರಿತ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಮತ್ತು ನಿಮ್ಮ ಬೆಂಚ್‌ನಲ್ಲಿರುವ ನಿಖರ ಮಾಧ್ಯಮದ ಉತ್ಪನ್ನ ಸೂಚನಾ ಪತ್ರಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ದೃಢೀಕರಿಸಿ.
MacConkey: ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಕೆಲಸಗಳು, ಸರಳವಾದ ದೃಶ್ಯ ನಿಯಮ
MacConkey ತತ್ವವು ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಕೆಲಸವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಘಟಕಕ್ಕೆ ನಿಯೋಜಿಸುತ್ತದೆ. ASM MacConkey agar ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ ಅದೇ ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ಮತ್ತು ವಿಭೇದಕ ಚೌಕಟ್ಟನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು MacConkey agar ಗಾಗಿ FDA BAM ವಿಧಾನ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುವ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಪಟ್ಟಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ: peptones, lactose, bile salts, salt, neutral red, crystal violet ಮತ್ತು agar. Bile salts ಜೊತೆಗೆ crystal violet Gram-ಧನಾತ್ಮಕ ಜೀವಿಗಳ ವಿರುದ್ಧ ಆಯ್ಕೆಮಾಡುತ್ತವೆ. Lactose ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ಸಬ್‌ಸ್ಟ್ರೇಟ್ ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. Neutral red pH ಸೂಚಕವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಿ, ಆಮ್ಲ ರೂಪುಗೊಳ್ಳುವ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣಕ್ಕೆ ತಿರುಗುತ್ತದೆ; ತೀವ್ರ ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳ ಸುತ್ತ ಕೆಲವೊಮ್ಮೆ ಅವಕ್ಷೇಪಿತ bile ಕಾಣಿಸಬಹುದು.
ಓದುವ ನಿಯಮವನ್ನು ಉದ್ದೇಶಪೂರ್ವಕವಾಗಿ ಸರಳವಾಗಿರಿಸಲಾಗಿದೆ: ಗುಲಾಬಿ ಎಂದರೆ lactose ಫರ್ಮೆಂಟರ್, ಬಣ್ಣರಹಿತ ಅಥವಾ ತೆಳು ಎಂದರೆ ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್. E. coli ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ಕೆಂಪಾಗಿ ಕಾಣಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಆಗಾಗ bile ಅವಕ್ಷೇಪದ ಹ್ಯಾಲೊ ಇರುತ್ತದೆ. Klebsiella ಮತ್ತು Enterobacter ಗುಲಾಬಿಯಾಗಿ ಕಾಣುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಅವುಗಳ capsules ಕಾರಣದಿಂದ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ ಆಗಿರುತ್ತವೆ. Salmonella, Shigella, Proteus ಮತ್ತು ಅನೇಕ ಇತರ Gram-ಋಣಾತ್ಮಕ rods ಬಣ್ಣರಹಿತವಾಗಿ ಕಾಣುತ್ತವೆ. ಬೋಧನಾ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತೊಂದು ಪ್ರಯೋಜನವೂ ಇದೆ: bile salts ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ Proteus swarming ಅನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತವೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಆಯ್ಕೆಮಾಡದ ಮಾಧ್ಯಮಗಳಿಗಿಂತ MacConkey ಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಕಾಲನಿಗಳನ್ನು ಪಡೆಯುವುದು ಸುಲಭ. ಆದರೆ ಈ ತಡೆ ಸಂಪೂರ್ಣವಲ್ಲ, ಮತ್ತು swarming ನಿಯಂತ್ರಣವೇ ಮುಖ್ಯ ಆದ್ಯತೆಯಾಗಿರುವ ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ಉಪ್ಪಿಲ್ಲದ ಪರ್ಯಾಯಗಳೂ ಇವೆ.
ಡೈಗಳು ಈ ರೀತಿಯಾಗಿ ವರ್ತಿಸುವ ಅಣುಮಟ್ಟದ ಕಾರಣ charge ಮತ್ತು structure ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ. Methylene blue ಒಂದು ಕ್ಯಾಟಯಾನಿಕ್ phenothiazine dye ಆಗಿದ್ದು, ಅದರ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು ಆಮ್ಲೀಯ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಮೇಲ್ಮೈಗಳತ್ತ ಅದರ ಆಕರ್ಷಣೆಯನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತವೆ; ಇದೇ ಆಕರ್ಷಣೆ EMB ಯ ಆಮ್ಲೀಯ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಅದು ಅವಕ್ಷೇಪಗೊಳ್ಳುವಾಗಲೂ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ.
ಒಂದು ನೋಟದಲ್ಲಿ ಹೋಲಿಕೆ
| ಲಕ್ಷಣ | EMB agar | MacConkey agar |
|---|---|---|
| ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ವ್ಯವಸ್ಥೆ | Eosin Y ಜೊತೆಗೆ methylene blue | Bile salts ಜೊತೆಗೆ crystal violet |
| ವಿಭೇದಕ ಸಬ್‌ಸ್ಟ್ರೇಟ್ | Lactose (Levine ನಲ್ಲಿ sucrose ಇಲ್ಲ) | Lactose |
| ಸೂಚಕ | ಡೈ ಅವಕ್ಷೇಪಣೆಯೇ ಸೂಚಕ (ಗಾಢ ಕಾಲನಿಗಳು, ಹಸಿರು ಹೊಳಪು) | Neutral red (ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ಕೆಂಪು ಆಮ್ಲೀಯ ಕಾಲನಿಗಳು) |
| ತೀವ್ರ E. coli ಸಂಕೇತ | ಗಾಢ ನೀಲಿ-ಕಪ್ಪು ಕಾಲನಿ, ಆಗಾಗ ಲೋಹೀಯ ಹಸಿರು ಹೊಳಪು | ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ಕೆಂಪು ಕಾಲನಿ, ಆಗಾಗ bile ಅವಕ್ಷೇಪ |
| Klebsiella ಮತ್ತು Enterobacter | ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ನೇರಳೆ, ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್, ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಹೊಳಪು ಇಲ್ಲ | ಗುಲಾಬಿಯಿಂದ ಕೆಂಪು, ಆಗಾಗ ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ |
| Salmonella, Shigella, Proteus | ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಣ್ಣರಹಿತ ಅಥವಾ ಪಾರದರ್ಶಕ | ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಣ್ಣರಹಿತ ಅಥವಾ ತೆಳು |
| Gram-ಧನಾತ್ಮಕ ಜೀವಿಗಳು | ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ತಡೆಯಲ್ಪಡುತ್ತವೆ | crystal violet ಸಂಯೋಜನೆಗಳಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ತಡೆಯಲ್ಪಡುತ್ತವೆ |
| ಬೋಧನೆಯಲ್ಲಿ ಮುಖ್ಯ ಪ್ರಯೋಜನ | ತೀವ್ರ ಮತ್ತು ದುರ್ಬಲ ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸ ಗೋಚರವಾಗುತ್ತದೆ | ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ಮತ್ತು ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ನಡುವಿನ ಅತ್ಯಂತ ಸರಳ ವಿಂಗಡಣೆ |
ಪಟ್ಟಿಯನ್ನು ನಿರ್ಧಾರ ಕ್ರಮವಾಗಿ ಓದಿ. ಅಭ್ಯಾಸದಲ್ಲಿ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳು ಒಂದು ಸ್ಪಷ್ಟ ಅಂತಿಮ ಸ್ಥಿತಿಯೊಂದಿಗೆ ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ತೀವ್ರತೆಯ ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ನೋಡಬೇಕಿದ್ದರೆ, EMB ಅದನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಜೈವ ರಾಸಾಯನಿಕ ದೃಢೀಕರಣಕ್ಕೂ ಮೊದಲು ತ್ವರಿತ ದ್ವಿಮುಖ ವಿಂಗಡಣೆ ಬೇಕಿದ್ದರೆ, MacConkey ಅದನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ.
ಯಾವ ಮಾದರಿಗೆ ಯಾವ ಮಾಧ್ಯಮ
ಪೂರ್ವಾನುಮಾನಾತ್ಮಕ fecal coliform ಅಥವಾ E. coli ಗುರುತಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಉದ್ದೇಶಿಸಿದ ನೀರಿನ ಅಭ್ಯಾಸಗಳಲ್ಲಿ, EMB ಆಕರ್ಷಕವಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಅದರ ಹೊಳಪು ದೃಶ್ಯವಾಗಿ ವಿಶಿಷ್ಟವಾಗಿರುತ್ತದೆ. MacConkey ಕೂಡ ಎಂಟೆರಿಕ್ Gram-ಋಣಾತ್ಮಕ ಜೀವಿಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನೀರಿನ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಐತಿಹಾಸಿಕ ಬಳಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಆದರೆ ಯಾವುದೇ ಪ್ಲೇಟ್ ನಿಯಂತ್ರಣಾತ್ಮಕ ನೀರಿನ ವಿಧಾನಕ್ಕೆ ಪರ್ಯಾಯವಲ್ಲ; ಪರೀಕ್ಷೆಯ ಪ್ರಕಾರ modified mTEC ಅಥವಾ MI ಹೀಗೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮಾಧ್ಯಮಗಳನ್ನು ವಿಧಾನವು ಸೂಚಿಸಬಹುದು. ನಿಮ್ಮ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ಅನುಸರಿಸಬೇಕಾದ ವಿಧಾನವನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಿ.
ಮಲದ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳನ್ನು ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳಿಂದ ಬೇರ್ಪಡಿಸುವ ರೀತಿಯ ಅಭ್ಯಾಸಗಳಿಗೆ, ಈ ಎರಡರಲ್ಲಿ MacConkey ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚು ಉಪಯುಕ್ತವಾಗಿದೆ. Salmonella ಅಥವಾ Shigella ಗಾಗಿ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಮಲ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ MacConkey ಒಂದರ ಮೇಲೆಯೇ ಅವಲಂಬಿಸದೆ XLD ಅಥವಾ Hektoen enteric ಹೀಗೆ ಇನ್ನಷ್ಟು ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ಎಂಟೆರಿಕ್ ಮಾಧ್ಯಮಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಕಾರ್ಯಪ್ರವಾಹವನ್ನು ಅನುಕರಿಸುವ ಮೂತ್ರ-ಶೈಲಿಯ ಬೋಧನೆಗಾಗಿ MacConkey ಅನ್ನು blood agar ಜೊತೆಗೆ ಬಳಸಿ. MacConkey ಆರಂಭಿಕ Gram-ಋಣಾತ್ಮಕ ವಿಂಗಡಣೆಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ blood agar MacConkey ತಡೆಯುವ ಜೀವಿಗಳನ್ನು ಮರುಪಡೆಯುತ್ತದೆ. ಮೂತ್ರ ಕಲ್ಚರ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ವಿವರಣೆಗಳಲ್ಲಿ ಈ ಜೋಡಣೆ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿದೆ.
ಶುದ್ಧ ತತ್ವಬೋಧನೆಗಾಗಿ ಎರಡನ್ನೂ ಬಳಸಿ. ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ತೀವ್ರತೆ ಮುಖ್ಯವೆಂದು ಮತ್ತು ಒಂದು ಅಣುವೇ ಎರಡು ಪಾತ್ರಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಬಹುದೆಂದು EMB ಕಲಿಸುತ್ತದೆ. MacConkey ಮೋಡ್ಯೂಲರ್ ವಿನ್ಯಾಸವನ್ನು ಕಲಿಸುತ್ತದೆ: ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ಘಟಕ, ಸಬ್‌ಸ್ಟ್ರೇಟ್ ಮತ್ತು ಸೂಚಕವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿಡುವುದು. ತಿಳಿದಿರುವ E. coli, ತಿಳಿದಿರುವ Klebsiella aerogenes ಮತ್ತು ತಿಳಿದಿರುವ Salmonella ಅನ್ನು ಎರಡೂ ಮಾಧ್ಯಮಗಳಲ್ಲಿ ಪಕ್ಕಪಕ್ಕವಾಗಿ ಸ್ಟ್ರೀಕ್ ಮಾಡುವ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳು ಈ ಎರಡು ತರ್ಕಗಳನ್ನು ಮತ್ತೆ ಗೊಂದಲಪಡಿಸುವುದು ಅಪರೂಪ.
ಪ್ರತೀ ಅವಧಿಯಲ್ಲೂ ಮರುಕಳಿಸುವ ಓದುವ ತಪ್ಪುಗಳು
ಅತ್ಯಂತ ಸಾಮಾನ್ಯ ತಪ್ಪು ಎಂದರೆ ಕೇವಲ ಬಣ್ಣದ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಗುರುತಿಸುವುದು. MacConkey ಯಲ್ಲಿನ ಗುಲಾಬಿ ಬಣ್ಣವು E. coli, Klebsiella, Enterobacter ಅಥವಾ ಮತ್ತೊಂದು ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ಆಗಿರಬಹುದು. ಬಣ್ಣರಹಿತವು Salmonella, Shigella, Proteus, Pseudomonas ಅಥವಾ ಮತ್ತೊಂದು ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ಆಗಿರಬಹುದು. ಬಣ್ಣವು Gram stain, oxidase, ಜೈವ ರಾಸಾಯನಿಕ panels ಅಥವಾ ಉಪಕರಣ ಆಧಾರಿತ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಹೀಗೆ ದೃಢೀಕರಣ ಕಾರ್ಯಗಳಿಗೆ ದಾರಿ ತೋರಿಸುವ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ phenotype ಮಾತ್ರ; ಅದು species ಹೆಸರು ಅಲ್ಲ.
ಎರಡನೇ ತಪ್ಪು ಎಂದರೆ ಹೊಳಪು ಕಾಣಿಸದಿರುವುದನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ಅರ್ಥೈಸುವುದು. ಕೆಲವು ನಿಜವಾದ E. coli ಕಾಲನಿಗಳು, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಕಾಲನಿಗಳು, EMB ಯಲ್ಲಿ ಬಹಳ ಕಡಿಮೆ ಅಥವಾ ಯಾವುದೇ ಲೋಹೀಯ ಹೊಳಪು ತೋರಿಸದಿರಬಹುದು. ಹೊಳಪು ಇಲ್ಲದಿರುವುದು E. coli ಅನ್ನು ಹೊರತುಪಡಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಹೊಳಪು ಇರುವುದೂ ಅದನ್ನು ಸಾಬೀತುಪಡಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಹೊಳಪನ್ನು ಪೂರ್ವಾನುಮಾನಾತ್ಮಕ ಸುಳಿವಾಗಿ ಮಾತ್ರ ಪರಿಗಣಿಸಿ.
ಮೂರನೇ ತಪ್ಪು ಎಂದರೆ ವಿಭಿನ್ನ ವಯಸ್ಸಿನ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ಹೋಲಿಸುವುದು. ವಿಳಂಬಿತ lactose ಫರ್ಮೆಂಟರ್‌ಗಳು ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಇಂಕ್ಯುಬೇಶನ್ ನಂತರ MacConkey ಯಲ್ಲಿ ಗುಲಾಬಿಯಾಗಬಹುದು; ಇದರಿಂದ ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ಮತ್ತು ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ನಡುವಿನ ಸ್ಪಷ್ಟ ವಿಭಜನೆ ಮಸುಕಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ನಿಗದಿಪಡಿಸಿದ ಸಮಯದಲ್ಲೇ ಓದಿ ಮತ್ತು ಫಲಿತಾಂಶದೊಂದಿಗೆ ಇಂಕ್ಯುಬೇಶನ್ ಸಮಯವನ್ನು ದಾಖಲಿಸಿ.
ನಾಲ್ಕನೇ ತಪ್ಪು ಎಂದರೆ ಮಿಶ್ರ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಒಂದೇ ಜೀವಿಯಾಗಿ ಓದುವುದು. ಬಣ್ಣರಹಿತ ಕಾಲನಿಯ ಪಕ್ಕದಲ್ಲಿರುವ ಗುಲಾಬಿ ಕಾಲನಿ ಎರಡು phenotype ಗಳನ್ನು ದಾಖಲಿಸುತ್ತದೆ, ಮಧ್ಯಂತರ ಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಅಲ್ಲ. ಚೆನ್ನಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕಗೊಂಡ ಕಾಲನಿಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಯೊಂದು morphotype ಅನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಕಾರ್ಯಗತಗೊಳಿಸಿ. ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ texture ಇದೇ ರೀತಿಯ ಮತ್ತೊಂದು ಬಲೆಯಾಗಿದೆ: Klebsiella ಮತ್ತು Enterobacter ಎರಡೂ ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ ಆಗಿ ಕಾಣಬಹುದು, ಆದ್ದರಿಂದ capsule ಒಂದರ ಆಧಾರದಲ್ಲಿ ಹೆಸರು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಹಿಂದೆ Enterobacter aerogenes ಎಂದು ಬೋಧಿಸಲಾಗುತ್ತಿದ್ದ ಜೀವಿಯನ್ನು ಈಗ Klebsiella aerogenes ಎಂದು ವರ್ಗೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆ; ಹಳೆಯ ಚಾರ್ಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಹೊಸ ಲೇಬಲ್‌ಗಳು ಏಕೆ ಭಿನ್ನವಾಗಿ ಕಾಣುತ್ತವೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಇದು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ.
ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಮತ್ತು ಅಂತಿಮ ನಿಯಮ
ಪ್ರತಿ ಅವಧಿಯಲ್ಲೂ ಛಾಯಾಚಿತ್ರಿತ ಅಥವಾ ತಾಜಾ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳನ್ನು ನಡೆಸಿ: ತೀವ್ರ ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಾಗಿ E. coli, ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಹೊಳಪಿಲ್ಲದ ಮ್ಯೂಕಾಯ್ಡ್ ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್‌ಗಾಗಿ Klebsiella aerogenes, ಬಣ್ಣರಹಿತ ನಾನ್‌ಫರ್ಮೆಂಟರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಾಗಿ Salmonella strain ಮತ್ತು ನಿಮ್ಮ ನಿಖರ ಉತ್ಪನ್ನದಲ್ಲಿ Gram-ಧನಾತ್ಮಕ ತಡೆಗಟ್ಟುವಿಕೆಯನ್ನು ದೃಢೀಕರಿಸಲು Staphylococcus aureus. strain ಸಂಖ್ಯೆಗಳು ಮತ್ತು ಅಂಗೀಕಾರ ಮಾನದಂಡಗಳನ್ನು ತಯಾರಕರ ಸೂಚನಾ ಪತ್ರಿಕೆಗೆ ಹೊಂದಿಸಿ, ಏಕೆಂದರೆ bile, crystal violet ಮತ್ತು ಡೈ ಪ್ರಮಾಣದೊಂದಿಗೆ selectivity ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಬೆಂಚ್‌ನಲ್ಲಿ ಒಂದು ವಾಕ್ಯವನ್ನು ನೆನಪಿಡಿ. EMB ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ಮತ್ತು ಸೂಚಿಸುವ ಎರಡೂ ಕೆಲಸ ಮಾಡುವ ಡೈಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ; ಇದರಿಂದ E. coli ಗೆ ಸ್ಪಷ್ಟವಾದ ಸಂಕೇತ ಸಿಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಓದುವಿಕೆ ಸ್ವಲ್ಪ ಸೂಕ್ಷ್ಮವಾಗುತ್ತದೆ. MacConkey ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವ ಕೆಲಸವನ್ನು ಸೂಚಿಸುವ ಕೆಲಸದಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುತ್ತದೆ; ಇದರಿಂದ ಸರಳ ಗುಲಾಬಿ ಮತ್ತು ತೆಳು ವಿಂಗಡಣೆ ಸಿಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಫರ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ವಿವರ ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರಶ್ನೆಯ ತತ್ವಕ್ಕೆ ಹೊಂದುವ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ, ಸೂಕ್ತ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಿಂದ ಬಣ್ಣವನ್ನು ದೃಢೀಕರಿಸಿ; ಆಗ ಎರಡು ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು ಪರಸ್ಪರ ಸ್ಪರ್ಧಿಸುವುದನ್ನು ನಿಲ್ಲಿಸಿ ಪರಸ್ಪರ ಪೂರಕವಾಗುತ್ತವೆ.