EMB agar móti MacConkey agar: val og tulking av ræktunarmiðlum

Ein lesandi strikar sama vatnsýni út á tvær skálir. Á aðrari síggjast myrkar koloniur við grønum metalliskum skíni. Á hinari síggjast klárt ljósareyðar koloniur við einum ógreiðum geisla rundanum. Báðar skálirnar vórðu inokuleraðar úr sama røri, inkuberaðar lið um lið og lisnar sama tíma. Lesandi spyr, hvør skál er røtt.

Báðar skálirnar eru rættar. Tær svara ymiskum spurningum. Ógreiðan kemur av at viðgera hesar báðar ræktunarmiðlarnar sum um teir vóru umbýtiligir screeningarmiðlar fyri tarmbakteriur. Teir hava eitt felags endamál, sum er at selektera Gram-negativar enteriskar verur og skilja laktosugerjandi verur frá ikki-gerjandi verum, men teir fremja hetta endamálið við ymiskari evnafrøði og ymiskari sjónligari logikk. Tá tú sært tey bæði grundleggjandi hugtøkini, verður val av skál og avlestur av kolonium ein rutinuppgáva.

Stutta svarið

EMB agar nýtir tvey litarevni, eosin Y og methylene blue, sum hava tvífalda uppgávu: tey tálma Gram-positivan vøkstur og fella út rundan um sterkar sýrumyndarar, so myrkar koloniur verða til, klassiskt við grønum metalliskum skíni hjá Escherichia coli. MacConkey agar skilur uppgávurnar sundur: gallssølt saman við crystal violet tálma Gram-positivar verur, laktosa gevur grundarlag fyri gerjing, og neutral red vísir sýru sum ljósareyðar ella reyðar koloniur. Er uppgávan ein greið presumptiv sýning av E. coli, hevur EMB sín fyrimun. Er uppgávan ein einfaldur skilnaður millum ljósareyðar og litloysar laktosugerjandi og ikki-gerjandi verur, serliga í arbeiðsgongdum við skarni ella urini, er MacConkey vanliga lættari at lesa. Eingin av skálunum eyðmerkir eina veru út frá liti einsamøllum.

EMB: litarevni, sum bæði selektera og vísa úrslitið

Hugtakið handan EMB savnar selektión og indikering í somu molekylum. ASM-framferðarhátturin fyri eosin methylene blue agar lýsir EMB sum bæði selektivan og differentialan ræktunarmiðil, har litarevnaparið tálmar nógvar Gram-positivar verur, meðan laktosugerjing elvir til upptøku og útfelling av litarevnum. Ein vanlig Levine-samanseting inniheldur pepton, laktosu, fosfat, eosin Y, methylene blue og agar, sum tilskilað í FDA BAM-háttinum fyri Levine EMB agar. Gev gætur, at eldri EMB-uppskriftir stundum høvdu sukrosu afturat laktosu, meðan Levine EMB inniheldur laktosu uttan sukrosu; tí eigur at verða skrásett, hvørja samanseting starvsstovan hevur á goymslu.

At lesa EMB merkir at lesa atferðina hjá litarevnunum. Kraftig laktosugerjing framleiðir nóg mikið av sýru til at elva til munandi útfelling av litarevnum, sum gevur E. coli myrkar blásvartar miðjur og, í klassiska førinum, grønt metalliskt skín í endurskini. Veikari gerjarar sum Enterobacter og Klebsiella vaksa vanliga sum ljósareyðar til lilla, slímutar koloniur uttan hetta skínið. Ikki-gerjarar sum Salmonella, Shigella og Proteus vaksa vanliga sum litloysar ella hálvgjøgnumskygdar koloniur, tí tær ikki framleiða tað brádliga sýrustigið, sum fær litarevnini at fella út. Gram-positivar verur verða vanliga tálmaðar, men tálmingin er stigvís og broytist eftir stammu og vøru. Nærri evnafrøði um tilreiðing av litarevnum, eisini hví methylene blue í grundini virkar sum eitt kationiskt litarevni, hoyrir heima í einari serstakari umrøðu av litarevnasamansetingum, og almenna mikroskopisamanhangið er lýst í einum atlasi yvir litunarhættir. Henda greinin heldur seg til val og avlestur av skálum.

Myndin omanfyri er myndilig. Hon vísir tann sjónliga logikkin, sum tú kanst vænta: myrkar koloniur við skíni, ljósareyðar slímutar typur og ljósar typur á EMB, samanborið við ljósareyðar móti ljósum typum á MacConkey. Nýt hana til at læra mynstrið, og staðfest síðani hvørja meting móti fotograferaðum kontrollum og vøruinnlegginum fyri júst tann ræktunarmiðilin, sum stendur á arbeiðsborðinum.

MacConkey: sundurskildar uppgávur, einfaldari sjónlig regla

Hugtakið handan MacConkey letur hvørt innihaldsevni hava sína serligu uppgávu. ASM-framferðarhátturin fyri MacConkey agar nýtir somu lýsing av miðlinum sum selektivan og differentialan, og FDA BAM-hátturin fyri MacConkey agar listar virkandi partarnar: pepton, laktosu, gallssølt, salt, neutral red, crystal violet og agar. Gallssølt saman við crystal violet selektera ímóti Gram-positivum verum. Laktosa gevur gerjingarundirlagið. Neutral red virkar sum pH-vísari og verður ljósareytt til reytt, har sýra verður gjørd, stundum við útfeldum galli rundan um sterkar gerjarar.

Avlestrarreglan er tilætlað einføld: ljósareytt merkir laktosugerjari, litloyst ella ljóst merkir ikki-gerjari. E. coli sæst ljósareytt til reytt, ofta við einum geisla av gallútfelling. Klebsiella og Enterobacter síggjast ljósareyð og ofta slímglað orsakað av kapslunum. Salmonella, Shigella, Proteus og nógvir aðrir Gram-negativir stavir síggjast litloysir. Ein eyka fyrimunur hevur týdning í undirvísingarstarvsstovum: gallssølt minka vanliga um sverming hjá Proteus, so tað er lættari at fáa isoleraðar koloniur á MacConkey enn á ikki-selektivum ræktunarmiðlum, hóast tálmingin ikki er fullkomin, og saltfríir valmøguleikar finnast, tá tamarhald á sverming er høvuðsendamálið.

Molekylara frágreiðingin um, hví litarevnini bera seg soleiðis at, stavar frá løðing og bygnaði. Methylene blue er eitt kationiskt phenothiazine-litarevni, og bygnaður og eginleikar tess greiða frá bindihuginum til súrar bakteriuyvirflatur, sum er sami bindihugur, ið virkar, tá tað fellur út í súrum økjum á EMB.

Samanbering í stuttum