Agar EMB i gcoinne agar MacConkey: meáin a roghnú agus a léirmhíniú

Cuireann mac léinn an sampla uisce céanna de stríoca ar dhá phláta. Ar cheann amháin, tagann coilíneachtaí dorcha le lonracht mhiotalach ghlas chun cinn. Ar an gceann eile, tagann coilíneachtaí gealbándearga le hál doiléir chun cinn. Ionaclíodh an dá phláta ón bhfeadán céanna, goradh iad taobh le taobh, agus léadh iad ag an uair chéanna. Fiafraíonn an mac léinn cén pláta atá ceart.

Tá an dá phláta ceart. Freagraíonn siad ceisteanna éagsúla. Tagann an mearbhall as caitheamh leis an dá mheán mar scagthástálacha inmhalartaithe do bhaictéir stéige. Tá cuspóir coiteann acu, is é sin orgánaigh eintéaracha Gram-dhiúltacha a roghnú agus coiptheoirí lachtóis a dheighilt ó neamhchoiptheoirí, ach cuireann siad an cuspóir sin i bhfeidhm le ceimic éagsúil agus le loighic amhairc éagsúil. Nuair a thuigtear an dá bhunchoincheap, éiríonn roghnú plátaí agus léamh coilíneachtaí ina ngnáthobair.

An freagra gairid

Úsáideann agar EMB dhá ruaim, eosin Y agus gorm meitiléine, a dhéanann dhá obair: cuireann siad fás Gram-dhearfach faoi chois agus deascann siad timpeall ar tháirgeoirí láidre aigéid chun coilíneachtaí dorcha a chruthú, agus go clasaiceach bíonn lonracht mhiotalach ghlas ar Escherichia coli. Scarann agar MacConkey na feidhmeanna: cuireann salainn domlais móide violet criostail Gram-dhearfaigh faoi chois, cothaíonn lachtós an choipeadh, agus léiríonn dearg neodrach aigéad trí choilíneachtaí bándearga nó dearga. Más é an tasc léiriú toimhdeach beoga ar E. coli, tá áit tuillte ag EMB. Más é an tasc coiptheoirí lachtóis a roinnt go soiléir ina mbándearg agus neamhchoiptheoirí ina ndath gan dath, go háirithe i sreafaí oibre stóil nó fuail, is gnách gur fusa MacConkey a léamh. Ní aithníonn ceachtar pláta orgánach de réir datha amháin.

EMB: ruaimeanna a roghnaíonn agus a thugann comhartha ag an am céanna

Cuireann coincheap EMB an roghnú agus an tásc sna móilíní céanna. Déanann prótacal agar eosin agus gorm meitiléine ASM cur síos ar EMB mar mheán roghnaitheach agus difreálach araon, agus cuireann an péire ruaimeanna cosc ar go leor orgánach Gram-dhearfach agus cuireann coipeadh lachtóis ionsú agus deascadh na ruaimeanna chun cinn. Tá peaptón, lachtós, fosfáit, eosin Y, gorm meitiléine agus agar i bhfoirmliú caighdeánach Levine, mar atá liostaithe i modh FDA BAM d'agar Levine EMB. Tabhair faoi deara gur cuireadh siúcrós in éineacht le lachtós i roinnt oidis EMB níos sine, ach go bhfuil lachtós gan siúcrós in Levine EMB, mar sin taifead cén foirmliú atá i stoc ag do shaotharlann.

Is éard atá i gceist le EMB a léamh ná iompar na ruaimeanna a léamh. Táirgeann coipeadh bríomhar lachtóis a dhóthain aigéid chun deascadh trom ruaime a spreagadh, rud a thugann lárionaid dhorcha ghormdhubha do E. coli agus, sa chás clasaiceach, lonracht mhiotalach ghlas i solas frithchaite. Is gnách go bhfásann coiptheoirí níos laige amhail Enterobacter agus Klebsiella mar choilíneachtaí múcasacha bándearga go corcra gan an lonracht sin. Is iondúil go bhfásann neamhchoiptheoirí amhail Salmonella, Shigella agus Proteus mar choilíneachtaí gan dath nó tréshoilseacha toisc nach dtáirgeann siad an borradh aigéid a dheascann na ruaimeanna. Is gnách Gram-dhearfaigh a chur faoi chois, cé gur ceist céime é an cur faoi chois agus go n-athraíonn sé de réir tréithchineáil agus táirge. Baineann ceimic iomlán ullmhú na ruaimeanna, lena n-áirítear an fáth a n-iompraíonn gorm meitiléine mar ruaim chatánach ar an gcéad dul síos, le plé ar leith ar fhoirmliúcháin ruaime, agus tá comhthéacs ginearálta na micreascópachta in atlas de mhodhanna dathúcháin. Díríonn an t-alt seo ar roghnú agus léamh plátaí.

Is léiriú í an fhíor thuas. Taispeánann sí an loighic amhairc atá le súil léi: coilíneachtaí dorcha lonracha móide cineálacha múcasacha bándearga móide cineálacha geala ar EMB, i gcomparáid le cineálacha bándearga i gcoinne cineálacha geala ar MacConkey. Úsáid í chun an patrún a fhoghlaim, ansin deimhnigh gach léamh i gcoinne rialuithe grianghraftha agus bhileog an táirge don mheán cruinn ar do bhinse.

MacConkey: feidhmeanna scartha, riail amhairc níos simplí

Sannann coincheap MacConkey gach feidhm do chomhábhar ar leith. Cuireann prótacal agar MacConkey ASM an frámaíocht roghnaitheach agus difreálach chéanna i láthair, agus liostaíonn modh FDA BAM d'agar MacConkey na comhpháirteanna oibre: peaptóin, lachtós, salainn domlais, salann, dearg neodrach, violet criostail agus agar. Roghnaíonn salainn domlais móide violet criostail in aghaidh Gram-dhearfach. Soláthraíonn lachtós an tsubstráit choipthe. Feidhmíonn dearg neodrach mar tháscaire pH, agus casann sé bándearg go dearg san áit a bhfoirmítear aigéad, uaireanta le domlas deasctha timpeall ar choiptheoirí láidre.

Tá an riail léitheoireachta simplí d'aon ghnó: ciallaíonn bándearg coiptheoir lachtóis; ciallaíonn gan dath nó geal neamhchoiptheoir. Bíonn cuma bhándearg go dearg ar E. coli, go minic le hál de dheascadh domlais. Bíonn Klebsiella agus Enterobacter bándearg agus go minic múcasach mar gheall ar a gcapsúil. Bíonn Salmonella, Shigella, Proteus agus go leor slat Gram-dhiúltach eile gan dath. Tá buntáiste eile tábhachtach i saotharlanna teagaisc: laghdaíonn salainn domlais scaipfhás Proteus de ghnáth, mar sin is fusa coilíneachtaí leithlisithe a fháil ar MacConkey ná ar mheáin neamhroghnaitheacha, cé nach bhfuil an cur faoi chois iomlán agus go bhfuil roghanna eile gan salann ann nuair is é rialú scaipfháis an tosaíocht.

Tagann an chúis mhóilíneach a n-iompraíonn na ruaimeanna ar an mbealach seo ó lucht agus ó struchtúr. Is ruaim chatánach feiniteitiasíneach é gorm meitiléine agus míníonn a struchtúr agus a airíonna a chleamhnas le dromchlaí baictéaracha aigéadacha, an cleamhnas céanna a bhíonn i bhfeidhm nuair a dheascann sé i gcriosanna aigéadacha ar EMB.

Comparáid sracfhéachaint

Léigh an tábla mar nós imeachta cinnteoireachta. Nuair is gá don chleachtadh ligean do mhic léinn grádán de neart coipthe a fheiceáil le críochphointe drámatúil amháin, taispeánann EMB é. Nuair is gá don chleachtadh deighilt thapa dhénártha roimh dheimhniú bithcheimiceach, taispeánann MacConkey í.

Cén meán do cén sampla

I gcleachtaí uisce atá dírithe ar aithint toimhdeach colafhoirmeach faecach nó E. coli, tá EMB tarraingteach toisc go bhfuil an lonracht sainiúil ó thaobh amhairc de. Láimhseálann MacConkey Gram-dhiúltaigh eintéaracha freisin agus úsáideadh go stairiúil é le haghaidh uisce, ach ní ghlacann ceachtar pláta áit modha rialála uisce, a bhféadfadh meáin amhail modified mTEC nó MI a bheith sonraithe ann ag brath ar an tástáil. Seiceáil an modh a gceanglaítear ar do shaotharlann é a leanúint.

Maidir le deighiltí ar nós samplaí stóil idir coiptheoirí agus neamhchoiptheoirí, is gnách gurb é MacConkey an ceann is úsáidí den dá cheann. I ngnáthobair stóil le Salmonella nó Shigella cuirtear meáin eintéaracha níos roghnaithí amhail XLD nó Hektoen enteric leis de ghnáth seachas brath ar MacConkey amháin.

I dteagasc ar nós sreabhadh oibre fuail a dhéanann aithris ar shreabhadh cliniciúil, péireáil MacConkey le blood agar. Soláthraíonn MacConkey an luathdheighilt Gram-dhiúltach agus aisghabhann blood agar orgánaigh a chuireann MacConkey faoi chois. Tá an phéireáil seo caighdeánach i gcur síos cliniciúil ar shocrú cultúir fuail.

Le haghaidh teagasc coincheapa íona, úsáid an dá cheann. Múineann EMB go bhfuil tábhacht ag baint le neart an choipthe agus gur féidir le móilín amháin dhá ról a chomhlíonadh. Múineann MacConkey dearadh modúlach: an roghnóir, an tsubstráit agus an táscaire a choinneáil ar leithligh. Is annamh a mheascann mic léinn a chuireann E. coli aitheanta, Klebsiella aerogenes aitheanta agus Salmonella aitheanta de stríoca taobh le taobh ar an dá mheán an dá loighic arís.

Gaistí léitheoireachta a thagann chun cinn gach téarma

Is é an teip is coitianta ná aithint de réir datha amháin. Is féidir gur E. coli, Klebsiella, Enterobacter nó coiptheoir eile atá bándearg ar MacConkey. Is féidir gur Salmonella, Shigella, Proteus, Pseudomonas nó neamhchoiptheoir eile atá gan dath. Is feinitíopa scagtha é an dath a threoraíonn obair dheimhnithe amhail dathú Gram, oxidase, painéil bhithcheimiceacha nó sainaithint ionstraime, ní ainm speicis.

Is é an dara teip ná an iomarca a bhaint as lonracht atá ar iarraidh. Táirgeann roinnt coilíneachtaí fíora E. coli, go háirithe cinn leithlisithe, beagán nó gan aon lonracht mhiotalach ar EMB. Ní eisiann easpa lonrachta E. coli, agus ní chruthaíonn láithreacht lonrachta é. Caith leis an lonracht mar leid toimhdeach.

Is é an tríú teip ná plátaí d'aoiseanna éagsúla a chur i gcomparáid. Is féidir le coiptheoirí lachtóis moillithe casadh bándearg ar MacConkey tar éis goraithe fada, rud a dhoiléiríonn an deighilt ghlan idir coiptheoir agus neamhchoiptheoir. Léigh ag an uair atá sonraithe ag an tsaotharlann agus taifead an t-am goraithe leis an toradh.

Is é an ceathrú teip ná fás measctha a léamh mar orgánach amháin. Taifeadann coilíneacht bhándearg in aice le coilíneacht gan dath dhá fheinéitíopa, ní staid idirmheánach. Roghnaigh coilíneachtaí atá leithlisithe go maith agus oibrigh gach moirfitíopa ar leithligh. Cruthaíonn uigeacht mhúcasach gaiste comhchosúil: is féidir cuma mhúcasach a bheith ar Klebsiella agus Enterobacter araon, mar sin ní shocraíonn capsúl amháin an t-ainm riamh. Rangaítear an t-orgánach a múineadh tráth mar Enterobacter aerogenes anois mar Klebsiella aerogenes, rud a mhíníonn cén fáth a ndealraíonn sé go bhfuil seanchairteacha agus lipéid níos nuaí ag easaontú.

Rialuithe agus riail deiridh

Rith rialuithe grianghraftha nó úra gach seisiún: E. coli don imoibriú láidir coiptheora, Klebsiella aerogenes do choipeadh múcasach gan an lonracht chlasaiceach, tréithchineál Salmonella don imoibriú neamhchoiptheora gan dath, agus Staphylococcus aureus chun cur faoi chois Gram-dhearfach ar do tháirge cruinn a dheimhniú. Meaitseáil uimhreacha tréithchineálacha agus critéir ghlactha le bileog an mhonaróra, toisc go n-athraíonn roghnaíocht de réir ábhar domlais, violet criostail agus ruaime.

Cuimhnigh ar abairt amháin ag an mbinse. Úsáideann EMB ruaimeanna a roghnaíonn agus a thugann comhartha araon, rud a thugann comhartha drámatúil E. coli ach a éilíonn léamh níos caolchúisí. Scarann MacConkey an roghnú ón gcomhartha, rud a thugann deighilt shoiléir idir bándearg agus geal ach a thugann níos lú sonraí faoin gcoipeadh. Roghnaigh an meán a bhfuil a choincheap ag teacht leis an gceist, deimhnigh dath le tástálacha cuí, agus stopann an dá phláta de bheith in iomaíocht lena chéile agus tosaíonn siad ag comhoibriú.